梁科 王懿 李斌 黃紫茵 石松

摘 要：目的：對(duì)市場(chǎng)采集的爛了一點(diǎn)的水果樣品進(jìn)行微生物及真菌毒素檢測(cè)分析。方法：采用測(cè)試片法對(duì)樣品中的菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌、酵母菌、金黃色葡萄球菌進(jìn)行檢測(cè)，采用膠體金速測(cè)卡法對(duì)樣品中的黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素、嘔吐毒素進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果：水果爛的部位，毛桃的菌落總數(shù)為1.47×106 CFU/g;葡萄中菌落總數(shù)為1.06×107 CFU/g，葡萄中霉菌達(dá)到了8.5×105 CFU/g;蘋果中菌落總數(shù)為2.23×105 CFU/g，金黃色葡萄球菌及霉菌均在1 000 CFU/g以下;在毛桃、梨、葡萄中均檢出玉米赤霉烯酮，且含量超過了60 μg/kg;葡萄中檢出黃曲霉毒素B1，且含量超過了5 μg/kg。結(jié)論：水果部分爛了或者長(zhǎng)霉以后，整個(gè)水果的微生物污染程度都很高，同時(shí)在爛了的部位檢出了玉米赤霉烯酮和黃曲霉毒素B1，需要引起人們的重視。

關(guān)鍵詞：霉變水果;微生物;真菌毒素

Analysis of Microbial and Mycotoxin Contamination of Moldy Fruit

LIANG Ke， WANG Yi， LI Bin， HUANG Ziyin， SHI Song

（Guangdong Dayuan Oasis Food Safety Technology Co.， Ltd.， Guangzhou 510530， China）

Abstract： Obiective： To detect and analyze microbes and mycotoxins on rotten fruit samples collected from the market. Methods： The test piece method was used to detect the total number of colonies， coliforms， molds， yeasts， and staphylococcus aureus in the samples， and the colloidal gold test card method was used to detect the aflatoxin B1 and zearalenone in the samples.Ochratoxin， vomiting toxin for testing. Results： In the rotten parts of the fruit， the total number of colonies in peach was 1.47×106 CFU/g; the total number of colonies in grapes was 1.06×107 CFU/g， and the mold in grapes reached 8.5×105 CFU/g; the total number of colonies in apples was 2.23×105 CFU/g， staphylococcus aureus and mold are below 1 000 CFU/g; zearalenone was detected in peach， pear， and grapes， and the content exceeded 60 μg/kg; yellow was detected in grapes aspergillus toxin B1， and the content exceeds 5 μg/kg. Conclusion： After part of the fruit is rotten or moldy， the whole fruit has a high degree of microbial contamination. At the same time， zearalenone and aflatoxin B1 have been detected in the rotten part， which requires attention.

Keywords： moldy fruits; microorganisms; mycotoxins

人們?nèi)粘Ｉ钪?，往往?xí)慣了一次購買大量的水果。而有的水果一旦存放條件適宜微生物生長(zhǎng)，很容易發(fā)生霉變。微生物生長(zhǎng)條件包括溫度、濕度適宜、空氣流通，再加上水果自身就是一個(gè)天然良好的培養(yǎng)基，擁有豐富的碳水化合物、水分、礦物質(zhì)、維生素、無機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)成分，各種微生物自然紛紛“慕名而來”，并迅速“生根發(fā)芽”。

一定濃度的有害微生物，如致病菌進(jìn)入人體內(nèi)，會(huì)對(duì)人體造成危害。例如金黃色葡萄球菌，是常見的食源性致病菌。金黃色葡萄球菌是誘發(fā)人類和動(dòng)物日常疾病較為常見的主要致病菌，在自然界中無處不在，嚴(yán)重威脅著食品質(zhì)量安全[1]。金黃色葡萄球菌在適當(dāng)?shù)臈l件下，能夠產(chǎn)生腸毒素，引起食物中毒。腸毒素是一種單鏈小分子蛋白，具有熱穩(wěn)定性，可對(duì)人體腸道產(chǎn)生破壞，導(dǎo)致嘔吐腹瀉等癥狀。如霉菌，意即“發(fā)霉的真菌”。霉菌在自然界中廣泛存在，對(duì)人和畜禽的主要毒性表現(xiàn)在神經(jīng)和內(nèi)分泌紊亂、免疫抑制、致癌致畸、肝腎損傷、繁殖障礙等。霉菌會(huì)產(chǎn)生毒素，霉菌毒素對(duì)農(nóng)產(chǎn)品的污染已經(jīng)被世界衛(wèi)生組織列為食源性疾病的重要根源[2]。

果品是重要的農(nóng)產(chǎn)品，也廣泛受到真菌毒素的污染[3]。真菌在生長(zhǎng)過程中會(huì)產(chǎn)生一定的毒素，其種類多樣、危害性強(qiáng)，對(duì)農(nóng)作物造成嚴(yán)重的污染，也危害人體的健康[4]。真菌毒素對(duì)人體的危害非常大，比如黃曲霉毒素B1對(duì)人畜有強(qiáng)烈的致病性、致癌性[5]，毒性是砒霜的68倍、玉米赤霉烯酮的20倍。其對(duì)光、熱較穩(wěn)定，常規(guī)烹調(diào)和加熱法不易將其分解。人的原發(fā)性肝癌很可能與黃曲霉毒素有關(guān)。2020年，黑龍江雞西居民王某某及親屬9人在家中聚餐，食用自制“酸湯子”（用玉米水磨發(fā)酵后做的一種粗面條樣的主食），引發(fā)食物中毒，造成8人死亡。檢測(cè)顯示，在玉米面中檢出高濃度米酵菌酸，患者胃液中亦檢出米酵菌酸。

在基層檢測(cè)和實(shí)際生活中，由于條件的限制，不可能對(duì)水果使用實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行定量檢測(cè)，而快速檢測(cè)方法則可以在短時(shí)間內(nèi)對(duì)樣品的微生物及真菌毒素污染情況進(jìn)行檢測(cè)。本研究通過從市場(chǎng)采集水果樣本，將其放置到不新鮮或爛了一點(diǎn)以后，采用免疫膠體金法和微生物測(cè)試片法對(duì)水果中的黃曲霉毒素B1（AFB1）、嘔吐毒素（DON）、赭曲霉毒素（OTA）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌、酵母菌以及金黃色葡萄球菌的含量進(jìn)行檢測(cè)，探究相關(guān)污染情況。

1 材料與方法

1.1 材料

采集市場(chǎng)4份水果樣品，包含蘋果、毛桃、葡萄、梨。

1.2 儀器與試劑

生物安全柜BHC-1000H A/B3（蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司）;立式壓力蒸汽滅菌器LS-30（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司）;電熱恒溫培養(yǎng)箱DHP-9082（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）。

黃曲霉毒素B1、嘔吐毒素、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮膠體金快速檢測(cè)卡，菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌、酵母菌、金黃色葡萄球菌微生物快速測(cè)試片（廣東達(dá)元綠洲食品安全可就份有限公司）。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 快速檢測(cè)方法

黃曲霉毒素B1、嘔吐毒素、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮免疫膠體金法參照產(chǎn)品說明書（廣東達(dá)元綠洲食品安全科技股份有限公司研制）;菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌、酵母菌、金黃色葡萄球菌測(cè)試片法參照產(chǎn)品說明書（廣東達(dá)元綠洲食品安全科技股份有限公司研制）。

1.3.2 微生物測(cè)試試驗(yàn)

取蘋果、毛桃、葡萄樣品，分別在爛的部位及完好的部位采樣，葡萄樣品選取其他完整的顆粒，用無菌生理鹽水分別進(jìn)行10倍稀釋，選擇合適濃度的樣品懸濁液分別用菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌、酵母菌、金黃色葡萄球菌測(cè)試片進(jìn)行接種，每個(gè)濃度接種兩片，置（36±1）℃進(jìn)行培養(yǎng)24～48 h，觀察記錄生長(zhǎng)情況。

1.3.3 真菌毒素測(cè)試試驗(yàn)

取蘋果、毛桃、梨、葡萄等樣品，分別在爛的部位及完好的部位采樣，葡萄樣品選取其他完整的顆粒，用黃曲霉毒素B1、嘔吐毒素、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮免疫膠體金快速檢測(cè)卡進(jìn)行檢測(cè)。

2 結(jié)果與分析

2.1 微生物測(cè)試試驗(yàn)結(jié)果

由表1可知，毛桃爛了一點(diǎn)后，爛的部位菌落總數(shù)可達(dá)1.47×106 CFU/g;而完好的部位菌落總數(shù)為9.2×103 CFU/g。葡萄爛了一點(diǎn)后，爛的葡萄及相鄰?fù)旰脗€(gè)體各種菌落數(shù)比較中，爛的部位的葡萄的菌落總數(shù)最多達(dá)到了1.06×107 CFU/g，其中大腸桿菌數(shù)量差異較小，而霉菌在爛的部位中達(dá)到了8.5×105 CFU/g，在完好的部位中霉菌為1.85×103 CFU/g;蘋果爛的部位及完好的部位中各種菌落數(shù)無顯著差異，其中菌落總數(shù)可達(dá)2.23×105 CFU/g，金黃色葡萄球菌及霉菌較少，均在1 000 CFU/g以下。3種水果樣品，爛了一點(diǎn)以后，無論是爛的部位還是完好的部位，大腸菌群的數(shù)量均明顯超出《食品安全地方標(biāo)準(zhǔn) 非預(yù)包裝即食食品微生物限量》（DBS 44/006—2016）對(duì)第四類（去皮或預(yù)切的鮮水果和蔬菜、含去皮或預(yù)切鮮水果和蔬菜的食品等）食品中大腸埃希氏菌的1 00 CFU/g的限量要求。

2.2 真菌毒素測(cè)試試驗(yàn)結(jié)果

由表2可知，4種水果樣品完好部位的玉米赤霉烯酮、黃曲霉毒素B1、嘔吐毒素、赭曲霉毒素A均為陰性，而在爛了一點(diǎn)的部位，蘋果中4種毒素檢測(cè)均為陰性;毛桃、梨、葡萄均檢出玉米赤霉烯酮，且含量超過了60 ?g/kg;葡萄除檢出玉米赤霉烯酮外，還檢出了黃曲霉毒素B1，含量超過了5 ?g/kg。

3 結(jié)論

本研究主要是對(duì)市面上購買所得的毛桃、蘋果、梨、葡萄樣品中的微生物及毒素污染情況進(jìn)行了分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，水果部分爛了或者長(zhǎng)霉以后，整個(gè)水果的微生物污染程度都很高，雖然水果本身的微生物限量標(biāo)準(zhǔn)不盡齊全，但參考《食品安全地方標(biāo)準(zhǔn) 非預(yù)包裝即食食品微生物限量》的要求，但凡自然爛了的水果，其大腸菌群指標(biāo)均超過國(guó)標(biāo)限量值;葡萄樣品在爛了的部位甚至檢出了玉米赤霉烯酮及黃曲霉毒素B1;雖然采集的樣品不能夠完全代表全國(guó)，不能代表所有爛了或長(zhǎng)霉點(diǎn)的水果樣品中微生物及真菌毒素的整體污染水平，但如此高的微生物含量及毒素檢出率，需要引起人們的重視。

參考文獻(xiàn)

[1]徐重新，陳蔚，謝雅晶，等.食品中金黃色葡萄球菌檢測(cè)及防控技術(shù)研究[J].農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與安全，2019（3）：49-56.

[2]張丞，劉穎莉，吳裕本，等.2019年中國(guó)飼料和原料中霉菌毒素污染情況調(diào)查總結(jié)報(bào)告[J].飼料與畜牧，2010（4）：30-33.

[3]王蒙，姜楠，戴瑩，等.國(guó)內(nèi)外水果真菌毒素的限量及檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)分析[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2016，7（2）：459-467.

[4]稅丕容.食品中真菌毒素的污染與檢測(cè)研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代食品，2018（13）：130-131.

[5]馬騰達(dá)，王慧玲，周鳳霞，等.黃曲霉毒素B1在食品檢測(cè)中的研究新進(jìn)展[J].吉林農(nóng)業(yè)，2019（10）：75.