于洪華，趙同申，顏紅，丁銳，楊清華

(1.山東華魯制藥有限公司，山東 聊城 252100；2.山東省藥學(xué)科學(xué)院，山東 濟(jì)南 250101)

鹽酸氨溴索注射液是一種呼吸系統(tǒng)藥物，具有促進(jìn)黏液排除的作用及溶解分泌物的特性，它可促進(jìn)呼吸道內(nèi)黏稠分泌物的排除及減少黏液的滯留，因而顯著促進(jìn)排痰，改善呼吸狀況。適用于伴有痰液分泌不正常及排痰功能不良的急性、慢性呼吸道疾病例如慢性支氣管炎急性加重、喘息型支氣管炎及支氣管哮喘的祛痰治療；術(shù)后肺部并發(fā)癥的預(yù)防和治療；早產(chǎn)兒及新生兒的嬰兒呼吸窘迫綜合征(IRDS)的治療[1-2]。其臨床應(yīng)用廣泛，臨床療效好，無明顯毒副作用，且耐受性較好[3-8]。

鹽酸氨溴索注射液于20世紀(jì)80年代初在德國上市，隨后在法國、意大利、日本、西班牙等許多國家上市，商品名：沐舒坦。規(guī)格：2 mL：15 mg，棕色玻璃安瓿包裝。本文研究的鹽酸氨溴索注射液采用聚丙烯安瓿包裝，產(chǎn)品生產(chǎn)吹、灌、封在A級(jí)區(qū)內(nèi)完成，可以將污染風(fēng)險(xiǎn)降到最低，因此產(chǎn)品的安全性更高；同時(shí)不易破碎、使用方便。聚丙烯原料在生產(chǎn)過程中常添加少量抗氧劑(一般為抗氧劑1010、330、1076、168)和除酸劑(一般為鋁鎂滑石)等，以增強(qiáng)聚丙烯材料的穩(wěn)定性。包材中添加劑的加入對所包裝的藥品就可能引入安全性風(fēng)險(xiǎn)，《歐洲藥典》規(guī)定注射劑包裝中抗氧劑的最大用量為0.3%。本文參考《歐洲藥典》的相關(guān)規(guī)定、《化學(xué)藥品注射劑與塑料包裝材料相容性指導(dǎo)原則(試行)》以及相關(guān)文獻(xiàn)[9]，對聚丙烯安瓿是否與鹽酸氨溴索注射液具有相容性進(jìn)行研究及評估。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 1260高效液相色譜儀(美國安捷倫公司)；TE612-L和BT125D電子天平(賽多利斯公司)；色譜柱：Cosmosil C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)。

1.2 試藥 抗氧劑1010對照品(EP，批號(hào)：3.1)；抗氧劑330對照品(EP，批號(hào)：2.1)；抗氧劑1076對照品(EP，批號(hào)：2.2)；抗氧劑168對照品(EP，批號(hào)：4.0)。甲醇(色譜純，山東禹王實(shí)業(yè)有限公司禹城化工廠)；乙腈(色譜純，天津賽孚瑞科技有限公司)；乙醇(分析純，天津富宇化工精細(xì)有限公司)；二氯甲烷(分析純，天津富宇精細(xì)化工有限公司)；水(去離子水，自制)。

1.3 樣品 空白聚丙烯安瓿及鹽酸氨溴索注射液(批號(hào)：C1708211、C1708221、C1708231)，由山東華魯制藥有限公司生產(chǎn)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇為流動(dòng)相；檢測波長274 nm；柱溫25 ℃；流速1 mL·min-1。

2.2 對照品溶液的制備 分別精密稱取抗氧劑對照品1010、330、1076、168均約15 mg，置同一25 mL量瓶中，加1 mL二氯甲烷，溶解后，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液；精密量取5 mL，置25 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 取空白聚丙烯輸液瓶剪碎，精密稱取2.5 g，精密加入乙腈20 mL，精密稱定，回流6 h，冷卻后用乙腈補(bǔ)失重量，作為提取試驗(yàn)供試品溶液。

取鹽酸氨溴索注射液穩(wěn)定性考察樣品各時(shí)間點(diǎn)的樣品溶液作為遷移試驗(yàn)供試品溶液。

2.4 定量限和檢測限 取“2.2”項(xiàng)下的對照品溶液，用甲醇定量稀釋成不同倍數(shù)的系列溶液，按上述色譜條件進(jìn)行測定。測得抗氧劑1010、330、1076、168的定量限分別為24、24、36和36 ng；檢測限分別7.2、7.2、10.8和10.8 ng。

2.5 精密度試驗(yàn) 精密量取“2.2”項(xiàng)下的對照品溶液20 μL，注入高效液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6針，記錄色譜圖及峰面積。結(jié)果：抗氧劑對照品1010、330、1076、168對照品溶液平均峰面積的RSD分別為：0.14%、0.07%、0.07%和0.05%。

2.6 線性與范圍 取“2.2”項(xiàng)下的對照品貯備液，精密量取不同體積，用甲醇稀釋至不同濃度的溶液6份，精密量取各溶液20 μL，分別注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖及峰面積，結(jié)果見表1。

表1 4種抗氧劑線性試驗(yàn)結(jié)果

可見，4種抗氧劑在各自濃度范圍內(nèi)，線性關(guān)系均良好。

2.7 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn) 分別于0、2、4、6、8、10、12、24 h，精密量取對照品溶液20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖及峰面積。結(jié)果對照品溶液中抗氧劑1010、330、1076、168峰面積的RSD分別為0.36%、0.46%、0.39%、0.29%。說明抗氧劑的對照品溶液24 h穩(wěn)定性良好。

2.8 回收率試驗(yàn)

2.8.1 抗氧劑溶劑提取回收試驗(yàn) 對照品溶液：照“2.2”項(xiàng)下制備。

供試品溶液：取空白聚丙烯安瓿，清洗干凈，晾干，剪碎，取1.25 g，精密稱定，置圓底燒瓶中，分別精密加入對照品溶液2 mL，然后加入乙腈18 mL，回流6 h。同法制備供試品溶液6份。作為提取回收率供試品溶液。

取對照品溶液及供試品溶液各20 μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖及峰面積。計(jì)算回收率，結(jié)果見表2。

表2 4種抗氧劑提取回收率試驗(yàn)結(jié)果

4種抗氧劑的提取回收率均達(dá)到95%以上。

2.8.2 抗氧劑在藥液中的遷移回收率試驗(yàn) 對照品溶液：照“2.2”項(xiàng)下制備。

供試品溶液：量取鹽酸氨溴索藥液(樣品批號(hào)：C1708221)10 mL，再精密量取對照品貯備液0.5 mL，搖勻，同法制備供試品溶液6份，作為遷移回收率供試品溶液。

取對照品溶液及供試品溶液各20 μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖及峰面積。計(jì)算回收率，結(jié)果見表3。

表3 4種抗氧劑在藥液中的遷移回收率試驗(yàn)結(jié)果

4種抗氧劑在藥液中的遷移回收率均達(dá)到90%以上。

2.9 樣品測定 樣品批號(hào)：C1708211、 C1708221、C1708231。對照品溶液：照“2.2”項(xiàng)下制備。供試品溶液：照“2.3”項(xiàng)下制備。

取對照品溶液和供試品溶液各20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖及峰面積，用外標(biāo)法計(jì)算含量，結(jié)果見表4～5。典型圖譜見圖1～3。

圖1 對照品溶液HPLC圖(出峰順序依次為：抗氧劑1010、330、1076、168)

表4 聚丙烯安瓿提取溶液中抗氧劑含量測定結(jié)果

提取試驗(yàn)結(jié)果：檢測到可提取物有3個(gè)，為抗氧劑1010、抗氧劑330和抗氧劑168，其中抗氧劑330含量最高。

表5 遷移試驗(yàn)樣品中抗氧劑遷移量測定結(jié)果

遷移試驗(yàn)結(jié)果：鹽酸氨溴索注射液3批樣品在長期24月及加速6月穩(wěn)定性考察中4種抗氧劑均未檢出。

3 討論

3.1 抗氧劑提取溶劑的選擇 分別采用乙腈、95%乙腈、乙醇，對空白聚丙烯安瓿進(jìn)行回流提取6 h，測定提取液中各抗氧劑的含量，結(jié)果：提取溶劑為乙腈時(shí)，各種抗氧劑提取量最多，故選擇乙腈為提取溶劑。

圖2 提取試驗(yàn)抗氧劑測定HPLC圖(出峰順序依次為：抗氧劑1010、330、168)

圖3 遷移試驗(yàn)抗氧劑測定HPLC圖

3.2 抗氧劑提取時(shí)間的選擇 以乙腈為提取溶劑，對空白聚丙烯安瓿分別回流提取3、4、5、6、6、7 h，測定提取液中各抗氧劑的含量，結(jié)果：提取6 h和7 h的樣品檢出4種抗氧劑的種類和含量基本一致，說明提取6 h即能將4種抗氧劑基本提取完全，因此，回流提取的時(shí)間選擇6 h。

3.3 強(qiáng)制遷移研究 取聚丙烯安瓿包裝的鹽酸氨溴索注射液，置高壓蒸汽滅菌鍋中，121 ℃條件維持60 min，測定該樣品溶液中各抗氧劑的含量，以考察包材中抗氧劑向藥液中遷移的可能性。結(jié)果測得抗氧劑1010、330、168含量分別為0.74、0.71、0.44 μg·mL-1，抗氧劑1076未檢出。說明高溫高壓等劇烈條件可使聚丙烯材料中添加的抗氧劑遷移入藥液之中。但本試驗(yàn)條件下的強(qiáng)制遷移量均較小。

3.4 提取試驗(yàn)及強(qiáng)制遷移研究中，檢出抗氧劑1010、330、168，但含量均遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于0.3%的限度(即3 000 μg·g-1)；遷移試驗(yàn)中鹽酸氨溴索注射液3批樣品長期24月穩(wěn)定性考察中均未檢出抗氧劑。說明包材聚丙烯安瓿中抗氧劑沒有遷移入藥液或遷移量很小。表明本品聚丙烯輸液瓶中的添加劑-抗氧劑不會(huì)改變藥品的有效性及安全性，對患者的安全性風(fēng)險(xiǎn)很小，說明本品包裝材料與藥品具有良好的相容性。

3.5 聚丙烯安瓿包裝注射液產(chǎn)品由于其自身的優(yōu)點(diǎn)，近幾年獲得高速推廣和發(fā)展，但并非所有注射劑產(chǎn)品皆可采用聚丙烯安瓿包裝。選用時(shí)應(yīng)考慮聚丙烯安瓿材料本身添加了少量的添加劑且具有透氣性，需要分析產(chǎn)品的特性和包材的特性，然后根據(jù)相關(guān)指導(dǎo)原則進(jìn)行研究，以確保產(chǎn)品的安全性、有效性和治療可控。