王立瑞
新冠肺炎具有極強(qiáng)的流行性和傳染性,可通過(guò)呼吸途徑傳播。及時(shí)發(fā)現(xiàn)和隔離治療新冠肺炎患者,是防止疫情大面積擴(kuò)散的重要方式。目前,最適合大范圍篩查的檢測(cè)方法就是新冠病毒核酸檢測(cè),通過(guò)檢測(cè)病毒的核酸,及時(shí)發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性患者與無(wú)癥狀感染者,盡早隔離治療與觀察,避免疫情擴(kuò)散。那么新冠病毒核酸檢測(cè)的流程是什么?檢測(cè)時(shí)需要注意哪些問(wèn)題?都是核酸檢測(cè)人員需要掌握和了解的內(nèi)容。
一、新冠病毒核酸檢測(cè)是什么意思
核酸檢測(cè)主要是對(duì)病毒的核酸進(jìn)行檢測(cè)的方法,通過(guò)在受檢者糞便、血液、呼吸道標(biāo)本中查找是否存在外來(lái)入侵病毒的核酸,進(jìn)而確定是否感染了新冠病毒。如果核酸檢測(cè)顯示陽(yáng)性,則說(shuō)明受檢者體內(nèi)存在病毒。新冠病毒感染人體后,可在呼吸道系統(tǒng)進(jìn)行繁殖。因此通過(guò)檢查鼻咽拭子或痰液標(biāo)本的病毒核酸,就能夠判斷人體是否感染新冠病毒。目前,核酸檢測(cè)陽(yáng)性也是新冠病毒感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。在大范圍檢測(cè)中,新冠病毒核酸檢測(cè)主要采集咽拭子標(biāo)本,受檢者將嘴巴張開(kāi),醫(yī)生用一根長(zhǎng)棉簽拭子,擦拭受檢者咽隱窩、扁桃體附近的分泌物,然后在試管中妥善保存,統(tǒng)一送到核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病毒核酸檢測(cè)。檢測(cè)中采取特定的檢測(cè)技術(shù)和反應(yīng)方法,根據(jù)判定標(biāo)準(zhǔn)如果結(jié)果顯示為陽(yáng)性,則說(shuō)明受檢者體內(nèi)已經(jīng)感染了新冠病毒。
二、新冠病毒核酸檢測(cè)的流程是怎樣的
新冠病毒核酸檢測(cè)的流程主要是,呼吸道標(biāo)本采集→樣本運(yùn)送→樣本接受→樣本滅活(56℃,30min)→核酸提取→核算擴(kuò)增→結(jié)果判讀→報(bào)告。在新冠病毒核酸檢測(cè)中,首先是采集樣本,醫(yī)護(hù)人員用棉拭子在咽喉處擦拭,采集到的混合人體細(xì)胞、病毒、細(xì)菌的分泌物樣本。在病毒采樣管中保存,通過(guò)專用樣本運(yùn)送桶、特制密封樣本轉(zhuǎn)運(yùn)箱冷藏保存,送到實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。對(duì)外包裝逐層噴灑酒精消毒,然后拆開(kāi)樣本包裝,并對(duì)樣本做好編號(hào)標(biāo)記。樣本先滅活后進(jìn)行病毒核酸提取,首先處理樣本,加入相應(yīng)的試劑,采用專用設(shè)備和方法提取病毒核酸。核酸提取后采用實(shí)時(shí)熒光PCR儀進(jìn)行核酸擴(kuò)增。PCR技術(shù),也就是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)或稱為體外DNA擴(kuò)增技術(shù),進(jìn)行擴(kuò)增和檢測(cè)。將病毒核酸加入到配制好的PCR體系中,放入熒光定量PCR檢測(cè)儀器,設(shè)定程序后,儀器會(huì)自動(dòng)運(yùn)行,對(duì)病毒基因進(jìn)行擴(kuò)增。在經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的反應(yīng)之后,得出熒光信號(hào),進(jìn)而獲得樣本檢驗(yàn)結(jié)果。在實(shí)驗(yàn)室檢查完成后,還要對(duì)各種廢物進(jìn)行無(wú)害處理。
三、核酸檢測(cè)時(shí)需要注意哪些問(wèn)題
首先是檢測(cè)前的樣品采集、保存與運(yùn)輸:采樣人員按個(gè)人三級(jí)防護(hù)穿戴好防護(hù)裝備,采樣時(shí)先核對(duì)被采樣人的信息,包括姓名、性別、編號(hào)及身份證號(hào)碼等信息,采樣部位必須準(zhǔn)確,采樣操作必須規(guī)范,樣品保存和運(yùn)輸必須符合規(guī)范要求。實(shí)驗(yàn)室樣品的接收:接收樣品時(shí)先逐一核對(duì)樣品與登記表信息,登記編號(hào)與樣品管編號(hào)是否一致,被采樣人員信息登記必須完整,否則拒收樣品,登記信息與樣品管不一致時(shí)返回重新采樣,打開(kāi)轉(zhuǎn)運(yùn)箱必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行,并做好必要的消毒處理。樣品檢測(cè):檢測(cè)前必須先56℃30min滅活,核酸提取必須按試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,操作時(shí)必須認(rèn)真仔細(xì),防止加樣順序錯(cuò)誤,加樣量與提取程序必須與說(shuō)明書(shū)一致,提取后的廢棄物必須按規(guī)范處理,否則容易造成實(shí)驗(yàn)室的污染。核酸擴(kuò)增:擴(kuò)增試劑與提取液加入必須精準(zhǔn),擴(kuò)增程序設(shè)置嚴(yán)格按擴(kuò)增試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,并按上級(jí)要求做好質(zhì)量控制。核酸檢測(cè)人員按規(guī)范做好個(gè)人防護(hù),整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作必須滿足生物安全要求,廢充物處理符合規(guī)范,防止實(shí)驗(yàn)室內(nèi)職業(yè)暴露和廢棄物處理不當(dāng)造成的環(huán)境污染和新冠肺炎疫情擴(kuò)散。
四、新冠病毒核酸檢測(cè)如何保障結(jié)果準(zhǔn)確可靠
在新冠病毒核酸檢測(cè)中,如果受到一定因素的影響,可能會(huì)發(fā)生假陽(yáng)性或假陰性的情況。例如,受檢者本身并未感染新冠病毒,但檢測(cè)結(jié)果顯示為陽(yáng)性。這可能是由于實(shí)驗(yàn)室核酸污染、標(biāo)本間交叉污染等因素引起的。對(duì)此,需要對(duì)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控工作嚴(yán)格落實(shí),以減少假陽(yáng)性的發(fā)生。假陰性的情況往往更為常見(jiàn),指的是受檢者在流行病學(xué)、肺部影像學(xué)、臨床癥狀上都符合新冠肺炎標(biāo)準(zhǔn),但是病毒核酸檢測(cè)結(jié)果卻為陰性。這是由于,病毒剛剛?cè)肭秩梭w,病毒量尚未達(dá)到可以檢出的水平。對(duì)于不同程度癥狀、不同潛伏期的情況,在人體不同位置病毒載量也有所不同。如果采樣部位、采樣時(shí)機(jī)不準(zhǔn)確,就可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果陰性。檢測(cè)使用的試劑、設(shè)備等都有檢測(cè)下限。如果病毒量無(wú)法達(dá)到檢測(cè)下限,那么就會(huì)無(wú)法檢出,導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性。實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理不到位、人員檢測(cè)能力差、設(shè)備性能不足等,也會(huì)發(fā)生假陰性。所以,需要對(duì)這些情況加以注意,以提高檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性。
結(jié)論:新冠病毒核酸檢測(cè)是大范圍初步篩查新冠肺炎患者的重要途徑。在核酸檢測(cè)當(dāng)中,必須確保嚴(yán)格的操作和規(guī)范的流程,受檢者也要做好配合。將各種影響因素消除,以提高檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性。