王哲睿 潘潔露 喻 曉 張海燕 邢練軍

上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院脾胃病二科 (上海， 200032)

肝癌在全球癌癥相關(guān)發(fā)病率和死亡率分別排名第6和第4，我國(guó)肝癌發(fā)病率及死亡率分別排名第4和第3，且肝癌新發(fā)病例率上升最快[1-3]。中醫(yī)認(rèn)為肝癌發(fā)病與氣滯、血瘀、濕熱等病理因素瘀滯肝絡(luò)所形成的癌毒有關(guān)，清熱解毒已成為治療肝癌的重要方法之一?，F(xiàn)代藥理研究表明清熱解毒中藥治療肝癌能減輕患者臨床癥狀及體征，其機(jī)制與抑制腫瘤增殖及轉(zhuǎn)移、聯(lián)合化療藥物增強(qiáng)療效、減輕化療藥物不良反應(yīng)等有關(guān)[4-7]。本文對(duì)清熱解毒中藥治療肝癌的作用機(jī)制進(jìn)行綜述。

1 抑制細(xì)胞增殖

肝癌細(xì)胞呈失控增殖，抑制肝癌細(xì)胞增殖是治療肝癌的重要手段。鴉膽子油脂質(zhì)體抑制肝癌HepG2細(xì)胞增殖，且呈劑量依賴性，其機(jī)制與抑制DNA合成、調(diào)控microRNA-95的表達(dá)、阻斷G0/G1向S期發(fā)展有關(guān)[8, 9]。白花蛇舌草提取物熊果酸UA顯著抑制了R-HepG2細(xì)胞的生長(zhǎng)，且呈時(shí)間與劑量依賴性，其機(jī)制為阻滯細(xì)胞周期和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡介導(dǎo)[10]。菊花提取物可以有效減弱異丙腎上腺素(ISO)對(duì)HepG2和MHCC97H細(xì)胞的有絲分裂作用，其機(jī)制是抑制ISO對(duì)腫瘤細(xì)胞的子β2受體激動(dòng)，從而阻止MAPK/ERK1/2信號(hào)通路的激活[11]。

重樓提取物PS1和PS2可以抑制HepG2細(xì)胞增殖，促肝癌細(xì)胞凋亡，且呈劑量依賴性，其機(jī)制與激活p38/MAPK和JNK/MAPK信號(hào)通路、抑制ERK/MAPK和P13K/Akt信號(hào)通路有關(guān)[12, 13]。白頭翁提取物AB4可抑制肝癌細(xì)胞SMMC- 7721增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和自噬，其機(jī)制可能與PI3K/Akt/mTOR信號(hào)失活有關(guān)[14]。黃芩素能夠抑制Bel7402和HepG2細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，其機(jī)制與降低c-Myc在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)、下調(diào)CD24的mRNA和蛋白表達(dá)有關(guān)[15]。藤梨根提取物能夠抑制MHCC97H、MHCC97L、HepG2、SMMC7721、Huh7和Hep3B細(xì)胞增殖，且呈劑量依賴性，其機(jī)制是通過(guò)顯著增強(qiáng)PCSK9表達(dá)，減少低密度脂蛋白水平從而降低肝癌細(xì)胞內(nèi)總膽固醇濃度[16]。這些研究顯示，鴉膽子、白花蛇舌草、菊花、重樓、白頭翁、黃芩、藤梨根能夠抑制肝癌細(xì)胞增殖。

2 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡

細(xì)胞凋亡是指基因調(diào)控的細(xì)胞自主有序的死亡過(guò)程，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡是治療癌癥的重要方法之一。絞股藍(lán)皂苷可以誘導(dǎo)肝癌HepG2、SMMC7721、Huh7細(xì)胞凋亡，且呈時(shí)間和劑量依賴性，其機(jī)制與擾亂細(xì)胞鈣穩(wěn)態(tài)從而觸發(fā)鈣離子依賴性細(xì)胞凋亡有關(guān)[17, 18]。魚(yú)腥草提取物可誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡，抑制其細(xì)胞增殖，其機(jī)制是通過(guò)激活HIF-1A、FOXO3和MEF2A等轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[19]。黃芩苷通過(guò)激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)ATF6信號(hào)通路的分子靶點(diǎn)S2P，誘導(dǎo)HepG2和SMMC7721凋亡[20]，還可通過(guò)上調(diào)Bax和下調(diào)Bcl-2，從而抑制Bel-7402的體外增殖[21]?；⒄忍崛∥锇邹继J醇可以誘導(dǎo)SMMC-7721細(xì)胞凋亡，其機(jī)制與激活caspases 3和caspases 9并同時(shí)上調(diào)p-JNK表達(dá)和下調(diào)p-ERK表達(dá)相關(guān)[24,25]。金銀花提取物可以誘導(dǎo)SMMC7721細(xì)胞凋亡，其機(jī)制與對(duì)于促凋亡ERK信號(hào)通路的激活超過(guò)了促生存AKT/mTOR信號(hào)通路的激活有關(guān)，且可抑制乙肝病毒復(fù)制[22, 23]。這些研究顯示，絞股藍(lán)、魚(yú)腥草、黃芩、虎杖、金銀花能夠誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡。

3 阻滯細(xì)胞周期

細(xì)胞周期是基因組DNA完成復(fù)制后均等地分裂成兩個(gè)相似的細(xì)胞，分為G1、S、G2和M期，G0期屬于細(xì)胞靜止期，阻滯腫瘤細(xì)胞周期能有效抑制其分裂增殖。半枝蓮提取物能夠阻滯HepG2和R-HepG2細(xì)胞周期，其機(jī)制與抑制G2/M期細(xì)胞周期調(diào)控蛋白、細(xì)胞周期蛋白A1和cdc2的表達(dá)有關(guān)[26]。甘草提取物能夠阻滯HepG2細(xì)胞于G2/M期，其機(jī)制是通過(guò)抑制STAT3的激活和降低細(xì)胞周期蛋白B1、CDK1/2和p27的水平[27]。研究表明，大血藤提取物能夠阻滯肝癌HepG-2細(xì)胞于S期，且能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和抑制細(xì)胞增殖[28]。研究表明藤梨根提取物TEO可抑制BEL7402,、BEL7404和SMMC7721細(xì)胞生長(zhǎng)并阻滯于G1期[29]，絞股藍(lán)提取物能夠阻滯Hep3B細(xì)胞于G0/G1期[30, 31]。這些研究顯示，半枝蓮、甘草、大血藤、藤梨根能夠阻滯肝癌細(xì)胞周期。

4 抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移

肝癌患者預(yù)后差主要與惡性腫瘤細(xì)胞遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移有關(guān)。多項(xiàng)研究證實(shí)藤梨根提取物能夠抑制肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移，其機(jī)制之一是通過(guò)下調(diào)DLX2的表達(dá)抑制Hep3B、HepG2、SMMC7721、MHCC97L、MHCC97H和HCCLM3細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化[32]，其二是抑制SKHep1細(xì)胞MAPK和FAK信號(hào)通路，降低PI3K/Akt活性和MMP-2蛋白水平[33]，其三是通過(guò)抑制HCCLM3、MHCC97H、MHCC97L、HepG2、SMMC7721、Huh7、Hep3B和HL7702細(xì)胞EP3表達(dá)，降低VEGF、EGFR、MMP2和MMP9的活化[34]。此外，藤梨根提取物還能與Huh7、HepG2和Hep3B細(xì)胞ATP結(jié)合囊相互作用抑制VEGFR2激酶活性，下調(diào)VEGFR2/Src/FAK/cdc42軸，進(jìn)而降低細(xì)胞骨架微絲的形成，大劑量時(shí)藤梨根與索拉非尼具有協(xié)同化療作用[35]。

白花蛇舌草提取物齊墩果酸和熊果酸能夠抑制Huh7和HepG2細(xì)胞增殖和腫瘤轉(zhuǎn)移的能力，并且能夠調(diào)節(jié)肝功能，葡萄糖代謝和遷移相關(guān)的受體[36]。漢黃芩素能夠抑制MHCC97L和PLC/PRF/5細(xì)胞遷移，其機(jī)制可能與抑制MMP-9活性有關(guān)[37]。野菊花乙醇提取物能夠抑制MHCC97H轉(zhuǎn)移，其機(jī)制是通過(guò)抑制MMP-2與MMP-9的表達(dá)和促進(jìn)TIMP-1與TIMP-2的表達(dá)[38]。夏枯草提取物能抑制肝癌Huh-7 和HA22T細(xì)胞侵襲遷移，其機(jī)制與抑制 VEGF、VEGFR、EGFR和MMP-9的表達(dá)有關(guān)[39]。這些研究顯示，藤梨根、白花蛇舌草、黃芩、野菊花、夏枯草能夠抑制肝癌轉(zhuǎn)移。

5 抑制血管生成

抑制腫瘤血管生成可以改變腫瘤微環(huán)境，減少腫瘤細(xì)胞血氧及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的供給、改善化療藥物向腫瘤內(nèi)部的傳送、抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移等。藤梨根乙醇提取物能有效抑制H22細(xì)胞微血管的形成，其機(jī)制與下調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)的表達(dá)有關(guān)[40]。重樓提取物可抑制SMMC7721、PLC、HepG2、Hep3B和Bel7402中血管生成擬態(tài)(VM)的形成，其機(jī)制是通過(guò)阻斷PI3k-Akt-Twist1-VE-cadherin通路而使VM形成受損，還能通過(guò)抑制Twist1啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄激活和干擾導(dǎo)致VM阻塞[41]。青黛提取物靛玉紅可以抑制腫瘤來(lái)源的內(nèi)皮細(xì)胞Td-EC的血管生成，其與腫瘤組織缺氧、上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化、癌癥干細(xì)胞樣細(xì)胞相關(guān)[42]。

6 其他

免疫功能在抑制腫瘤生長(zhǎng)的過(guò)程中發(fā)揮重要作用，可認(rèn)為與中醫(yī)正氣相關(guān)。半枝蓮提取物能夠改善免疫功能，其機(jī)制與增強(qiáng)NK細(xì)胞毒性、下調(diào)Treg細(xì)胞和Th17細(xì)胞，降低IL-10、TGF-β、IL-17A水平，同時(shí)提高IL-2和IFN-γ水平有關(guān)。此外，半枝蓮提取物還能抑制HepG2體外增殖，且呈劑量依賴性[43]。牛蒡甙元可以誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞自噬，其機(jī)制與通過(guò)抑制自噬通量與減少自噬途徑，從而導(dǎo)致p62積累有關(guān)[44]。青黛提取物靛玉紅通過(guò)抑制HepG2細(xì)胞中YB-1的核定位從而增加HepG2對(duì)放線菌素D的敏感性，放線菌素D能夠抑制腫瘤細(xì)胞RNA的合成從而發(fā)揮抗腫瘤作用[45,46]。黃芩苷可協(xié)同增強(qiáng)納秒脈沖電場(chǎng)(nsPEFs)誘導(dǎo)的QSG7701、MHCC97H和HCCLM3細(xì)胞消融，同時(shí)通過(guò)提高線粒體跨膜電位和減少ROS的生成，保護(hù)正常肝細(xì)胞免受nsPEFs的損傷[47]。馬齒莧提取物顯著降低了HepG2細(xì)胞活力和改變細(xì)胞形態(tài)[48]。

綜上所述，近年研究顯示藤梨根、白花蛇舌草、半枝蓮、黃芩、絞股藍(lán)等清熱解毒類中藥對(duì)肝癌有廣泛的作用，涉及細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期、細(xì)胞轉(zhuǎn)移、血管生成、免疫功能和自噬等方面。深入研究清熱解毒類中藥的作用特點(diǎn)，能夠?yàn)橹嗅t(yī)藥治療肝癌提供更多的選擇。值得一提的是，很多中藥對(duì)肝癌細(xì)胞具有多重作用，如藤梨根、半枝蓮、黃芩等，可以作用于肝癌發(fā)生、發(fā)展的不同環(huán)節(jié)，合理配伍使用這些中藥將有可能進(jìn)一步提高中醫(yī)藥治療肝癌的臨床療效。