董智豪，陳 宇，黃高想，白俊艷，2，*，李靜云，趙淑娟，2，雷 瑩，2，王新樂(lè)，胡琦杭，范征宇

(1.河南科技大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院，河南 洛陽(yáng) 471023； 2.洛陽(yáng)市動(dòng)物遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河南 洛陽(yáng)471023)

禽類已經(jīng)成為日常生活的重要肉類食用品種，在科學(xué)工作者們的不懈努力下，我國(guó)培育出很多家禽新品系，無(wú)論是屠宰性能還是產(chǎn)蛋性能等方面都有極大的進(jìn)步。在禽類生長(zhǎng)性狀這一塊，很多研究者進(jìn)行了關(guān)于生長(zhǎng)性狀方面的基因多態(tài)性測(cè)定，并找出影響禽類生長(zhǎng)性狀的如生長(zhǎng)激素和生長(zhǎng)激素受體(GH和GHR)基因[1-3]、黑素促黑素受體-4(MC4R)基因[4-6]、肌細(xì)胞生成素(MyoG)基因[7-9]、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)基因[10-13]等相關(guān)候選基因。血管活性腸肽I型受體(VIPR-1)基因是一種與Gs蛋白偶聯(lián)的7次跨膜糖蛋白，具有大的親水性胞外N-末端，隨后是7個(gè)高度保守的疏水性跨膜螺旋和胞質(zhì)C-末端。通過(guò)與腺苷酸環(huán)化酶偶聯(lián)，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)cAMP的產(chǎn)生，屬于促胰泌素/VIP受體亞族[14]。下丘腦-垂體-性腺軸對(duì)禽類的繁殖性具有高度的調(diào)控能力，該軸上的VIPR-1等基因被認(rèn)為對(duì)家禽繁殖性能具有一定影響[15]。關(guān)于VIPR-1基因的其他研究也有很多，Zhou等[16]研究分析了VIPR-1基因的突變其對(duì)雞育雛性狀的遺傳效應(yīng)(親子性)并得出該基因上的某些位點(diǎn)可能與親子性有關(guān)。洪軍等[17]采用如皋黃雞作為實(shí)驗(yàn)材料，分析出VIPR-1基因的SNP位點(diǎn)與其產(chǎn)蛋性能和蛋品質(zhì)之間具有一定關(guān)聯(lián)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，等位基因T對(duì)產(chǎn)蛋性能和蛋品質(zhì)的改善具有一定作用，GTTT和TTTTC組合基因型個(gè)體組合效應(yīng)對(duì)產(chǎn)蛋性能更為顯著。周敏等[18]通過(guò)克隆鵪鶉VIPR-1基因，再采用RT-PCR等技術(shù)獲得了該基因的cDNA全長(zhǎng)序列，后分析并檢測(cè)出該基因在鵪鶉不同體組織中的表達(dá)規(guī)律，為鵪鶉的選育提供一定的理論依據(jù)。關(guān)于該基因?qū)η蓊惍a(chǎn)蛋性能的影響，Pu等[19]通過(guò)實(shí)驗(yàn)得出該基因多態(tài)性對(duì)鵪鶉蛋質(zhì)量具有明顯的影響。

目前我國(guó)對(duì)鵪鶉分子水平的研究工作雖處于一個(gè)上升階段，但對(duì)蛋用鵪鶉基因多態(tài)性的研究還較少。有關(guān)VIPR-1基因多態(tài)性對(duì)家禽生長(zhǎng)性狀影響的研究較少，本研究從該點(diǎn)出發(fā)，分析VIPR-1基因多態(tài)性與其早期生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)程度，探究其是否能夠作為鵪鶉早期生長(zhǎng)性狀的相關(guān)分子標(biāo)記或者候選基因，對(duì)于研究鵪鶉分子遺傳育種、提高其早期發(fā)育程度具有重要的理論意義和實(shí)踐價(jià)值。同時(shí)，取得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以用于鵪鶉品種的選育，以期在鵪鶉養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)實(shí)踐中獲得更大的經(jīng)濟(jì)效益，為農(nóng)戶或廠家對(duì)于選用鵪鶉蛋用品種提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

本實(shí)驗(yàn)所用的鵪鶉包括中國(guó)黃羽鵪鶉66只，中國(guó)白羽鵪鶉69只，朝鮮鵪鶉51只，均是從河南省養(yǎng)殖基地隨機(jī)選取的母鶉。從每只心臟中采血2 mL，并裝于肝素鈉抗凝管中混勻后保存在-20 ℃的冰箱中。并測(cè)定體重(g)、脛長(zhǎng)(cm)、胸寬(cm)、胸深(cm)、胸骨長(zhǎng)(cm)、體長(zhǎng)(cm)、脛圍(cm)、日增重(g·d-1)、相對(duì)生長(zhǎng)率(%)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 蛋用鵪鶉血液基因組DNA的提取

利用DNA試劑盒提取鵪鶉血液中基因組DNA，后放置在-20 ℃的冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 引物設(shè)計(jì)與合成

VIPR-1基因的引物信息來(lái)自蒲躍進(jìn)[20]，引物由鄭州鼎國(guó)生物有限公司合成。引物信息具體為，F(xiàn)：5′-GCTGCTGGTGGAAGGGTTA-3′，R：5′-CCGTCCAAGCAGTGATGAA-3′，片段大小為1 096 bp。

1.2.3 PCR-RFLP

本實(shí)驗(yàn)所采用的反應(yīng)體系為10 μL，其中，0.6 μL的DNA，上、下游引物各0.4μL， 3.6 μL的去離子水，5 μL的2×TaqPCR Green Mix。PCR擴(kuò)增程序?yàn)椋涸跍囟?5 ℃進(jìn)行預(yù)變性5 min；在95 ℃下變性40 s；在58.7 ℃的溫度下退火45 s，72 ℃延伸35 s，進(jìn)行35個(gè)循環(huán)；在72 ℃條件下延伸5 min。

VIPR-1基因外顯子6-7的PCR產(chǎn)物采用HpyCH4IV酶進(jìn)行酶切，其反應(yīng)體系為10 μL：1×buffer 1.0 μL、PCR產(chǎn)物7.7 μL、限制性核酸內(nèi)切酶HpyCH4IV(10 000 U·mL-1)0.3 μL、ddH2O 1.0 μL?；旌暇鶆蚝?，先置于37 ℃水浴鍋內(nèi)1 h，再置于將溫度升至65 ℃水浴鍋內(nèi)1 h。然后利用2%的瓊脂糖凝膠電泳對(duì)酶切產(chǎn)物進(jìn)行基因型測(cè)定。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

利用Excel和SPSS分析軟件對(duì)所測(cè)得的數(shù)據(jù)進(jìn)行合并整理，計(jì)算出VIPR-1基因的等位基因數(shù)，在所測(cè)鵪鶉群體中的基因頻率、基因型頻率、雜合度、有效等位基因數(shù)、多態(tài)信息含量，以及對(duì)所測(cè)群體的該基因進(jìn)行哈代溫伯格平衡檢驗(yàn)。利用SPSS進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，分析模型為：Yijk=μ+Wi+Mj+eijk。式中：Yijk是表型測(cè)定值，μ是總體平均數(shù)，Wi是第i個(gè)周齡效應(yīng)，Mj是第j個(gè)基因型效應(yīng)，eijk是誤差效應(yīng)。

2 結(jié)果與分析

2.1 鵪鶉VIPR-1基因的PCR產(chǎn)物檢測(cè)

中國(guó)黃羽鵪鶉、中國(guó)白羽鵪鶉、朝鮮鵪鶉的VIPR-1基因的PCR產(chǎn)物檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖1。由圖1可以看出，電泳中的條帶均在1 096 bp處，表明所擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物是目的基因。電泳條帶單一無(wú)雜帶，條帶清晰無(wú)拖尾現(xiàn)象，可以用于后續(xù)的酶切實(shí)驗(yàn)。

2.2 鵪鶉VIPR-1基因的多態(tài)性檢測(cè)

利用鵪鶉VIPR-1基因的引物進(jìn)行混合DNA的PCR擴(kuò)增并測(cè)序，在VIPR-1基因的外顯子6到外顯子7區(qū)域上共檢測(cè)出15個(gè)SNP位點(diǎn)，分別為A94G、G97T、C201T、A204G、A233G、C260G、A299T、C354T、A355G、C378T、C407G、A425C、A543G、G585T、A586G。在所測(cè)出的15個(gè)SNP中的A355G位點(diǎn)可以被HpyCH4IV酶進(jìn)行酶切，3個(gè)鵪鶉品種VIPR-1基因的酶切產(chǎn)物檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖2-4，從圖2-4可以看出，VIPR-1基因的HpyCH4IV位點(diǎn)(A355G)可以檢測(cè)到AA(285 bp/811 bp)、AG(285 bp/811 bp/1 096 bp)和GG(1 096 bp)3種基因型，但是對(duì)于不同品種的鵪鶉種群來(lái)說(shuō)檢測(cè)到基因型種類也有所不同，其中中國(guó)黃羽鵪鶉和中國(guó)白羽鵪鶉檢測(cè)到AA、AG、GG3種基因型，而朝鮮鵪鶉卻只檢測(cè)到AG和GG兩種基因型，未檢測(cè)到AA基因型。

M，Marker DL2000；1～2，中國(guó)黃羽鵪鶉；3～4，中國(guó)白羽鵪鶉；5～7，朝鮮鵪鶉。M， Marker DL2000；1-2， Chinese yellow quail;3-4， Chinese white quail; 5-7， Korean quail.圖1 VIPR-1基因的PCR產(chǎn)物電泳檢測(cè)結(jié)果Fig.1 Results of PCR products electrophoresis of VIPR-1 gene

M，Marker DL2000；1、2、3和6，GG基因型；4，AG基因型；5，AA基因型。M， Marker DL2000;1、2、3and 6， GG genotype;4， AG genotype;5，AA genotype.圖2 中國(guó)白羽鵪鶉的VIPR-1基因酶切產(chǎn)物電泳圖Fig.2 Electrophoretic map of restriction endonuclease products of VIPR-1 gene in Chinese white quail

M，Marker DL2000；1，AG基因型；2，GG基因型；3和4，AA基因型。M， Marker DL2000;1， AG genotype;2， GG genotype;3 and 4， AA genotype.圖3 中國(guó)黃羽鵪鶉的VIPR-1基因酶切產(chǎn)物電泳圖Fig.3 Electrophoretic map of restriction endonuclease products of VIPR-1 gene in Chinese yellow quail

M，Marker DL2000；1、2和4，GG基因型；3、5和6，AG基因型。M， Marker DL2000;1， 2and 4， GG genotype;3，5and6， AG genotype.圖4 朝鮮鵪鶉的VIPR-1基因酶切產(chǎn)物電泳圖Fig.4 Electrophoretic map of restriction endonuclease products of VIPR-1 gene inKoreanquail

2.3 VIPR-1基因的不同基因型的測(cè)序圖譜

鵪鶉VIPR-1基因的不同基因型進(jìn)行測(cè)序，獲得的測(cè)序圖譜見(jiàn)圖5，從圖5可以看出，鵪鶉VIPR-1基因的引物V2在HpyCH4IV位點(diǎn)(A355G)有一個(gè)A/G突變。

圖5 鵪鶉VIPR-1基因HpyCH4IV位點(diǎn)(A355G)不同基因型的測(cè)序圖譜Fig.5 Sequencing map of different genotypes of VIPR-1 gene HpyCH4IV (A355G) in quail

2.4 VIPR-1基因在鵪鶉群體中的遺傳多態(tài)性

3個(gè)蛋用鵪鶉群體的VIPR-1基因的HpyCH4IV位點(diǎn)(A355G)的基因型頻率、基因頻率、雜合度、有效等位基因數(shù)等實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。從表1中可以看出，中國(guó)黃羽鵪鶉和中國(guó)白羽鵪鶉含有AA、AG、GG 3種基因型，而且在中國(guó)黃羽鵪鶉和中國(guó)白羽鵪鶉中AG基因型頻率最高，其頻率分別達(dá)到0.636和0.609，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)這兩個(gè)群體的其他兩種基因型頻率，在中國(guó)黃羽鵪鶉群體中AA基因型頻率(0.227)略高于GG基因型頻率(0.136)，而在中國(guó)白羽鵪鶉品種中結(jié)果相反。朝鮮鵪鶉中只檢測(cè)到AG和GG兩種基因型，其中GG基因型頻率為0.765，遠(yuǎn)高于其AG基因型頻率0.235。中國(guó)黃羽鵪鶉和中國(guó)白羽鵪鶉中A和G兩個(gè)等位基因的基因頻率較為相近，而朝鮮鵪鶉中兩個(gè)等位基因的基因頻率相差甚遠(yuǎn)。中國(guó)黃羽鵪鶉等位基因A的基因頻率略高于等位基因G，而中國(guó)白羽鵪鶉和朝鮮鵪鶉的優(yōu)勢(shì)等位基因是G，G等位基因頻率分別為0.609和0.882。

同樣從表1中可以看出蛋用鵪鶉VIPR-1基因的HpyCH4IV位點(diǎn)(A355G)的群體遺傳多態(tài)性，中國(guó)黃羽鵪鶉和中國(guó)白羽鵪鶉兩者的雜合度分別為0.496和0.476，中國(guó)黃羽鵪鶉和中國(guó)白羽鵪鶉的遺傳多樣性略比朝鮮鵪鶉(0.208)的高。中國(guó)黃羽鵪鶉和中國(guó)白羽鵪鶉的有效等位基因數(shù)接近2，而對(duì)朝鮮鵪鶉來(lái)說(shuō)，其有效等位基因數(shù)則只有1.262。VIPR-1基因的多態(tài)性在所測(cè)鵪鶉群體中并不高，其中VIPR-1基因在中國(guó)黃羽鵪鶉和中國(guó)白羽鵪鶉為中度多態(tài)(0.250.05)。

表1 蛋用鵪鶉VIPR-1基因多態(tài)性的群體遺傳學(xué)分析Table 1 Population genetic analysis of VIPR-1 gene polymorphism in egg quails

2.5 鵪鶉VIPR-1基因與早期生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)分析

鵪鶉VIPR-1基因的HpyCH4IV位點(diǎn)(A355G)與1-4周齡生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)分析見(jiàn)表2，由表2可以看出，VIPR-1基因的HpyCH4IV位點(diǎn)(A355G)與中國(guó)黃羽鵪鶉的日增重、體重、脛長(zhǎng)、胸寬、胸深、胸骨長(zhǎng)、脛圍有顯著關(guān)聯(lián)性(P<0.05)。具體表現(xiàn)為AA基因型個(gè)體的日增重、體重、脛長(zhǎng)、胸寬、胸深、胸骨長(zhǎng)、脛圍顯著高于GG基因型個(gè)體(P<0.05)，而AG基因型個(gè)體與AA基因型個(gè)體之間除脛圍外無(wú)顯著差異(P>0.05)。AG基因型個(gè)體的胸寬、胸深、胸骨長(zhǎng)顯著高于GG基因型個(gè)體(P<0.05)。

表2 鵪鶉VIPR-1基因多態(tài)性與1～4周齡生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)分析Table 2 Association analysis between VIPR-1 gene polymorphism and growth traits of 1-4 weeks inquails

相比較于中國(guó)黃羽鵪鶉，中國(guó)白羽鵪鶉和朝鮮鵪鶉受該基因多態(tài)性的影響要小得多。對(duì)于中國(guó)白羽鵪鶉來(lái)說(shuō)，VIPR-1基因的HpyCH4IV位點(diǎn)(A355G)僅僅與脛圍有顯著關(guān)聯(lián)性(P<0.05)，具體為AA基因型個(gè)體的脛圍顯著高于AG基因型和GG基因型(P<0.05)，而AG基因型和GG基因型的脛圍無(wú)顯著差異(P>0.05)。VIPR-1基因的HpyCH4IV位點(diǎn)(A355G)與其他生長(zhǎng)性狀無(wú)顯著關(guān)聯(lián)性(P>0.05)。

對(duì)于朝鮮鵪鶉來(lái)說(shuō)，VIPR-1基因的HpyCH4IV位點(diǎn)(A355G)與體重、胸寬、胸深有顯著關(guān)聯(lián)性(P<0.05)，具體表現(xiàn)為AG基因型個(gè)體的體重、胸寬、胸深顯著高于GG基因型個(gè)體(P<0.05)。VIPR-1基因的HpyCH4IV位點(diǎn)(A355G)與其他生長(zhǎng)性狀無(wú)顯著關(guān)聯(lián)性(P>0.05)。

鵪鶉VIPR-1基因的HpyCH4IV位點(diǎn)(A355G)與5-7周齡生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)分析見(jiàn)表3，由表3可以看出，對(duì)于中國(guó)黃羽鵪鶉來(lái)說(shuō)，HpyCH4IV位點(diǎn)與鵪鶉的體重、胸骨長(zhǎng)、脛長(zhǎng)、體長(zhǎng)、胸寬、胸深、脛圍、日增重和相對(duì)生長(zhǎng)率均有顯著的關(guān)聯(lián)性(P<0.05)。具體為HpyCH4IV位點(diǎn)的AA基因型個(gè)體的體重和胸骨長(zhǎng)顯著高于AG基因型和GG基因型個(gè)體(P<0.05)，而AG基因型和GG基因型個(gè)體的體重和胸骨長(zhǎng)無(wú)顯著差異(P>0.05)。AA基因型個(gè)體的脛長(zhǎng)和體長(zhǎng)顯著高于GG基因型個(gè)體(P<0.05)，而AG基因型與GG基因型、AA基因型個(gè)體的脛長(zhǎng)和體長(zhǎng)無(wú)顯著差異(P>0.05)。AA基因型和AG基因型個(gè)體的胸寬顯著高于GG基因型個(gè)體(P<0.05)，而AG基因型與AA基因型個(gè)體的胸寬無(wú)顯著差異(P>0.05)。AA基因型個(gè)體的胸深顯著高于GG基因型個(gè)體(P<0.05)，而AG基因型與AA基因型、GG基因型個(gè)體的胸深無(wú)顯著差異(P>0.05)。AA基因型個(gè)體的脛圍顯著高于AG基因型個(gè)體(P<0.05)，而GG基因型與AA基因型、AG基因型個(gè)體的脛圍無(wú)顯著差異(P>0.05)。GG基因型個(gè)體的日增重和相對(duì)生長(zhǎng)率顯著高于AG基因型個(gè)體，而AA基因型個(gè)體的日增重和相對(duì)生長(zhǎng)率與GG基因型和AG基因型無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表3 鵪鶉VIPR-1基因多態(tài)性與5～7周齡生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)分析Table 3 Association analysis between VIPR-1 gene polymorphism and growth traits of 5-7 weeks inquails

HpyCH4IV位點(diǎn)與中國(guó)白羽鵪鶉的日增重和相對(duì)生長(zhǎng)率均有顯著關(guān)聯(lián)性(P<0.05)，與其他生長(zhǎng)性狀無(wú)顯著關(guān)聯(lián)性(P>0.05)。具體為HpyCH4IV位點(diǎn)的AG基因型個(gè)體的日增重顯著高于AA基因型個(gè)體(P<0.05)，而GG基因型與AG基因型、AA基因型個(gè)體的日增重?zé)o顯著差異(P>0.05)。GG基因型個(gè)體的相對(duì)生長(zhǎng)率顯著高于AA基因型個(gè)體(P<0.05)，而AG基因型與GG基因型、AA基因型個(gè)體的相對(duì)生長(zhǎng)無(wú)顯著差異(P>0.05)。HpyCH4IV位點(diǎn)與朝鮮鵪鶉的體重有顯著的關(guān)聯(lián)性(P<0.05)，與其他生長(zhǎng)性狀無(wú)顯著關(guān)聯(lián)性(P>0.05)。具體為HpyCH4IV位點(diǎn)的AG基因型個(gè)體的體重顯著高于GG基因型個(gè)體(P<0.05)。

3 討論

3.1 VIPR-1基因的多態(tài)性

基因的多態(tài)性一般是指遺傳的多態(tài)性，所以基因多態(tài)性就是在同一群體中，某個(gè)基因座上存在兩個(gè)或兩個(gè)以上的等位基因，且這些等位基因的頻率大于0.01的現(xiàn)象，等位基因的形成和基因突變有關(guān)，其中環(huán)境的選擇起著重要的作用，并且因?yàn)樯L(zhǎng)環(huán)境的不同，基因的多態(tài)性也越來(lái)越豐富，評(píng)價(jià)基因多態(tài)性的主要參數(shù)是基因頻率、基因型頻率等。在其他禽類上關(guān)于該基因多態(tài)性的研究有很多，Zhou等[16]在紅原雞等雞品種中測(cè)出VIPR-1基因上的11 136 bp區(qū)域發(fā)現(xiàn)了128個(gè)變異位點(diǎn)，包括109個(gè)SNP和19個(gè)其他變異，通過(guò)所測(cè)數(shù)據(jù)計(jì)算得知，在雞VIPR-1基因中，平均每102 bp產(chǎn)生1個(gè)SNP，在比較每個(gè)區(qū)域的SNP密度時(shí)，5′側(cè)翼區(qū)域變異率最高，平均每83 bp產(chǎn)生1個(gè)SNP，然后內(nèi)含子，平均每93 bp產(chǎn)生1個(gè)SNP。VIPR-1基因CDS的外顯子2、外顯子3和外顯子6中有3個(gè)SNP，外顯子2(A+457G)中有1個(gè)SNP改變了翻譯成熟蛋白(Ser18Gly)。

蒲躍進(jìn)[20]在神丹公司的H系、L系鵪鶉和河南南陽(yáng)的野生鵪鶉3個(gè)品種VIPR-1基因的多態(tài)性研究中，VIPR-1基因外顯子6和外顯子7之間區(qū)域中發(fā)現(xiàn)到15個(gè)SNP位點(diǎn)，分別為A94G、A137C、A174G、C121A、A146G、A216G、A122G、A150G、C294C、A124C、A163T、A126T、A172G、A338G、A336G。我們?cè)谥袊?guó)黃羽鵪鶉、中國(guó)白羽鵪鶉、朝鮮鵪鶉這3個(gè)蛋用鵪鶉群體中也測(cè)到VIPR-1基因的外顯子6到外顯子7區(qū)域上共檢測(cè)出15個(gè)SNP位點(diǎn)，分別為A94G、G97T、C201T、A204G、A233G、C260G、A299T、C354T、A355G、C378T、C407G、A425C、A543G、G585T、A586G。本研究檢測(cè)的15個(gè)SNP中有些SNP的位置與蒲躍進(jìn)[20]的略不同，這可能由于鵪鶉群體不同，也可能是測(cè)序的偏差造成的。

本研究對(duì)3個(gè)蛋用鵪鶉品種的VIPR-1基因外顯子6-7的HpyCH4IV位點(diǎn)(A355G)進(jìn)行酶切多態(tài)性分析，結(jié)果可以檢測(cè)AA、AG、GG 3種基因型，3種基因型在不同鵪鶉群體中頻率有所差異：在中國(guó)黃羽鵪鶉所測(cè)群體中基因型頻率AA(0.227)、AG(0.636)、GG(0.136)，在中國(guó)白羽鵪鶉所測(cè)群體中基因型頻率AA(0.087)、AG(0.609)、GG(0.304)，在朝鮮鵪鶉所測(cè)群體中基因型頻率AG(0.235)、GG(0.765)。HpyCH4IV位點(diǎn)(A355G)在中國(guó)黃羽鵪鶉和中國(guó)白羽鵪鶉中以AG基因型頻率最高，這與蒲躍進(jìn)[20]研究的該位點(diǎn)在野生鵪鶉中AG基因型頻率最高有相似結(jié)果。本研究中HpyCH4IV位點(diǎn)(A355G)在朝鮮鵪鶉中以GG基因型頻率最高，這與蒲躍進(jìn)[20]研究的該位點(diǎn)在H鵪鶉群體和L鵪鶉群體中GG基因型頻率最高有相似結(jié)果。

3.2 VIPR-1基因與生產(chǎn)性能的關(guān)聯(lián)分析

數(shù)量性狀是受遺傳(基因)與環(huán)境共同作用的影響，而且遺傳(基因)對(duì)數(shù)量性狀起著決定性作用，并且是遺傳研究者更注重的研究課題。目前對(duì)VIPR-1基因的研究都是針對(duì)禽類繁殖性能方面的關(guān)聯(lián)分析報(bào)道比較多，如周敏等[21]通過(guò)對(duì)寧都三黃雞VIPR-1基因的多態(tài)性與其早期產(chǎn)蛋性能的關(guān)聯(lián)分析，結(jié)果表明，選取的位于5’調(diào)控區(qū)和內(nèi)含子6位點(diǎn)上的突變基因分別對(duì)該品種的產(chǎn)蛋量和開(kāi)產(chǎn)日齡具有影響。但是，周敏等[22]在對(duì)雞基因(VIPR-1)5’側(cè)翼區(qū)上的兩個(gè)SNP (A-1666G和G359T)與雞產(chǎn)蛋性能的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，這兩個(gè)多態(tài)位點(diǎn)與雞產(chǎn)蛋性能無(wú)顯著影響。洪軍等[17]研究表明，VIPR-1基因內(nèi)含子2第+1063位堿基(PA位點(diǎn))與如皋黃雞的開(kāi)產(chǎn)日齡(AFE)和40周齡總產(chǎn)蛋數(shù)(EN40)呈顯著相關(guān)(P<0.05)。朱志明等[23]研究表明，VIPR-1基因外顯子2的HpaⅡ位點(diǎn)與河田雞的24日齡產(chǎn)蛋數(shù)、300日齡產(chǎn)蛋數(shù)有顯著影響(P<0.05)。于海龍[24]研究表明，VIPR基因第3外顯子的變異與連城白鴨500 d產(chǎn)蛋量存在顯著關(guān)聯(lián)(P<0.05)。

周敏等[25]探究清遠(yuǎn)麻雞VIPR-1基因?qū)ζ渖L(zhǎng)性狀的影響，結(jié)果表明，該基因位點(diǎn) C+53327T 與該雞品種300日齡的體重呈極顯著相關(guān)(P<0.01)，其中CT基因型個(gè)體300周齡體重顯著高于CC和TT基因型個(gè)體。周敏等[26]在選用寧都三黃雞的VIPR基因多態(tài)性與其雞冠高度和體重做關(guān)聯(lián)分析，分析得出其中內(nèi)含子2和內(nèi)含子8的突變基因?qū)ζ潴w重具有一定影響。本研究主要分析了VIPR-1基因外顯子6-7的HpyCH4IV位點(diǎn)對(duì)蛋用鵪鶉1～7周齡早期生長(zhǎng)性狀的影響，結(jié)果表明，VIPR-1基因的HpyCH4IV位點(diǎn)與中國(guó)黃羽鵪鶉的日增重、相對(duì)生長(zhǎng)率、體重、脛長(zhǎng)、胸寬、胸深、胸骨長(zhǎng)、脛圍有顯著關(guān)聯(lián)性(P<0.05)；HpyCH4IV位點(diǎn)與朝鮮鵪鶉的體重、胸寬、胸深有顯著關(guān)聯(lián)性(P<0.05)；HpyCH4IV位點(diǎn)與中國(guó)白羽鵪鶉的脛圍、日增重和相對(duì)生長(zhǎng)率有顯著關(guān)聯(lián)性(P<0.05)。本研究顯示，HpyCH4IV位點(diǎn)(A355G)與中國(guó)黃羽鵪鶉和中國(guó)白羽鵪鶉的體重有顯著關(guān)聯(lián)性，這一結(jié)果與周敏等[25]、周敏等[26]的結(jié)果相似。綜上，VIPR-1基因外顯子6-7的HpyCH4IV位點(diǎn)(A355G)與蛋用鵪鶉的早期生長(zhǎng)性狀具有一定影響。但是由于本研究?jī)H僅檢測(cè)了VIPR-1基因外顯子6-7區(qū)域上的位點(diǎn)，后期實(shí)驗(yàn)需要通過(guò)研究該基因片段上其余區(qū)域，進(jìn)一步探究VIPR-1基因?qū)g鶉早期生長(zhǎng)性狀的影響。