石慶珍，宋冠中，郇樹乾

（海南大學動物科技學院，海南 海口 570228）

海南文昌雞因產(chǎn)自文昌而得名，是海南省地方優(yōu)良肉雞品種，以其體形方圓、腳脛細短、皮薄骨酥、肉質香甜嫩滑、營養(yǎng)豐富、百吃不厭等特色，馳名中外。 有研究發(fā)現(xiàn)，在畜禽飼料中添加少量抗生素能夠使畜禽長得更快，因此，抗生素開始大范圍應用，并逐漸普及到畜牧生產(chǎn)之中［1］。 在最初幾十年中， 抗生素的添加給畜牧生產(chǎn)帶來了良好效益，但近些年來，人們發(fā)現(xiàn)了越來越多的抗生素帶來的不利影響?？股乇恍笄輽C體吸收后會蓄積在肝和腎等器官，雖然能殺滅有害菌，抑制有害菌在腸道內(nèi)的繁殖，但對有益菌也有一定影響。 畜禽持續(xù)飼用抗生素后，會導致機體的免疫力降低、腸道微生物和菌群失調、腸道吸收營養(yǎng)物質能力下降，且會導致有害菌的耐藥性增強［2-3］；抗生素在畜禽體內(nèi)殘留或隨糞便排出還會對消費者以及周邊環(huán)境造成不良影響。 有研究顯示，抗生素在進入畜禽體內(nèi)后殘留方式有2 種， 一種是共價結合代謝物的形式，少量抗生素不會對人體產(chǎn)生影響，但如果攝入大量含有抗生素殘留物的畜禽產(chǎn)品會導致殘留物在人體內(nèi)蓄積，造成體內(nèi)器官病變甚至癌變；另一種是聚積狀態(tài)或者游離狀態(tài)下的保藥性的代謝物［3］。 根據(jù)我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布的第194 號公告，從2020 年7 月1 日起禁止在飼料中添加抗生素類添加劑，無抗飼養(yǎng)成為未來養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的必然趨勢。

目前具有一定功能的植物添加劑不僅不會使細菌產(chǎn)生抗藥性、無毒害和副作用，在畜禽體內(nèi)也不會有殘留，近年來被廣泛應用于畜禽生產(chǎn)。有研究表明， 在飼料中添加具有藥用價值的植物添加劑不僅能讓畜禽的生長速度達到添加抗生素的效果，還能改善肉色和風味。風味是評價肉類品質的一個重要標準， 而風味的好壞來源于肉中眾多游離氨基酸， 游離氨基酸能夠賦予肉類酸甜苦鮮各種滋味。 植物提取物能夠影響肉中的游離氨基酸的種類與含量，使肉呈現(xiàn)出更好的風味［4］。 香茅草作為海南傳統(tǒng)的經(jīng)濟栽培植物，提取物中有很多單體成分有較好的抑菌作用，包括檸檬醛、香茅醛、香茅醇、乙酸香葉酯、香葉醇、橙花醇、芳樟醇等［5］。筆者研究香茅草粉替代抗生素作為飼料添加劑在文昌雞養(yǎng)殖上的應用效果， 以期為無抗綠色養(yǎng)殖文昌雞提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗動物30 只1 月齡文昌雞 （15 只公雞、15 只母雞） 來自海南龍泉集團有限公司文昌雞養(yǎng)殖基地。

1.1.2 香茅草及抗生素香茅草采自海南大學實驗基地， 阿莫西林產(chǎn)自合肥中龍神力動物藥業(yè)有限 公 司， 規(guī) 格：10%， 批 號： 獸 藥 字（2016）120511199。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗日糧配制將新鮮香茅草剪斷后放入恒溫烘箱105 ℃殺青15 min， 在75 ℃烘干36 h，烘干后放入粉碎機中研磨成粉，按照3%的比例混入基礎日糧， 配制成飼喂用日糧， 抗生素按照0.1%的比例混入基礎日糧，配制成飼喂用日糧?；A日糧配方組成見表1。

表1 基礎日糧組成及其營養(yǎng)水平

1.2.2 試驗分組與處理選取1 月齡的文昌雞，將基礎日糧設為對照組、 基礎日糧+3%香茅草粉設為試驗組1、基礎日糧+0.1%抗生素設為試驗組2，每個處理10 只文昌雞（5 只公雞、5 只母雞），公雞、母雞分籠飼養(yǎng)，共30 只文昌雞，試驗期28 d。

1.2.3 試驗動物管理試驗雞在海南大學實驗基地動物房中飼養(yǎng)，飼養(yǎng)前對動物房的環(huán)境、雞籠、食槽和水壺進行全面消毒。 試驗雞采用籠養(yǎng)方式，公母分開飼養(yǎng)，防止同一籠里體型較大的公雞在進食時影響母雞進食， 試驗期間自由采食顆粒飼料，保證水源充足， 自然光照， 保持適宜的溫度以及濕度，適度通風。 每天添加2 次飼料和飲水，在8：00和17：00 稱重并記錄每次添加的飼料量；每天更換并清洗1 次糞盤，記錄有無病雞以及腹瀉情況。

1.2.4 測定指標及方法

1.2.4.1 平均日增重、料肉比及解剖測定在飼養(yǎng)試驗的正式試驗開始前，進行3 d 的預試驗，在預試驗結束后對試驗雞進行初始體重測定 （稱量前禁水禁食12 h）。 正式試驗后，在試驗開始的第7 天、第14 天、第21 天及第28 天的7：00 對試驗雞進行空腹稱重并記錄數(shù)據(jù)， 計算每只試驗雞的增重情況。于稱重前一天17：00 清理料槽，記錄剩余飼料量并計算當周各組試驗雞總消耗飼料量（當周總飼喂量-剩余飼料量）。計算每組試驗雞每周的料肉比： 料肉比=總消耗飼料量 （g）/總增重（g）， 平均日增重［g/（只·d）］=（終末重-初始重）/（試驗天數(shù)·雞只數(shù)），平均日采食量［g/（只·d）］=總消耗飼料量/（試驗天數(shù)·雞只數(shù)）。

每組挑選2 只文昌雞（一公一母）分別取十二指腸、空腸及回腸上段2 cm 左右，用生理鹽水將所取腸道的內(nèi)容物沖洗干凈，放入裝有3 mL 多聚甲醛固定液的10 mL 離心管，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.4.2 腸道樣品包埋及切片觀察將固定液中的腸道樣品取出， 依次放入80%、90%、100%、100%濃度的無水乙醇脫水2 h， 使組織中的水分全部置換出來，放入二甲苯至組織透明，將石蠟浸入組織取代組織中含有的透明劑， 最后將組織置于融化的固體石蠟中制成蠟塊，保存?zhèn)溆?，用于后續(xù)制作切片。 制成的切片用蘇木素—伊紅（HE）染色，染色后置于倒置顯微鏡下觀察，并用電腦成像截圖，測量各腸道樣品的絨毛長度和隱窩深度，計算絨隱比， 通過比較各處理的絨毛長度及隱窩深度得出結論。

1.2.4.3 血清中T-SOD、CAT活性及MDA含量測定試驗結束后， 宰殺前對試驗雞禁食12 h，不禁水，宰殺時采用頸靜脈放血取血法，每只文昌雞取2 管各5～8 mL 全血，放入冰中冷藏，防止凝血，在30 只試驗雞全部取完血樣后， 于低溫離心機中3 000 r/min 離心10 min， 取血清于1.5 mL 離心管中，-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?根據(jù)說明書使用酶標儀或分光光度計測量每只試驗雞血清中總超氧化物歧化酶（T-SOD）和過氧化氫酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）含量，得到數(shù)據(jù)后進行對比得出結論。

1.3 數(shù)據(jù)處理及分析

試驗數(shù)據(jù)用Excel 應用軟件制表，SPSS 應用軟件進行統(tǒng)計分析， 采用One-Way ANOVA 檢驗方法進行單因素方差分析， 利用LSD 法進行多重比較。

2 結果與分析

2.1 飼料中添加香茅草粉對文昌雞生長性能的影響

由表2 可知， 試驗組1 和試驗組2 試驗雞平均日增重顯著（P＜0.05）高于基礎日糧組，試驗組2的平均日增重提高了16.17%， 試驗1 組提高了11.77%， 試驗組1 和試驗組2 平均日增重差異不顯著（P＞0.05）。3 組平均日采食量和料肉比無顯著差異（P＞0.05），試驗組2 料肉比比對照組降低了13.43%，比試驗組1 降低了14.10%。

表2 飼料中添加抗生素和添加香茅草粉對文昌雞生長性能的影響 單位：g

2.2 飼料中添加香茅草粉對文昌雞腸道黏膜形態(tài)的影響

飼料中添加抗生素和香茅草粉對試驗雞腸道黏膜形態(tài)的影響見表3。 由表3 可知，與對照組相比，試驗組1 和試驗組2 顯著（P＜0.05）提高試驗雞十二指腸絨毛高度， 試驗組2 的十二指腸絨毛高度相比對照組提高了30.49%，比試驗組1 提高了31.13%；對照組、試驗組1 和試驗組2 十二指腸隱窩深度和絨隱比差異不顯著（P＞0.05），試驗組1 和試驗組2 絨隱比明顯高于對照組， 分別提高了11.30%和8.40%。 試驗組1 和試驗組2 與對照組相比顯著（P＜0.05）提高空腸絨毛高度和絨隱比，對照組、試驗組1 和試驗組2 空腸隱窩深度差異不顯著（P＞0.05），試驗組2 空腸絨毛高度相比對照組提高了18.28%， 絨隱比提高了15.97%；試驗組1 相比對照組空腸絨毛高度提高了32.18%，絨隱比提高了29.36%。 對照組、試驗組1 和試驗組2 回腸絨毛高度、隱窩深度、絨隱比無顯著差異（P＞0.05）， 試驗組2 的回腸絨毛高度和絨隱比相比對照組分別提高了14.58%和20.33%，比試驗組1 提高了13.99%和18.30%。

表3 飼料中添加抗生素和添加香茅草粉對文昌雞腸道黏膜形態(tài)的影響 單位：μm

2.3 飼料中添加香茅草粉對文昌雞抗氧化能力的影響

飼料中添加抗生素和香茅草粉對文昌雞血清中過氧化氫酶 （CAT） 和總超氧化物歧化酶 （TSOD）兩種酶以及丙二醛（MDA）含量的影響見表4。 由表4 可知，試驗組1 文昌雞血清中CAT 活力提高，顯著（P＜0.05）高于對照組和試驗組2，試驗組2 和對照組CAT 活力差異不顯著 （P＞0.05）；3組T-SOD 活力差異不顯著（P＞0.05），但試驗組2和試驗組1 的T-SOD 活力相比對照組都有較明顯的提升趨勢； 試驗組1 和試驗組2 的血清中MDA 含量都顯著（P＜0.05）低于對照組，試驗組1和試驗組2 MDA 含量無顯著（P＞0.05）差異。

表4 飼料中添加抗生素和香茅草粉對文昌雞血清抗氧化能力的影響

3 討論

3.1 不同飼喂處理對文昌雞生長性能的影響

試驗組1 和試驗組2 的平均日增重顯著（P＜0.05）高于對照組，且兩者無顯著（P＞0.05）差異，說明添加香茅草粉對文昌雞日增重的影響近似于添加抗生素。 另外，3 個處理的日采食量和料肉比均無顯著（P＞0.05）差異，但試驗組1 平均日采食量在均低于對照組和試驗組2 的情況下料肉比最低。 由此可知，在飼料中添加香茅草粉能顯著（P＜0.05） 提高文昌雞的平均日增重， 提高飼料轉化率，降低料肉比，在促進文昌雞的生長速度方面能達到抗生素的效果甚至優(yōu)于抗生素， 原因可能是香茅草粉能保護腸細胞免受破壞以及提高血清抗氧化能力。

3.2 不同飼喂處理對文昌雞腸道黏膜形態(tài)的影響

小腸是機體吸收營養(yǎng)物質的主要部位， 小腸內(nèi)絨毛的高度和隱窩深度直接決定了小腸對營養(yǎng)物質的吸收能力。 路靜等［6］、李可洲等［7］、王海波等［8］研究顯示，小腸絨毛高度越高越能增加小腸絨毛與營養(yǎng)物質的接觸面積， 越有利于營養(yǎng)物質的吸收。 絨隱比能體現(xiàn)小腸對營養(yǎng)物質的吸收能力，絨隱比越高代表小腸絨毛發(fā)育越成熟、結構更完整、吸收營養(yǎng)物質的能力越強，還可以增加腸絨毛上皮細胞的再生與修復能力，這些作用將直接促進文昌雞的生長發(fā)育與提高飼料轉化率。該研究結果發(fā)現(xiàn)試驗組1 和試驗組2 的十二指腸、空腸絨毛高度和空腸絨隱比都顯著（P＜0.05）高于對照組，甚至試驗組1 的絨毛高度和絨隱比都略高于試驗組2，因此，可以得出飼料中添加香茅草粉能夠促進文昌雞的生長發(fā)育，代替抗生素在飼料添加劑中的作用，與Tiwari 等［9］研究結果相符。

3.3 不同飼喂處理對文昌雞血清抗氧化能力的影響

畜禽在正常生長過程中， 體內(nèi)氧自由基的產(chǎn)生和清除基本上處于動態(tài)平衡的狀態(tài)， 維持正常的生理活動，但在畜禽飼養(yǎng)過程中，可能會由于光照、溫度、通風、噪音或稱重時對畜禽的抓捕使畜禽受到不同程度的刺激， 誘導體內(nèi)發(fā)生氧化應激反應， 使機體受到不同程度的氧化損傷并產(chǎn)生氧自由基， 氧自由基又能攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸（PUFA）引發(fā)脂質過氧化反應形成脂質過氧化物如丙二醛（MDA），產(chǎn)生脂類分解產(chǎn)物，這些分解產(chǎn)物中大部分能引起細胞代謝以及功能障礙，甚至死亡［10］。需要增強畜禽的抗氧化能力以使畜禽能產(chǎn)生更多酶清除多余的氧自由基， 防止組織遭受破壞，使畜禽繼續(xù)維持正常的生理活動。TSOD 能清除超氧陰離子自由基（O2-·），保護細胞和組織免受損傷， 對機體的氧化與抗氧化平衡起著至關重要的作用［11］；CAT 則能催化畜禽體內(nèi)的過氧化氫分解，防止脂質過氧化［12］；MDA 的含量通?？梢苑从硻C體內(nèi)脂質過氧化的程度，間接反映細胞與組織受損傷的程度。 試驗結果顯示，飼料中添加香茅草粉能顯著提高血液中過氧化氫酶與超氧化物歧化酶的活力， 顯著降低血液中MDA 含量。

4 結論

由此可見，在文昌雞飼糧中添加香茅草粉可作為文昌雞抗生素生長促進劑的替代品， 提高文昌雞的生長性能與飼料轉化率， 提高文昌雞血清抗氧化能力和抗應激能力， 保護文昌雞細胞組織免受損傷，代替抗生素在飼料添加劑中的作用，實現(xiàn)無抗綠色養(yǎng)殖。 但試驗的不足之處在于試驗未研究在飼料中添加不同濃度梯度的香茅草粉對文昌雞的生長是否有影響， 未找到一個最適合文昌雞生長的香茅草粉添加比例， 而且未測量血清總抗氧化能力，尚待深入研究。