卓少斐,王永存,董善彪，王雨千，崔鶴馨，付曉霞

1.寧波市奉化區(qū)農(nóng)機(jī)畜牧發(fā)展中心,浙江寧波 315000；2.寧波市奉化區(qū)蕭王廟街道，浙江寧波 315000；3.寧波市奉化區(qū)大堰鎮(zhèn)，浙江寧波 315000；4.寧波奉化同發(fā)梅花鹿養(yǎng)殖專業(yè)合作社，浙江寧波 315000；5.長(zhǎng)春市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，吉林長(zhǎng)春 130000

從養(yǎng)鹿業(yè)的發(fā)展形式上看，品質(zhì)較好的母鹿，產(chǎn)茸量高的梅花鹿公鹿，就意味著飼養(yǎng)成本隨之相對(duì)下降，獲得的利潤(rùn)相應(yīng)的就多。種公鹿種母鹿在遺傳育種以及品種質(zhì)量的提高上有著非常重要的作用，所以，梅花鹿的人工授精技術(shù)就是解決品種質(zhì)量的關(guān)鍵。而梅花鹿人工授精中，輸精時(shí)機(jī)和時(shí)間的選擇至關(guān)重要。本試驗(yàn)對(duì)梅花鹿同期發(fā)情后，采取不同的時(shí)間輸精，通過(guò)比較受胎率的高低，從而尋找最佳輸精時(shí)間，提高人工授精的成功率。

1 材料和方法

1.1 供試動(dòng)物

選擇75頭寧波奉化同發(fā)梅花鹿養(yǎng)殖專業(yè)合作社的3～6歲經(jīng)產(chǎn)母梅花鹿作為母本。

1.2 材料

孕馬血清促性腺激素注射液（PMSG），杭州動(dòng)物藥品廠，1 000 IU/支；甲基炔孕酮栓劑（CIDR），新西蘭進(jìn)口。

精液：采用吉林某鹿場(chǎng)同一頭梅花鹿種公鹿（產(chǎn)茸在6 kg以上，經(jīng)過(guò)監(jiān)測(cè)后健康無(wú)疾?。┑木?00份（每份精子含量不少于1 000萬(wàn)），其中25份備用，75份試驗(yàn)用。精液用細(xì)管保存在-196 ℃液氮罐內(nèi)貯存運(yùn)輸。

1.3 精液品質(zhì)檢查

精液在從液氮罐拿出后，立即放入38 ℃恒溫水浴箱內(nèi)解凍，在400倍顯微鏡下檢查精子的活力和密度等情況。密度用血球計(jì)數(shù)器計(jì)算，以1 mL精子數(shù)量計(jì)算精子數(shù)量。

1.4 分組方法

將選取的90頭梅花鹿隨機(jī)分為A、B、C、D、E五組，其中A組為對(duì)照組。

1.5 同期發(fā)情方法

在2020年9月25日，都采用同期發(fā)情的方法處理，即CIDR+PMSG的方法，即75頭母鹿每頭陰道埋入CIDR栓，11 d后，麻醉后取出，同時(shí)，每頭母鹿肌肉注射350 IU的PMSG。

1.6 試驗(yàn)方法

分別在取栓并注射PMSG后42 h（A組）、50 h（B組）、58 h（C組）、66 h（D組）、74 h（E組）分別給予輸精。輸精方法：采用開(kāi)膣器法一次輸精，輸精部位在子宮內(nèi)。

輸精后，持續(xù)記錄各組返情鹿的情況，并統(tǒng)計(jì)。

統(tǒng)計(jì)各組懷孕并產(chǎn)仔（含流產(chǎn)）的情況，產(chǎn)仔或流產(chǎn)記為受胎，并統(tǒng)計(jì)。

母鹿一次或多次出現(xiàn)返情，并在產(chǎn)仔期過(guò)后仍未產(chǎn)仔視為未受孕。

1.7 試驗(yàn)結(jié)果

表1 輸精時(shí)間及結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

1.8 試驗(yàn)分析

1.8.1 從試驗(yàn)觀察出懷孕率呈拋物線趨勢(shì)，其中A、B、E受孕率較C、D低，p＜0.05，其差異顯著，C組受孕率最高。

1.8.2 通過(guò)同期發(fā)情后，人工授精未懷孕母鹿均出現(xiàn)返情現(xiàn)象。

1.9 試驗(yàn)結(jié)論

1.9.1 結(jié)合同期發(fā)情技術(shù)進(jìn)行人工授精，輸精時(shí)間選擇在取栓并注射PMSG后58～66 h左右較好。

1.9.2 同期發(fā)情技術(shù)最好選擇CIDR+PMSG的方法較好。

1.9.3 人工授精成功率受到客觀因素以及人為因素影響的因素較多。比如：陰道埋栓掉栓問(wèn)題，人工輸精位置的問(wèn)題，母鹿喂養(yǎng)的胖瘦問(wèn)題等。必須有熟練的技術(shù)人員在優(yōu)良的設(shè)施和整潔的環(huán)境工作，才能取得較好的成功率。

1.9.4 從試驗(yàn)看出，冷凍精子的活力和精子在輸精后的子宮內(nèi)存活時(shí)間有一定的關(guān)系，其活力和鮮精比較還是下降的較快。

參考文獻(xiàn)：略