劉寰宇 王焱冰 楊濤 崔人勻 安炯俊 陳健 郝力爭 李忠

摘要 目的：探究芪甲扶正方治療肺腺癌相關(guān)性疲乏的作用機(jī)制。方法：基于中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(tái)（TCMSP）、中醫(yī)藥綜合數(shù)據(jù)庫（TCMID）、Pubchem、Swiss Target Prediction等數(shù)據(jù)庫收集芪甲扶正方有效成分及作用靶點(diǎn);通過GeneCards、OMIM等數(shù)據(jù)庫獲取“肺腺癌相關(guān)性疲乏”相關(guān)靶基因;將藥物靶點(diǎn)映射到疾病靶點(diǎn)集合上，獲取交集基因;使用String構(gòu)建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò);通過Cytoscape構(gòu)建藥物-成分-靶點(diǎn)調(diào)控網(wǎng)絡(luò);利用DAVID數(shù)據(jù)庫對(duì)芪甲扶正方治療肺腺癌相關(guān)性疲乏的靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體（GO）富集分析和京都基因和基因組百科全書（KEGG）富集分析;運(yùn)用Genebank數(shù)據(jù)庫分析交集基因的組織器官定位;利用AutoDock Vina_1.1.2分析主要活性成分和關(guān)鍵靶點(diǎn)的結(jié)合能力，并使用PYMOL軟件將對(duì)接結(jié)果進(jìn)行可視化展示。結(jié)果：調(diào)控網(wǎng)絡(luò)共包含9味中藥、108種活性成分、87個(gè)靶基因;和CASP3、VEGFA、EGFR、MYC、IL-6;KEGG富集分析涉及PI3K-AKT、p53、TNF、MAPK、ErbB、Ras、FoxO等通路;關(guān)鍵基因主要分布在肺、紅細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞;分子對(duì)接結(jié)果表明EGFR與木犀草素、IL-6、MAKP3與β-谷甾醇、MAKP8與鞣花酸具有較強(qiáng)的結(jié)合能力。結(jié)論：芪甲扶正方活性成分鞣花酸、β-谷甾醇等，可能通過作用于EGFR、IL-6、MAKP3、MAKP8等靶點(diǎn)，進(jìn)而通過調(diào)節(jié)PI3K-AKT通路發(fā)揮對(duì)肺腺癌相關(guān)性疲乏的治療作用。

關(guān)鍵詞 肺腺癌;癌因性疲乏;芪甲扶正方;網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué);分子對(duì)接;鞣花酸;IL6;PI3K-AKT

Abstract Objective：To explore the action mechanism of Qijia Fuzheng Formula in the treatment of fatigue-related lung adenocarcinoma.Methods：Based on databases such as TCMSP，TCMID，Pubchem，Swiss Target Prediction，etc.，the active ingredients and targets of Qijia Fuzheng Formula were collected; relevant target genes of “pulmonary adenocarcinoma-related fatigue” from databases such as GeneCards and OMIM were obtained; drug targets were mapped to diseases target set.The intersection genes on the target set were obtained; String was used to construct a protein-protein interaction（PPI） network; Cytoscape was used to construct a drug-component-target regulatory network;DAVID database was used to enrich（GO，KEGG） analysis of the targets of Qijiafuzheng Formula in the treatment of lung adenocarcinoma-related fatigue; Genebank database was used to analyze the tissue and organ location of intersection genes; AutoDock Vina_1.1.2 was used to analyze the main active ingredients and key binding ability of the target，and PYMOL was used software to visualize the docking results.Results：The drug-compound-target network consisted of 9 drugs，108 compounds and 87 targets; and CASP3，VEGFA，EGFR，MYC，IL-6; KEGG enrichment analysis involved PI3K-AKT，p53，TNF，MAPK，ErbB，Ras，F(xiàn)oxO and other pathways; key genes were mainly distributed in lungs，red blood cells，T cells，B cells; molecular docking results showed that EGFR and luteolin，IL-6，MAKP3 and β-sitosterol，MAKP8 and ellagic acid had strong binding ability.Conclusion：The active ingredients of Qijia Fuzheng Formula，such as ellagic acid and β-sitosterol，may act on EGFR，IL-6，MAKP3，MAKP8 and other targets，and then play a role in the treatment of lung adenocarcinoma-related fatigue by regulating the PI3K-AKT pathway effect.

Keywords Lung adenocarcinoma; Cancer related fatigue; Qijia Fuzheng Formula; Network pharmacology; Molecular docking; Luteolin; IL6; PI3K-AKT

中圖分類號(hào)：R285文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.11.008

癌癥相關(guān)性疲勞（Cancer Related Fatigue，CRF）是80%腫瘤患者正在或已經(jīng)經(jīng)歷過的虛弱癥狀[1]，具有多維度、多階段、不可緩解等特點(diǎn)，近年來隨著腫瘤治療理念由傳統(tǒng)的對(duì)抗治療到姑息治療理念的轉(zhuǎn)變，癌性疲乏已經(jīng)引起越來越多腫瘤研究者的關(guān)注[2]。雖然國內(nèi)外關(guān)于藥物干預(yù)癌性疲乏的臨床研究逐年增加，但目前尚無理想治療藥物[3-4]。正所謂“精氣奪則虛”，中醫(yī)將此種虛弱癥狀歸屬于“虛勞”辨治，提出其病機(jī)為“多臟腑虧損，氣血陰陽同虛”[5]，特點(diǎn)為“虛損勞衰不斷加重”，治當(dāng)以扶正為主，祛邪為輔[6]，注重攻補(bǔ)兼施，調(diào)補(bǔ)脾腎[7]。

芪甲扶正方是遵《黃帝內(nèi)經(jīng)》“虛則補(bǔ)之”“勞者溫之”“損者益之”的治療思想組方而成，具有健脾益腎、固攝扶正的作用，由黃芪、鱉甲、烏梅、仙鶴草、瓦楞子、秦艽、半枝蓮、莪術(shù)、鼠婦等藥物組成，方中黃芪甘溫，中黃表白，白入肺，黃入脾，合治“脫力勞傷”之仙鶴草共為君以奏健中州之效，醋鱉甲咸寒入腎軟堅(jiān)散結(jié)、破瘀通經(jīng)，烏梅酸澀平入肝為臣，莪術(shù)、鼠婦、秦艽、半枝蓮、煅瓦楞子為佐，以奏健脾益腎、固攝扶正之效。已在臨床應(yīng)用多年[8]。本團(tuán)隊(duì)既往臨床研究表明，其能配合西醫(yī)基礎(chǔ)治療改善非小細(xì)胞肺癌患者尤其是肺腺癌患者乏力、氣短的癥狀[9]。雖然芪甲扶正方的臨床療效明確，但其具體的分子作用機(jī)制不清，有待進(jìn)一步探索。

因此，本研究運(yùn)用具有預(yù)測中藥復(fù)方干預(yù)疾病分子機(jī)制作用的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法和具有預(yù)測復(fù)合物結(jié)合能作用的分子對(duì)接技術(shù)[10]，通過多種網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫，從多組分、多靶點(diǎn)整體分析并預(yù)測芪甲扶正方治療肺腺癌相關(guān)性疲乏的潛在藥理學(xué)機(jī)制，旨在初步闡釋芪甲扶正方治療肺腺癌相關(guān)性疲乏的作用機(jī)制。具體研究流程見圖1。

1 資料與方法

1.1 篩選芪甲扶正方活性成分并預(yù)測成分作用靶點(diǎn)

以“烏梅”“仙鶴草”“黃芪”“秦艽”“半枝蓮”“莪術(shù)”等芪甲扶正方所含中藥為關(guān)鍵詞，依次檢索中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(tái)（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform，TCMSP）（http：//lsp.nwu.edu.cn/tcmsp.php）[11]收集藥物活性成分，并以藥物口服生物利用度大于等于30%和藥物相似性大于等于0.18為篩選閾值，進(jìn)一步篩選有效活性成分;然后以中醫(yī)藥綜合數(shù)據(jù)庫（TCMID）（http：//www.megabionet.org/tcmid/）平臺(tái)檢索鱉甲活性成分;最后經(jīng)Pubchem數(shù)據(jù)庫（https：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）獲得鼠婦、瓦楞子等藥物的活性成分[12-13]。

以上述有效成分為關(guān)鍵詞分別檢索TCMSP和有機(jī)小分子生物活性數(shù)據(jù)庫（Swiss Target Prediction）（http：//www.swisstargetprediction.ch/）[11]，獲取上述有效活性成分對(duì)應(yīng)的作用靶點(diǎn)。

1.2 肺腺癌相關(guān)性疲乏靶點(diǎn)獲取

以“Cancer-related fatigue of lung adenocarcinoma”為關(guān)鍵詞，檢索GeneCards（http：//www.genecards.org/）、人類孟德爾遺傳綜合數(shù)據(jù)庫（Online Mendelian Inheritance in Man，OMIM）（http：//www.omim.org/）等數(shù)據(jù)庫，將所得靶點(diǎn)合并去重后得到肺腺癌相關(guān)性疲乏的疾病靶點(diǎn)。

1.3 獲取藥物-疾病交集靶點(diǎn)

將芪甲扶正方活性成分作用靶點(diǎn)與肺腺癌相關(guān)性疲乏相關(guān)靶點(diǎn)進(jìn)行映射，得到芪甲扶正方治療肺腺癌相關(guān)性疲乏的潛在靶點(diǎn);將以上篩選出的靶標(biāo)通過Uniprot（http：//www.uniprot.org/）數(shù)據(jù)庫轉(zhuǎn)換成對(duì)應(yīng)的基因名，舍棄無法找到基因名的靶標(biāo)。

1.4 構(gòu)建芪甲扶正方治療肺腺癌相關(guān)性疲乏的PPI網(wǎng)絡(luò)并篩選重要靶點(diǎn)

使用STRING數(shù)據(jù)庫，將1.3收集的芪甲扶正方治療肺腺癌相關(guān)性疲乏的潛在靶點(diǎn)復(fù)制到Multiple proteins，物種來源選擇Homo sapiens，輸出tsv.結(jié)果;并使用Cytoscape軟件進(jìn)行可視化，設(shè)置其中心靶點(diǎn)重要性優(yōu)于外周。

1.5 構(gòu)建藥物-成分-靶點(diǎn)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)

選取藥物、靶點(diǎn)、靶點(diǎn)相關(guān)的藥物活性成分輸入Cytoscape構(gòu)建藥物-成分-靶點(diǎn)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)并根據(jù)度值（degree）將活性成分和靶點(diǎn)進(jìn)行排序。

1.6 藥物治療疾病組織器官定位

使用Genecard數(shù)據(jù)庫將各組織的靶基因分別與藥物疾病交集基因進(jìn)行映射，以明確肺腺癌相關(guān)性疲乏基因的分布。

1.7 交集基因富集分析

研究使用DAVID數(shù)據(jù)庫（https：//david.ncifcrf.gov/）對(duì)上述所得交集靶基因進(jìn)行基因本體（Gene Ontology，GO）和京都基因和基因組百科全書（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）富集分析[14]。其中GO分析包括分子功能（Molecular Function，MF）、生物過程（Biological Process，BP）、細(xì)胞組成（Cellular Components，CC）。

1.8 分子對(duì)接

研究使用AutoDock Vina_1.1.2將前30個(gè)成分與前5個(gè)靶基因進(jìn)行分子對(duì)接分析，驗(yàn)證其相互作用活性。1）經(jīng)TCMSP平臺(tái)下載前30個(gè)成分的（“mol2“格式）信息，依次為分子結(jié)構(gòu)加氫原子（通過Open Babel），加電荷（選擇MMFF94力場）、能量最小化，將化合物轉(zhuǎn)化為PDBQT格式文件（通過AutoDcok Tools）。2）從PDB網(wǎng)站（http：//www.rcsb.org/）獲取前5個(gè)靶點(diǎn)蛋白。3）利用AutoDock Tools分離靶蛋白、相應(yīng)配體，添加氫原子并計(jì)算電荷后導(dǎo)出PDBQT格式文件;并使用AutoDock Tools確定對(duì)接盒子的大小和中心，對(duì)接盒子的中心定義為蛋白晶體結(jié)構(gòu)原配體的中心，大小包裹原配體所在活性位點(diǎn)關(guān)鍵殘基。4）最后使用Vina依次將活性成分與靶蛋白進(jìn)行對(duì)接，提取對(duì)接打分，使用PyMol（V2.4.0）進(jìn)行對(duì)接結(jié)果的可視化展示。

2 結(jié)果

2.1 藥物活性成分篩選和靶點(diǎn)預(yù)測結(jié)果

通過上述數(shù)據(jù)庫檢索芪甲扶正方中9味中藥所含的化合物后，根據(jù)OB和DL值共篩選出108個(gè)化合物，黃芪20個(gè)，烏梅8個(gè)，仙鶴草5個(gè)，秦艽2個(gè)，莪術(shù)3個(gè)，半枝蓮29個(gè)，鱉甲16個(gè)，瓦楞子7個(gè)，鼠婦34個(gè);根據(jù)度值篩選出前30個(gè)活性成分，如表1;預(yù)測靶點(diǎn)5 132個(gè)。

2.2 疾病潛在基因靶點(diǎn)

檢索各數(shù)據(jù)庫合并去重后，共獲得與肺腺癌相關(guān)性疲乏相關(guān)靶點(diǎn)1 263個(gè)。

2.3 藥物治療疾病作用靶點(diǎn)集

將5 132個(gè)芪甲扶正方作用靶點(diǎn)與1 263個(gè)肺腺癌相關(guān)性疲乏關(guān)聯(lián)靶點(diǎn)進(jìn)行映射，得到一個(gè)含87個(gè)基因的基因集合，可能是芪甲扶正方治療肺腺癌相關(guān)性疲乏的作用靶點(diǎn)。

2.4 芪甲扶正方治療肺腺癌相關(guān)性疲乏的PPI網(wǎng)絡(luò)及重要靶點(diǎn) 將上述所得87個(gè)交集靶點(diǎn)，導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫，得到一個(gè)包含1 179條邊，87個(gè)節(jié)點(diǎn)，平均度值為27.1的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò);下載PPI網(wǎng)絡(luò)、導(dǎo)入Cytoscape3.7.1后，通過Network analyzer功能對(duì)PPI網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)浞治?，最后根?jù)度值篩選出CASP3、VEGFA、EGFR、MYC、IL-6、CCND1、ESR1、MAPK3、MAPL8、PTGS2等靶點(diǎn)，可能為藥物發(fā)揮作用的重要靶點(diǎn)，如圖2所示。

2.5 藥物-成分-靶點(diǎn)調(diào)控網(wǎng)絡(luò) 如圖3藥物-成分-靶點(diǎn)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)所示，鼠婦、半枝蓮所含化合物最多，其次為黃芪、鱉甲、仙鶴草、烏梅;網(wǎng)絡(luò)中度值較高的前5個(gè)藥物成分槲皮素、山柰酚、黃芩苷、鞣花酸、異鼠李素，可能為發(fā)揮治療作用的關(guān)鍵成分。度值較高的前5個(gè)靶點(diǎn)CASP3、VEGFA、EGFR、MYC、IL-6，可能是發(fā)揮治療作用的重要靶點(diǎn)。

2.6 組織器官定位分析結(jié)果 依次以Red blood cell、T cell、B cell、Mitochondria、lung、Adrenal gland、Spleen為關(guān)鍵詞查詢GeneCards數(shù)據(jù)庫，獲取相關(guān)組織器官靶基因后與藥物芪甲扶正方治療肺腺癌相關(guān)性疲乏的潛在基因進(jìn)行映射，如圖4所示：芪甲扶正方治療肺腺癌相關(guān)性疲乏的87個(gè)潛在基因可全部作用于紅細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞，大部分作用于肺72個(gè)、腦36個(gè)、腎上腺30個(gè)，少數(shù)作用于線粒體6個(gè)、脾臟4個(gè)。

2.7 富集分析結(jié)果

2.7.1 GO富集分析結(jié)果 GO富集獲得BP條目278個(gè)、CC條目38個(gè)、MF條目80個(gè)（P<0.05），根據(jù)Count值分別篩選前10個(gè)條目，采用條形圖展示（圖5），BP主要表現(xiàn)為促進(jìn)RNA聚合酶Ⅱ啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄、抑制凋亡、抑制藥物陽性反應(yīng)、調(diào)控DNA轉(zhuǎn)錄模板化過程、正向調(diào)控細(xì)胞增殖、正向調(diào)控基因表達(dá)、脂多糖的反應(yīng)、對(duì)有毒物質(zhì)的反應(yīng)、細(xì)胞衰老、雌二醇反應(yīng);CC富集在細(xì)胞（核、質(zhì)、膜）、細(xì)胞液、細(xì)胞外間隙、胞質(zhì)的核周圍區(qū)域、以及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體等細(xì)胞器;MF主要涉及蛋白結(jié)合、酶結(jié)合、轉(zhuǎn)錄因子活性、ATP結(jié)合、蛋白激酶活性等。提示芪甲扶正方可對(duì)多部位進(jìn)行調(diào)控發(fā)揮作用。

2.7.2 KEGG富集分析結(jié)果 KEGG富集分析篩選出83條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，Count排序前10的通路見圖6，包括PI3K-AKT信號(hào)通路、p53信號(hào)通路、腫瘤壞死因子信號(hào)通路、催乳激素信號(hào)通路、HIF-1信號(hào)通路、甲狀腺激素信號(hào)通路、分裂原激活的蛋白激酶信號(hào)通路、ErbB信號(hào)通路、Ras信號(hào)通路、FoxO信號(hào)通路。

2.8 分子對(duì)接結(jié)果 根據(jù)度值排序的前30個(gè)成分與前5個(gè)基因結(jié)合能見表2。結(jié)合能較高的4個(gè)對(duì)接模式圖分別為A：MAKP8-鞣花酸，B：IL-6-β-谷甾醇，C：EGFR-木犀草素，D：EGFR-木犀草素。如圖7所示，圖中藍(lán)色實(shí)線：代表氫鍵、灰色虛線：代表疏水作用。

3 討論

3.1 芪甲扶正方所含關(guān)鍵活性成分

研究共獲得中藥活性成分108個(gè)，關(guān)鍵靶點(diǎn)87個(gè)，以黃芪、仙鶴草、鼠婦所含活性成分最多，以黃酮類為主，具有抗炎、抗腫瘤作用，將上述108個(gè)成分中度值較高的30個(gè)核心成分與重要靶點(diǎn)進(jìn)行分子對(duì)接，其結(jié)果表明EGFR與木犀草素、IL-6、MAKP3與β-谷甾醇、MAKP8與鞣花酸具有相對(duì)高的結(jié)合能力，提示木犀草素、β-谷甾醇、鞣花酸可能為芪甲扶正方發(fā)揮治療作用的重要成分。以上成分可能通過抑制肺腺癌的增殖、阻滯細(xì)胞周期、促進(jìn)肺腺癌的凋亡等抗腫瘤作用改善肺腺癌患者的疲乏情況。其中，木犀草素主要來源于仙鶴草，屬于黃酮類化合物，可抑制肺癌細(xì)胞的增殖[15]。鞣花酸主要來源于仙鶴草，屬于天然多酚化合物，能抑制乳腺癌[16]、黑色素瘤[17]、胃癌[18]，阻滯細(xì)胞周期、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[19]、改善炎癥[20]，抑制線粒體呼吸和肺癌細(xì)胞增殖[20]。β-谷甾醇主要來源于秦艽和半枝蓮，為膳食植物甾醇，能預(yù)防多種腫瘤的發(fā)生和生長，通過阻滯肺癌A549細(xì)胞周期于G2/M期來抑制細(xì)胞增殖[21]，同時(shí)促進(jìn)細(xì)胞凋亡[22]，發(fā)揮抗腫瘤作用。

3.2 芪甲扶正方潛在的關(guān)鍵靶點(diǎn)分析

PPI網(wǎng)絡(luò)結(jié)果提示芪甲扶正方調(diào)節(jié)的靶蛋白與肺腺癌相關(guān)性疲乏相關(guān)的靶蛋白間具有復(fù)雜的相互作用關(guān)系;將調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中靶點(diǎn)中以度值排序，初步分析前5個(gè)重要靶點(diǎn)多對(duì)細(xì)胞凋亡、炎癥、免疫等腫瘤相關(guān)的經(jīng)典表型具有調(diào)節(jié)作用，其中caspase-3是執(zhí)行細(xì)胞凋亡的蛋白酶[23];EGFR是一種酪氨酸激酶受體，其過表達(dá)或突變與細(xì)胞增殖有關(guān)[24]，Landi等[25]的研究表明IL-7，IL-16和VEGF-A的減少可能與慢性疲勞綜合征有關(guān);進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，以上靶點(diǎn)可能通過調(diào)節(jié)炎癥表型發(fā)揮作用，這與既往研究報(bào)道指出的炎癥介質(zhì)失調(diào)學(xué)說提出的炎癥介質(zhì)表達(dá)增加在腫瘤患者疲乏的發(fā)生機(jī)制中起著重要作用的觀點(diǎn)相一致[26]，Rich等[27]的研究表明癌癥患者的疲勞癥狀、不良生命質(zhì)量和治療結(jié)果均與腫瘤或宿主產(chǎn)生的炎癥介質(zhì)有關(guān)，如IL-6、IL-1β、IL-10以及TNF-α等，其中IL-6研究的最為廣泛，如Wu等[28]的研究發(fā)現(xiàn)圍手術(shù)期胃腺癌患者疲乏評(píng)分與血漿IL-6的水平正相關(guān)。Inagaki等[29]亦得出IL-6可能在晚期癌癥患者的疲勞中發(fā)揮作用的結(jié)論?？偨Y(jié)可發(fā)現(xiàn)腫瘤、炎癥、腫瘤相關(guān)性疲乏三者之間相互影響，其中炎癥在腫瘤過程中發(fā)揮的作用已有總結(jié)[30]，而炎癥和腫瘤相關(guān)性疲乏之間的關(guān)系將是我們后續(xù)研究關(guān)注的重點(diǎn)。

3.3 芪甲扶正方治療肺腺癌相關(guān)性疲乏的潛在機(jī)制分析

GO富集分析結(jié)果表明，芪甲扶正方可作用于多個(gè)細(xì)胞組分，能多形式地調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、抑制細(xì)胞凋亡生物進(jìn)程，在肺腺癌相關(guān)性疲乏的炎癥、增殖等表型中起到保護(hù)作用;對(duì)交集基因進(jìn)行組織定位分析發(fā)現(xiàn)，87個(gè)基因主要分布于紅細(xì)胞、T、B淋巴細(xì)胞、肺，也涉及腎上腺、脾、線粒體等部位，提示芪甲扶正方是通過多部位發(fā)揮治療作用。

KEGG通路富集分析結(jié)果表明，芪甲扶正方主要是通過PI3K-AKT信號(hào)通路發(fā)揮對(duì)肺腺癌相關(guān)性疲乏的治療作用的，該研究中有2種方式可激活該通路，一種是細(xì)胞外以IL-6為主的細(xì)胞因子與細(xì)胞膜上的IL-6受體結(jié)合，激活JAK，進(jìn)而激活PI3K-AKT。另一種方式是直接被生長因子受體EGFR激活，該通路被激活后下游可與mTOR、P53、NF-κB、MAPK、VEGF等多條信號(hào)通路發(fā)生交互作用，從而調(diào)節(jié)蛋白合成、糖代謝、細(xì)胞增殖、DNA損傷、細(xì)胞循環(huán)、增殖、生存等多個(gè)表型[31]，這與一項(xiàng)人參皂苷通過激活PI3K-AKT抗老年大鼠疲勞綜合征的研究結(jié)論一致[32];腫瘤壞死因子通路主要是由核因子κB途徑和MAPK級(jí)聯(lián)，介導(dǎo)凋亡或壞死[33];FoxO信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中，IL-6可與STAT3結(jié)合介導(dǎo)FOXO家族的磷酸化，進(jìn)而調(diào)節(jié)自噬和免疫[34-35]。以上通路既有各自的特點(diǎn)也存在著明顯的交互作用，這與中醫(yī)整體觀念具有相似性。在后續(xù)研究中，我們將圍繞本研究得出的結(jié)論進(jìn)行體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)，以彌補(bǔ)本研究的缺陷和不足，從而為芪甲扶正方治療癌因性疲乏的深入研究提供科學(xué)依據(jù)。

4 結(jié)論

本研究預(yù)測芪甲扶正方的多種成分如木犀草素、β-谷甾醇、鞣花酸等可能通過作用于肺、T、B淋巴細(xì)胞、紅細(xì)胞等部位的IL-16、EGFR、MAKP3、MAKP8等靶點(diǎn)，調(diào)節(jié)以PI3K-AKT為主的多條凋亡相關(guān)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，促進(jìn)肺腺癌細(xì)胞凋亡從而發(fā)揮對(duì)肺腺癌相關(guān)性疲乏的治療作用。

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（2020-08-13收稿 責(zé)任編輯：馬雪玲，徐穎）