李新新
開封市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,河南開封 475000
肺炎支原體(MP)是兒童呼吸道感染疾病的常見病原體,對(duì)抗菌藥物的敏感性較低,易誘發(fā)兒童肺部的急性炎癥改變和呼吸道感染[1]。MP感染早期臨床表現(xiàn)為全身乏力、頭痛、發(fā)熱、咳嗽等,缺乏典型性表現(xiàn),若不及時(shí)接受正確、有效的治療,隨著病情進(jìn)展可引起心力衰竭、肺外合并癥等,甚至誘發(fā)多器官受損,甚至威脅患兒生命安全[2-3]。故實(shí)驗(yàn)室病原學(xué)檢查至關(guān)重要。MP-脫氧核糖核酸(DNA)定量檢測(cè)和MP抗體定性檢測(cè)是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)MP的常用手段。本研究分析MP抗體免疫球蛋白(Ig)G、IgM、DNA檢測(cè)在診斷兒童呼吸道感染中的應(yīng)用價(jià)值,為臨床診治提供參考,報(bào)告如下。
選擇2017年2月—2020年5月間開封市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科收治的80例呼吸道感染患兒為研究對(duì)象,年齡1個(gè)月~13歲,平均年齡(5.20±1.32)歲,男42例,女38例,<1歲12例,1~<4歲37例,4~<8歲21例,≥8歲10例。納入標(biāo)準(zhǔn):符合《兒童肺炎支原體肺炎診治專家共識(shí)(2015年版)》[4]中呼吸道感染相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn),經(jīng)呼吸道分泌物支原體培養(yǎng)為陽(yáng)性,患兒家長(zhǎng)簽署知情同意書,凝血功能正常。排除標(biāo)準(zhǔn):入組前使用激素類藥物、免疫抑制劑治療,免疫系統(tǒng)疾病,先天性代謝障礙性疾病,營(yíng)養(yǎng)不良,血液系統(tǒng)疾病。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。
抽取入組患兒空腹靜脈血3 ml,轉(zhuǎn)速3 500 rpm,離心15 min,獲取上清液,用定量酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法測(cè)定MP-IgG和MP-IgM,試紙盒購(gòu)自亞輝龍生物科技股份有限公司。采用一次性吸痰管吸取口咽部分泌物標(biāo)本,使用熒光探針PCR技術(shù)測(cè)定MP-DNA,試劑盒購(gòu)自達(dá)安基因股份有限公司。MP-IgG>15 kU/L為陽(yáng)性,MP-IgM>17 kU/L為陽(yáng)性,MP-DNA≥1×103copies/mL為陽(yáng)性。
(1)分析不同年齡段患兒MP-IgG、 MP-DNA、MP-IgM陽(yáng)性率。(2)分析MP-IgG、MP-DNA、MP-IgM單一與聯(lián)合診斷兒童呼吸道感染價(jià)值。
采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,組間比較采用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料用例數(shù)和百分比(%)表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
4~<8歲組和≥8歲組MP-IgG、MP-DNA陽(yáng)性率高于<1歲組、1~<4歲組,MP-IgM陽(yáng)性率高于<1歲組,MP-IgM陽(yáng)性率低于1~<4歲組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);1~<4歲組陽(yáng)性率高于<1歲組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); 4~<8歲組與≥8歲組 MP-IgG、MP-DNA、MP-IgM陽(yáng)性率和<1歲組、與1~<4歲組MP-IgG、MP-DNA陽(yáng)性率比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表1。
表1 不同年齡段患兒MP-IgG、MP-DNA、MP-IgM陽(yáng)性率比較例(%)
MP-IgG+MP-DNA+MP-IgM診斷兒童呼吸道感染的AUC為0.778,敏感度和特異度分別為78.96%、96.21%,高于各指標(biāo)單一診斷,見表2。
表2 MP-IgG、MP-DNA、MP-IgM單一與聯(lián)合診斷兒童呼吸道感染價(jià)值
MP是引起兒童肺炎支原體肺炎和呼吸系統(tǒng)疾病的常見病原體,感染性較強(qiáng),可經(jīng)飛沫傳播,易侵入呼吸道黏膜和纖毛上皮細(xì)胞,損傷細(xì)胞膜,并釋放大量過(guò)氧化氫、核酸酶等有毒代謝產(chǎn)物,促使細(xì)胞腫脹、溶解、壞死,引起呼吸道的急性炎癥改變[5]。因MP抗原與人體部分組織存在相同抗原,侵入人體后會(huì)促進(jìn)機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的自身抗體,形成免疫復(fù)合物,誘發(fā)呼吸道以外的其他器官病變,如腎炎、心肌炎、腦炎等。因兒童處于生長(zhǎng)發(fā)育階段,機(jī)體各項(xiàng)機(jī)能尚未發(fā)育成熟,機(jī)體抵抗能力相對(duì)較差,尤其是免疫系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能尚未發(fā)育健全,難以抵御MP侵襲,易發(fā)生感染。以往體外培養(yǎng)是診斷MP感染的常用手段,但分離培養(yǎng)費(fèi)時(shí)、繁瑣,培養(yǎng)周期較長(zhǎng),判斷結(jié)果需3~5周,且培養(yǎng)陽(yáng)性率低,不利于MP的早期診斷[6-7]。
機(jī)體感染MP后會(huì)刺激免疫系統(tǒng),提高體液中可溶性白細(xì)胞介素-2受體含量,既能抑制機(jī)體細(xì)胞免疫,又能激發(fā)機(jī)體體液免疫,逐漸提高體內(nèi)Ig水平,如IgG、IgM。故,檢測(cè)MP-IgG、MP-IgM尤為重要。研究MP感染可發(fā)生于兒童任何年齡段,其中學(xué)齡期和學(xué)齡前兒童較為多見。各指標(biāo)聯(lián)合診斷能夠提高疾病檢出率。MP-IgM是機(jī)體感染MP后最早產(chǎn)生的抗體,一般可在感染后約7 d被檢測(cè)到,感染3~4周達(dá)到峰值。一般機(jī)體MP感染后不會(huì)立刻出現(xiàn)臨床癥狀,潛伏期為2~3周,待患兒就診時(shí)MP-IgM已處于較高水平,是診斷MP感染的有效指標(biāo)。但MP-IgM陰性不能否定MP感染,需監(jiān)測(cè)MP-IgG,其出現(xiàn)較晚,一般為患病后第5周達(dá)到分值,持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),其含量明顯升高提示患者為近期感染,若顯著下降則為感染后期。MP-DNA監(jiān)測(cè)具有特異性強(qiáng)、檢測(cè)時(shí)間短、不受抗體水平影響、敏感度高等優(yōu)點(diǎn),能夠彌補(bǔ)MP-IgM高峰出現(xiàn)晚的不足。
綜上所述,不同年齡段患兒免疫系統(tǒng)發(fā)育不同,會(huì)影響MP的免疫應(yīng)答,MP-IgG、MP-DNA、MP-IgM是診斷兒童呼吸道感染的有效指標(biāo),聯(lián)合診斷能夠提高檢出率。