【摘要】目的：對(duì)BD BACTECTM FX200全自動(dòng)血培養(yǎng)儀進(jìn)行性能評(píng)價(jià)。方法：選用24株臨床已分離菌株及標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行檢測(cè)，評(píng)價(jià)儀器的準(zhǔn)確性，采用轉(zhuǎn)種平板的方法， 回顧性分析2019年6月至12月968份血培養(yǎng)的結(jié)果，分析陽性率、陽性檢出時(shí)間、檢出菌種類、假陽性率及假陰性率等的性能評(píng)價(jià)指標(biāo)。結(jié)果：在模擬20份樹脂需氧瓶中，19份在72h內(nèi)報(bào)陽，陽性檢出率為95%。在模擬20份溶血素厭氧瓶和樹脂兒童瓶中在72h內(nèi)全部報(bào)陽，陽性檢出率為100%。報(bào)陽轉(zhuǎn)種的病原菌經(jīng)Phoenix 100鑒定后，與已知病原菌一樣，準(zhǔn)確性為100%。968份臨床血培養(yǎng)標(biāo)本，120份陽性，陽性率12.4%，最快陽性報(bào)警時(shí)間2h，假陰性率0.47%，假陽性率為4.0%。結(jié)論：FX200血培養(yǎng)儀操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)速度快，準(zhǔn)確性高，既提高血培養(yǎng)陽性率，又縮短報(bào)陽時(shí)間。

【關(guān)鍵詞】BD BACTECTM FX 200；全自動(dòng)血培養(yǎng)儀；病原菌；性能評(píng)價(jià)

[中圖分類號(hào)]R446 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A [文章編號(hào)]2096-5249（2021）13-0144-02

BD BACTECTM FX 200為微生物快速培養(yǎng)系統(tǒng)， 可對(duì)菌血癥患者血液里的病原菌進(jìn)行快速靈敏檢測(cè)， 同時(shí)也可檢測(cè)體內(nèi)無菌部位標(biāo)本。能為臨床更快提供檢驗(yàn)結(jié)果，便于臨床診斷治療及用藥[1]， 現(xiàn)根據(jù)CNAS-GL028文件要求，對(duì)該血培養(yǎng)儀進(jìn)行性能評(píng)價(jià)，結(jié)果如下。

1 材料與方法

1.1菌株來源 我院自2019年1月至6月在血培養(yǎng)陽性標(biāo)本中分離的21株病原菌，經(jīng)過Phoenix 100鑒定且經(jīng)microTyper MS質(zhì)譜儀分析確認(rèn)。分別為肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、熱帶假絲酵母菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、屎腸球菌、糞腸球菌、肺炎克雷伯菌、無乳鏈球菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌、陰溝腸桿菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、粘質(zhì)沙雷菌、奇異變形桿菌、化膿鏈球菌、藤黃微球菌、表皮葡萄球菌、卡他莫拉菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌。還有3株病原菌為標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、糞腸球菌，標(biāo)準(zhǔn)菌株購(gòu)自中國(guó)工業(yè)微生物菌種保藏管理中心。

1.2臨床標(biāo)本 我院自2019年6月至12月經(jīng)BD BACTECTMFX200檢測(cè)的血培養(yǎng)標(biāo)本共計(jì)968份。

1.3儀器與試劑 BD BACTECTM FX 200、樹脂需氧瓶、溶血素厭氧瓶、樹脂兒童瓶、Phoenix 100鑒定系統(tǒng)、microTyper MS質(zhì)譜儀、BD革蘭氏陰性細(xì)菌鑒定/藥敏板、BD革蘭氏陽性細(xì)菌鑒定/藥敏板、PhoenixTM酵母菌鑒定板。

1.3方法 ①準(zhǔn)確性評(píng)價(jià)：先配置麥?zhǔn)?.5菌懸液，9.9 mL生理鹽水加0.1 mL菌懸液稀釋兩次，9.8 mL生理鹽水加0.2 mL菌懸液一次，稀釋三遍后相當(dāng)于菌懸液濃度為300 CFU/mL，加100uL稀釋后的菌懸液至3 mL無菌血液中即制備成接種至樹脂需氧瓶或含溶血素厭氧瓶的模擬標(biāo)本（菌量為10 CFU/瓶），加100uL稀釋后的菌懸液至1 mL無菌血液中即制備成接種至樹脂兒童瓶的模擬標(biāo)本（菌量為30CFU/瓶）。另取100uL生理鹽水加入需要量無菌血液中，作為陰性對(duì)照。將制備好的模擬標(biāo)本打入相應(yīng)培養(yǎng)瓶中， 按操作步驟放置血培養(yǎng)儀中，并記錄報(bào)陽時(shí)間，吸取報(bào)陽瓶中的培養(yǎng)液轉(zhuǎn)種于血平板、沙保羅、巧克力平板，放在5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24h，過夜培養(yǎng)的菌株用Phoenix 100進(jìn)行鑒定。后續(xù)經(jīng)microTyper MS質(zhì)譜儀分析確認(rèn)，比較不同病原菌在相同濃度時(shí)儀器報(bào)陽時(shí)間的差別及鑒定結(jié)果與已知菌株的一致性。②性能指標(biāo)評(píng)價(jià)：按照血培養(yǎng)儀的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)程培養(yǎng)臨床血標(biāo)本，并轉(zhuǎn)種至血平板、沙保羅、巧克力平板進(jìn)行培養(yǎng)及鑒定，根據(jù)鑒定結(jié)果對(duì)儀器的陽性率、陽性檢出時(shí)間、檢出菌種類、假陽性率及假陰性率進(jìn)行評(píng)價(jià)。

2 結(jié)果

2.1培養(yǎng)分離 菌株樹脂需氧瓶中，除藤黃微球菌未報(bào)陽性，其余19份均在72h內(nèi)報(bào)陽，陽性檢出率95%。鑒定結(jié)果與已知菌株一致，準(zhǔn)確性100%。在溶血素厭氧瓶和樹脂兒童瓶中，20份模擬樣本72h內(nèi)均報(bào)陽，陽性檢出率100%，培養(yǎng)分離菌株鑒定結(jié)果與已知菌株一致，準(zhǔn)確性100%。

2.2檢出菌種類分布及構(gòu)成比 968份臨床血標(biāo)本中，120份陽性標(biāo)本，陽性率12.4%，其中革蘭氏陰性菌占58.3%、革蘭氏陽性菌占35.8%、酵母菌占5.8%，大腸埃希菌陽性報(bào)警時(shí)間最快（2h），假陰性率0.47%，假陽性率4.0%（見表1），檢出菌種類分布及構(gòu)成比見表2。

3 討論

血流感染是醫(yī)院常見嚴(yán)重的感染性疾病，有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道：革蘭氏陰性菌造成的血流感染多于革蘭氏陽性菌造成的血流感染[2-3]， 與本文檢出的病原菌分類一致。

本實(shí)驗(yàn)?zāi)M的20份血培養(yǎng)標(biāo)本中，溶血厭氧瓶在72h內(nèi)報(bào)陽率100%，報(bào)陽平均時(shí)間13時(shí)52分。除了產(chǎn)氣莢膜梭菌為專性厭氧菌外，其余19株病原菌均為兼性厭氧菌，說明厭氧瓶兼具檢出專性厭氧菌和兼性厭氧菌的能力。溶血厭氧瓶與樹脂需氧瓶所選用的病原菌有16株一樣的，在相同濃度、病原菌情況下，除肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌外，其余14株厭氧培養(yǎng)報(bào)陽時(shí)間均早于樹脂需氧培養(yǎng)，與文獻(xiàn)中提到雙瓶均報(bào)陽，厭氧瓶報(bào)陽時(shí)間早于需氧瓶的報(bào)道一致[4]，究其原因，我認(rèn)為可能是厭氧培養(yǎng)瓶中營(yíng)養(yǎng)成分比需氧培養(yǎng)瓶好，有些兼性厭氧菌僅在厭氧培養(yǎng)瓶中生長(zhǎng)。因此建議臨床對(duì)疑似血流感染患者抽取血培養(yǎng)時(shí)，要采集雙瓶雙側(cè)，分別做需氧和厭氧培養(yǎng)。

在968份臨床標(biāo)本中，報(bào)陽時(shí)間最快的是大腸埃希菌，因?yàn)榇司鷮儆谀c桿菌科，兼性厭氧菌，在普通瓊脂平板即可生長(zhǎng)，發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，這與BD血培養(yǎng)儀檢測(cè)原理一致。本文中儀器假陽性率為4.0%，可能原因有：①抽血量過多；②厭氧菌及苛養(yǎng)菌的存在，沒有選擇適合的培養(yǎng)方式及平板；③室溫高于28℃；④培養(yǎng)箱電壓及溫度不穩(wěn)定。將經(jīng)血培養(yǎng)儀培養(yǎng)5 d報(bào)陰性的瓶子取出，轉(zhuǎn)種于血平板、沙保羅及巧克力平板，發(fā)現(xiàn)4份血培養(yǎng)標(biāo)本為假陰性，假陰性率為0.47%，3份真菌，1份奴卡菌。產(chǎn)生原因：①血液標(biāo)本采集后，放在室溫時(shí)間過長(zhǎng)；②血液采集量不足，兒童少于1 mL，成人少于3 mL，產(chǎn)生的CO2量不足以激發(fā)熒光系統(tǒng)而造成假陰性；③采集標(biāo)本時(shí)剛剛或正在使用抗生素；④未抓住采集合適時(shí)機(jī)；⑤消毒酒精未完全揮發(fā)時(shí)進(jìn)行標(biāo)本采集。因此，血培養(yǎng)瓶經(jīng)儀器培養(yǎng)5 d后報(bào)陰時(shí)，應(yīng)轉(zhuǎn)種血平板、沙保羅、巧克力平板，以確認(rèn)是否為真陰性。

綜上所述，BD BACTECTM FX 200全自動(dòng)血培養(yǎng)儀操作簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確性高，檢出速度更快捷，大大提高血培養(yǎng)的陽性率，縮短報(bào)陽時(shí)間，為患者治療贏取寶貴時(shí)間。

參考文獻(xiàn)

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作者簡(jiǎn)介：郭麗娜（1982.12-），女，漢族，陜西省渭南市人，大學(xué)本科，主管檢驗(yàn)師，研究方向：細(xì)菌耐藥機(jī)制。