吳 琳，秦 峰

南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬常州市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇常州 213000

癌癥已成為全球的高發(fā)疾病之一，癌癥患者承受著沉重的疾病負(fù)擔(dān)。2020年全球新發(fā)癌癥病例數(shù)約為1 930萬例，死亡病例1 000萬例，乳腺癌已超過肺癌成為全球最常見惡性腫瘤，同時(shí)也是全球第5大癌癥死因[1]。我國是癌癥高發(fā)國家之一，乳腺癌的發(fā)病數(shù)也呈持續(xù)上升趨勢，但得益于早期發(fā)現(xiàn)和綜合治療手段的應(yīng)用，生存率得到了較大改善[2]。血清腫瘤標(biāo)志物在腫瘤的早期診斷中起著重要作用，但乳腺癌的診斷缺乏高靈敏度和特異度的標(biāo)志物。癌胚抗原(CEA)和糖類蛋白153(CA153)是乳腺癌診斷和預(yù)后判斷中最常用的腫瘤標(biāo)志物，但其較低的陽性表達(dá)率使其在臨床應(yīng)用中存在局限性[3]。因此，尋找新的具有高特異度和靈敏度的腫瘤標(biāo)志物成為提高乳腺癌早期診斷效率的必然需求。

胃泌素釋放肽(GRP)被發(fā)現(xiàn)于哺乳動(dòng)物的胃腸道，同時(shí)在神經(jīng)系統(tǒng)及肺組織中廣泛表達(dá)，并參與調(diào)控腫瘤的發(fā)生發(fā)展[4]。但GRP在血液中的半衰期極短，更穩(wěn)定的ProGRP可作為代表血清GRP水平和相關(guān)基因表達(dá)水平的血清腫瘤標(biāo)志物，且其可作為診斷小細(xì)胞肺癌及預(yù)后監(jiān)測的血清腫瘤標(biāo)志物[5-6]。研究發(fā)現(xiàn)，ProGRP在胃腸道腫瘤、卵巢癌、甲狀腺髓樣癌等多種腫瘤中異常高表達(dá)，其表達(dá)水平與多項(xiàng)臨床病理參數(shù)及預(yù)后、復(fù)發(fā)監(jiān)測密切相關(guān)，具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值[6-8]。但ProGRP在乳腺癌患者中的表達(dá)水平及臨床應(yīng)用價(jià)值研究較少。本研究探討了ProGRP在乳腺癌患者中的表達(dá)及其在乳腺癌診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年6月至2020年12月本院收治的93例乳腺癌初診患者(乳腺癌組)、89例乳腺良性腫瘤患者(乳腺良性腫瘤組)以及106例體檢健康者(對(duì)照組)為研究對(duì)象。乳腺癌組年齡28～90歲，中位年齡56歲；乳腺良性腫瘤組年齡21～86歲，中位年齡48歲；對(duì)照組年齡21～89歲，中位年齡57歲。所有乳腺癌患者經(jīng)乳腺癌切除手術(shù)或B超引導(dǎo)下穿刺活檢術(shù)病理明確診斷為乳腺癌，包括浸潤性癌和非浸潤性癌；乳腺良性腫瘤患者經(jīng)切除術(shù)后病理或B超引導(dǎo)下穿刺活檢術(shù)后確診為良性腫瘤。所有患者術(shù)前均未接受新輔助放療或化療，均有詳細(xì)的臨床資料和隨訪資料，排除合并腎功能不全患者、非初診或已行術(shù)前新輔助治療或無相關(guān)臨床隨訪資料等不符合標(biāo)準(zhǔn)患者。

1.2方法 所有患者清晨空腹下采集靜脈血液約5 mL，3 500 r/min離心10 min，分離并提取合格血清標(biāo)本，并于3 h內(nèi)上機(jī)檢測。采用電化學(xué)發(fā)光法檢測ProGRP、CEA和CA153的表達(dá)水平。采用雅培I2000進(jìn)行檢測，檢測試劑由美國雅培公司提供。各指標(biāo)參考值范圍如下：ProGRP，0～63 pg/mL；CEA，0.0～4.3 ng/mL；CA153，0～25 U/mL。同時(shí)，通過GEPIA網(wǎng)站(http://gepia.cancer-pku.cn/)在線分析TCGA和GTEx數(shù)據(jù)庫中乳腺癌患者癌組織和正常乳腺組織中GRP mRNA表達(dá)水平差異，共納入1 085例乳腺癌組織及291例正常乳腺組織。

2 結(jié) 果

2.1數(shù)據(jù)庫分析GRP mRNA在乳腺癌中的表達(dá)及與預(yù)后的關(guān)系 血清ProGRP可代表血清GRP水平及相關(guān)基因表達(dá)水平。通過GEPIA網(wǎng)站分析TCGA和GTEx數(shù)據(jù)庫中乳腺癌組織和正常乳腺組織中GRP mRNA表達(dá)水平的差異，結(jié)果顯示，乳腺癌組織中GRP mRNA的表達(dá)水平較正常乳腺組織中明顯上調(diào)，提示乳腺癌患者中可能存在血清ProGRP表達(dá)的上調(diào)，見圖1。但未發(fā)現(xiàn)GRP mRNA表達(dá)水平與預(yù)后之間的相關(guān)性。

注：*P<0.05。

2.23組研究對(duì)象血清ProGRP水平的比較 乳腺癌組血清ProGRP水平為(55.2±35.7)pg/mL，乳腺良性腫瘤組血清ProGRP水平為(33.5±12.6)pg/mL，對(duì)照組血清ProGRP水平為(30.4±11.5)pg/mL，乳腺癌組血清ProGRP水平顯著高于乳腺良性腫瘤組和對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)；乳腺良性腫瘤組和對(duì)照組血清ProGRP水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.628)。

2.3血清ProGRP水平與乳腺癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系 乳腺癌患者血清ProGRP水平與患者年齡、人類表皮生長因子受體2(HER-2)、雌激素受體(ER)/孕激素受體(PR)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)無關(guān)；腫瘤最大徑>3 cm及有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者血清ProGRP水平明顯較腫瘤最大徑≤3 cm及無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者高(P=0.006、0.002)；TNM Ⅲ～Ⅳ期乳腺癌患者血清ProGRP水平高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.001)，見表1。

表1 乳腺癌患者ProGRP水平與臨床病理參數(shù)的關(guān)系分析

2.4ProGRP聯(lián)合CEA和CA153檢測在乳腺癌診斷中的價(jià)值 在乳腺癌患者中ProGRP的陽性率為22.6%(21/93)，CEA陽性率為14.0%(13/93)，CA153陽性率為18.3%(17/93)。ProGRP診斷乳腺癌ROC曲線下面積為0.71(95%CI：0.635～0.786，P<0.001)。ProGRP取cut off值為38.5 pg/mL時(shí)，其診斷乳腺癌的靈敏度為65.6%，特異度為74.2%。CEA診斷乳腺癌ROC曲線下面積為0.70(95%CI：0.627～0.782，P<0.001)，CEA取cut off值為2.42 ng/mL時(shí)，其診斷乳腺癌的靈敏度為62.4%，特異度為79.8%。CA153診斷乳腺癌ROC曲線下面積為0.742(95%CI：0.670～0.814，P<0.001)，CA153取cut off值為11.3 U/mL時(shí)，其診斷乳腺癌的靈敏度為69.9%，特異度為74.9%。ProGRP聯(lián)合CEA、CA153檢測診斷乳腺癌的靈敏度和特異度分別為68.3%、91.0%，CEA聯(lián)合CA153檢測診斷乳腺癌的靈敏度和特異度分別為69.4%、84.1%，ProGRP聯(lián)合CEA、CA153診斷乳腺癌的特異度優(yōu)于CEA聯(lián)合CA153(P<0.05)。

3 討 論

已有研究證實(shí)，多種血清腫瘤標(biāo)志物在惡性腫瘤早期診斷和預(yù)后監(jiān)測中具有重要臨床應(yīng)用價(jià)值[9-10]。有研究指出，ProGRP可作為小細(xì)胞肺癌診斷、療效判斷及復(fù)發(fā)監(jiān)測的指標(biāo)，但隨著對(duì)其研究的深入，發(fā)現(xiàn)其在非小細(xì)胞肺癌、胃腸道腫瘤及前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者中也具有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值[6,11-12]。本研究通過TCGA數(shù)據(jù)庫分析發(fā)現(xiàn)，乳腺癌組織中GRP mRNA表達(dá)水平較正常乳腺組織中明顯上調(diào)；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，血清ProGRP水平在乳腺癌組中顯著高于乳腺良性腫瘤組和對(duì)照組，提示GRP參與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展，ProGRP可作為診斷乳腺癌患者潛在的血清腫瘤標(biāo)志物。

有關(guān)乳腺癌的臨床和病理特征，如淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)、TNM分期和分子病理參數(shù)，包括基于HER-2、ER/PR及Ki-67等狀態(tài)進(jìn)行的分子分型，是乳腺癌重要預(yù)后判斷指標(biāo)。血清腫瘤標(biāo)志物CEA和CA153水平在乳腺癌預(yù)后判斷中也具有重要應(yīng)用價(jià)值，不同亞型乳腺癌的CEA和CA153水平存在差異，且其高表達(dá)與高腫瘤負(fù)荷相關(guān)[3,13-15]。SHAO等[3]報(bào)道HER-2陽性乳腺癌患者CEA水平升高更顯著，而ER陰性乳腺癌患者的CA153水平升高更顯著。本研究通過對(duì)乳腺癌患者ProGRP的表達(dá)水平與多項(xiàng)臨床病理參數(shù)間的關(guān)系分析發(fā)現(xiàn)，ProGRP水平與患者年齡、HER-2、ER/PR、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)無關(guān)，但其高表達(dá)與腫瘤最大徑、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、腫瘤TNM分期等較高的腫瘤負(fù)荷狀態(tài)有關(guān)。

CEA和CA153是乳腺癌早期診斷和預(yù)后判斷中最常用的血清腫瘤標(biāo)志物，但CEA和CA153在乳腺癌中的陽性表達(dá)率較低，研究顯示，CEA和CA153在乳腺癌患者中的陽性率僅為10.9%、13.9%，在早期乳腺癌患者中陽性表達(dá)率更低[3]。本研究結(jié)果顯示，ProGRP聯(lián)合CEA、CA153檢測診斷乳腺癌的特異度優(yōu)于CEA聯(lián)合CA153，可選作為乳腺癌早期診斷的血清腫瘤標(biāo)志物。但本研究未進(jìn)一步分析ProGRP在乳腺癌術(shù)后表達(dá)水平的變化，及其在乳腺癌預(yù)后判斷及復(fù)發(fā)監(jiān)測中的臨床應(yīng)用價(jià)值，因此，GRP/ProGRP在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的調(diào)控機(jī)制及其臨床應(yīng)用仍亟待進(jìn)一步深入研究。

綜上所述，本研究表明ProGRP在乳腺癌患者中上調(diào)表達(dá)，其表達(dá)水平與腫瘤負(fù)荷、腫瘤分期等密切相關(guān)，ProGRP聯(lián)合CEA、CA153檢測可應(yīng)用于乳腺癌的臨床診療，但在乳腺癌復(fù)發(fā)監(jiān)測及預(yù)后判斷中的應(yīng)用價(jià)值尚需進(jìn)一步大樣本量的深入研究。