朱鵬宇,王 月,謝 利,魏 倩,張志勝,曾瑞珍,郭和蓉
(華南農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)與風(fēng)景園林學(xué)院,廣東 廣州 510642)
植物香氣物質(zhì)是多種次生代謝途徑生成的一系列低分子量、易揮發(fā)的化合物,其種類繁多,生物合成途徑復(fù)雜[1],主要包括萜烯類、苯基/苯丙素類、脂肪酸衍生物等三大類。一般認(rèn)為,花香的釋放是隨著花朵的開放而產(chǎn)生,并且受到環(huán)境因素的影響,如光照、溫度、水分,晝夜節(jié)律等[2-4]。
紅掌(Anthurium andraeanum Lind.)屬天南星科(Araceae)花燭屬(Anthurium)植物,是著名的熱帶花卉之一。其佛焰苞心形,顏色鮮艷且花期長,具有較高的觀賞價(jià)值。但現(xiàn)在國內(nèi)紅掌品種資源中大多數(shù)無香,花香性狀研究滯后,因此研究紅掌香氣物質(zhì)成分及其釋放規(guī)律對(duì)香型紅掌新品種培育和生產(chǎn)具有重要意義。
供試材料為香型紅掌A.'Mystral' 和無香紅掌A.'Alabama'(見圖1),取自華南農(nóng)業(yè)大學(xué)國家植物航天育種工程技術(shù)研究中心花卉基地。
圖1 紅掌A.'Mystral'(左)和A.'Alabama'(右)
1.2.1 GC-MS 分析
采用固相微萃取頂空進(jìn)樣和GC-MS 聯(lián)用技術(shù),分別于凌晨0 點(diǎn)、早上10:00 點(diǎn)和下午5:00 點(diǎn),取紅掌雌蕊成熟2/3 時(shí)期的肉穗花序,先稱鮮重,后置于組培瓶中,吸取標(biāo)樣癸酸乙酯1μL,迅速用錫箔紙和封口膜封住瓶口,密封集氣30min,插入100μm纖維針,在室溫條件下頂空取樣30min,再開始進(jìn)樣檢測(cè)。
色譜條件:DB-IMS 色譜柱(30m×0.25mm),載氣為高純氦氣,分流比20:1,色譜柱流量為1mL·min-1,取樣2min,進(jìn)樣口溫度250℃;程序升溫為初始溫度為45℃,保持1min,以5℃/min 升至250℃,保持5min。
質(zhì)譜條件:接口溫度為250℃,電子轟擊源為EI,230℃;離子電離能量為70eV;四極桿150℃,運(yùn)行26min。
1.2.2 感官鑒定
選擇開放2/3 的肉穗花序,通過鼻嗅法聞香鑒定。
1.2.3 光照處理
在有一層外遮蔭網(wǎng)的溫室大棚中設(shè)3 個(gè)處理:①CK,光照強(qiáng)度為5500±100lx;②加1 層遮蔭網(wǎng),光照強(qiáng)度為2000±100lx;③加2 層遮蔭網(wǎng),光照強(qiáng)度為600±10lx。
通過GC-MS 檢測(cè)分析,在A.'Mystral'中共檢測(cè)出76 種香氣成分,單萜類有芳樟醇、4-萜烯醇、桉葉油醇、α-松油醇、2-甲基-6-亞甲基-7-辛烯-4-醇、順式芳樟醇氧化物、β-水芹烯、反式氧化檸檬烯、2-蒈烯、(+)-α-蒎烯、γ-松油烯、4-蒈烯、別羅勒烯、乙酸香芹酯、檜烯、月桂烯、羅勒烯、(-)-β-蒎烯、2,6-二甲基-2,4,6-辛三烯、(Z)-3,7-二甲基-1,3,6-十八烷三烯、萜品油烯、2-蒎烯、α-側(cè)柏烯、雙環(huán)[3.1.0]己烷4-甲基-1-(1-甲基乙烯基)、1-亞甲基-4-(1-甲基乙烯基) 環(huán)己烷、3,6,6-三甲基-雙環(huán)(3.1.1)庚-2-烯、對(duì)薄荷-1,3,8-三烯、L(-)-樟腦烯、(E)-羅勒烯、香葉基丙酮;倍半萜類有1,3,5-三異丙基苯、1,6-環(huán)癸二烯,1-甲基-5-亞甲基-8-(1-甲基乙基);脂肪酸衍生物有3-乙氧基-3,7-二甲基辛-1,6-二烯、壬醛、正癸醛、十一醛、癸酸甲酯、乙酸異戊酯;苯環(huán)類有苯甲醇、乙酸芐酯、苯甲酸芐酯、苯酸甲酯、苯甲醛、3-乙基鄰二甲苯、乙二醇苯醚、4-叔丁基-2,6-二甲基乙酰苯;烷烴類有2,4,4-三甲基-1-己烯、3-乙基-3-甲基庚烷、十一烷、3,3-二甲基十二烷、正十九烷、正十二烷、正十六烷、正二十烷、2,4,6-三甲基癸烷、4,7-二甲基十一烷、正二十一烷、6-甲基十三烷、2,3,6-三甲基十二烷、甲基環(huán)己烷、2,6-二甲基十一烷、正十七烷、2,6,10,15-四甲基十七烷、二十八烷、4,6-二甲基-十二烷、2,6,10-三甲基十二烷、正二十七烷、1-十三炔、(Z,Z)-3,5-二烯;其他香氣物質(zhì)有十二甲基環(huán)六硅氧烷、六甲基環(huán)三硅氧烷、八甲基環(huán)四硅氧烷、環(huán)五聚二甲基硅氧烷、2-溴十二烷、1-碘-2-甲基十一烷、亞硫酸,2-丙基十三烷醇酯,A.'Mystral'紅掌含量較高的香氣物質(zhì)是萜類和苯環(huán)類物質(zhì)。在A.'Alabama' 中檢測(cè)出9 種揮發(fā)性物質(zhì),有十二甲基環(huán)六硅氧烷、2,6,10-三甲基十二烷、十四烷、2,6,10,14-四甲基十七烷、十五烷、十六烷、3,5-二甲基十一烷、2,6,11,15-四甲基十六烷和鄰苯二甲酸異丁基辛酯,但相對(duì)含量總量較低。
2.2.1 紅掌晝夜節(jié)律的香氣釋放規(guī)律
對(duì)A.'Mystral'一天中不同時(shí)間進(jìn)行香氣物質(zhì)測(cè)定,在晝夜節(jié)律中香氣物質(zhì)含量和成分差異顯著,從白天到夜晚檢測(cè)出的紅掌香氣揮發(fā)物質(zhì)總含量和種類呈先上升后下降的趨勢(shì),下午5 時(shí)香氣物質(zhì)含量最高,香氣物質(zhì)相對(duì)總含量達(dá)到3.909μg·gFW-1·h-1,種類最多,主要包括苯甲醇和苯甲酸甲酯等,其次是單萜類物質(zhì);上午10 時(shí)次之,香氣物質(zhì)相對(duì)總含量達(dá)2.339μg·gFW-1·h-1,香氣物質(zhì)主要包括苯甲醇和乙酸芐酯等,單萜類物質(zhì)種類最豐富;凌晨0 時(shí)含量最低、種類最少,香氣物質(zhì)相對(duì)總含量降至為0.198μg·gFW-1·h-1,香氣物質(zhì)釋放以烷烴類為主,有六甲基環(huán)三硅氧烷、十一烷和4,7-二甲基十一烷等。
2.2.2 紅掌不同光照下香氣釋放規(guī)律
不同光照下,紅掌A.'Mystral'香氣釋放濃淡有差異,晴天較陰天香氣更濃,溫室大棚中,在2000lx 光照條件下,聞起來更香。
花香是觀賞植物的主要觀賞性狀之一。Kuanprasert 利用GC-MS 技術(shù)對(duì)香型紅掌的香氣物質(zhì)成分進(jìn)行分析,共檢測(cè)出22種香氣物質(zhì),芳樟醇、桉樹腦等單萜類化合物是紅掌的主要致香物質(zhì)[5];本研究在A.'Mystral'紅掌中共檢測(cè)到76 種香氣物質(zhì),萜烯類和苯丙環(huán)類是其主要致香物質(zhì),這可能是由于不同品種的紅掌,其香氣性狀的遺傳背景也不一樣,因而導(dǎo)致測(cè)出的香氣成分有所差異。
GC-MS 技術(shù)是測(cè)定香氣成分的有效方法,但該方法不僅成本高,而且速度慢,在雜交后代選擇中較難應(yīng)用,而通過鼻嗅法,可以隨時(shí)隨地對(duì)香氣性狀進(jìn)行鑒定。紅掌釋放花香的規(guī)律性變化主要受自身晝夜節(jié)律及環(huán)境因素的影響,在下午5 時(shí),紅掌A.'Mystral'香氣物質(zhì)釋放含量最高,種類最多,而Kuanprasert 對(duì)5 個(gè)紅掌品種及3 個(gè)雜交種進(jìn)行香氣性狀測(cè)定,發(fā)現(xiàn)不同品種紅掌香氣釋放時(shí)間不同,大多數(shù)品種在早晨釋放[5];在光照強(qiáng)度5500lx、2000lx 和600lx 條件下,大部分香氣物質(zhì)含量和成分在光照強(qiáng)度2000lx 條件下最高,結(jié)果與香水文心蘭(OncidiumSharry-Baby'SweetFragrance')花香釋放規(guī)律相似[2]。紅掌原產(chǎn)南美洲潮濕、半陰的熱帶雨林中,喜高濕且排水良好的環(huán)境,既不耐嚴(yán)寒和高溫,又忌強(qiáng)光照射[6],適宜的溫度和濕度對(duì)紅掌的香氣釋放有一定的促進(jìn)作用。
GC-MS 檢測(cè)出的大部分香型紅掌的香氣物質(zhì)含量大小與感官鑒定一致,極少數(shù)紅掌的香氣物質(zhì)含量大小與感官鑒定不一致,推測(cè)是因?yàn)橹参锵銡夂铣赏緩街杏性S多基因,某些基因的表達(dá)量影響了香氣物質(zhì)含量的大小,而香氣基因表達(dá)量與香氣釋放量也會(huì)存在差異,因而導(dǎo)致某些紅掌雖然檢測(cè)出香氣物質(zhì)含量較低,卻能聞到較濃的香氣。在大自然中,植物花香氣的形成和釋放機(jī)制復(fù)雜,關(guān)于紅掌花香氣釋放的規(guī)律,以及光照強(qiáng)度和晝夜節(jié)律對(duì)紅掌花香氣釋放過程中相關(guān)內(nèi)在因子的變化和花香氣組成成分釋放過程的關(guān)系,均有待進(jìn)一步的深入研究。