韋媛 羅永明 覃連紅 戴傳勇

（廣西農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣西 南寧 530007）

鴉膽子屬植物常綠灌木或小喬木，在我國主要分布于福建、廣東、廣西、海南等地。種子可作中藥，味苦，性寒，有清熱解毒、抗病毒、止痢疾、抗腫瘤、治療贅瘤、治毒蛇咬傷、治慢性鼻炎等功效，還可以治療雞眼、疣外、瘧疾以及痢疾等疾病。種子含有50%以上的鴉膽子油，鴉膽子油可以制成軟膠囊，這種膠囊具有抗癌的作用［1］。長期以來,鴉膽子大范圍處于一種野生狀態(tài)，隨著國內(nèi)外制藥企業(yè)對中藥材鴉膽子果實的需求，野生果實被掠奪性采收，野生資源逐年枯竭，果實產(chǎn)量不能滿足制藥企業(yè)的需求，且果實質(zhì)量很難控制［2］。近年來，市場調(diào)研發(fā)現(xiàn)，廠家對鴉膽子的需求量增大，而生產(chǎn)量沒有跟上，使得市場貨源走俏。因此，做好鴉膽子種子的育苗工作，推進人工種植，提高農(nóng)戶種植的成活率，可以大幅度提升鴉膽子的果實收成，進而實現(xiàn)農(nóng)戶經(jīng)濟效益。

近來年，已有不少學(xué)者針對鴉膽子的臨床醫(yī)藥應(yīng)用、成分提取技術(shù)、組織培養(yǎng)和產(chǎn)銷動態(tài)等方面進行過試驗和研究，但對鴉膽子種子發(fā)芽力、發(fā)芽率的影響方面研究較少。本研究通過開展不同成熟度鴉膽子種子對發(fā)苗率的影響研究，確定鴉膽子種子采集最佳成熟度。通過開展鴉膽子種子貯藏時間對發(fā)芽力、發(fā)芽率的影響研究，探索鴉膽子種子適宜的貯藏時間與發(fā)芽力、發(fā)芽率的關(guān)系。在此基礎(chǔ)上，撰寫鴉膽子育苗技術(shù)操作規(guī)程，為鴉膽子育苗提供技術(shù)保障，從而提高經(jīng)濟效益。

1 材料與方法

1.1 試驗地點

試驗地點：廣西南寧市大學(xué)東路176號廣西農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院農(nóng)學(xué)與園藝系；試驗選取三個不同年份的鴉膽子種子，種子采收點：廣西南寧市西鄉(xiāng)塘區(qū)壇洛鎮(zhèn)中上村永通坡的鴉膽子種植基地。

1.2 試驗藥品及儀器

試驗所采用的物品、儀器和設(shè)備有：蒸餾水、福爾馬林、濾紙、玻璃培養(yǎng)皿、燒杯、玻璃棒、溫度計、濕度測量表、鑷子、標(biāo)簽、發(fā)芽箱等。

1.3 試驗設(shè)計

1.3.1 鴉膽子不同成熟度種子對發(fā)芽率的試驗設(shè)計 一般情況下，開花過后4個月，鴉膽子開始結(jié)果，顏色由綠色逐漸變?yōu)辄S色，到6個月后，果實變?yōu)樽虾谏?。將種子分為三種不同成熟度，分別為：Ⅰ級種子（開花過后6個月采集到的紫黑果）、Ⅱ級種子（開花過后6.5個月采集到的紫黑果）、Ⅲ級種子（開花過后7個月采集到的紫黑果）。在試驗過程中，種子放置在密封玻璃培養(yǎng)皿貯存，處理催芽，置于30℃環(huán)境中催芽進行分類播種試驗。

1.3.2 鴉膽子種子貯藏時間對發(fā)芽力、發(fā)芽率的試驗設(shè)計 將種子分為三種不同貯藏時間，分別為：A類種子（當(dāng)年采收的，貯藏時間為0年）、B類種子（前一年采收的，貯藏時間為12個月）、C類種子（前兩年采收的，貯藏時間為24個月）。

在試驗過程中，種子放置在密封玻璃培養(yǎng)皿貯存，處理催芽，置于30℃環(huán)境中催芽進行分類播種試驗。

1.4 試驗方法

試驗方法參照《農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程》及《〈規(guī)程〉實施指南》進行。

1.4.1 種子采收 種子從生長健壯、無病蟲害、果實大而飽滿的母株上采集完全變黑的成熟的果實，采集后放在陰涼處，去除果皮肉，洗凈，陰干［3］。

1.4.2 種子消毒 為了預(yù)防霉菌感染，干擾試驗結(jié)果，采用藥劑浸種消毒，用冰醋酸100倍液浸種30min或50%福美雙可濕性粉劑500倍液浸種20min，使之吸收藥液，再用清水洗滌干凈，然后晾干催芽，再進行播種。

1.4.3 種子催芽 由于鴉膽子種子有休眠期，試驗前需要進行催芽。浸種催芽方法為，試驗前將種子置于50～60℃蒸餾水中，浸種60min左右，將種皮肉泡軟，直至可以用手揉掉，然后撈起，濾掉過多的水分，清洗2～3次，再將種子用紗布包好，放在塑料袋里保濕，最后將所有種子去皮肉后，用清水泡12～24h，再放在濾紙上，放在30℃、每天光照12h的發(fā)芽箱環(huán)境下催芽，催芽過程中每天用蒸餾水洗1次種子，以防生霉,在催芽過程中要保持同樣的溫度、濕度和光照［4］。

催芽處理后，再把種子分配到每個培養(yǎng)皿，擺放整齊，再用吸管把蒸餾水滴入培養(yǎng)皿種子上，放置在密封玻璃培養(yǎng)皿貯存，同樣置于30℃、每天光照12h的環(huán)境中監(jiān)測種子發(fā)芽情況。

1.4.4 種子試驗 選種、采集：由于鴉膽子花序較小，屬于雌雄異株，不易進行人工授粉，只需采用雌雄間種的方式，自然授粉，采集果實即可。鴉膽子種子有休眠期，種子的成熟度一般是根據(jù)采收果實距開花時間進行區(qū)分，在合適的時間采收種子，并通過貯藏時間來打破休眠期，進行選種育苗。

播種、記錄發(fā)芽時間：對這些不同時間點采收、不同成熟度、不同貯藏時間的鴉膽子種子在相同環(huán)境中，進行分組播種試驗，對它們的發(fā)芽力、發(fā)芽率進行記錄、比對。計算、比較發(fā)芽率：發(fā)芽率（%）=（n/N）×100，式中n指種子正常發(fā)芽粒數(shù)（在規(guī)定時間內(nèi)），N指供試種子總數(shù)，得出不同成熟度、不同貯藏時間鴉膽子種子與相應(yīng)發(fā)芽率的關(guān)系。

試驗一：試驗選取B類鴉膽子種子，Ⅰ級、Ⅱ級和Ⅲ級每類種子選150粒為試驗品種，作5個重復(fù)，分別裝進5個玻璃培養(yǎng)皿，30粒/培養(yǎng)皿，對其發(fā)芽情況進行統(tǒng)計比對。

試驗二：試驗選取三個采收年份的A類、B類、C類鴉膽子種子，每類種子選150粒為試驗品種，作5個重復(fù)，分別裝進5個玻璃培養(yǎng)皿，30粒/培養(yǎng)皿，對其發(fā)芽情況進行統(tǒng)計比對。

通過發(fā)芽試驗比較，得出種子休眠期處理、溫度調(diào)試、發(fā)芽時間等因素與鴉膽子的種子發(fā)芽力、發(fā)芽率的關(guān)系與影響情況［5］。

1.5 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS19.0統(tǒng)計分析軟件對數(shù)據(jù)進行獨立性T檢驗，結(jié)果以“平均值+標(biāo)準誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 成熟度與發(fā)芽率的試驗結(jié)果與分析

不同成熟度與發(fā)芽率的試驗結(jié)果如表1所示。種子陸續(xù)發(fā)芽，試驗時間為50天，Ⅰ級、Ⅱ級和Ⅲ級的150粒種子分別發(fā)芽40粒、45粒和85粒，成熟度為Ⅰ級的種子發(fā)芽天數(shù)最長，達到40d，Ⅱ級和Ⅲ級的種子發(fā)芽天數(shù)為38d，發(fā)芽率在26.7%～56.7%之間，成熟度為Ⅱ級的種子發(fā)芽率最高，達到56.7%。發(fā)芽率排序為：Ⅱ級種子>Ⅲ級種子>Ⅰ級種子。

表1 不同成熟度與發(fā)芽率的試驗結(jié)果

開花過后形成的鴉膽子綠果、黃果，還不具備有發(fā)芽力，開花過后7個月采集到的紫黑果，水分逐漸喪失，發(fā)芽力、發(fā)芽率遞減，采摘成熟度為Ⅱ級的鴉膽子種子發(fā)芽力最強。

2.2 貯藏時間與發(fā)芽率的試驗結(jié)果與分析

不同貯藏時間與發(fā)芽率的試驗結(jié)果如表2所示。根據(jù)成熟度與發(fā)芽率的試驗結(jié)果，在進行成熟度與發(fā)芽率的試驗時，選取的均為Ⅱ級種子（開花過后6.5個月采集到的紫黑果），試驗時間為50天，A類、B類和C類的150粒種子分別發(fā)芽42粒、89粒和45粒，A類、B類、C類發(fā)芽時間分別為35d、36d、38d，發(fā)芽率在28.0%～59.3%之間，貯藏時間為B類的鴉膽子種子發(fā)芽率最高，達到59.3%，同時發(fā)芽時間也最長。

表2 不同貯藏時間與發(fā)芽率的試驗結(jié)果

剛采摘的種子水分較多；成熟果實貯藏時間1年以上發(fā)芽力幾乎為0，貯藏1年以上的種子水分喪失較多，一定程度上制約其發(fā)芽力，影響發(fā)芽率；貯藏1年以內(nèi)的鴉膽子種子發(fā)芽率均在28%以上，采摘后貯藏12個月的鴉膽子種子發(fā)芽力最強。

2.3 不同處理方法的發(fā)芽數(shù)的差異分析

不同處理方法的發(fā)芽數(shù)的分析見表3，II級種子發(fā)芽數(shù)與I、III級種子差異顯著，I、III級差異不顯著，采摘時達到成熟度為Ⅱ級的種子發(fā)芽率最高，達到56.7%。B類發(fā)芽數(shù)與A、C類差異顯著，A、C類差異不顯著；貯藏時間為B類的鴉膽子種子發(fā)芽率最高，達到59.3%，同時發(fā)芽時間也最長，達到38天。

表3 不同處理方法的發(fā)芽數(shù)

3 結(jié)論與討論

文獻記載，日均溫20℃以下鴉膽子種子不發(fā)芽，其萌發(fā)的最適溫度為30℃；夏季7月份播種出苗最快，這與該種植物主要分布在熱帶地區(qū)的生活習(xí)性相一致。鴉膽子種子的發(fā)芽力存在物理障礙，堅硬的種殼可能使得浸種時水分很難被種子吸收，氧氣也難以透過種殼，不利于萌發(fā)。因此，在實際生產(chǎn)過程中，必須人為幫助其打破休眠期，縮短其發(fā)芽耗時，對加快種植生產(chǎn)有著較為積極地指導(dǎo)作用。

鴉膽子種子應(yīng)選擇從采摘到播種的時間一年以內(nèi)為宜，12個月為最佳，當(dāng)年采摘、貯藏1年次之，1年以上年限時間過長，發(fā)芽力逐漸喪失，鴉膽子種子應(yīng)分批采集果皮完全為紫黑色的留種，以保證發(fā)芽率和種苗質(zhì)量。果實經(jīng)陽光爆曬后變?yōu)楹谏枬M的種子，經(jīng)長時間晾曬后，果實干縮，這時種子的濕度為10%～13%，將其包裝后存放于陰涼干燥處，育種效果較好。

在自然環(huán)境下，種子發(fā)芽率只有30%～40%，因此，在實際生產(chǎn)過程中，經(jīng)過催芽打破休眠期后，開花過后6.5個月采集到的紫黑果作為鴉膽子育種種子，置于30℃、每天光照12h環(huán)境中大部分發(fā)芽率接近60%。這為鴉膽子產(chǎn)業(yè)化的科學(xué)育種、栽培種植發(fā)展提供技術(shù)保障，提高農(nóng)戶種植的成活率，提升鴉膽子的果實收成，可實現(xiàn)農(nóng)戶較好的經(jīng)濟效益。