郭武輝，張 華

(1.榆林市第二醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，陜西 榆林 719000；2.西安市兒童醫(yī)院兒童重癥監(jiān)護(hù)科，陜西 西安 710002)

每年死于乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)感染引發(fā)的肝衰竭、肝硬化后肝癌病例數(shù)可達(dá)80萬(wàn)人，位居各類致死性疾病的第15位，提示HBV感染已成為全球性的公共衛(wèi)生問(wèn)題[1-3]。臨床實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，個(gè)體感染HBV后，病毒會(huì)對(duì)機(jī)體造成持續(xù)而慢性的損傷，晚期患者可出現(xiàn)肝功能失代償、肝硬化或肝細(xì)胞癌等多種并發(fā)癥，因而臨床上建議及早對(duì)HBV感染患者開(kāi)展干預(yù)[4-5]。血流感染是感染性疾病中的嚴(yán)重表現(xiàn)之一，此類患者血液中存在大量HBV，會(huì)產(chǎn)生毒素和代謝產(chǎn)物，引起嚴(yán)重毒血癥，常常會(huì)危及患者生命[6]。血流感染可區(qū)分為細(xì)菌性和真菌性兩大類，近些年隨著中心靜脈導(dǎo)管、胃腸外導(dǎo)管給藥以及內(nèi)鏡技術(shù)的不斷發(fā)展，加之抗生素的濫用，局部真菌感染發(fā)生率明顯升高，相應(yīng)地影響了真菌性血流感染的發(fā)生率。有報(bào)道[7-8]顯示，真菌性血流感染的病死率已達(dá)到35%左右。肝硬化患者長(zhǎng)期處于免疫功能不全狀態(tài)，發(fā)生真菌感染的概率較常人更高。T淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定是檢測(cè)機(jī)體細(xì)胞免疫功能的重要指標(biāo)，對(duì)分析某些疾病發(fā)病機(jī)制、輔助診斷、觀察療效及監(jiān)測(cè)預(yù)后有重要意義。因此，本研究探究血清T淋巴細(xì)胞亞群(CD4+、CD3+及CD4+/CD8+)檢測(cè)對(duì)肝硬化合并真菌性血流感染的診斷價(jià)值，以期為改善此類患者預(yù)后提供臨床參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年1月至2021年5月于我院接受治療的肝硬化合并真菌性血液感染患兒60例為研究組；選擇同期于我院接受治療的肝硬化患兒50例為病例對(duì)照組；選擇健康兒童50例為對(duì)照組。三組兒童性別、年齡、平均動(dòng)脈壓(MAP)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，見(jiàn)表1。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合《慢性乙型肝炎防治指南》[9]中關(guān)于乙肝肝硬化診斷標(biāo)準(zhǔn)且出現(xiàn)相應(yīng)臨床癥狀；②意識(shí)清晰，能夠配合開(kāi)展研究；③一般資料齊全。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并精神疾患；②近1個(gè)月內(nèi)服用抗菌藥物；③合并惡性腫瘤；④合并其他病毒感染；⑤合并自身免疫系統(tǒng)疾患；⑥酒精性肝硬化；⑦合并其他肝臟疾病。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理學(xué)會(huì)批準(zhǔn)實(shí)施?；颊呒捌浼覍賹?duì)本次調(diào)研過(guò)程、方法、原理清楚并簽署知情同意書(shū)。

表1 三組兒童一般資料比較

1.2 研究方法 采集三組兒童清晨空腹肘靜脈血樣3 ml，應(yīng)用乙二胺四乙酸二鉀抗凝，然后采用流式細(xì)胞儀(貝克曼CYTOMICS FC 500)檢測(cè)血樣CD4+、CD3+淋巴細(xì)胞及CD4+/CD8+；采用Sysmex XN-9000檢測(cè)白細(xì)胞(WBC)及中性粒細(xì)胞(NE)水平。同時(shí)，采集肝素鈉抗凝血4 ml，采用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清降鈣素原(PCT)水平。

1.3 觀察指標(biāo) 比較三組兒童T淋巴細(xì)胞亞群以及炎癥指標(biāo)(PCT、WBC、NE)水平，分析T淋巴細(xì)胞亞群對(duì)肝硬化合并真菌性血流感染的診斷價(jià)值。

2 結(jié) 果

2.1 三組兒童T淋巴細(xì)胞亞群比較 見(jiàn)表2。研究組和病例對(duì)照組患兒CD4+、CD3+及CD4+/CD8+水平均顯著低于對(duì)照組，且研究組患兒CD4+、CD3+及CD4+/CD8+明顯低于病例對(duì)照組(均P<0.05)。

表2 三組兒童T淋巴細(xì)胞亞群比較

2.2 三組兒童PCT、WBC、NE水平比較 見(jiàn)表3。研究組和病例對(duì)照組患兒PCT、WBC以及NE水平均明顯高于對(duì)照組，且研究組患兒上述指標(biāo)水平明顯高于病例對(duì)照組(均P<0.05)。

表3 三組兒童PCT、WBC、NE水平比較

2.3 T淋巴細(xì)胞亞群對(duì)肝硬化合并真菌性血流感染的診斷價(jià)值分析 見(jiàn)表4。ROC曲線分析顯示，CD4+、CD3+、CD4+/CD8+單項(xiàng)、兩項(xiàng)聯(lián)合以及三項(xiàng)聯(lián)合均對(duì)肝硬化合并真菌性血流感染具有較高的診斷價(jià)值，尤其是三項(xiàng)聯(lián)合最高，曲線下面積(AUC)為0.951。

表4 T淋巴細(xì)胞亞群對(duì)肝硬化合并真菌性血流感染的診斷價(jià)值

3 討 論

肝硬化是慢性肝病進(jìn)展遷延的中間階段，其典型病變特點(diǎn)為肝細(xì)胞結(jié)節(jié)性再生、結(jié)締組織增生、纖維間隔形成等，其病因主要包括病毒性肝炎、酒精性肝炎或自身免疫性肝炎等[10-11]。肝硬化患者早期由于肝臟代償能力較強(qiáng)，臨床癥狀并不明顯，至疾病晚期可因肝臟失代償而出現(xiàn)諸如肝功能損傷、門(mén)靜脈高壓等表現(xiàn)[12-13]，同時(shí)多數(shù)患者會(huì)伴有多系統(tǒng)癥狀，常出現(xiàn)肝性腦病、上消化道出血、自發(fā)性腹膜炎[14]等并發(fā)癥，如不加以及時(shí)干預(yù)，可以發(fā)展為肝衰竭，威脅患者生命。近年受胃腸外導(dǎo)管給藥、局部真菌感染等因素影響，真菌性血流感染的患病率及病死率呈現(xiàn)明顯升高趨勢(shì)。已有研究[15-16]指出，真菌性血流感染患者早期病情較為隱匿，不易被患者察覺(jué)，但發(fā)展至晚期病死率可高達(dá)30%，建議及早準(zhǔn)確地實(shí)施診斷。

本研究通過(guò)設(shè)立對(duì)照分組的方式，就CD4+、CD3+及CD4+/CD8+等T淋巴細(xì)胞亞群在肝硬化合并真菌性血流感染中的診斷價(jià)值進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示研究組和病例對(duì)照組患兒CD4+、CD3+以及CD4+/CD8+水平均顯著低于對(duì)照組，且研究組患兒CD4+、CD3+及CD4+/CD8+明顯低于病例對(duì)照組，提示隨著病情的改變，患兒T淋巴細(xì)胞亞群出現(xiàn)了明顯變化。何小慶等[17]通過(guò)對(duì)166例細(xì)菌或真菌性血流感染患者開(kāi)展分析研究發(fā)現(xiàn)，受試者中真菌組CD4+T淋巴細(xì)胞降低較細(xì)菌組更為顯著，認(rèn)為CD4+T淋巴細(xì)胞水平能夠較為直觀地反映個(gè)體免疫功能，其水平的降低往往代表個(gè)體免疫功能的下降，本研究與其基本一致。

肝硬化的常見(jiàn)病因主要為病毒感染，而病毒感染導(dǎo)致慢性病變的主要原因即為機(jī)體免疫調(diào)節(jié)降低，尤其是細(xì)胞免疫功能下降，導(dǎo)致機(jī)體無(wú)法徹底清除感染病毒。在細(xì)胞免疫進(jìn)程中重要的免疫調(diào)控因子即為T(mén)淋巴細(xì)胞，臨床上也常將T淋巴細(xì)胞亞群作為反映機(jī)體免疫調(diào)節(jié)功能的金標(biāo)準(zhǔn)。有報(bào)道指出，在HBV感染機(jī)體的初期階段，機(jī)體免疫系統(tǒng)處于被激活狀態(tài)，其T淋巴細(xì)胞亞群水平會(huì)驟增，使機(jī)體產(chǎn)生免疫防御，而當(dāng)HBV感染進(jìn)入慢性感染期后，個(gè)體的T淋巴細(xì)胞亞群水平會(huì)明顯降低，CD4+、CD3+T淋巴細(xì)胞數(shù)量會(huì)大量減少，從而引起機(jī)體免疫力降低，如果CD4+和CD8+細(xì)胞亞群水平同時(shí)降低，則預(yù)示著免疫功能明顯減弱，肝硬化甚至肝衰竭將逐步出現(xiàn)[18-19]。本研究中進(jìn)一步通過(guò)對(duì)比三組兒童的炎癥指標(biāo)驗(yàn)證了上述理論的真實(shí)性，相比于對(duì)照組，病例對(duì)照組PCT、WBC等指標(biāo)已處于異常高表達(dá)狀態(tài)，而真菌感染進(jìn)一步加重了機(jī)體的炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致大量炎性因子被釋放，對(duì)肝臟形成了二次打擊[20]。最后，本研究通過(guò)繪制ROC曲線圖發(fā)現(xiàn)，CD4+、CD3+及CD4+/CD8+對(duì)肝硬化合并真菌性血流感染具有較好的診斷價(jià)值，尤其是三項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的診斷價(jià)值更大，可以考慮將上述三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)作為肝硬化合并真菌性血流感染的診斷參考。

綜上所述，CD4+、CD3+及CD4+/CD8+聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肝硬化合并真菌性血流感染具有較好的診斷價(jià)值，可以考慮將其作為該癥的早期診斷指標(biāo)。