黃新新，李曉斌，李 海，李璇玥，李 倩， 馬利鑫，陳 暉，馬玉輝

(1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，烏魯木齊 830052；2.新疆馬繁育與運動生理重點實驗室,烏魯木齊 830052；3.昭蘇縣畜牧獸醫(yī)站，新疆昭蘇 835699)

0 引 言

【研究意義】血清生理生化指標(biāo)測定可以體現(xiàn)動物機體的健康狀況，同時反映品種間的遺傳特性、生長發(fā)育環(huán)境、飼草營養(yǎng)水平等內(nèi)外環(huán)境因素對機體的影響，是研究動物生長發(fā)育的重要參考指標(biāo)[1-3]，也是臨床診斷疾病的有效方法[4-6]?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】在不同品種的牛和豬等的研究中發(fā)現(xiàn)，血液生理生化指標(biāo)檢測在飼草料利用率、培育新品系及疾病診斷等方面發(fā)揮重要作用[7-10]。薛宵等[11]研究發(fā)現(xiàn)，通過測定肉牛血清生化指標(biāo)可反映出，給肉牛飼喂全株玉米青貯比飼喂普通玉米秸稈青貯和甜玉米青貯效果好，且能降低肉牛料重比，顯著提高目糧消化率。田漢晨等[12]研究發(fā)現(xiàn)，通過對比雷州與川中2個品種黑山羊血清生化指標(biāo)，表明雷州黑山羊具有更好的抗氧性。【本研究切入點】鑒于血清生理生化指標(biāo)的檢測價值，當(dāng)前，國內(nèi)對馬匹血清生理生化指標(biāo)的研究文獻(xiàn)較少，且尚未建立馬匹完善的健康評價體系。研究不同品種1歲青年馬血清生化指標(biāo)的比較分析?！緮M解決的關(guān)鍵問題】研究以5個不同品種青年馬匹為試驗對象，通過測定其血清中常規(guī)指標(biāo)、肝臟代謝指標(biāo)、腎臟代謝指標(biāo)及糖脂代謝等相關(guān)指標(biāo)，在完善不同品種馬匹血清生理生化指標(biāo)基礎(chǔ)數(shù)據(jù)的同時為不同品種青年馬匹的日糧配比、飼養(yǎng)環(huán)境改善、疾病預(yù)防、健康養(yǎng)殖提供理論數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 材 料

試驗于2019年6月在新疆昭蘇縣進(jìn)行。

試驗選擇臨床健康的5個品種馬匹，分別為3個新疆地方品種(伊犁馬、哈薩克馬和焉耆馬)、1個引進(jìn)品種(純血馬，純血馬的父母本由國外引進(jìn)，但是在新疆地區(qū)進(jìn)行自繁后，選擇的子代作為試驗動物)和1個雜交品種(雜交馬，伊犁馬♀×奧爾洛夫馬♂)。分別為體重(217.44±21.35)kg相近的1歲伊犁馬20匹，體重(215.86±18.42)kg相近的1歲哈薩克馬20匹，體重(219.00±19.37)kg相近的1歲焉耆馬16匹，體重(224.35±14.56)kg相近的1歲純血馬16匹，體重(227.98±21.49)kg相近的1歲雜交馬(伊犁馬♀×奧爾洛夫馬♂)20匹，共計92匹，每個品種均公母各半。

1.2 方 法

1.2.1 試驗設(shè)計

將以上92匹1歲馬，以品種為單位，分為5個組，分別為伊犁馬組、哈薩克馬組、焉耆馬組、純血馬組和雜交馬組。在飼養(yǎng)管理和精飼料營養(yǎng)水平相同的基礎(chǔ)，進(jìn)行45 d補喂飼養(yǎng)，試驗第45 d采集馬匹血液樣品，測定其血清中常規(guī)指標(biāo)、肝臟代謝指標(biāo)、腎臟代謝指標(biāo)及糖脂代謝指標(biāo)相關(guān)指標(biāo)。

1.2.2 飼養(yǎng)管理

試驗馬匹舍飼飼養(yǎng)，精料補充料每匹馬 2.50 kg/d，平均分3等份，分別與09:00、14:00及19:00補喂。粗飼料以苜蓿干草和當(dāng)?shù)睾瘫究聘赡敛轂橹?，每天投?次，滿足自由采食，自由飲水。每次采食結(jié)束后馬匹活動圈自由運動。列出精料補充料營養(yǎng)水平，營養(yǎng)水平為實測值。表1

表 1 精料組成及營養(yǎng)成分(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 1 Concentrate composition and nutrient composition(DM basis)(%)

1.2.3 樣品采集

于試驗第45 d早晨，空腹頸部靜脈采集血樣至肝素鈉抗凝管中，3 500 r/min 離心15 min，取上清，立即-20℃冷凍保存，待測。

1.2.4 測定指標(biāo)

試驗樣本均使用南京建成生物有限公司所提供的生化分析儀和試劑盒進(jìn)行檢測血漿中的總蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,ALB)、尿素氮(BUN)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、門冬氨酸基轉(zhuǎn)移酶(AST)、尿酸(UA)、肌酐(CREA)、葡萄糖(glucose,GLU)、總膽固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件ONE-WAY ANOVA進(jìn)行方差分析。試驗數(shù)據(jù)均以平均值加減標(biāo)準(zhǔn)差(Mean ± SD)表示，采用Duncan法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同品種馬匹血清常規(guī)指標(biāo)比較

研究表明，在5個不同品種青年馬匹之間，血清總蛋白存在顯著或極顯著差異，雜交馬和焉耆馬極顯著高于伊犁馬和哈薩克馬(P<0.01)，分別提高27.16%、21.79%、24.39%、11.55%；純血馬顯著高于伊犁馬，比伊犁馬高15.33%(P<0.05)。白蛋白和尿素氮5個品種之間差異不顯著(P>0.05)，但雜交馬和焉耆馬血清白蛋白高于伊犁馬(高52.74%和62.86%)、哈薩克馬(高15.32%和22.96%)和純血馬(高59.33%和69.88%)，哈薩克馬高于伊犁馬和純血馬(高38.16%)；尿素氮伊犁馬高于其他4個品種，但差異不顯著(P>0.05)。表2

表 2 不同品種馬匹血清常規(guī)指標(biāo)比較Table 2 Comparison of serum routine indexes of horses of different breeds

2.2 不同品種馬匹肝、腎代謝指標(biāo)比較

研究表明，在5個不同品種青年馬匹之間，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活力雜交馬極顯著高于伊犁馬、哈薩克馬、焉耆馬和純血馬(P<0.01)，分別高126.55%、113.09%、34.53%和76.22%；焉耆馬極顯著高于伊犁馬和哈薩克馬、顯著高于純血馬，分別高68.40%(P<0.01)、48.43%(P<0.01)和30.99%(P<0.05)。血清門冬氨酸基轉(zhuǎn)移酶活力伊犁馬極顯著高于哈薩克馬和雜交馬，分別高41.20%(P<0.01)和43.62%(P<0.01)；純血馬顯著高于哈薩克馬和雜交馬，分別高34.79%(P<0.05)和37.10%(P<0.05)。血清中尿酸焉耆馬極顯著高于伊犁馬和哈薩克馬(P<0.01)，分別高31.89%和37.85%；雜交馬極顯著高于哈薩克馬，顯著高于伊犁馬，分別高31.77%(P<0.01)和26.07%(P<0.05)。血清肌酐濃度焉耆馬和雜交馬分別極顯著高于伊犁馬、哈薩克馬和純血馬(P<0.01)。表3

2.3 不同品種馬匹血清糖、脂代謝指標(biāo)比較

研究表明，在5個不同品種青年馬匹之間，血清葡萄糖的濃度雜交馬極顯著高于伊犁馬和純血馬(P<0.01)，分別高37.37%和41.39%，顯著高于哈薩克馬，高29.10%(P<0.05)；焉耆馬顯著高于伊犁馬和純血馬，分別高25.09%(P<0.05)和28.75%(P<0.05)。血清總膽固醇濃度焉耆馬、純血馬和雜交馬分別極顯著高于伊犁馬和哈薩克馬(P<0.01)。血清甘油三酯濃度焉耆馬和雜交馬與其他各品種馬匹之間差異極顯著(P<0.01)。血清高密度脂蛋白濃度雜交馬極顯著高于伊犁馬，比伊犁馬高77.53%(P<0.01)；哈薩克馬、焉耆馬和純血馬之間差異不顯著(P>0.05)。血清低密度脂蛋白各品種之間差異均不顯著(P>0.05)。表4

表 3 不同品種馬匹肝、腎功能代謝指標(biāo)比較Table 3 Comparison of metabolic indexes of liver and kidney in different breeds of horses

表 4 不同品種馬匹血清糖、脂代謝指標(biāo)比較Table 4 Comparison of serum glucose and lipid metabolism in different breeds of horses

3 討 論

血清總蛋白、白蛋白及尿素氮含量體現(xiàn)了機體蛋白質(zhì)代謝和氮沉積的能力，反映動物體內(nèi)蛋白質(zhì)和日糧氨基酸平衡狀況[13]。日糧中蛋白質(zhì)水平是導(dǎo)致血液中總蛋白、白蛋白、球蛋白含量變化的直接原因。尿素氮是反映機體蛋白質(zhì)代謝和氨基酸之間平衡狀況的關(guān)鍵因素。血液中尿素氮水平低，說明氨基酸平衡好、蛋白質(zhì)合成率較高。趙芳等[14]研究顯示，提高日糧精料補充料的補喂水平對1歲伊犁馬血清總蛋白含量無影響，但增加了血清白蛋白含量，降低了血清尿素氮水平。試驗結(jié)果中，不同品種馬匹血漿總蛋白質(zhì)濃度存在一定差異。焉耆馬、純血馬和雜交馬血漿中總蛋白質(zhì)水平顯著高于伊犁馬和哈薩克馬。在相同的精料補充料水平下，焉耆馬、純血馬和雜交馬表現(xiàn)出更高的日糧蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化率。伊犁馬和哈薩克馬的血緣更近，伊犁馬以哈薩克馬為母本雜交而成，精料補充料水平對伊犁馬和哈薩克馬血清總蛋白含量影響較小與趙芳[14]等研究結(jié)果相近。品種、年齡、飼養(yǎng)管理及使役等因素均會導(dǎo)致馬匹對蛋白質(zhì)需要的差異。Reitnour 等[15]研究成年馬對粗蛋白的需求量為16.60 g/kg；Olsman 等[16]研究青年馬對粗蛋白的需求量為11.81 g/kg；趙芳等[14]研究青年伊犁馬對粗蛋白的適宜需求量為14.28 g/kg。褚洪忠[17]研究顯示，飼養(yǎng)管理條件影響血清中總蛋白、白蛋白含量，主要與飼喂時間、飼喂次數(shù)及飼喂量等有關(guān)。試驗中，由于品種的差異，在飼喂相同精飼料的基礎(chǔ)上，不同品種日糧氨基酸和蛋白質(zhì)的平衡性不一致，是導(dǎo)致血漿蛋白質(zhì)相關(guān)指標(biāo)代謝差異的原因[3]。由于品種的差異，馬匹的飼養(yǎng)管理存在一定差異，粗飼料的采食量不一致，也是導(dǎo)致血漿蛋白質(zhì)水平差異的原因。

丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、門冬氨酸基轉(zhuǎn)移酶主要存在與肝臟、腎臟中，參與機體多種氨基酸的聯(lián)合轉(zhuǎn)氨基作用，通過轉(zhuǎn)氨基作用促進(jìn)機體不同來源的蛋白質(zhì)合成、分解代謝過程；也是動物機體蛋白質(zhì)、脂肪和糖類相互轉(zhuǎn)化代謝過程中的關(guān)鍵酶[18]。機體內(nèi)環(huán)境在穩(wěn)態(tài)狀態(tài)下其在血清中的活性很低，當(dāng)機體受到內(nèi)外刺激或肝腎功能發(fā)生病變時在血清中的活性會增加，可作為臨床診斷的參考指標(biāo)[19-21]。也有研究表明，血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、門冬氨酸基轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶活性與氧環(huán)境有關(guān)，低氧環(huán)境下均有升高的趨勢[22]。在試驗中，血漿中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和門冬氨酸基轉(zhuǎn)移酶活力因品種的不同存在顯著或者及顯著的差異。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶是機體內(nèi)氨基酸代謝過程中必需的催化劑，以肝臟細(xì)胞儲存最為豐富，肝細(xì)胞內(nèi)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶濃度較血清中高1 000～3 000倍，肝細(xì)胞損傷是增加血清酶濃度的直接原因。肝細(xì)胞損傷時，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶首先進(jìn)入血液中，使血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶明顯升高。某種程度上，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平過高是否存在肝代謝疾病，雜交馬達(dá)到43.95 U/L，需要做進(jìn)一步的研究，是品種因素還是肝損傷問題。門冬氨酸基轉(zhuǎn)移酶主要存在于細(xì)胞漿的線粒體中，肝損傷時，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶濃度升高，增加細(xì)胞的損傷，導(dǎo)致門冬氨酸基轉(zhuǎn)移酶在血清中的水平升高。尿酸是嘌呤代謝的最終產(chǎn)物，肌酐是肌酸代謝的產(chǎn)物，機體中的尿酸、肌酐都由腎臟排出體外，二者在血清中的濃度均可以作為評價腎臟排泄能力的參考指標(biāo)之一[23]。雜交馬和焉耆馬血清中尿酸、肌酐均高于其它3個品種馬匹，可能的原因不同品種青年馬匹體質(zhì)量、體型相近但肌肉含量不同，代謝產(chǎn)生的血清尿酸、肌酐和肌酐清除率存在差異。血清尿酸與動物機體一些激素的分泌也有關(guān)系，如雌激素水平能提高腎臟的排泄效率[24]，5個不同品種1歲青年馬匹可能存在生長發(fā)育階段不同的差異，血清激素水平不同使其他血清生化指標(biāo)含量有差異。

動物肝臟是貯備膽固醇、葡萄糖的主要器官，血清總膽固醇含量能反映肝臟不同程度的儲備能力；血清葡萄糖含量反映機體對葡萄糖的吸收、轉(zhuǎn)運和基礎(chǔ)代謝率。淀粉是動物葡萄糖的主要來源，在消化吸收過程中，腸道吸收的葡萄糖是血中葡萄糖的主要來源。血糖的升高與葡萄糖的吸收速度有關(guān)。胰島素是機體唯一具有降糖作用的激素，具有抑制食后肝內(nèi)葡萄糖生成，促進(jìn)血糖向組織內(nèi)轉(zhuǎn)運和利用的作用，其水平反映了血糖的調(diào)節(jié)狀況。脂類的代謝與血清中總膽固醇和甘油三脂含量關(guān)系密切[24]，脂肪動員后甘油三酯進(jìn)入血液，血清甘油三酯含量能夠直接反映機體脂肪儲存、消化、吸收是否平衡，如果甘油三酯含量高表明機體對脂肪的利用率低[25]。試驗中，雜交馬和焉耆馬血清葡萄糖水平、總膽固醇含量及甘油三酯濃度均顯著或者極顯著高于其他品種。與其日格日等[26]研究發(fā)現(xiàn)純血馬和蒙古馬血清部分生化指標(biāo)存在極顯著差異一致，不同品種的馬匹血清生化指標(biāo)存在生理上的差異，這與不同品種的遺傳、日糧適應(yīng)能力及飼養(yǎng)管理等有關(guān)，而具體產(chǎn)生差異的機制需要進(jìn)一步深入研究。

伊犁馬血清中門冬氨酸基轉(zhuǎn)移酶濃度為360.12 U/L，是因為線粒體損傷所致，還是品種的差異，或是初步的運動調(diào)訓(xùn)所致，需要進(jìn)一步做深入研究。

4 結(jié) 論

因品種不同，5個品種青年馬匹血清生化指標(biāo)存在顯著或極顯著的差異，其中焉耆馬血清中TP、ALP和BUN含量分別為76.20 U/L、58.27 U/L和7.22 mmol/L；哈薩克馬血清中ALT和AST含量分別為22.01和255.05 U/L低于其他品種馬，伊犁馬血清中GLU濃度為5.62 mmol/L較高，而TG濃度0.66 mmol/L較低，不同品種青年馬匹對日糧及日常管理的需求存在差異。在青年馬匹的飼養(yǎng)管理過程中，不同品種青年馬匹的飼養(yǎng)應(yīng)依靠血清生化指標(biāo)，并結(jié)合其生長特性、生長發(fā)育階段對日糧組成合理調(diào)整，以達(dá)到健康養(yǎng)殖。