廖 勇，趙紫荊

1 再生醫(yī)美

再生醫(yī)學(xué)（regenerative medicine，RM）指功能無法自行恢復(fù)的受損組織及器官通過臨床治療獲得結(jié)構(gòu)的重建與功能恢復(fù)，作為一個新興的跨學(xué)科領(lǐng)域，結(jié)合細(xì)胞和分子生物學(xué)、材料科學(xué)和組織工程的原理支持內(nèi)源性愈合、更替或再生細(xì)胞、組織或器官的結(jié)構(gòu)，從而恢復(fù)原有功能；通過使用細(xì)胞、天然或人工支架材料、生長因子、基因編輯或上述元素的組合來支持組織的自然再生修復(fù)過程。再生醫(yī)美是將再生醫(yī)學(xué)原理和技術(shù)應(yīng)用于醫(yī)療美容領(lǐng)域，從而獲得預(yù)期的臨床美容效果的交叉學(xué)科。

2 再生醫(yī)學(xué)技術(shù)

2.1 干細(xì)胞

干細(xì)胞（stem cell）是一類具有自我復(fù)制能力和多向分化潛能的細(xì)胞，特定條件下可分化為特定功能的細(xì)胞和組織。隨著年齡增長，干細(xì)胞增殖分化潛能的衰弱會直接導(dǎo)致細(xì)胞及機體的衰老。由于干細(xì)胞具有來源廣泛、免疫原性低、不易出現(xiàn)免疫排斥反應(yīng)以及體外穩(wěn)定增殖的優(yōu)勢，因此，干細(xì)胞成為近年來皮膚美容領(lǐng)域的研究熱點。臨床應(yīng)用的干細(xì)胞可來源于骨髓、脂肪、真皮、毛囊、羊膜及羊水等[1]，干細(xì)胞治療通常是將來源于宿主的干細(xì)胞經(jīng)過體外加工后再重新回輸供體。

骨髓干細(xì)胞（bone marrow stem cells，BMSCs）可用于瘢痕、光老化及脫發(fā)的治療，在皮膚美容領(lǐng)域顯示出很好的應(yīng)用前景。骨髓造血干細(xì)胞最早成功應(yīng)用于慢性創(chuàng)面的治療，并可用于萎縮性瘢痕治療[2,3]。人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUCMSCs）從臍帶中分離，在創(chuàng)面愈合、脫發(fā)、自身免疫性皮膚病及皮膚年輕化等多方面具有明顯的治療效果。脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）是再生醫(yī)學(xué)中另一種廣泛應(yīng)用的干細(xì)胞，其易于獲得且含量相對豐富[4]。ADSCs能夠分化為脂肪細(xì)胞，通過填充組織補充容量，從而有助于維持或改善組織形態(tài)，因此被用于面部塑形、豐唇、面部年輕化、瘢痕、陰莖周長和陰道功能的改善。誘導(dǎo)性多功能干細(xì)胞（induced pluripotent stem cells，iPSCs）是通過導(dǎo)入特定的轉(zhuǎn)錄因子將終末分化的體細(xì)胞重新獲得類似胚胎干細(xì)胞和成體多能干細(xì)胞（adult pluripotent stem cells，APSCs）的一種細(xì)胞類型[5]。

2.2 細(xì)胞外囊泡

細(xì) 胞 外 囊 泡（extracellular vesicles，EVs）是 由細(xì)胞釋放具有膜結(jié)構(gòu)囊泡的統(tǒng)稱，分4種類型：外泌體（exosomes，Exos）、微粒（microvesicles）、凋亡小體（apoptosis body）和癌小體（oncosomes）。間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSCs）旁分泌產(chǎn)生的Exos在醫(yī)療美容基礎(chǔ)和應(yīng)用領(lǐng)域倍受關(guān)注。Exos是直徑為50～150 nm的亞細(xì)胞雙層膜囊泡，初始形成于內(nèi)涵體小室，與細(xì)胞質(zhì)膜融合過程中釋放至胞外環(huán)境參與細(xì)胞間信息交流。Exos通過胞吞、胞吐及膜融合的方式進(jìn)入細(xì)胞，將其活性物質(zhì)（如蛋白質(zhì)、DNA、RNA等）釋放至宿主胞質(zhì)溶膠調(diào)控細(xì)胞生理功能；也可結(jié)合胞膜受體激活相關(guān)信號通路調(diào)控細(xì)胞功能，實現(xiàn)非細(xì)胞化再生醫(yī)美治療[6]。間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體（MSC-Exos）生物學(xué)功能與原始干細(xì)胞相似；但更加穩(wěn)定，免疫原性更低[7]，其免疫調(diào)節(jié)和再生功能逐漸引起研究人員的關(guān)注，體內(nèi)外實驗均顯示出抗炎、抗衰老和創(chuàng)面愈合的作用[8]。MSC可來源不同組織或iPSCs，因此，MSC-Exos種類也很多，相應(yīng)Exos的組成也不同。

2.3 富血小板血漿

富血小板血漿（platelet-rich plasma，PRP）是血小板超過生理濃度的自體血漿溶液，PRP血小板濃度是初始血漿3～5倍[9]。PRP不含干細(xì)胞，而是自體血漿濃縮血小板，包含＞800余種生物活性物質(zhì)；再生潛能主要歸因于血小板釋放的各種生長因子，如：血小板源性生長因子（platelet derived growth factor，PDGF）、轉(zhuǎn)化生長因子（transforming growth factor，TGF）、血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、堿性成纖維細(xì)胞生長因子（fibroblast growth factor-b，F(xiàn)GF-b）和表皮生長因子（epidermal growth factor，EGF）等，通過上調(diào)與細(xì)胞增殖、分化、血管生成以及細(xì)胞外基質(zhì)合成相關(guān)基因的表達(dá)，以及通過刺激細(xì)胞活化和巨噬細(xì)胞趨化，上調(diào)膠原蛋白合成，最終實現(xiàn)組織再生修復(fù)[10,11]。PRP已被用于創(chuàng)面愈合、皮膚再生（改善皺紋）、脫發(fā)和痤瘡瘢痕的治療[12]。

3 再生醫(yī)學(xué)在醫(yī)療美容領(lǐng)域的應(yīng)用

3.1 抗衰/年輕化

研究表明骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BM-MSCs）可以抑制人體皮膚成纖維細(xì)胞中紫外線引起的基質(zhì)金屬蛋白酶1（MMP-1）的表達(dá)，并上調(diào)前膠原蛋白的合成，提示BM-MSCs可用于紫外線誘導(dǎo)皮膚光老化的治療[13]。hUCMSCs可以促進(jìn)皮膚成纖維細(xì)胞的增殖和遷移，以及膠原蛋白、彈性纖維及纖連蛋白的合成，同時降低MMP-1與MMP-3的表達(dá)，促進(jìn)皮膚細(xì)胞外基質(zhì)合成，從而有助于皮膚再生和年輕化[14]。CO2點陣激光術(shù)后外用hUCMSCs培養(yǎng)基液，可有效改善術(shù)后紅斑現(xiàn)象，且聯(lián)合治療可提高激光的療效[15]。相比于BM-MSCs，ADSCs更具有增殖和分化的潛力，并保持向中胚層來源細(xì)胞分化的潛能，臨床上更多使用ADSCs來改善皮膚老化的表現(xiàn)[16]。ADSCs在受到刺激后分泌細(xì)胞外基質(zhì)的所有主要成分，有效構(gòu)建含有膠原蛋白和纖連蛋白的真皮結(jié)構(gòu)，而且分化的ADSCs會表達(dá)分泌更高水平的Ⅶ型膠原蛋白；ADSCs所構(gòu)建的真皮骨架具有100%的組織相容性，并且支持細(xì)胞與細(xì)胞間的相互作用[17,18]。過表達(dá)VEGF的ADSCs不僅可以增強ADSCs下調(diào)p21、MMP-1的能力，保護(hù)皮膚免受紫外線引起的損傷，還能上調(diào)Ⅰ型膠原蛋白在傷口處的表達(dá)，抑制由紫外線損傷引起的成纖維細(xì)胞的周期阻滯，從而改善紫外線輻射損傷引起的皮膚光老化[19]。

有研究發(fā)現(xiàn)，EGF對ADSCs的分化、增殖和遷移有促進(jìn)作用[20]；ADSCs過表達(dá)熱休克蛋白70也可顯著增加毛細(xì)血管密度和脂肪細(xì)胞數(shù)量，提高脂肪移植物在體內(nèi)存活率[21]；短鏈脂肪酸丁酸與ADSCs共培養(yǎng)可明顯增加ADSCs成脂分化，增加皮下脂肪層厚度[22]；適宜的線粒體活性氧預(yù)處理可以提高ADSCs促血管生成的潛力[23]。因此，通過合理的聯(lián)合方案從多方面提高ADSCs移植的療效。

自體成纖維細(xì)胞負(fù)責(zé)細(xì)胞外基質(zhì)（膠原蛋白、彈性纖維、透明質(zhì)酸和糖胺聚糖）的合成和分泌，補充真皮組織由于衰老導(dǎo)致的容量缺失，可有效治療皺紋和痤瘡萎縮性瘢痕[24]。2011年6月，美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）批準(zhǔn)第一款用于皮膚美容領(lǐng)域的個體化自體細(xì)胞治療產(chǎn)品（azficel-T）用于改善鼻唇溝，患者自體皮膚獲取的成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)后重新注入真皮所需治療區(qū)域[25]。角質(zhì)形成細(xì)胞被用于治療局部、較深的皮膚全層燒傷；角質(zhì)形成細(xì)胞移植后分化為成熟的上皮細(xì)胞，促進(jìn)損傷后修復(fù)[24]。

ADSCs培養(yǎng)液、脂肪組織提取物以及Exos作為無細(xì)胞衍生物也在皮膚美容方面發(fā)揮著重要的作用，可促進(jìn)細(xì)胞增殖，遷移，血管生成以及抑制細(xì)胞凋亡，抑制炎癥反應(yīng)，降低氧化應(yīng)激以及調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)[26]。ADSCs培養(yǎng)液中含有其分泌的細(xì)胞因子、生長因子、DNA、RNA和蛋白質(zhì)等多種活性物質(zhì)，可促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖和遷移，促進(jìn)膠原蛋白合成，降低彈性纖維變性，進(jìn)而促進(jìn)皮膚年輕化[4]。ADSCs-EVs可加速真皮成纖維細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞的遷移和增生，誘導(dǎo)鈣黏著蛋白（N-cadherin）、細(xì)胞周期蛋白D1、增殖細(xì)胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）、Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白基因的表達(dá)上調(diào)[27-29]。hUCMSCs-EVs作為Wnt/β-連環(huán)蛋白（Wnt/β-catenin）信號通路的“加速器”來修復(fù)受損的皮膚組織，且可通過調(diào)節(jié)Yes相關(guān)蛋白（Yes-associated protein，YAP）磷酸化來調(diào)控皮膚再生[30]。ADSC-Exos在創(chuàng)面愈合早期，促進(jìn)Ⅰ和Ⅲ型膠原蛋白的合成來加速愈合，但在愈合后期，其會抑制膠原蛋白的合成從而預(yù)防瘢痕形成[31]。人羊膜上皮細(xì)胞Exos（human amniotic epithelial cell-exosome，hAECs-Exos）可改善真皮層組織結(jié)構(gòu)，原有不規(guī)則組織結(jié)構(gòu)在治療后更接近正常的皮膚結(jié)構(gòu)[32]。

研究發(fā)現(xiàn)，iPSCs-EVs可恢復(fù)真皮老化成纖維細(xì)胞的功能，預(yù)處理的真皮成纖維細(xì)胞可對抗中波紫外線（UVB）引起的光老化，阻斷MMP-1/3的過表達(dá)，成纖維細(xì)胞活力增加，Ⅰ型膠原蛋白的表達(dá)上調(diào)[33]。Kim等[34]研究了hUCMSCs-Exos通過調(diào)節(jié)膠原蛋白和彈性纖維的合成和轉(zhuǎn)運來恢復(fù)皮膚的活力。UV導(dǎo)致的皮膚損傷中，氧化應(yīng)激反應(yīng)是主要因素；研究發(fā)現(xiàn)MSC-Exos可通過核因子相關(guān)因子-2（Nrf2）防御系統(tǒng)的適應(yīng)性調(diào)節(jié)來降低氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的皮膚損傷[35]。對于亞洲人群雙側(cè)面頰隨機對照研究發(fā)現(xiàn)，＞70%的患者表示使用ADSCs蛋白質(zhì)提取物一側(cè)面頰的皺紋、緊致度、彈性、水分、膚色和光澤度等均出現(xiàn)明顯改善，且未見不良反應(yīng)[36]。

PRP也可有效促進(jìn)皮膚年輕化，75%臨床醫(yī)生和62.5%患者使用臨床評價量表評價PRP抗衰的療效均為良好或顯著；成像分析軟件顯示皺紋減少，皮膚紋理和色澤整體改善，屏障功能和皮膚電容測量顯示水合作用也得到改善[37]?；诠饫匣u分發(fā)現(xiàn)，PRP治療較生理鹽水治療受試者自我評分（細(xì)紋及較粗的皺紋）出現(xiàn)顯著性改善[38]。另有研究發(fā)現(xiàn)，患者接受PRP治療后，皮膚整體外觀、緊致度和皺紋均有所改善，但色斑未見顯著性差異[39]。PRP可通過增加真皮成纖維細(xì)胞的增殖、基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)和膠原蛋白的合成來促進(jìn)皮膚年輕化，通過微創(chuàng)治療進(jìn)行眶周年輕化[40]。聯(lián)合CO2點陣激光皮膚年輕化及萎縮性瘢痕治療時，PRP可降低激光不良反應(yīng)的程度和持續(xù)時間，并提高預(yù)期的治療效果。此外，聯(lián)合脂肪填充面部年輕化治療，PRP可維持移植物的組織容量，改善皺紋及眶周色素沉著[41,42]。貧血小板血漿（PPP）富含纖維蛋白和凝血蛋白，臨床試驗發(fā)現(xiàn)二者均有改善眼眶下色素沉著的效果，且PPP要優(yōu)于PRP[43]。

3.2 脫發(fā)

脫發(fā)受到多種內(nèi)外源性因素影響：遺傳、內(nèi)分泌功能（甲狀腺器官疾病、性激素水平變化）、免疫系統(tǒng)疾病、營養(yǎng)不良、藥物、精神情緒和自然衰老；上述因素會影響毛發(fā)周期（hair cycle，HC），降低毛囊干細(xì)胞活性和修復(fù)能力[44]。再生醫(yī)學(xué)技術(shù)可通過誘導(dǎo)毛囊再生來治療脫發(fā)，對于脫發(fā)的治療具有很好的臨床應(yīng)用價值。

研究表明BM-MSCs可以通過抑制斑禿的相關(guān)基因（如IFNG、CXCL9、NKG2D和CXCL10等）表達(dá)，來促進(jìn)斑禿皮損處毛發(fā)的恢復(fù)[45]。hUCMSCs可顯著抑制地塞米松誘導(dǎo)的毛發(fā)退化，顯著增加毛囊的重要組成細(xì)胞人毛乳頭細(xì)胞和HaCaT細(xì)胞的增殖，并誘導(dǎo)與上調(diào)毛發(fā)再生的相關(guān)蛋白的表達(dá)[46]。毛囊細(xì)胞上清液培養(yǎng)hUCMSCs，可誘導(dǎo)其分化為毛囊細(xì)胞，進(jìn)一步證明hUCMSCs治療脫發(fā)的可行性[47]。毛囊細(xì)胞移植治療是從毛囊中提取到毛乳頭細(xì)胞，再經(jīng)過體外細(xì)胞的培養(yǎng)后移植到皮膚中誘導(dǎo)毛囊的新生并促進(jìn)毛發(fā)生長，已被用于治療雄激素性脫發(fā)（androgentic alopecia，AGA）以及女性彌漫性脫發(fā)[24]。ADSCs分泌的生長因子（如：FGF、VEGF和PDG）可提高毛囊細(xì)胞的活力[4]。ADSCs培養(yǎng)液也可通過調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和誘導(dǎo)頭發(fā)周期的生長期來促進(jìn)頭發(fā)的生長，達(dá)到治療脫發(fā)的目的[48]。此外，毛囊的隆突部細(xì)胞具有分化為毛囊間表皮、毛囊和皮脂腺結(jié)構(gòu)的能力，并已被用于構(gòu)建完整的毛囊結(jié)構(gòu)[49]；隆突部干細(xì)胞可再生培養(yǎng)出毛囊上皮和小葉間表皮，與新生大鼠毛乳頭細(xì)胞混合植入免疫缺陷小鼠后可見毳毛的生長[50]。iPSCs已成功分化為上皮性毛囊干細(xì)胞（hair follicle stem cell，HFSC），移植小鼠新生真皮后產(chǎn)生正常毛囊結(jié)構(gòu)[51]；利用iPSCs來源的上皮和間充質(zhì)細(xì)胞成分可成功再生毛囊結(jié)構(gòu)[52]，移植至成年裸鼠背部，2周后出現(xiàn)毛發(fā)生長，且在移植后的3個月內(nèi)未發(fā)現(xiàn)腫瘤的發(fā)生，表明其治療脫發(fā)具有一定安全性和有效性[53]。

ADSCs培養(yǎng)液中的細(xì)胞因子[如：FGF、VEGF、PDGF及胰島素樣生長因子（insulin-like growth factors，IGF）等]可顯著提高患者頭發(fā)的密度和直徑；使用微針輔助給藥3個月后與治療前相比，頭發(fā)的直徑和密度均出現(xiàn)顯著性改善，提示ADSCs培養(yǎng)液對脫發(fā)同樣具有治療作用[4]。Exos也是一種很有前途的AGA新療法，研究發(fā)現(xiàn)Exos療法可以使頭發(fā)生長良好，而且無明顯不良反應(yīng)[54]；真皮乳頭（dermal papilla，DP）細(xì)胞來源Exos可促進(jìn)DP細(xì)胞的增殖，增加人毛囊毛軸的長度，局部注射誘導(dǎo)毛囊進(jìn)入生長期，促進(jìn)毛發(fā)的生長和再生[55]。

PRP對毛發(fā)的生長/再生具有促進(jìn)作用，其至少含有FGF、PDGF、IGF-1、VEGF和EGF等其他生長因子，其中b-EGF可促進(jìn)毛囊發(fā)育；IGF-1促進(jìn)毛囊細(xì)胞活力、增殖和遷移；前列腺素E2（prostaglandins E2，PGE2）可刺激毛囊中毛發(fā)的生長；PGE2及其類似物可促進(jìn)毛囊從休止期向生長期的轉(zhuǎn)變[44]。PRP可通過作用于毛乳頭細(xì)胞，促進(jìn)新的毛發(fā)生長，加速毛發(fā)從休止期向生長期的轉(zhuǎn)化，增加毛發(fā)密度，同時具有免疫調(diào)節(jié)的作用，從而發(fā)揮毛發(fā)再生的作用[56]?；罨腜RP（AA-PRP）和非活化的PRP（A-PRP）對于AGA的治療顯示出不同的治療效果，A-PRP治療的頭發(fā)密度改善（31%±2%），顯著高于AA-PRP治療組（19%±3%），說明體內(nèi)凝血酶在激活血小板和體內(nèi)分配激活血小板內(nèi)容物方面的優(yōu)勢[57,58]。PRP可聯(lián)合其他治療方法，如聯(lián)合外用（米諾地爾）或口服治療（非那雄胺），會提高治療效果[59]。PRP對于不同性別AGA患者的效果存在差異；PRP可顯著增加男性患者頭發(fā)的密度和直徑，但PRP只顯著增加了女性患者頭發(fā)的直徑，頭發(fā)密度改善不明顯[60]。脂肪組織的衍生物基質(zhì)血管成分（stromal vascular fraction，SVF）聯(lián)合PRP治療AGA被報道比SVF單獨治療的效果更好[61]。

3.3 萎縮性/增生性瘢痕

再生醫(yī)學(xué)技術(shù)治療痤瘡萎縮性瘢痕時可以聯(lián)合微針來改善功效成分的皮膚滲透率，如聯(lián)合微針。微針聯(lián)合使用羊水間充質(zhì)干細(xì)胞（amniotic fluid-derived mesenchymal stem cells，AF-MSCs）培養(yǎng)液治療痤瘡萎縮性瘢痕發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合治療組瘢痕的改善程度明顯高于單獨微針治療組，而且膠原蛋白和彈性纖維的質(zhì)與量出現(xiàn)明顯改善[62]，說明聯(lián)合治療可獲得更好的療效。臨床研究證明微針聯(lián)合PRP治療痤瘡萎縮性瘢痕比單用微針或單用PRP治療效果更加明顯；PRP也可聯(lián)合皮下分離術(shù)治療痤瘡萎縮性瘢痕，聯(lián)合治療比單獨PRP治療更有效，不良反應(yīng)更輕[63-65]。增生性瘢痕是組織對損傷的過度纖維異常增生的結(jié)局。研究發(fā)現(xiàn)，增生性瘢痕纖維組織與ADSCs共培養(yǎng)后，ADSCs培養(yǎng)液能夠下調(diào)細(xì)胞外基質(zhì)相關(guān)的基因和蛋白質(zhì)的表達(dá)，細(xì)胞增殖被顯著的抑制[66]，說明ADSCs培養(yǎng)液可抑制纖維組織的異常增生，從而治療增生性瘢痕。PRP也可聯(lián)合曲安奈徳治療瘢痕疙瘩，治療結(jié)果同樣比曲安奈徳單獨治療效果更好[67]。

3.4 萎縮紋

萎縮紋（striae distensae，SD）是各年齡段均可見的線性紋路，其特征是表皮萎縮、真皮厚度減少、膠原蛋白和彈性纖維結(jié)構(gòu)質(zhì)與量出現(xiàn)改變（包括減少、缺失、斷裂或增厚）。目前有激光、機械磨削、微針等治療方法，但是多數(shù)治療會誘發(fā)術(shù)后色素沉著的不良反應(yīng)。PRP能夠促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)重塑，新的膠原蛋白和彈性纖維的合成，所以PRP在SD的治療中很有價值[68]。研究發(fā)現(xiàn)，PRP聯(lián)合微晶磨削治療3個月與PRP單獨給藥的效果比單獨使用微晶磨削的效果更好；組織學(xué)檢查顯示真皮膠原蛋白和彈性纖維含量增加，表皮增厚，血管周圍炎癥浸潤減少，而且患者對治療的耐受性好[69]。

3.5 其他適應(yīng)證

3.5.1 炎癥 BM-MSCs對T淋巴細(xì)胞具有免疫抑制作用，可使用BM-MSCs治療炎癥性或過敏性皮膚疾病。MSCs的免疫反應(yīng)并不是自發(fā)進(jìn)行的，而是需要干擾素（IFN）-α、IFN-β及白細(xì)胞介素（IL）-1等啟動因子的激活，但是潛在機制仍不清楚[70,71]。hUCMSCs可通過抑制肥大細(xì)胞脫顆粒，Ⅰ/Ⅱa期臨床研究顯示高劑量（5.0×107細(xì)胞）hUCMSCs治療中重度特應(yīng)性皮炎（AD），55%患者濕疹面積及嚴(yán)重度指數(shù)（eczema area and severity index，EASI）、研究者總體評分（investigator"s global assessment，IGA）、AD積分指數(shù)（scoring atopic dermatitis，SCORAD）和瘙癢評分均顯著降低，患者血清IgE水平和嗜酸粒細(xì)胞數(shù)量不同程度下降[72]。hUCMSCs可降低由于微環(huán)境中的高鈣水平而導(dǎo)致的角質(zhì)形成細(xì)胞分化及功能的異常，對于皮炎的治療表現(xiàn)出良好的效果[73]。皮下注射ADSCs-Exos可顯著提高角質(zhì)層的水合作用并降低炎性因子的表達(dá)水平，通過誘導(dǎo)神經(jīng)酰胺的合成從而促進(jìn)AD的表皮屏障修復(fù)，這表明Exos具有治療屏障受損相關(guān)皮膚炎癥性問題的潛力[74]。

3.5.2 黃褐斑 有研究對10例黃褐斑女性患者進(jìn)行PRP治療2、4、6周及1個月后，使用改良黃褐斑面積與嚴(yán)重程度指數(shù)（melasma area severity index，mMASI）、皮膚黑色素/血紅素測試儀（Mexameter）和皮膚成像測量儀（Antera 3D）來評價試驗結(jié)果，發(fā)現(xiàn)PRP治療組比生理鹽水對照組的黃褐斑明顯改善，患者的滿意度也隨時間增加而顯著提高，但Mexameter評估的紅斑和黑色素指數(shù)在對照組和PRP治療組之間沒有顯著性差異，而且黑色素指數(shù)有逐漸減少的趨勢，且未見明顯不良反應(yīng)[75]。PRP治療后黃褐斑患者治療區(qū)域皮膚內(nèi)TGF-β表達(dá)顯著升高，TGF-β負(fù)向調(diào)控黑素細(xì)胞分化，減少皮膚色素沉著的細(xì)胞因子，提示PRP可以通過升高TGF-β來改善黃褐斑[76]；而且氨甲環(huán)酸與PRP聯(lián)合使用比氨甲環(huán)酸單獨使用治療黃褐斑的效果更好，這提示PRP可作為氨甲環(huán)酸的聯(lián)合治療手段，從而提高氨甲環(huán)酸對黃褐斑的治療效果[77]。

4 現(xiàn)存問題及展望

再生醫(yī)學(xué)技術(shù)在皮膚美容領(lǐng)域具有較好的治療效果以及應(yīng)用前景，但是部分技術(shù)還處于初期的階段，存在著一定的潛在風(fēng)險，如干細(xì)胞的排斥反應(yīng)、超敏反應(yīng)、與其他干細(xì)胞發(fā)生交叉污染以及不可控增殖產(chǎn)生腫瘤的潛在風(fēng)險；干細(xì)胞在體內(nèi)對眾多宿主細(xì)胞影響機制的細(xì)節(jié)還不夠明確[78]。且對于常用干細(xì)胞的提取、制備和使用等方面沒有相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)指南來規(guī)范，這更加降低了干細(xì)胞臨床使用的安全性，限制了干細(xì)胞在皮膚美容領(lǐng)域的應(yīng)用前景[26]。

基于上述問題，科學(xué)家轉(zhuǎn)而關(guān)注去細(xì)胞化技術(shù)在再生醫(yī)美領(lǐng)域的應(yīng)用，研究最多的是PRP和外泌體。既往有接受腓腸肌PRP注射后患者發(fā)生局部感染和潰瘍的報道，但在皮膚美容領(lǐng)域未見嚴(yán)重不良反應(yīng)的報道[79]。使用PRP時會出現(xiàn)一些輕微、短暫的不良反應(yīng)，未見瘢痕以及炎癥后色素沉著的現(xiàn)象，少數(shù)注射后會出現(xiàn)疼痛、灼燒感及輕微紅斑，一般持續(xù)數(shù)分鐘至1 h，臨床使用PRP非常安全[10]。Exos質(zhì)量直接決定其臨床應(yīng)用的有效性以及安全性。國際胞外囊泡協(xié)會（International Society for Extracellular Vesicles，ISEV）以及藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范均制定了Exos質(zhì)量控制的相關(guān)規(guī)定，內(nèi)容包括：Exos中相關(guān)活性物質(zhì)的數(shù)量和質(zhì)量、Exos的特異性標(biāo)志物、顆粒與蛋白質(zhì)、脂質(zhì)及RNA的比例及毒理學(xué)風(fēng)險和效價分析[7]。毒理學(xué)實驗系統(tǒng)闡述ADSCExos的毒理學(xué)特性，ADSCs-Exos在皮膚致敏試驗中被歸類為潛在非致敏劑，眼部刺激試驗中被歸類為非致敏劑，皮膚刺激試驗中被歸類為皮膚非致敏劑，光毒性試驗或急性口服毒性試驗中均未誘導(dǎo)出任何毒性；該研究說明ADSCs-Exos局部應(yīng)用的安全性，且在毒理學(xué)測試中無不良作用[80]。

目前的基礎(chǔ)和臨床數(shù)據(jù)說明需要更多的實驗/試驗及數(shù)據(jù)來更加全面認(rèn)識再生醫(yī)學(xué)技術(shù)在醫(yī)學(xué)美容領(lǐng)域的應(yīng)用，爭取做到更加精準(zhǔn)的治療；且需要更多的基礎(chǔ)與臨床數(shù)據(jù)來確定各種技術(shù)手段的適應(yīng)證與禁忌證，以達(dá)到更加準(zhǔn)確且安全的臨床應(yīng)用，從而獲得更好的預(yù)期治療效果，同時盡量避免不良反應(yīng)的發(fā)生。