【摘要】目的 回顧性分析本血液中心獻(xiàn)血者ABO血型檢測中正反定型不符的原因，為血型檢測提供指導(dǎo)。方法 對2021年1月到2021年7月間全自動血型分析儀檢測74例ABO血型不確定樣本進(jìn)一步采用手工試管法等血型血清學(xué)方法進(jìn)行檢測，對鑒定結(jié)果進(jìn)行分類歸納、統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 共有74例正反定型不符，其中由確認(rèn)抗M影響6例，占8.11%; ABO亞型8例，占10.81%;抗原誤檢、漏檢11例，占14.86%;抗體誤檢、漏檢48例，占64.86%。結(jié)論 ?全自動血型分析儀在反定型抗體檢測中的錯誤是造成ABO正反定型不符的主要原因，應(yīng)該摸索出最佳的檢測參數(shù)以降低錯誤率，提高準(zhǔn)確度。并且應(yīng)該與手工檢測相結(jié)合，才能準(zhǔn)確鑒定ABO血型。

【關(guān)鍵詞】ABO正反定型不符;全自動血型分析儀;抗體漏檢

目前，由于采供血事業(yè)的蓬勃發(fā)展，各個(gè)血站的采血量逐年增加，靠手工檢測已不能滿足工作需要，血液的自動化檢測已經(jīng)全面應(yīng)用。但由于各個(gè)廠家所生產(chǎn)的設(shè)備的準(zhǔn)確率不同，從而會影響血液質(zhì)量及輸血安全。

1 材料與方法

1.1研究對象 ?本研究選取了2021年1月至2021年7月在獻(xiàn)血者，經(jīng)全自動血型分析儀ABO血型檢測發(fā)現(xiàn)正反定型不符樣本74例。

1.2試劑與儀器單克隆抗A、抗B、抗A1、單克隆抗AB、單克隆抗H、ABO細(xì)胞（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司）;抗人球蛋白卡（珠海貝索生物技術(shù)有限公司）;離心機(jī)（久保田KA-2200）;全自動血型分析儀（貝克曼，PK7300）。

1.3 方法

1.3.1血型血清學(xué)檢測獻(xiàn)血者初次ABO 血型鑒定由血液檢測實(shí)驗(yàn)室采用全自動血型分析儀，參照儀器說明書進(jìn)行。血型參比實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步進(jìn)行ABO 正反定型，采用手工試管法，參照文獻(xiàn)進(jìn)行操作。對每個(gè)ABO正反定型不符結(jié)果進(jìn)行分析，判斷其原因，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

1.3.2統(tǒng)計(jì)學(xué)分析分析判斷抗原、抗體漏檢和抗原、抗體多檢出情況，采用直接計(jì)數(shù)法;分析各月份正反定型不符的例數(shù)是否與檢測人數(shù)有關(guān)，采用χ2檢驗(yàn);分析 ABO亞型、不規(guī)則抗體等情況是否與性別、年齡、血型有相關(guān)性，將74例樣本分為3個(gè)年齡組，分別是30歲以下組、30-39歲組和40歲以上組，進(jìn)行Fisher分析。

2 結(jié)果

2.1正反定型不符的情況分布結(jié)果見表1。

從表1可以看出，有42例抗體漏檢，其中38例是因?yàn)榭贵w弱凝集而導(dǎo)致反定型假陰性，但也有4例是強(qiáng)凝集而被判為陰性;反定型假陽性有6例，其中4例是因?yàn)榫囧X導(dǎo)致機(jī)器判讀困難。

正定型假陽性10例，即檢出并不存在的ABO抗原;正定型假陰性2例，其中1例為強(qiáng)凝集。

ABO亞型常常既干擾正定型也干擾反定型，所以在表中單列出來。本研究共發(fā)現(xiàn)8例ABO亞型。

2.2 各月份檢測人數(shù)與正反定型不符的例數(shù)

經(jīng)卡方分析，不符合例數(shù)與檢測人數(shù)之間沒有顯著差異性，沒有相關(guān)性。

2.3正反定型不符情況與性別、血型、年齡的相關(guān)性

從表3可以看出，正反定型不符情況與性別、年齡無相關(guān)性，而與血型有強(qiáng)相關(guān)性（p<0.01）。

3 討論

ABO正反定型不符可以從兩方面分析，正定型有問題或反定型有問題。ABO亞型可能導(dǎo)致正定型、反定型都有問題。有時(shí)血清學(xué)難以判斷結(jié)果，就需要進(jìn)行ABO基因分型。

遇到ABO正反定型不符的樣本，先進(jìn)行鹽水法試驗(yàn)，看一下正定型和反定型的凝集情況， 4攝氏度可以加強(qiáng)ABO抗原抗體的凝集。

機(jī)器判讀ABO正反定型結(jié)果會有一定的錯誤率，這就要求實(shí)驗(yàn)人員嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，正確處理血樣，避免緡錢凝集干擾判讀結(jié)果。對全血自動分析儀的準(zhǔn)確率進(jìn)行評價(jià)，定期校準(zhǔn)設(shè)備，降低錯誤率。對機(jī)器初步判斷為正反定型不符的血樣，及時(shí)送交相關(guān)科室進(jìn)行人工復(fù)核。

全自動血型分析儀主要由液體分配系統(tǒng)、離心機(jī)、孵育器、讀數(shù)儀、清洗系統(tǒng)及控制系統(tǒng)等部分組成。使用前應(yīng)對血型分析儀的主要參數(shù)進(jìn)行評價(jià)并優(yōu)化，關(guān)鍵參數(shù)分為固定參數(shù)與可優(yōu)化參數(shù)，共有9個(gè)。固定參數(shù)是根據(jù)廠家推薦和其他實(shí)驗(yàn)室的使用情況而設(shè)置，包括孵育溫度、標(biāo)本紅細(xì)胞濃度、試劑紅細(xì)胞濃度、試劑加注量、稀釋標(biāo)本加注量以及儀器的判定參數(shù)。可優(yōu)化參數(shù)包括孵育時(shí)間、標(biāo)準(zhǔn)抗A、抗B血清稀釋倍數(shù)、標(biāo)本血漿稀釋倍數(shù)。在每種檢測條件下的判讀準(zhǔn)確率應(yīng)該在95%以上。影響結(jié)果準(zhǔn)確率的原因可能有：反應(yīng)時(shí)間過短，凝集不完全;忘記加樣;微孔板內(nèi)有異物;標(biāo)準(zhǔn)血清效價(jià)低，凝集不完全;血漿粘滯性較高，紅細(xì)胞沉降不完全等。針對這些原因應(yīng)該有相應(yīng)的措施，來避免假陰性假陽性反應(yīng)，提高血型檢測準(zhǔn)確率。

準(zhǔn)確的血型檢測結(jié)果是保證臨床輸血安全的基本前提。隨著技術(shù)的發(fā)展與更新，全自動血型分析儀具有自動化、標(biāo)準(zhǔn)化、穩(wěn)定化等優(yōu)點(diǎn)，在部分大型血站實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)開展應(yīng)用，但其多為開放式系統(tǒng)，設(shè)備廠商推薦的參數(shù)主要為設(shè)備自身的試驗(yàn)參數(shù)及判定參數(shù)，還需要每個(gè)科室自行摸索最佳的檢測試劑參數(shù)。

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作者簡介：于江虹，1973年8月，女，漢，吉林省長春市，本科，副主任醫(yī)師，輸血研究。