郭欣碩，徐小雅，黃萍萍，關(guān) 麗，羅 靳，郭 楠

(遼寧省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)基地建設(shè)工程中心，遼寧 沈陽 110032)

2.弧菌的鑒定結(jié)果

將分離得到的202株弧菌菌株通過分子生物學(xué)(PCR)的方法分析鑒定出21個(gè)弧菌種類，其中有45株分析鑒定結(jié)果為弧菌屬，詳見表4。分離結(jié)果顯示，大菱鲆弧菌的檢出占弧菌總數(shù)的33.7%，在總菌群中占的比例最高；托蘭宗弧菌、溶藻弧菌、魚腸道弧菌、嗜環(huán)弧菌、燦爛弧菌也均有檢出量，分別占到6.4%、4%、5.9%、5.9%、4.5%；哈維弧菌、副溶血弧菌、緩慢弧菌、大西洋弧菌、巨大弧菌等也均有檢出，但數(shù)量相對較少。對202株弧菌的鑒定表明，葫蘆島地區(qū)養(yǎng)殖大菱鲆應(yīng)重視優(yōu)勢弧菌的病害防治。

表4 遼寧葫蘆島地區(qū)202株弧菌菌株的分離鑒定結(jié)果

3.弧菌屬對抗菌藥物的總體感受性

目前世界上對水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)危害最大的主要疾病之一是弧菌病，據(jù)報(bào)道，弧菌侵染范圍廣的案例已經(jīng)很多，涉及人工養(yǎng)殖和野生魚。本試驗(yàn)經(jīng)過分離鑒定，從202株弧菌中選取了86株弧菌，并對8種抗菌藥物進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)，各種抗菌藥物對弧菌屬的最小抑菌濃度(MIC)區(qū)間及藥物的敏感率、耐藥率對比結(jié)果如表5所示。

從表5和圖1可以看出，供試菌株對各種抗菌藥物的總體感受性各有不同，恩諾沙星MIC偏向分布于0.1～3.13微克/毫升，表現(xiàn)出高度敏感性，敏感率為100%；鹽酸多西環(huán)素、硫酸新霉素MIC偏向分布0.1～25微克/毫升，敏感率分別為93.0%、48.8%；氟苯尼考MIC偏向分布于0.78～100微克/毫升，敏感率為64%；磺胺間甲氧嘧啶鈉、磺胺甲噁唑/甲氧芐啶MIC分別分布于1～512和1/0.2～512/102，最小抑菌濃度相對集中在1～32、1/0.2～32/6.4，敏 感 率 分 別 為83.7%、77.9%；甲砜霉素和氟甲喹MIC值分布具有相似性，最小抑菌濃度相對偏高，耐藥率分別為52.3%和57.0%，表明弧菌對兩類藥物的敏感程度較低。

圖1 弧菌的敏感率和耐藥率結(jié)果

表5 抗菌藥物對弧菌的MIC值區(qū)間及敏感率、耐藥率結(jié)果(n＝86)

三、討論

在大菱鲆養(yǎng)殖的過程中，常常因?yàn)轲B(yǎng)殖環(huán)境的惡化、致病性弧菌數(shù)量達(dá)到一定水平，導(dǎo)致了弧菌病害的發(fā)生。同時(shí)，養(yǎng)殖魚本身的抗病性下降也是由多種因素引起的。因此，及時(shí)防控和及時(shí)用藥可以有效減少養(yǎng)殖魚的大面積死亡。大菱鲆弧菌的耐藥性試驗(yàn)對有效預(yù)防和控制大菱鲆弧菌感染具有重要指導(dǎo)意義。

根據(jù)分離鑒定結(jié)果，弧菌廣泛存在于該地區(qū)養(yǎng)殖的大菱鲆體內(nèi)，不同大菱鲆養(yǎng)殖場、不同日期均有檢出，春季和秋季分離出的弧菌數(shù)量比夏季多。在分離培養(yǎng)出的202株弧菌中，大菱鲆弧菌的檢出率最高，托蘭宗弧菌、大西洋弧菌、嗜環(huán)弧菌、魚腸道弧菌、燦爛弧菌、溶藻弧菌，巨大弧菌、緩慢弧菌、哈維弧菌、細(xì)小弧菌、副溶血弧菌、輪蟲弧菌、苜蓿弧菌、弧菌H1309、卡那羅弧菌、異源弧菌、沙氏弧菌等也均有檢出。藥敏分析結(jié)果表明，弧菌種屬對恩諾沙星、鹽酸多西環(huán)素表現(xiàn)出高度敏感性，其次為磺胺間甲氧嘧啶鈉、磺胺甲噁唑/甲氧芐啶、氟苯尼考、硫酸新霉素，而對甲砜霉素和氟甲喹的耐藥性最強(qiáng)。

有學(xué)者認(rèn)為，上述現(xiàn)象的原因與多種因素密切相關(guān)，例如，在大菱鲆養(yǎng)殖地區(qū)，養(yǎng)殖戶常常使用單一藥物、漁藥劑量不合理、給藥途徑不當(dāng)以及耐藥菌株通過媒介傳播等(喬毅等，2015)。因此，根據(jù)試驗(yàn)分析結(jié)果，建議將抑制作用明顯的恩諾沙星、氟苯尼考作為首選藥物，用于本地區(qū)弧菌類疾病的治療和預(yù)防。另外，也有一些藥物表現(xiàn)出了部分敏感，例如磺胺間甲氧嘧啶鈉、磺胺甲噁唑/甲氧芐啶等，在一定程度上也抑制了菌株的生長和繁殖。而對甲砜霉素和氟甲喹表現(xiàn)出大部分耐藥，說明本地弧菌菌株可能已經(jīng)對此類藥物產(chǎn)生了抗藥性，需要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行合理使用。筆者認(rèn)為不合理地使用或者濫用水產(chǎn)藥物，不僅不能有效地預(yù)防和治療水產(chǎn)動(dòng)物疾病，而且會(huì)導(dǎo)致養(yǎng)殖環(huán)境中耐藥菌株數(shù)量的增加，建議養(yǎng)殖者在保證良好養(yǎng)殖環(huán)境的條件下，根據(jù)藥物敏感性及發(fā)病癥狀合理選擇有效治療劑量，達(dá)到合理用藥的目的。此外，本研究樣品采集局限于遼寧省葫蘆島地區(qū)，雖然分離菌株耐藥性較高，但結(jié)果并非代表遼寧省的整體情況，之后仍需要進(jìn)行大量的監(jiān)測普查，廣泛地進(jìn)行取樣，提出更科學(xué)的、區(qū)域性的用藥建議。

(全文完)