張勝龍

苦參燥濕洗劑是在濮陽(yáng)市中醫(yī)醫(yī)院現(xiàn)有制劑品種苦參燥濕散(豫藥制字Z20120362(濮))基礎(chǔ)上改良發(fā)展而來(lái)?？鄥⒃餄裆⒃谂R床中對(duì)痔瘺、肛裂具有較好的治療效果，該藥劑為中藥煮散，患者需自行煎煮后使用。由于患者煎煮方法的操作規(guī)范程度可影響藥液的療效，因此，為了提高患者使用制劑的便利性并提高藥品療效，本研究在原有的注冊(cè)制劑品中苦參燥濕散的基礎(chǔ)上，增加了提取濃縮配液工藝，并將煮散劑型改為洗劑。此外，為使其檢測(cè)方法更加合理有效，本研究對(duì)其質(zhì)控方法進(jìn)行了升級(jí)，新增了薄層色譜鑒別個(gè)數(shù)，保證了藥品的優(yōu)良品質(zhì)和確切的臨床療效。

1 材料與試劑

硅膠G、鹽酸小檗堿對(duì)照品和蘇木對(duì)照藥材(中國(guó)食品藥品檢定研究院)；其他試劑均為分析純。處方組成：苦參、黃柏、防風(fēng)、白礬、白芷、黃芩、蘇木、當(dāng)歸、甘草。

2 方法與結(jié)果

2.1 制備工藝確定本品處方中君藥苦參和黃柏主要含生物堿類、黃酮類成分；其余各味藥主要含揮發(fā)油類、三萜皂苷類、有機(jī)酸、多糖類、氨基酸類及鞣質(zhì)等成分[1-3]，主要成分可以被熱水提取。考慮到臨床用藥對(duì)象的疾病特點(diǎn)、給藥途徑以及使用便利性，本品擬選用洗劑。根據(jù)本品的劑型要求和主要有效成分的理化性質(zhì)，擬采用以下工藝設(shè)計(jì)：苦參等九味飲片，擬以水為提取溶媒，采用水煎煮提取。擬定制備工藝路線見(jiàn)圖1。

圖1 工藝路線圖

2.2 制備工藝的考察

本研究以加水量、提取時(shí)間、提取次數(shù)、空白等4個(gè)因素為指標(biāo)，每個(gè)因素取3個(gè)水平，選用L9(34)正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)；取1/10處方量藥材，按表1進(jìn)行試驗(yàn)，并以干膏得率作為考察指標(biāo)，以優(yōu)選出最佳提取工藝條件。取苦參、黃柏、防風(fēng)、白礬、白芷、黃芩、蘇木、當(dāng)歸、甘草，共9份，根據(jù)表2正交試驗(yàn)表進(jìn)行9種提取工藝的提取、濾過(guò)，得其水煎液。按照正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)操作，各水煎液分別濃縮，濃縮條件為：溫度60～70 ℃，真空度-0.06～-0.07 Mpa，蒸汽(壓力0.03 MPa)，稱量干膏重量。將濃縮液置于100 ml量瓶中，定容、搖勻。精密吸取濃縮液10 ml置干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，于105 ℃干燥至恒重(約10 h)后，置于干燥器30 min，冷卻后稱定重量，計(jì)算干膏得率。每份試驗(yàn)平行做3次，取平均值，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行方差分析，因素A和C有顯著性影響，根據(jù)正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)直觀分析，因素A2>A3>A1，選擇A2，C2>C3>C1，選擇C2，因素B差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且B3>B2>B1，B2與B3差異微小，考慮到兼顧充分提取和適當(dāng)提高生產(chǎn)效率，選擇B2。因此綜合生產(chǎn)實(shí)際狀況，最佳提取工藝為：加8倍量水，提取2次，每次提取1.5 h。見(jiàn)表3。

表1 苦參燥濕洗劑提取因素水平表

表2 苦參燥濕洗劑L9(34)正交試驗(yàn)安排及干膏率測(cè)定結(jié)果

表3 方差分析結(jié)果

2.3 中試樣品的制備研究

為了驗(yàn)證工藝的穩(wěn)定性和科學(xué)性，中試生產(chǎn)3批苦參燥濕洗劑。批量設(shè)定按照50倍處方量進(jìn)行投料，對(duì)成品率分別進(jìn)行考察。工藝設(shè)定合理，3批成品按照苦參燥濕洗劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案檢驗(yàn)，結(jié)果均符合規(guī)定。該工藝穩(wěn)定可靠，已初步具備大批量生產(chǎn)的條件。見(jiàn)表4。

表4 苦參燥濕洗劑3批中試樣品生產(chǎn)參數(shù)

2.4 質(zhì)量控制本品處方中主要有效成分為生物堿類、揮發(fā)油類、黃酮類、三萜皂苷類、有機(jī)酸、多糖類、氨基酸類及鞣質(zhì)等化合物[4]。本制劑性狀為紅棕色液體；氣微，味苦。取本品20 ml，蒸干，加甲醇10 ml，超聲處理30 min，上清液作為供試品溶液。另取蘇木對(duì)照藥材0.3 g，同法制成對(duì)照藥材溶液。薄層色譜法(通則0502)試驗(yàn)，吸取供試品溶液各5 μl，對(duì)照藥材和對(duì)照品溶液各2 μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-丙酮-甲酸(8∶4∶1)為展開(kāi)劑[4]，展開(kāi)，取出，晾干，立即置干燥器內(nèi)放置4 h后置紫外燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。用不含蘇木的制劑進(jìn)行陰性對(duì)照試驗(yàn)，圖2顯示，陰性對(duì)照色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，無(wú)相同顏色的熒光斑點(diǎn)。取本品20 ml，蒸干，加乙醇15 ml，超聲處理10 min，上清液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加乙醇制成1 ml含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(附錄一)試驗(yàn)，吸取供試品溶液各5 μl，對(duì)照品溶液2 μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶2)為展開(kāi)劑[4]，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，圖3顯示，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。用不含黃柏的制劑進(jìn)行陰性對(duì)照試驗(yàn)，結(jié)果陰性對(duì)照色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，無(wú)相同顏色的熒光斑點(diǎn)。

注：1 缺蘇木陰性對(duì)照；2 苦參燥濕洗劑供試品(20190401)；3 苦參燥濕洗劑供試品(20190402)；4苦參燥濕洗劑供試品(20190403)；5蘇木對(duì)照藥材圖2 蘇木薄層色譜圖

注：1 缺黃柏陰性對(duì)照； 2 苦參燥濕洗劑供試品(20190401)； 3 苦參燥濕洗劑供試品(20190402)； 4苦參燥濕洗劑供試品(20190403)；5鹽酸小檗堿對(duì)照品圖3 黃柏薄層色譜圖

3 討論

中醫(yī)結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)痔瘺，肛裂的治療，目前具有較好的治療效果。本證皆屬濕熱下注或氣滯血瘀，濕毒蘊(yùn)結(jié)而成，基于濕熱瘀滯，絡(luò)阻腫瘤之病機(jī)?？鄥⑶鍩嵩餄?、祛風(fēng)止癢為主藥，黃柏、黃芩清熱利濕、消腫止痛，防風(fēng)祛風(fēng)止癢，白礬燥濕、斂瘡為輔藥，白芷消腫排脹潤(rùn)膚止痛，蘇木消風(fēng)腫止痛，當(dāng)歸養(yǎng)血潤(rùn)燥、止痛為佐藥，甘草調(diào)和諸藥，有利濕之用而為使，諸藥合用共奏：清熱燥濕、祛風(fēng)止癢、消腫止痛之效[5-7]。

該方于1999年12月正式批準(zhǔn)為濮陽(yáng)市中醫(yī)醫(yī)院制劑，2004年注冊(cè)批準(zhǔn)文號(hào)，現(xiàn)已使用17年，其前應(yīng)用湯劑已使用8年。濮陽(yáng)市中醫(yī)醫(yī)院現(xiàn)有制劑品種苦參燥濕散，為中藥煮散，患者需自行煎煮后使用，由于患者提取方法的操作規(guī)范程度有差別，藥液的療效有一定的影響；為了患者更便于使用制劑，并保證藥品療效更好，在原有的注冊(cè)制劑品種苦參燥濕散的基礎(chǔ)上，工藝改為提取濃縮配液過(guò)程，將煮散劑型改為洗劑?？鄥⒃餄裣磩┓綇母纳聘亻T疾病疼痛、排便障礙入手，經(jīng)多年臨床使用證明是一種較好的治療方法，患者使用中藥制劑苦參燥濕洗劑熏洗坐浴，對(duì)肛門疾病疼痛、排便障礙等有明顯緩解作用，使用安全，療效確切。

選用L9(34)正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)對(duì)樣品進(jìn)行提取確定最優(yōu)制備工藝，測(cè)定3次提取液的干膏率，結(jié)果表明該制備工藝重現(xiàn)性較好。3批中試樣品的制備研究成品率分別為：95.5%、97.0%、96.0%，制備工藝穩(wěn)定可靠，重新性好，已初步具備大批量生產(chǎn)的條件。通過(guò)查閱資料和進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，對(duì)方中的黃柏、蘇木進(jìn)行薄層鑒別考察，結(jié)果顯示無(wú)陰性干擾，斑點(diǎn)清晰，不受樣品中其他藥味的干擾，專屬性較強(qiáng)。本制劑具有制備方法較為科學(xué)、質(zhì)量易于控制，整體藥效較為穩(wěn)定，使用更為方便等優(yōu)點(diǎn)，值得推廣[8]。