劉纖纖，梁曉蓮，李文莉，陳 勇，劉玟君，黃周艷，李 媛，曾水風(fēng)，韋澤蕓

（廣西中醫(yī)藥大學(xué)科學(xué)實(shí)驗(yàn)中心，南寧 530200）

紅穿破石是指鼠李科屬植物翼核果（Ventilago leiocarpaBenth.）的根及根莖，又名鐵牛入石、血風(fēng)藤、青筋藤等，為木質(zhì)藤本，生于山間溝邊、疏林下或灌木叢。紅穿破石在廣東、廣西、福建、湖南、云南等地均有產(chǎn)出，在印度、緬甸、越南等國(guó)都有分布。紅穿破石可以清熱利濕，還可以利尿通淋，對(duì)泌尿系統(tǒng)結(jié)石具有特殊作用，可用于尿路感染、急慢性腎炎、腎結(jié)石的治療，還具有舒筋活絡(luò)、盈補(bǔ)氣血的功效，對(duì)于跌打損傷、月經(jīng)不調(diào)、風(fēng)濕疼痛等癥狀都有較好的治療效果。

民族藥想要跟上時(shí)代發(fā)展，就需要不斷地進(jìn)行深入研究，通過創(chuàng)新的研究成果推動(dòng)民族藥的發(fā)展。紅穿破石作為一種具有多種功效的民族藥，目前業(yè)界對(duì)其藥理作用以及有效物質(zhì)的深入研究鮮見報(bào)道。本研究通過對(duì)前人的文獻(xiàn)進(jìn)行整理，在此基礎(chǔ)上探究紅穿破石的藥用價(jià)值，以期對(duì)紅穿破石的開發(fā)應(yīng)用提供參考。

1 紅穿破石化學(xué)成分的研究

目前，翼核果的化學(xué)成分發(fā)現(xiàn)的不多，以鼠李科植物作參考，發(fā)現(xiàn)鼠李屬植物中含有豐富的黃酮類成分［1］，其中以多羥基黃酮醇及其苷類居多，并證明黃酮化合物在鼠李屬植物中普遍存在，其次含量較多的是醌類物質(zhì)，主要蒽醌類成分為大黃酚、大黃素、大黃素甲醚以及其苷類，此外鼠李科植物還含有萘酚類、苯酚類香豆素類物質(zhì)。

應(yīng)百平等［2］從海南島產(chǎn)的翼核果植物根中分離得到大黃素、大黃素-6，8-二甲醚、1-羥基-6，7，8-三甲氧基-3-甲基蒽醌、翼核果醌和羽扇豆醇，其中1-羥基-6，7，8-三甲氧基-3-甲基蒽醌是首次從自然界中分離到，而翼核果醌也是一種新化合物。王雪芬等［3］對(duì)紅穿破石進(jìn)行了化學(xué)成分研究，從紅穿破石中分離到3個(gè)蒽醌成分和2個(gè)萘醌成分，其中萘醌成分中1個(gè)新的化合物被命名為翼核果素（圖1）。從目前的研究成果來看，翼核果素、翼核果醌-Ⅰ這2種成分只能通過分離紅穿破石得到。

圖1 翼核果素、翼核果醌的分子式

王曉煒等［4］從廣西產(chǎn)紅穿破石根莖的抗炎有效部位堿提取酸沉淀中分離得到6個(gè)化合物，其中首次分離得到大黃素-8-O-β-D-葡萄糖甙、酮類化合物（1，6-二羥基-3-甲基酮-8-羧酸）以及從本屬植物首次分離而得的異黃酮類化合物鶯尾甙元。王曉煒等［5］從紅穿破石的根莖中分離得到1個(gè)新化合物，命名為翼核酮苷，并對(duì)其抗氧化活性進(jìn)行了初步探究，為紅穿破石藥材質(zhì)量控制方面提供了依據(jù)。

2 紅穿破石的生藥鑒定

翼核果屬植物種類繁多，中國(guó)分布僅有翼核果、毛果翼核果（V.calyculata）、海南翼核果（V.inaequilateralis）、印度翼核果（V.maderaspatana）、臺(tái)灣翼核果（V.elegans）以及矩葉翼核果（V.oblongifolia）等少數(shù)品種［6］。此外，在翼核果屬中發(fā)現(xiàn)了2個(gè)云南新種，分別是少脈翼核果（VentilagopaucinervisC.Y.Wu ex L.L.Deng et G.S.Fan）［7］和政德翼核果（VentilagozhengdeiG.S.Fan）［8］。

2.1 性狀鑒別

紅穿破石的性狀特征：根、莖均呈圓柱形，常彎曲有分支，莖表面暗棕紅色，栓皮稍松，易薄片狀剝離，除去皮層，木質(zhì)部表面有粗細(xì)不等的縱棱線，縱切面深黃色，紋理通直易劈開，外側(cè)木栓層棕紅色，易剝離，內(nèi)側(cè)有細(xì)層紋能呈片狀剝離，木質(zhì)部鮮黃色，可見導(dǎo)管孔單個(gè)或多個(gè)連結(jié)呈放射狀排列，有細(xì)密放射紋及多個(gè)年輪環(huán)紋。

2.2 顯微鑒別

梁超楊等［9］發(fā)現(xiàn)紅穿破石的顯微特征顯著，橫切面木栓層由10多列細(xì)胞組成，常含有棕黃色物。根皮層內(nèi)分布著單個(gè)石細(xì)胞，中柱部位明顯可見有較多呈間歇性環(huán)狀的石細(xì)胞群和纖維束。莖的韌皮部較寬，大型的分泌細(xì)胞形成層附近分散分布，而石細(xì)胞群的位置位于射線部位。藥材粉末化后還可以看見晶體石細(xì)胞。壁稍厚，皮層寬廣，薄壁細(xì)胞多個(gè)形，切線向延長(zhǎng)，草酸鈣方晶較多，韌皮部纖維束多，排列成斷續(xù)環(huán)狀，形成層環(huán)明顯，其中可見棕黃層塊，木質(zhì)部導(dǎo)管單個(gè)或多個(gè)相連，呈放射狀排列，射線細(xì)胞近方形。薄壁細(xì)胞內(nèi)含淀粉粒。

紅穿破石粉末產(chǎn)品中木纖維多數(shù)成束，少數(shù)散離，狹長(zhǎng)，兩端尖，壁較厚，木化，胞腔狹線形，纖維束的外圍薄壁細(xì)胞中含有草酸鈣方晶，以晶纖維的狀態(tài)存在。草酸鈣方晶較多，易見，呈方形、斜方形。棕色塊：少數(shù)，黃棕色，形狀不一。導(dǎo)管：具緣紋孔導(dǎo)管碎片多見，且較大，紋孔口橢圓形，也有少數(shù)網(wǎng)紋導(dǎo)管碎片。淀粉粒：?jiǎn)瘟＃尸F(xiàn)形狀有卵形、類球形、圓形、半圓形，臍點(diǎn)可見，呈點(diǎn)狀，短線形；復(fù)粒由單粒復(fù)合而成。木栓細(xì)胞：有時(shí)顯淡棕色，木化，其表面觀呈多角形，大小均勻，斷面觀呈狹長(zhǎng)方形，壁較厚，有的胞腔內(nèi)有棕色物。射線細(xì)胞：徑向斷面可見，細(xì)胞呈類方形、長(zhǎng)方形，壁稍增厚，紋孔明顯或不明顯。

3 紅穿破石的含量測(cè)定

農(nóng)云開等［10］采用薄層色譜法對(duì)紅穿破石中大黃素、翼核果醌進(jìn)行鑒別，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，紅穿破石中含有多種醌類成分，其中以大黃素含量高。為此，專門建立了一種薄層鑒別方法，該方法具有較高的特異性，能夠有效地把控瑤藥紅穿破石的質(zhì)量。

黃維安等［11］采用HPLC法對(duì)紅穿破石中大黃素的含量進(jìn)行測(cè)定，色譜柱為EclipseXDB-C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，5μm），將甲醇-0.1%磷酸溶液（75∶25）作為流動(dòng)相，將流速控制在1.0 mL/min，把檢測(cè)波長(zhǎng)控制為285 nm，把柱溫控制為30℃，把進(jìn)樣量控制為10μL，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對(duì)大黃素的進(jìn)樣量進(jìn)行控制，控制其范圍在0.006 3～0.063 0μg之間時(shí)，進(jìn)樣量與峰面積的比值，最終呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系。

劉歡等［12］采用Agilent TC-C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5μm）對(duì)紅穿破石的HPLC指紋圖譜進(jìn)行研究，采用甲醇-0.1%磷酸鹽溶液進(jìn)行梯度洗脫，將流速控制為1.0 mL/min，將檢測(cè)波長(zhǎng)控制為291 nm，最終確定了樣品溶液的制備方法，在克服各種不利因素的影響下，考察檢測(cè)波長(zhǎng)、流動(dòng)相梯度和色譜柱對(duì)樣品色譜行為的影響，最后從中選擇最優(yōu)的紅穿破石分離條件。研究結(jié)果表明，大黃素作為紅穿破石的有效成分，在指紋圖譜中保留時(shí)間適中，含量高，穩(wěn)定性好，因此適宜以大黃素為參照峰建立紅穿破石的指紋圖譜。

蒙毅等［13］采用HPLC法對(duì)紅穿破石中大黃素和大黃素甲醚的含量進(jìn)行測(cè)定，通過正交試驗(yàn)、對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果得知，當(dāng)將乙醇體積分?jǐn)?shù)控制在60%，液料比控制為8∶1，每次時(shí)間控制在2 h，提取頻率為4次時(shí)，可以達(dá)到紅穿破石中總皂苷的最佳提取率。

胡筱希等［14］采用HPLC法對(duì)紅穿破石藥材中的翼核果素及翼核果醌-Ⅰ的含量進(jìn)行測(cè)定，建立了紅穿破石中的翼核果素及翼核果醌-Ⅰ的含量測(cè)定方法。同時(shí)，通過測(cè)定翼核果素及翼核果醌-Ⅰ對(duì)DPPH自由基的清除能力，以半數(shù)清除濃度（IC50）值作為評(píng)價(jià)清除DPPH自由基能力的指標(biāo)，并證明了紅穿破石藥材中翼核果素及翼核果醌-Ⅰ的含量分別為0.56%、0.10%，2種成分清除DPPH自由基的IC50分別為1.13、1.63 mg/mL。胡筱希等［15］利用HPLC法測(cè)定翼核果和翼核果醌-Ⅰ的含量，采用響應(yīng)曲面法控制相關(guān)變量，考察提取的次數(shù)、提取的時(shí)間及料液比對(duì)提取效果的影響，測(cè)得翼核果的最佳提取條件是料液比1∶25，提取次數(shù)3.98次，提取時(shí)間24.98 min，翼核果醌-Ⅰ的最佳提取條件是料液比1.00∶24.78，提取次數(shù)2.38次，提取時(shí)間20.05 min，這可以為紅穿破石藥材中的翼核果和翼核果醌-Ⅰ的提取工藝提供依據(jù)。

4 紅穿破石藥理作用研究

4.1 抗肝損作用

現(xiàn)代藥理學(xué)證明，紅穿破石及其提取物在一定的條件下作用于小鼠，有減輕乙醇致小鼠急性肝損傷的作用，進(jìn)一步研究可知，其醇提取物能夠明顯降低乙醇誘導(dǎo)小鼠中的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高，與此同時(shí)，提高肝臟的過氧化氫酶和總的抗氧化能力，最終達(dá)到明顯減輕肝組織病理改變的效果［16］。黃健等［16］探究其急性毒性試驗(yàn)，提示紅穿破石醇提物毒性低，未出現(xiàn)死亡及明顯的毒性反應(yīng)，對(duì)乙醇肝損傷有防治作用，其機(jī)制或與增強(qiáng)肝臟抗氧化功能有關(guān)，但抗肝損活性部位尚需進(jìn)一步研究。

4.2 抗氧化作用

胡筱希等［14］以DPPH作為一種穩(wěn)定的以氮為中心的自由基，當(dāng)有抗氧化劑存在時(shí)，其吸收消失或減弱，且吸光度變小的程度與自由基被清除的程度呈定量關(guān)系，可通過檢測(cè)其吸光度來評(píng)價(jià)樣品的抗氧化性。其研究結(jié)果得到，紅穿破石提取物具有抗氧化活性，由于翼核果素的抗氧化活性和含量均大于翼核果醌-Ⅰ，可以推測(cè)翼核果素為紅穿破石提取物抗氧化活性的主要貢獻(xiàn)者。

據(jù)《中國(guó)瑤藥學(xué)》［17］記載，民間可用于治療慢性肝炎以及肝硬化，抗氧化能力是有效反映肝損傷與肝再生失衡狀態(tài)評(píng)價(jià)的重要因素，紅穿破石中的特征成分翼核果素及翼核果醌-Ⅰ具有一定的清除自由基能力。紅穿破石化學(xué)成分中含有抗氧化物質(zhì)，對(duì)紅穿破石高抗氧化進(jìn)行基礎(chǔ)性的研究，可為抗氧化產(chǎn)品提供理論依據(jù)?？寡趸涂寡鬃饔孟嚓P(guān)，因此，對(duì)紅穿破石兩者關(guān)系進(jìn)行研究具有理論與現(xiàn)實(shí)的意義。

4.3 抗癌作用

紅穿破石具有養(yǎng)血祛風(fēng)、固腎益精、舒筋活絡(luò)等功效，可以用于貧血頭暈、急慢性肝炎、跌打損傷、月經(jīng)不調(diào)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)痛、內(nèi)傷等疾病的治療。經(jīng)臨床試驗(yàn)，服用紅穿破石被證明有升高白血球的作用，特別對(duì)婦科癌癥治療期間出現(xiàn)的白細(xì)胞減少癥有較好的療效［18］。

徐綏緒等［19］從紅穿破石的莖中分離得到2種微量的新化合物，并且通過采用合理的研究方法，將這2種新的化合物作用于人體慢性髓樣白血病細(xì)胞K562，測(cè)定這2種新的化合物對(duì)該種類細(xì)胞抑制生長(zhǎng)作用的強(qiáng)弱。徐宏等［20］研究發(fā)現(xiàn)，翼核果素能夠?qū)θ烁伟┘?xì)胞HepG2裸鼠移植瘤生長(zhǎng)產(chǎn)生抑制作用，其機(jī)制可能與MAPK、p53和TNF信號(hào)通路有關(guān)。

4.4 對(duì)T細(xì)胞和B細(xì)胞增殖的抑制作用

在尋找自然界免疫抑制物質(zhì)的過程中，Wang等［21］采用乙醇提取物和所有分離化合物體外對(duì)小鼠脾臟細(xì)胞的細(xì)胞毒性、對(duì)Concanavalin A（ConA）誘導(dǎo)的T細(xì)胞增殖和脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的B細(xì)胞增殖的抑制活性進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)紅穿破石粗提物對(duì)T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞增殖有較強(qiáng)的體外抑制作用。

4.5 其他作用

陶濤等［22］用原子吸收分光光度法及電感禍合等離子體發(fā)射光譜法測(cè)定紅穿破石粉末中20種元素的含量，其分析結(jié)果表明，紅穿破石含有多種人體必需的微量元素，其中Fe、Zn、Cu、Mn、Cr、Co等元素的含量及比例對(duì)其功效有一定的關(guān)聯(lián)。鐵是生物體內(nèi)非常重要的微量元素，而紅穿破石中含有大量的Fe，故其與補(bǔ)血功能有一定的關(guān)聯(lián)。除此之外，紅穿破石還在調(diào)節(jié)人體鉻含量中具有一定作用。

5 紅穿破石的應(yīng)用及展望

在紅穿破石的應(yīng)用中，常見的含有紅穿破石的單驗(yàn)方可用于治療風(fēng)濕性腰腿痛、慢性肝炎、風(fēng)濕痹癥、癱瘓、跌打損傷。如用于治療風(fēng)濕性腰腿痛可取紅穿破石根、穿山龍、釘?shù)馗?、雞骨香、軟枝杜、半楓荷，浸酒，常飲。含有紅穿破石藥材的復(fù)方中成藥治療腎結(jié)石、尿道結(jié)石、膀胱結(jié)石等結(jié)石病癥的效果比較好，用于治療跌打損傷也可以取得明顯的效果，其使用安全系數(shù)很高，且單驗(yàn)方藥材購(gòu)買價(jià)格不高，值得研究和倡導(dǎo)應(yīng)用。

紅穿破石中含有豐富的大黃素等蒽醌類成分，大黃素等蒽醌類成分都具有抗炎、抗菌、利尿、止咳以及降血壓等多種功能，考慮加強(qiáng)紅穿破石在實(shí)際過程中的應(yīng)用，可以將此作為出發(fā)點(diǎn)對(duì)其藥理作用進(jìn)行更加針對(duì)性的研究分析。醌類化合物大多具有較好的生物活性，研究表明，蒽醌類的抗腫瘤藥物具有抗菌譜廣的特點(diǎn)，即蒽醌類的抗腫瘤藥物的治療限制性較弱，適用性比較好。臨床應(yīng)用表明，蒽醌類的抗腫瘤藥物不僅可用于實(shí)體瘤治療，也可用于非實(shí)體瘤的治療，比如乳腺癌、惡性淋巴瘤和急慢性白血病等。

紅穿破石藥材在實(shí)際生活中的作用廣泛，并且效果顯著，因此，在科技發(fā)展迅猛的今天，更加深入研究紅穿破石的成分，通過發(fā)現(xiàn)新的活性成分，提高紅穿破石的應(yīng)用效率，讓紅穿破石能夠在抗腫瘤、消炎、利尿以及治療結(jié)石等方面都可以有更進(jìn)一步的應(yīng)用發(fā)展。

6 小結(jié)

民族藥紅穿破石是民間常用的藥材，獲得九牛美稱中的“紫金?！?，多種藥方將其應(yīng)用在實(shí)際臨床中，治療跌打損傷、風(fēng)濕、利尿通淋等，有重要的臨床意義。本研究對(duì)紅穿破石化學(xué)成分、鑒別特征、含量測(cè)定及藥理作用進(jìn)行總結(jié)，但其總化學(xué)成分仍不全面，相應(yīng)的黃酮類、蒽醌類成分目前發(fā)現(xiàn)較少，紅穿破石的藥理作用僅有抗氧化、抗肝損等研究進(jìn)展，尚缺乏對(duì)紅穿破石抗炎鎮(zhèn)痛、利尿通淋等作用的研究，明確其藥理機(jī)制，將來可以作為新藥運(yùn)用于臨床，擴(kuò)大其藥效作用。