郭翠翠，孔凡強，范前業(yè)，程宏霞，朱 斌

（1.中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊第960醫(yī)院，山東 濟南 250000；2.上海醫(yī)藥集團青島國風藥業(yè)股份有限公司，山東 青島 266510）

0 引言

鐵元素是人體內(nèi)必需的微量元素之一，人體內(nèi)鐵含量約為4~5 g，不僅是血紅蛋白的重要組成成分，還存在于紅細胞中參與氧氣運輸. 同時鐵元素還具有促進發(fā)育，提高機體免疫力等諸多功能. 鐵元素的缺乏會引起血紅蛋白合成降低，從而導致缺鐵性貧血（iron-deficiency anemia，IDA）［1-2］. 世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）統(tǒng)計資料表明，IDA作為四大營養(yǎng)缺乏癥之一，同時也是臨床常見營養(yǎng)性貧血中的一種，約有全球總?cè)丝诘?0%患IDA，其中患者總數(shù)的90%為嬰幼兒和妊娠期婦女［3］. 文獻報道，胎兒對鐵元素的獲取途徑只有通過胎盤從母體中輸送，所以妊娠期婦女對鐵的需求量劇增. 導致妊娠期貧血的因素主要有飲食不合理與營養(yǎng)吸收不良［4］，妊娠期IDA容易造成新生兒缺氧，引起新生兒窒息等情況，嚴重貧血能造成新生兒神經(jīng)及智力發(fā)育等不可逆的損傷，嚴重影響婦、兒及家庭生活質(zhì)量［5］. 嬰幼兒IDA的主要原因是妊娠期母體貧血導致的嬰幼兒鐵儲存不足［6］，由于嬰幼兒生長速度快，所需營養(yǎng)多，不及時補充鐵元素等營養(yǎng)極易出現(xiàn)貧血癥狀. 患有IDA的嬰幼兒在智力、運動及神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育低于正常嬰幼兒，嚴重IDA會導致患兒嗜睡、發(fā)育遲緩等癥狀［7］.

當前臨床常用的鐵補充方法主要有三種：靜脈補鐵劑、口服補鐵劑和營養(yǎng)干預. 隨著技術(shù)的發(fā)展，靜脈和口服補鐵劑分別又衍生出傳統(tǒng)和新型鐵劑. 傳統(tǒng)靜脈鐵劑主要有右旋糖酐鐵和蔗糖鐵. 低分子右旋糖苷鐵作為靜脈注射用鐵劑在我國臨床應用時間較長，輸注前需要進行小劑量試驗［8］，蔗糖鐵則不需要進行輸注前試驗［9］. 新型靜脈鐵劑以羥基麥芽糖鐵為代表，具有良好的臨床有效性和穩(wěn)定性［10］. 傳統(tǒng)口服鐵劑主要為二價鐵離子的方式進行補充，之后轉(zhuǎn)換成三價鐵離子. 主要的傳統(tǒng)口服鐵劑為硫酸亞鐵、枸櫞酸鐵等［11］. 新型口服鐵劑代表有氨基酸螯合鐵、血紅素鐵及多糖鐵復合物. 近年來，以多糖鐵復合物（Polysaccharide-iron complex，PIC）為代表的第三代口服補鐵劑，由于在人體生理范圍內(nèi)良好的溶解性以及較高的生物利用度得到越來越多的關(guān)注［12］. PIC是由鐵和多糖合成的大分子絡合物，鐵核成β-FeOOH結(jié)構(gòu)，屬于非離子型口服補鐵劑，鐵元素含量高達46%，能以分子形式在消化道吸收，因此胃腸道不良反應發(fā)生率較低［13-14］.在臨床上應用廣泛，可用于治療妊娠期女性、非妊娠期女性鐵缺乏和缺鐵性貧血；兒童鐵缺乏和缺鐵性貧血；消化系統(tǒng)疾病合并鐵缺乏和缺鐵性貧血；慢性腎病合并鐵缺乏和缺鐵性貧血以及外科疾病合并鐵缺乏和缺鐵性貧血等［15-19］.

原子吸收分光光度法，簡稱原子吸收法，目前已成為普及程度很高的分析方法之一，并廣泛應用于食品、藥品、化工等領(lǐng)域相關(guān)元素的定量分析. 郭嬌艷建立了原子吸收法測定葡萄糖中鉛含量的方法，且該方法的各項指標均符合中國藥典要求［20］. 盧小蘭等通過該方法對癲癇片中鈣含量進行了測定，測定結(jié)果準確靈敏，表明該方法可應用于藥效學研究［21］. 馬玉婷等采用微波消解—火焰原子吸收法對保健品中的鈣含量進行了快速測定，結(jié)果表明該方法準確簡便［22］. 綜上，原子吸收分光光度法具有靈敏度高、譜線簡單、操作簡便快捷、精密度高、測定元素種類多的特點［23-24］. 多糖鐵復合物膠囊法定質(zhì)量標準中鐵含量的測定方法為碘量法，操作較為繁瑣且易引入人為誤差. 隨著國家對藥品質(zhì)量監(jiān)管的日趨嚴格，企業(yè)采用新技術(shù)、新方法開展質(zhì)量標準提升工作勢在必行.

本文采用了原子吸收分光光度法測定多糖鐵復合物膠囊中鐵含量，并開展了方法學研究，本法操作簡便，結(jié)果準確度高，檢測效率高，彌補了碘量法的不足.

1 儀器與試藥

1.1 儀器

原子吸收光譜儀（PE）；XS205型電子天平（梅特勒）；DRHH-S8型水浴鍋（上海雙捷實驗設備有限公司）.

1.2 試藥

多糖鐵復合物膠囊（商品名：紅源達，上海醫(yī)藥集團青島國風藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號：190504、190505、190506）；標準鐵溶液（規(guī)格：1000 μg·mL-1，貯存于1.0 mol·L-1硝酸介質(zhì)中，中國家有色金屬及電子材料分析測試中心，定值日期：2018年11月05日）；硝酸（優(yōu)級純，國藥集團化學試劑有限公司）；水為純凈水.

2 方法與結(jié)果

2.1 儀器工作條件

檢測波長：248.3 nm；燈電流：15 mA；燃氣流量：2.0 L·min-1；狹縫寬度：0.2 nm；燃燒器高度：7.5 mm；助燃氣流量：15.0 L·min-1.

2.2 溶液的配置

5%硝酸溶液：取5 ml硝酸置100 mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得.

標準鐵儲備液：精密量取標準鐵溶液5.0 mL置50 mL量瓶中，用5%硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，即得.

供試品溶液：稱取多糖鐵復合物膠囊10粒，研磨混勻，精密稱取細粉約40 mg，置200 mL量瓶中，分別加入5 mL硝酸和5 mL水，密封，置沸水浴上中加熱10 min，取出放涼，加水至刻度，搖勻. 精密量取該溶液2 mL置50 mL量瓶中，加入5%硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，即可.

空白溶液：取5 ml硝酸和5 mL水置200 mL量瓶中，密封，置沸水浴上中加熱10 min，取出放涼，加水至刻度，搖勻. 精密量取該溶液2 mL置50 mL量瓶中，加入5%硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，即得.

2.3 線性試驗

精密量取“2.2”項下標準鐵儲備液0、0.5、1、2、4、6 mL，置100 mL量瓶中用5%硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，即得0，0.5，1.0，2.0，4.0，6.0 μg·mL-1的系列對照品溶液. 以鐵元素濃度（C）為橫坐標，以吸光度（A）為縱坐標，繪制標準曲線，結(jié)果見圖1. 結(jié)果表明：鐵元素濃度在0~6 μg·mL-1范圍內(nèi)，吸光度與濃度呈良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為：A = 0.047 1×C+0.003 2，r2= 0.999 2.

圖1 對照品溶液標準曲線圖

2.4 精密度試驗

精密量取鐵標準儲備液3 mL，置100 mL 量瓶中，用5%硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，按“2.1”項下儀器工作條件連續(xù)測定6 次，檢測結(jié)果的RSD為0.42%，表明儀器精密度良好.

2.5 重復性試驗

按“2.2”項下方法制備供試品溶液6份，按“2.1”項下儀器工作條件測定，RSD為0. 97%，結(jié)果表明重復性良好.

2.6 溶液穩(wěn)定性試驗

取“2.2”項下供試品溶液，室溫下放置，分別于0.5、1、2、4、6、8 h依法檢測，結(jié)果顯示供試品溶液的RSD為0.39%（n = 6）. 表明在室溫條件下，供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定.

2.7 回收率試驗

精密稱取已知含量的多糖鐵復合物膠囊粉末約20 mg，共9份，分別置200 mL量瓶中，加入標準鐵1000 μg·mL-1溶液6 mL、7.5 mL、9 mL各3 份，按“2.2”項下供試品溶液制備，精密量取該溶液2 mL 于50 mL量瓶中，加5%硝酸溶液至刻度，搖勻，按“2.1”儀器工作條件測定，計算回收率，回收率為100.3%，RSD =1.12%.

2.8 樣品檢測

取多糖鐵復合物膠囊，按“2.2”項下方法制備供試品溶液，按“2.1” 儀器工作條件測定，計算含量. 同時按法定質(zhì)量標準中鐵含量的測定方法，依法檢測.結(jié)果表明，兩種方法測得結(jié)果基本一致，結(jié)果見表1.

表1 多糖鐵復合物膠囊樣品含量測定結(jié)果對比

3 討論

采用傳統(tǒng)碘量法測定多糖鐵復合物膠囊中鐵含量的原理是：首先，通過消解出多糖鐵復合物中的三價鐵離子；然后，消解出的三價鐵離子將碘化鉀氧化成碘單質(zhì)；最后，使用硫代硫酸鈉滴定碘單質(zhì)，間接測定鐵含量. 該方法的不足之處有兩點，首先所用試劑繁多，配制過程繁瑣，操作要求高；其次，多糖鐵復合物膠囊內(nèi)容物溶于水后呈紅棕色，由于溶液本身顏色，以及操作人員對顏色變化的敏感性不同，易造成滴定突躍終點觀察不便，引起人為誤差，最終導致測定結(jié)果的不準確，影響檢測效率.

鑒于傳統(tǒng)碘量法的不足之處，探究了基于原子吸收分光光度法對多糖鐵復合物膠囊中鐵含量的檢測方法，同時進行了方法學考察，在線性、精密度、重復性、穩(wěn)定性、回收率等試驗結(jié)果均表現(xiàn)良好. 通過兩種方法對多批次多糖鐵復合物膠囊樣品中鐵含量進行測定，結(jié)果基本一致，表明該方法適用于對多糖鐵復合物膠囊中鐵含量的測定. 對比傳統(tǒng)碘量法，筆者總結(jié)了原子吸收分光光度法的優(yōu)點. 首先，試驗所需試劑種類少，操作步驟簡便；其次，由于儀器測定得出結(jié)果，不依賴于實驗人員觀察，使得人為操作產(chǎn)生的誤差減少，結(jié)果準確性提高；再次，隨著科技的發(fā)展，原子吸收光譜儀已成為企業(yè)和科研機構(gòu)常用的分析儀器，相較于碘量法，縮短了檢測時間，提高了檢測效率；最后，該方法通過多糖鐵復合物膠囊中鐵含量的精確測定，進而更加準確的控制藥品質(zhì)量，為患者提供安全、優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品，因此能產(chǎn)生較大的社會效益.

綜上所述，原子吸收分光光度法不僅適合多糖鐵復合物膠囊中鐵含量的測定，同時鑒于該方法對于實驗結(jié)果的準確性、檢測效率的提高、藥品質(zhì)量的提升以及患者用藥的安全性等方面的意義，建議進一步深入研究并為接下來開展的藥品質(zhì)量標準提升工作奠定基礎(chǔ).

4 結(jié)論

通過對三批多糖鐵復合物膠囊中鐵含量測定，本方法與法定質(zhì)量標準方法的測定結(jié)果基本一致，表明本方法適合多糖鐵復合物膠囊中鐵含量的測定.