南君宏

甘肅省會寧縣土門峴鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，甘肅白銀 730724

隨著現(xiàn)代養(yǎng)禽業(yè)的規(guī)模化、集約化發(fā)展，種雞普遍采用籠養(yǎng)，家禽人工授精技術是提高良種公禽利用效率的有效途徑［1］。在國內(nèi)絕大多數(shù)種雞場均采用人工授精，人工授精有效實現(xiàn)了擴大種公雞的利用效率，降低生產(chǎn)成本。在實際生產(chǎn)過程中為保證受精率，一般輸入有效精子數(shù)為1億個左右。但筆者認為，在保證受精率不下降的前提下，還可以進一步減少輸入的有效精子數(shù)。在本試驗中筆者將原精采用不同的稀釋比例稀釋后對母雞輸?shù)攘肯♂尵?，觀察在不同的稀釋倍數(shù)下對其受精率的影響。

1 試驗材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物

選用健康的海蘭褐母雞180只和安卡紅種公雞15只，采用三階梯籠養(yǎng)。

1.1.2 試驗儀器及稀釋液

采精杯、集精杯、輸精器、顯微鏡、血細胞計數(shù)板、載玻片、蓋玻片、鑷子、培養(yǎng)皿，0.9%生理鹽水。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗動物分組

將180只海蘭褐母雞分為3組，每組60只，依次記為A、B、C組。

1.2.2 精液采集、稀釋、精液品質(zhì)檢測

采精前將人工授精所用器械洗凈、消毒、冷卻、干燥。采用“腹背聯(lián)合按摩法”采精，把所有公雞精液集在一起，用干凈無污染的膠頭吸管輕輕抽吸幾次，使之混合均勻。將精液和稀釋液按容積比1:1，1:1.25,1:1.5進行稀釋，保證精液和稀釋液充分混勻。精液稀釋后用光學顯微鏡檢測后得知精子活率為0.9。

1.2.3 輸精

A、B、C三組母雞分別輸按1:1、1:1.25、1:1.5稀釋的精液，每只雞每次輸精量為50 μL，輸精深度2 cm左右，所采精液稀釋后在30 min內(nèi)全部輸完。

1.2.4 種蛋保存

在輸精48 h后開始收集種蛋，每天收集1次按不同組分別常溫保存，每組連續(xù)收集種蛋5 d。

1.2.5 受精率檢查

全部采用打蛋的方法觀察種蛋受精情況。

1.3 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計

采用獨立性檢驗(檢驗χ2)對數(shù)據(jù)分析，檢驗不同組間的差異是否顯著。

2 試驗結(jié)果

由表1可知，用0.9%NaCl作為稀釋液按1:1.25和1:1.5比例稀釋后的受精率之間差異不顯著（p>0.05）,但均顯著高于按1:1比例稀釋后的受精率（p<0.05）。

表1 不同稀釋倍數(shù)下其受精率及其比較

3 分析討論

從試驗結(jié)果看，稀釋比為1:1.25和1:1.5時其受精率明顯高于以1:1比例稀釋后的受精率。本試驗中，每只雞輸入有效精子數(shù)（有效精子數(shù)=輸精量×精子密度×精子活率）分別為0.629、0.559、0.503億個，輸入的有效精子數(shù)越少受精率反而會越高。

正常情況下，精子儲存于輸卵管傘附近的精子儲存管（SST）中，卵黃通過時即能釋出，精子必須要能穿過卵黃膜才能達到雌性生殖細胞而完成受精。雖然在正常受精過程中僅有一個精子與卵子結(jié)合，但其它的精子也起了不可而替代的作用，這就要求在輸精過程中輸入一定量的精子數(shù)，才能保證完成正常的受精過程［2］。有試驗結(jié)果表明，要保持高的受精率就要保證每只雞每次輸入的有效精子數(shù)不少于0.8～1.0億個［3］。蘇東頓等（2003）［4］輸入有效精子數(shù)為0.75億和1.5億時受精率沒有顯著差異，受精率分別為93.49%和95.33%，其輸入有效精子數(shù)均高于本次試驗輸入有效精子數(shù)，且受精率基本一致。劉建忠等（1995）以l%的NaCl溶液稀釋雞精液，每次輸入精子數(shù)為0.25，0.50，0.75，l.0億只的輸精效果表明，每次輸入0.75億只精子即可在輸精間隔為5 d時確保種蛋必要的受精率。而潘越博等（2010）對雞精液進行1:1、1:2和1:3稀釋后，稀釋組受精率均顯著高于原精液（(p<0.05），但組間差異不顯著（p>0.05）。在本試驗中，輸入0.5億個有效精子時，其受精率顯著地高于輸入有效精子為0.62億時的受精率，引起的原因可能是精液未能稀釋到最佳倍數(shù)，精子仍然較為粘稠,因而精子活力未能達到最佳狀態(tài)，也不排除輸精人員由于操作水平所限，而導致的輸入的有效精子數(shù)未達到理論值。

4 小結(jié)

在人工授精時，要保證較高的受精率，要求輸精人員技術操作熟練，翻肛人員與輸精人員密切配合，做到準確、有效輸精，可以明顯提高受精率。在本次試驗中，用0.9%NaCl為稀釋液稀釋時，輸入5 000萬有效精子數(shù)時即可達到較高的受精率。