王安訓(xùn)

中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院口腔頜面外科，廣東廣州（510080）

人體的免疫系統(tǒng)由免疫器官（骨髓、脾臟、淋巴結(jié)等）、免疫細(xì)胞（淋巴細(xì)胞、單核吞噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞等）和免疫活性物質(zhì)（抗體、補體、免疫球蛋白、細(xì)胞因子等）共同組成，具有免疫監(jiān)視、防御、調(diào)控等作用。由于免疫功能的異常在許多疾病的發(fā)生發(fā)展及預(yù)后中起重要作用，因此開展免疫功能檢測具有實際的臨床意義。

1 免疫功能檢測分類

1.1 細(xì)胞免疫分析

淋巴細(xì)胞是機體細(xì)胞免疫的重要組成部分，其功能的異常與許多疾病相關(guān)，因此臨床上常開展淋巴細(xì)胞亞群分析，主要分析T 淋巴細(xì)胞、B 淋巴細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞（natural killer cell，NK）。

1.1.1 T 淋巴細(xì)胞 T 淋巴細(xì)胞維持著機體正常的細(xì)胞免疫［1-2］。成熟的T 細(xì)胞表面均表達CD3（CD3+，即總T 細(xì)胞）；CD3+T 細(xì)胞又分為CD4+T 細(xì)胞和CD8+T 細(xì)胞兩個亞群。CD4+T 細(xì)胞接受抗原刺激后，在不同的條件下可分化成不同亞型的T 細(xì)胞，如：①在白介素-12（interleukin-12，IL-12）和干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ）的誘導(dǎo)下分化為Th1細(xì)胞，調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫和遲發(fā)型超敏反應(yīng)等；②在IL-4 的誘導(dǎo)下分化為Th2 細(xì)胞，參與體液免疫和速發(fā)型超敏反應(yīng)等；③在轉(zhuǎn)化生長因子β（transforming growth factor-β，TGF-β）誘導(dǎo)下分化為調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞（regulatory T cells，Tregs），參與免疫調(diào)節(jié)；④在TGF-β 和IL-6 的共同誘導(dǎo)下分化為Th17 細(xì)胞，參與炎癥反應(yīng)和自身免疫性疾病。CD8+T 細(xì)胞只識別主要組織相容性復(fù)合體（major histocompatibility complex，MHC）Ⅰ類分子遞呈的抗原，根據(jù)細(xì)胞表面CD28 的表達情況又可分為細(xì)胞毒性T 細(xì)胞（CD8+CD28+）和抑制性T 細(xì)胞（CD8+CD28-），前者在CD28 共刺激分子激活下分化增殖成效應(yīng)細(xì)胞；后者對免疫應(yīng)答具有負(fù)調(diào)節(jié)功能。

T 細(xì)胞亞群的檢測分析對許多疾病的診斷和治療都有極其重要的指導(dǎo)意義。在大多數(shù)惡性腫瘤患者中外周血T 細(xì)胞亞群呈現(xiàn)如下特征：CD3+細(xì)胞、CD4+細(xì)胞明顯減少，而CD8+細(xì)胞明顯增加，CD4+/CD8+比值顯著降低，這說明患者的細(xì)胞免疫功能處于抑制狀態(tài)。在免疫缺陷病、白血病、某些病毒感染、器官移植后的排斥反應(yīng)以及免疫抑制劑治療的患者中常表現(xiàn)為CD4+T 細(xì)胞數(shù)和CD4+/CD8+比值降低。在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、I 型糖尿病等患者中可見CD4+/CD8+比值上升。

1.1.2 B 淋巴細(xì)胞 B 淋巴細(xì)胞來源于骨髓的多能干細(xì)胞，成熟B 細(xì)胞定居于淋巴結(jié)皮質(zhì)淺層的淋巴小結(jié)和脾臟的紅髓和白髓的淋巴小結(jié)內(nèi)，接受抗原刺激后，在抗原提呈細(xì)胞和Th 細(xì)胞的輔助下成為活化B 細(xì)胞，進而分化為漿細(xì)胞，合成和分泌各類抗體（免疫球蛋白），執(zhí)行機體的體液免疫［3］。

CD19 是B 細(xì)胞重要的膜抗原，是診斷B 細(xì)胞系腫瘤（白血病、淋巴瘤）和鑒定B 細(xì)胞最好的標(biāo)記。CD19+B 細(xì)胞升高常見于B 細(xì)胞系的惡性腫瘤：如急性前B 細(xì)胞白血病和Burkitt 淋巴瘤等；CD19+B 細(xì)胞降低可見于長期使用免疫抑制劑患者。另外，由于CD19 廣泛存在于B 細(xì)胞惡性腫瘤細(xì)胞表面，故CD19 可用于其靶點免疫治療［4］。

1.1.3 NK 細(xì)胞 NK 細(xì)胞來源于骨髓，主要分布于外周血，少量分布于淋巴結(jié)和骨髓。NK 細(xì)胞的表面標(biāo)志特異性相對差，常見的標(biāo)記有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94 和LAK-1。NK 細(xì)胞主要通過穿孔素、NK 細(xì)胞毒因子和腫瘤壞死因子（tumour necrosis factor，TNF）等對靶細(xì)胞起殺傷作用，是機體抗腫瘤、抗感染的重要免疫因素，活化的NK 細(xì)胞還可發(fā)揮調(diào)節(jié)免疫和造血作用以及直接殺傷靶細(xì)胞的作用［4］。

NK 細(xì)胞總數(shù)和活性檢測可作為判斷機體抗腫瘤和抗病毒感染的指標(biāo)之一。NK 細(xì)胞總數(shù)正常而活性降低者常見于大多數(shù)腫瘤患者（尤其是中晚期或伴有轉(zhuǎn)移的患者）、免疫缺陷病以及感染性疾病患者；NK 細(xì)胞總數(shù)和活力均下降常見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、急性多發(fā)性硬化癥等；NK 細(xì)胞活性增高常見于多發(fā)性骨髓瘤、肺結(jié)核和宿主抗移植物反應(yīng)等疾病。

1.2 體液免疫分析

1.2.1 免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig） 免疫球蛋白主要存在于血漿中，也見于其他體液、組織液和分泌液中［5-6］，因結(jié)構(gòu)不同分為IgG、IgA、IgM、IgD和IgE 5 種。血清Ig 的測定是檢查體液免疫功能最常用的方法，由于目前還沒有發(fā)現(xiàn)由IgD 和IgE 缺陷所致疾病，所以通常只檢測IgG、IgM、IgA。

IgG 抗體是四鏈單體，占血清Ig 總量的75%，是血清和細(xì)胞外液中最主要的抗體成分；IgG 出生后3 個月開始合成，3～5 歲接近成人水平，其功能包括：激活補體經(jīng)典途徑介導(dǎo)溶菌和細(xì)胞毒作用；參與抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用；調(diào)理吞噬作用；中和毒素和病毒［7］。血清IgG 升高常見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎以及某些感染性（病毒）疾病等；血清IgG 降低常見于免疫缺陷綜合征、燒傷、濕疹、天皰瘡等。血清IgG 抗體陽性，一般提示是既往感染，對臨床診斷意義不大；但如果IgG 抗體滴度持續(xù)上升，則應(yīng)考慮為近期感染了該種病毒。IgG4（IgG 一種亞型）相關(guān)性疾病是一種慢性、進行性炎癥伴纖維化的疾病，可累及多臟器，血清IgG4 水平顯著升高，如唾液腺受累的Mikulicz 病［8］。

IgM 是由5 個結(jié)構(gòu)相同單體組成的“星狀”五聚體；占血清Ig 總量的5%～10%。IgM 在胎兒3 個月后開始合成，1～2 歲時達到成人水平；其功能包括：與抗原結(jié)合啟動補體級聯(lián)反應(yīng)產(chǎn)生溶菌作用、調(diào)理吞噬作用、中和病毒（效能比IgG 高）［9］。IgM抗體是免疫應(yīng)答中首先分泌的抗體，一經(jīng)感染快速產(chǎn)生，其后逐漸減少而消失，因此血清中檢出IgM，提示近期感染，可用于感染的早期診斷。IgM不能通過胎盤，如果胎兒或新生兒的血液中發(fā)現(xiàn)IgM，說明有宮內(nèi)感染。IgM 升高常見于巨球蛋白血癥、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、肝臟病等；IgM 降低常見于胃腸病、燒傷、聯(lián)合免疫缺陷病等。

IgA 有單體、雙體、三體及多聚體等多種形式，占血清Ig 含量的10%～20%；分為血清型及分泌型。血清型IgA 無重要的免疫功能；分泌型IgA 存在于分泌液中，如唾液、淚液、初乳、鼻和支氣管分泌液等，是機體黏膜局部抗感染的主要抗體［10］。新生兒可從母乳中獲得分泌型IgA，出生4～6 個月后血中開始出現(xiàn)IgA，青少年期達到高峰。IgA 的功能包括：分泌于黏膜表面中和感染因子；通過初乳輸送到新生兒的消化道黏膜中起保護作用［11］。血清IgA 升高常見于IgA 型多發(fā)性骨髓瘤、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等；血清IgA 降低常見于自身免疫病、繼發(fā)性免疫缺損等。

1.2.2 輕鏈 輕鏈?zhǔn)侵窱g 單體分子中分子量較小的多肽鏈，每條輕鏈包含可變區(qū)（VL，與抗原結(jié)合部位）和恒定區(qū)（CL），根據(jù)恒定區(qū)氨基酸序列的差異將輕鏈分為：kappa（κ）鏈與lambda（λ）鏈［12］。正常人血清中κ∶λ 比值約為2∶1。輕鏈能自由通過腎小球基底膜，并能在腎小管被重吸收，因此正常人尿中有少量輕鏈存在。血或尿輕鏈的定量測定可用于多發(fā)性骨髓瘤等疾病的診斷或輔助診斷。自身免疫性疾病、某些惡性腫瘤、感染、肝硬化、急慢性肝炎等患者輕鏈也可增多，但一般表現(xiàn)為κ、λ同時增多，比值不變。

1.2.3 補體（Complement） 補體是存在于血清和組織液中經(jīng)活化后具有酶活性的一組蛋白質(zhì)，可介導(dǎo)免疫和炎癥反應(yīng)。補體包括固有成分（C1q、C1r、C1s、C2-C9、D 因子及B 因子）、調(diào)節(jié)蛋白和補體受體。補體的經(jīng)典激活途徑是由抗原-抗體復(fù)合物或其他因子激活C1，然后經(jīng)過識別、活化和膜攻擊3 個階段起作用；而替代激活途徑是直接由C3開始的激活途徑。補體系統(tǒng)參與機體的特異性和非特異性免疫機制，包括對細(xì)菌溶解和殺傷、免疫黏附、趨化和過敏毒素作用。

補體C3 是血清中含量最高的補體成分，主要由巨噬細(xì)胞和肝臟合成，在補體經(jīng)典激活途徑或替代激活途徑中均發(fā)揮重要作用。補體C4 是一種多功能β1-球蛋白，在補體經(jīng)典激活途徑中被C1s水解為C4a/C4b，在補體激活、促進吞噬、防止免疫復(fù)合物沉著和中和病毒等方面發(fā)揮作用。C3 或C4 升高常見于某些急性炎癥、傳染病早期或者組織損傷，如風(fēng)濕熱急性期、關(guān)節(jié)炎等；C3 或C4 降低常見于慢性活動性肝炎、急性胰腺炎、嚴(yán)重類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎以及兒童營養(yǎng)不良性疾病等［13-14］。腫瘤患者血清補體可發(fā)生明顯改變，如肝癌和白血病等。

1.3 炎癥反應(yīng)標(biāo)志物

機體受到微生物入侵或組織損傷等炎癥刺激時肝細(xì)胞可合成一系列的急性相蛋白，包括：C 反應(yīng)蛋白、血清淀粉樣蛋白A、纖維蛋白原等［15］。臨床上常用這些炎癥反應(yīng)標(biāo)志物作為多種疾病診斷和治療的監(jiān)測指標(biāo)。

1.3.1 紅細(xì)胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR） ESR 是指紅細(xì)胞在一定條件下沉降的速度。在正常情況下紅細(xì)胞膜表面的唾液酸帶有負(fù)電荷形成zeta 電位，使紅細(xì)胞互相排斥而保持懸浮穩(wěn)定性，沉降很慢；在病理情況下血漿纖維蛋白原或球蛋白增多，致使紅細(xì)胞zeta 電位降低，彼此易于沾邊成緡錢狀，使血沉加快。婦女月經(jīng)、妊娠3 個月以上直到分娩后3 周、60 歲以上的高齡者因血漿纖維原蛋白量逐漸增高可導(dǎo)致血沉的生理性增快［16-17］。

血沉增快常見于以下疾?。?4］：①炎癥、組織損傷及壞死；②惡性腫瘤：惡性腫瘤患者因組織壞死、繼發(fā)感染及貧血等因素可導(dǎo)致血沉加快，血沉可用于良惡性腫瘤鑒別診斷和惡性腫瘤療效監(jiān)測的指標(biāo)；③各種原因?qū)е碌母咔虻鞍籽Y：如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥等；④貧血：當(dāng)血紅蛋白低于90 g/L 時，血沉可增快，但低色素性貧血，可因紅細(xì)胞體積減小、血紅蛋白量不足導(dǎo)致血沉降低。

1.3.2 C 反應(yīng)蛋白（C-reaction protein，CRP） CRP是機體受到微生物入侵或組織損傷等炎癥性刺激時肝細(xì)胞合成的急性相蛋白，它通過與配體結(jié)合，激活補體和單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)，將載有配體的病理物質(zhì)或病原體清除。CRP 在炎癥開始數(shù)小時就升高，48 h 即達峰值，隨著病變消退恢復(fù)正常；CRP升高比臨床癥狀的變化要早，因此CRP 檢測可成為某些疾病早診斷和早治療的依據(jù)。

CRP 檢測可用于多種疾病的診斷和治療監(jiān)測［18］，①急性感染性疾病的診斷：CRP 升高的程度反映炎癥嚴(yán)重程度，當(dāng)CRP 值大于100 mg/L 時表示嚴(yán)重的炎癥；②術(shù)后感染的監(jiān)測：術(shù)后并發(fā)癥可導(dǎo)致CRP 的持續(xù)升高，因此對有術(shù)后感染風(fēng)險的患者可通過測定CRP 來調(diào)整治療方案；③抗生素使用的依據(jù)和療效觀察：許多急性感染或高危病人在缺少微生物學(xué)診斷時可通過監(jiān)測CRP 作為使用抗生素治療的依據(jù)，CRP 下降至正常時中斷抗生素治療；④疾病預(yù)后判斷：許多惡性腫瘤患者血清CRP 均有不同程度的升高，因此CRP 水平升高或持續(xù)升高預(yù)示著預(yù)后不良或轉(zhuǎn)移。

1.3.3 血清淀粉樣蛋白A（Serum amyloid A protein，SAA） SAA 是一種由肝細(xì)胞產(chǎn)生后被分泌到血清中的一種急性時相蛋白，當(dāng)機體發(fā)生感染或損傷時，可在4～6 h 內(nèi)迅速升高約1 000 倍，當(dāng)機體抗原清除后則迅速降低至正常水平，是反映機體感染情況和炎癥恢復(fù)的靈敏指標(biāo)［19］。

SAA 升高可見于病毒、支原體、細(xì)菌感染，且敏感性高于CRP。在細(xì)菌感染性疾病中SAA 比CRP上升早、幅度大、靈敏度高，而在病毒感染性疾病中SAA 顯著升高，CRP 不升高。因此SAA 聯(lián)合CRP 檢測可用于鑒別診斷細(xì)菌或病毒感染［20］。惡性腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移時SAA 可顯著升高；SAA 還是監(jiān)測移植排異的靈敏指標(biāo)［21］。

2 免疫功能檢測在口腔黏膜相關(guān)疾病中的應(yīng)用

口腔頜面部在人體的免疫系統(tǒng)中占重要地位，免疫功能的異常在某些口腔疾病的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。本文將討論免疫功能異常在3 種常見口腔黏膜相關(guān)疾病中的作用，包括復(fù)發(fā)性阿弗他潰瘍（recurrent aphthous ulcer，RAU）、扁平苔蘚（lichen planus，LP）以及口腔鱗狀細(xì)胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）。同時探討免疫功能檢測在這些疾病診斷和治療中的應(yīng)用價值。

2.1 復(fù)發(fā)性阿弗他潰瘍

RAU 是最常見的口腔黏膜病，患病率高達20%左右；其臨床表現(xiàn)為孤立的、圓形或橢圓形的淺表性潰瘍，周期性復(fù)發(fā)且具有自限性，愈合后多不留瘢痕。RAU 的發(fā)病與遺傳、免疫、環(huán)境、感染等多種因素有關(guān)，其中免疫因素被認(rèn)為與該病的發(fā)生尤為密切，包括細(xì)胞免疫功能異常、體液免疫功能異常、自身免疫等。

目前已有大量關(guān)于RAU 淋巴細(xì)胞亞群和體液免疫功能的研究［22-25］，Nan 等［22］檢測30 例RAU 患者外周血細(xì)胞免疫和體液免疫指標(biāo)，結(jié)果顯示：RAU 患者CD4+細(xì)胞水平顯著降低，IgM 水平顯著增高，因此作者認(rèn)為RAU 患者以細(xì)胞免疫功能低下為主，同時伴有體液免疫功能增強。Yang 等［23］對頑固性RAU 患者外周血Th17 細(xì)胞和體液免疫功能分析顯示：RAU 患者Th17 細(xì)胞占CD4+細(xì)胞的比例升高，IgG、IgA、IgE 水平也升高。Koridze 等［24］的研究結(jié)果也顯示RAU 患者CD3+、CD4+和NK 細(xì)胞下降，IgM、IgG、IgE 和IL-6 升高；治療后CD3+、CD4+、NK 細(xì)胞以及IgG、IgM 均可恢復(fù)正常。然而Sun 等［25］對34 例RAU 患者的研究發(fā)現(xiàn)，RAU 患者發(fā)病期間CD3+、CD4+等細(xì)胞顯著升高；治愈后CD4+細(xì)胞顯著下降，CD8+細(xì)胞顯著升高。

上述研究雖然顯示RAU 與細(xì)胞免疫和體液免疫功能異常相關(guān)，但結(jié)果存在很大差異，為此筆者收集了2013 年1 月至2017 年9 月在中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院就診的47 例RAU 患者（20 例女性，27 例男性；年齡16～69 歲），同時收集健康人13 例（7 例女性，6 例男性；年齡22～43 歲），檢測外周血淋巴細(xì)胞亞群、體液免疫功能和炎癥反應(yīng)標(biāo)志物；淋巴細(xì)胞亞群分析顯示：與健康人比較，RAU 患者CD19+細(xì)胞、CD3+細(xì)胞、CD4+細(xì)胞、CD8+細(xì)胞水平下降，CD4+/CD8+、NK 細(xì)胞水平升高，但所有指標(biāo)兩組間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義；分別有45%的患者CD4+細(xì)胞呈升高（7/47）或降低（14/47），48.9%的患者NK 細(xì)胞呈升高（19/47）或降低（4/47）。體液免疫功能結(jié)果顯示：與健康人比較，口腔潰瘍患者κ 鏈、λ 鏈、C3、IgA、IgG、IgM 水平升高，κ 鏈/λ 鏈、C4 水平下降，兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義的有：κ 鏈/λ 鏈和λ鏈；同時有51%的患者C3 或C4 異常。炎癥反應(yīng)標(biāo)志物檢測結(jié)果顯示：與健康人比較，口腔潰瘍患者ESR、CRP 均顯著升高，分別為39%和28.5%。進一步分析顯示RAU 患者中許多組合的陽性檢出率高于70%（即兩項中至少有一項異常），如細(xì)胞免疫組合（CD3+/NK、CD4+/NK），細(xì)胞/體液免疫組合（CD3+/κ 鏈、CD3+/C3、CD3+/IgG、CD3+/IgM、CD4+/κ鏈、NK/κ 鏈、NK/C3），細(xì)胞免疫/炎癥組合（CD3+/CRP、NK/ESR）和體液免疫/炎癥組合（ESR/κ 鏈、ESR/IgG）。本研究表明RAU 患者存在明顯的體液免疫功能異常和炎癥反應(yīng)。雖然細(xì)胞免疫功能未見明顯異常，但有近一半的患者存在CD4+細(xì)胞或NK 細(xì)胞的異常；同時RAU 患者中各種細(xì)胞免疫、體液免疫或炎癥反應(yīng)標(biāo)志物組合的陽性率均高達70%。這也說明雖然RAU 患者免疫功能存在異常，但不同個體存在不同的細(xì)胞免疫或體液免疫功能的異常，臨床上應(yīng)該針對不同的免疫功能異常給予不同的治療方案。

2.2 口腔扁平苔蘚

LP 是一種可累及皮膚、黏膜、指甲和毛發(fā)的炎癥性皮膚??；可單獨發(fā)生于口腔黏膜或皮膚，也可皮膚與黏膜同時累及。OLP 的臨床特征為珠光白色條紋，可形成網(wǎng)狀損害或糜爛，多見于磨牙區(qū)黏膜與前庭溝，具有明顯的左右對稱性，有粗糙感和輕度刺激痛。目前OLP 病因未明，其發(fā)病可能與自身免疫、感染、神經(jīng)精神因素有關(guān)；藥物因素、內(nèi)分泌異常、慢性病灶等因素也可誘發(fā)本病。由于自身免疫功能的異常以及感染引起的炎癥反應(yīng)是LP 發(fā)病的主要原因，因此對LP 患者進行淋巴細(xì)胞亞群分析、體液免疫功能以及炎癥反應(yīng)標(biāo)志物的檢測對LP 的診斷、治療及預(yù)后預(yù)測具有重要意義。

研究顯示OLP 患者炎癥反應(yīng)標(biāo)志物紅細(xì)胞沉降素（erythrocyte sedimentation rate，ESR）、CRP、中性粒/淋巴細(xì)胞（neutrophil/lymphocyte ratio，N/L）比率顯著上升［26］。Huang［27］等對30 例OLP 患者的細(xì)胞免疫和體液免疫功能進行分析顯示：OLP 患者淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+和CD8+細(xì)胞顯著低于正常值，CD19+細(xì)胞顯著高于正常值；體液免疫IgM 顯著上升，C4 顯著下降，也即OLP 患者同時存在細(xì)胞免疫功能和體液免疫功能的異常。Biocina-Lukenda 等［28］對30 例OLP 患者的體液免疫功能檢測也發(fā)現(xiàn)：OLP 患者IgA 和IgM 顯著上升，但IgG 僅輕度升高。

為了對OLP 患者進行系統(tǒng)的免疫功能和炎癥反應(yīng)狀態(tài)進行研究，筆者收集了2013 年1 月至2017 年9 月在中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院就診的OLP患者38 例（22 例女性，16 例男性；年齡25～76 歲），淋巴細(xì)胞亞群分析顯示：與健康人比較，OLP 患者CD3+細(xì)胞、CD8+細(xì)胞水平下降，CD19+細(xì)胞、CD4+細(xì)胞、CD4+/CD8+、NK 細(xì)胞水平升高，其中CD3+細(xì)胞、CD8+細(xì)胞和CD4+/CD8+兩組間存在顯著性差異；同時發(fā)現(xiàn)40%的患者CD19+細(xì)胞異常（83%升高），57%的OLP 患者NK 異常（71%升高）。體液免疫功能結(jié)果顯示：與健康人比較，OLP 患者λ 鏈水平升高，κ 鏈、κ 鏈/λ 鏈、C4、IgA 水平下降，C3、IgG、IgM無明顯變化；兩組間存在顯著性差異的有κ 鏈/λ 鏈和C4；同時發(fā)現(xiàn)63%患者κ 鏈異常（70%下降），41%患者C4 異常（85%下降）。炎癥反應(yīng)標(biāo)志物檢測結(jié)果顯示：與健康人比較，OLP 患者ESR 顯著升高；ESR 升高的患者中女性占85%。進一步分析顯示OLP 患者中許多組合的陽性檢出率高于75%，如細(xì)胞免疫組合（CD19+/CD3，CD19+/NK），細(xì)胞/體液免疫組合（CD3+/IgG、CD4+/κ 鏈、NK/λ 鏈、NK/C4），體液免疫組合（κ 鏈/λ 鏈，κ 鏈/C4）和體液免疫/炎癥組合（κ 鏈/ESR）。OLP 患者中CD3+/κ 鏈和NK/κ 鏈組合的陽性檢出率高于90%；在男性患者中NK/κ 鏈，CD19+/κ 鏈組合的陽性檢出率達100%。同時還發(fā)現(xiàn)CD3 或CD4 下降的患者NK 均上升，λ 鏈升高的患者ESR 均上升，IgG 下降的患者κ 鏈均下降。本研究表明OLP 患者存在明顯的細(xì)胞免疫功能、體液免疫功能的異常和炎癥反應(yīng)；細(xì)胞免疫功能中還可見40%和57%的患者存在CD19+細(xì)胞和NK 細(xì)胞的異常，這兩者均與體液免疫功能密切相關(guān)；體液免疫功能中也可見63%和41%的患者存在κ 鏈和C4 的異常；同時OLP 患者中各種細(xì)胞免疫、體液免疫或炎癥反應(yīng)標(biāo)志物組合的陽性率可高達75%，甚至100%。

2.3 口腔鱗狀細(xì)胞癌

OSCC 泛指原發(fā)于口腔黏膜的惡性腫瘤，在湖南、臺灣等地區(qū)，由于有咀嚼檳榔的習(xí)慣，導(dǎo)致口腔鱗癌的發(fā)病率居高不下。近年來隨著程序性死亡受體1（programmed cell death protein 1，PD-1）/程序性死亡配體-1（programmed death ligand-1，PDL1）、嵌合抗原受體T 細(xì)胞免疫療法（chimeric antigen receptor T-cell immunotherapy，CAR-T）等免疫治療在惡性腫瘤治療中取得的巨大成功，腫瘤免疫又成為了腫瘤研究的熱點方向。惡性腫瘤中由于腫瘤抗原的存在，機體的免疫系統(tǒng)可識別并激發(fā)特異性免疫反應(yīng)，因此擁有正常的免疫功能對機體有效監(jiān)視和排斥癌變細(xì)胞具有重要意義，臨床上可通過檢測淋巴細(xì)胞亞群和體液免疫功能評估腫瘤患者的免疫功能狀態(tài)。

雖然免疫治療已成為惡性腫瘤治療的發(fā)展方向，但有關(guān)OSCC 的免疫發(fā)病機制、免疫治療的研究仍較少。目前研究已顯示OSCC 患者細(xì)胞免疫功能受到明顯抑制［30］，Grimm 等［29］對30 例OSCC 患者術(shù)前淋巴細(xì)胞亞群分析顯示：患者總T 細(xì)胞、Th細(xì)胞、Treg 細(xì)胞、Tc 細(xì)胞和NK 細(xì)胞均顯著下降。Bose 等［30］對Ⅲ/Ⅳ期頭頸癌的研究也發(fā)現(xiàn)，患者外周血CD4+、CD8+、NK 細(xì)胞顯著下降，而具有抑制功能的CD4+CD25+Foxp3+T 細(xì)胞顯著上升。Rajendran等［31］對口腔癌患者體液免疫功能研究發(fā)現(xiàn)患者血清IgA，IgD 和IgE 均顯著上升。近年來許多研究發(fā)現(xiàn)炎癥反應(yīng)標(biāo)志物CRP 與OSCC 的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，可作為口腔癌癌變危險性的標(biāo)志物，還可作為口腔癌進展、復(fù)發(fā)和預(yù)后標(biāo)志物；DE Paz 等［32］對246 例OSCC 患者CRP 的檢測發(fā)現(xiàn)患者CRP 顯著上升，且與侵襲轉(zhuǎn)移能力、預(yù)后密切相關(guān)。Du 等［33］應(yīng)用免疫組化分析顯示CRP 與舌鱗癌的原發(fā)灶大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和病理分級密切相關(guān)，體外研究發(fā)現(xiàn)CRP 具有濃度和時間依賴性促進舌鱗癌細(xì)胞的增殖、侵襲轉(zhuǎn)移能力。

以上研究分別提示OSCC 存在免疫功能異?；蜓装Y反應(yīng)，為了綜合評估OSCC 的免疫功能狀態(tài)和炎癥狀態(tài)，筆者收集了2013 年1 月至2017 年9月在中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院就診的OSCC 患者67例（22 例女性，45 例男性；年齡18～83 歲），淋巴細(xì)胞亞群分析顯示：與健康人比較，OSCC 患者CD3+細(xì)胞、CD8+細(xì)胞水平下降，CD19+細(xì)胞、CD4+細(xì)胞、CD4+/CD8+、NK 細(xì)胞水平升高，CD4+細(xì)胞、CD8+細(xì)胞和CD4+/CD8+兩組間存在顯著性差異；同時發(fā)現(xiàn)近47.8%的患者NK 細(xì)胞呈升高（26/67）或降低（6/67）。體液免疫功能結(jié)果顯示：與健康人比較，OSCC 患者λ 鏈輕微升高，κ 鏈、κ 鏈/λ 鏈、C4、IgM、IgG水平下降，C3、IgA 無明顯變化；兩組間存在顯著性差異的有κ 鏈/λ 鏈和C4；同時發(fā)現(xiàn)55%的患者κ 鏈呈升高（7/67）或降低（30/67），57%的患者IgG 呈升高（13/67）或降低（25/67），52.2%的患者IgM 呈升高（4/67）或降低（31/67）。炎癥反應(yīng)標(biāo)志物檢測結(jié)果顯示：與健康人比較，OSCC 患者ESR 顯著升高。ESR、CRP、SAA 水平升高的患者分別為42%、30%和28%。進一步分析也發(fā)現(xiàn)OSCC 患者中許多組合的陽性檢出率均高于75%，如細(xì)胞免疫組合（CD3+/CD8+、CD3+/NK、CD4+/NK），細(xì)胞/體液免疫組合（CD3+/κ 鏈、CD3+/IgG、CD3+/IgM、CD4+/κ 鏈、CD4+/IgG、CD4+/IgM、CD8+/κ 鏈、CD8+/IgM、NK/κ 鏈、NK/IgG、NK/IgM），體液免疫組合（κ 鏈/IgM、IgG/IgM）和體液免疫/炎癥組合（ESR/κ 鏈、ESR/IgG），其中NK/κ 鏈和ESR/κ 鏈組合的陽性檢出率高于80%；在女性患者中CD4+/IgM、CD8+/IgM 組合的陽性檢出率達90%。以上結(jié)果表明OSCC 患者存在明顯的細(xì)胞免疫功能和體液免疫功能的異常和炎癥反應(yīng)；體液免疫功能中還可見超過一半的OSCC 患者分別有κ鏈、IgG 或IgM 的異常；同時OSCC 患者中各種細(xì)胞免疫、體液免疫或炎癥反應(yīng)標(biāo)志物組合的陽性率可高達75%，甚至90%。

3 總 結(jié)

綜上所述，免疫功能檢測具有廣泛的臨床意義。淋巴細(xì)胞亞群分析常用于惡性腫瘤患者免疫功能狀態(tài)的評估、血液性腫瘤的分子分型、免疫相關(guān)疾病的診斷和治療監(jiān)測。體液免疫功能檢測常用于免疫性疾病、細(xì)菌或病毒性感染性疾病、部分惡性腫瘤（如多發(fā)性骨髓瘤）、肝臟疾病等的的診斷、鑒別診斷和治療指導(dǎo)。炎癥反應(yīng)標(biāo)志物常用于細(xì)菌或病毒感染性疾病的診斷和鑒別診斷、良惡性腫瘤鑒別診斷和惡性腫瘤預(yù)后轉(zhuǎn)移和療效監(jiān)測的指標(biāo)、各種炎癥和術(shù)后感染的監(jiān)測、抗生素使用的依據(jù)和療效觀察、免疫相關(guān)疾病的診斷和治療監(jiān)測。

免疫功能檢測在口腔疾病的應(yīng)用也相當(dāng)廣泛，本文僅列舉3 種最常見的口腔疾病。3 種疾病中RAU 患者僅有輕度的體液免疫功能異常和明顯的炎癥反應(yīng)（CRP 和ESR 均升高），細(xì)胞免疫功能雖未見明顯異常，但有近一半的患者存在CD4+細(xì)胞或NK 細(xì)胞的異常；同時存在各種細(xì)胞免疫和體液免疫的聯(lián)合異常，這些說明RAU 患者存在不同的細(xì)胞免疫或體液免疫功能的異常，臨床上應(yīng)該針對不同的免疫功能異常給予不同的治療方案。與RAU 比較，OLP 患者存在更為明顯的細(xì)胞免疫功能、體液免疫功能的異常和較輕的炎癥反應(yīng)（僅ESR 升高）；細(xì)胞免疫功能中除了CD3+和CD8+細(xì)胞水平呈顯著性差異外，近一半患者存在CD19+細(xì)胞和NK 細(xì)胞的異常，這兩者均與體液免疫功能密切相關(guān)；體液免疫功能中除了C4 水平呈顯著性差異外，63%的患者存在κ 鏈的異常；OLP 患者存在更為普遍的各種細(xì)胞免疫和體液免疫的聯(lián)合異常；在男性患者中NK/κ 鏈、CD19+/κ 鏈組合的陽性檢出率達100%，也即患者中至少存在κ 鏈或CD19+（NK）的異常。與OLP 患者比較，OSCC 患者同樣存在明顯的細(xì)胞免疫功能和體液免疫功能的異常和炎癥反應(yīng)；細(xì)胞免疫功能中除了CD4+和CD8+細(xì)胞水平呈顯著性差異外，還可見近一半患者存在NK細(xì)胞的異常；體液免疫功能中同樣存在C4 水平的顯著性差異，但超一半的患者分別有κ 鏈、IgG 或IgM 的異常；OSCC 患者中存在更多的細(xì)胞免疫體液免疫組合異常，在女性患者中CD4+/IgM、CD8+/IgM 組合的陽性檢出率達90%。

以上的研究成果與文獻報道不盡相同，同時文獻的研究結(jié)果也存在較大差異，其原因與研究中存在的缺陷相關(guān)，如大部分研究的樣本量小、檢測指標(biāo)單一、缺乏有效配對、缺乏追蹤隨訪以及多中心研究等。因此未來必須開展大樣本、多中心、多指標(biāo)聯(lián)合檢測的研究，從而更加完善地闡明免疫功能異常在各種疾病發(fā)病中的作用及其機理，建立相應(yīng)的診斷模型和預(yù)后預(yù)測模型，尋找更為有效的治療手段。同時還需對各種異常指標(biāo)在疾病中的作用展開功能和機理的研究，以獲得更為精準(zhǔn)的診斷和治療標(biāo)志物。

【Author contributions】Wang AX wrote and revised the article.Wang AX read and approved the final manuscript as submitted.