劉洋生

（江蘇省鹽城市響水縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，江蘇 鹽城 224600）

精氨酸是一種功能性氨基酸，是魚類機(jī)體內(nèi)一種必需氨基酸。目前，對(duì)精氨酸的研究主要集中在哺乳動(dòng)物繁殖性能方面[1]。精氨酸在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)可以參與蛋白質(zhì)的沉積與代謝，其代謝產(chǎn)物一氧化氮和多胺會(huì)參與機(jī)體細(xì)胞的增殖與分化，并能調(diào)節(jié)基因的表達(dá)[2]。精氨酸及其代謝產(chǎn)物一氧化氮、瓜氨酸及鳥氨酸可以增強(qiáng)機(jī)體細(xì)胞的殺菌和吞噬能力；提高免疫球蛋白含量，進(jìn)而提高動(dòng)物機(jī)體的免疫功能[3]。在水產(chǎn)養(yǎng)殖方面的研究結(jié)果表明，精氨酸可以顯著提高斑點(diǎn)叉尾機(jī)體內(nèi)一氧化氮的含量，提高機(jī)體抵抗有害菌的能力[4]；精氨酸可以顯著提高美國(guó)紅魚和條紋鱸機(jī)體溶菌酶活性，增強(qiáng)了機(jī)體的免疫功能[5]。

鯉（Cyprinus Carpio）原產(chǎn)亞洲，屬于溫帶雜食性淡水魚，生長(zhǎng)較快、肉質(zhì)鮮美，是我國(guó)淡水魚養(yǎng)殖主要品種之一。目前，精氨酸在鯉養(yǎng)殖中的應(yīng)用較少?，F(xiàn)以鯉為研究對(duì)象，探討日糧添加不同水平的精氨酸對(duì)其免疫功能的影響，以期為精氨酸科學(xué)、合理地應(yīng)用于鯉的養(yǎng)殖生產(chǎn)中提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用精氨酸購(gòu)自臺(tái)灣MDbio 公司，含量大于90%。試驗(yàn)鯉購(gòu)自當(dāng)?shù)厮a(chǎn)養(yǎng)殖基地。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選取120 尾體質(zhì)量相近、健康的鯉，按照隨機(jī)分組原則，將鯉分成4 個(gè)試驗(yàn)組，每組3 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10 尾。試驗(yàn)1 組為對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)2 組、3 組、4 組依次在基礎(chǔ)日糧中添加1%，2%，3%的精氨酸。試驗(yàn)周期為8 周。試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧原料組成及含量如表1 所示。其中，營(yíng)養(yǎng)成分含量為：粗蛋白30.75%，脂肪5.59%，灰分8.83%。

表1 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧原料組成及含量 %

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)期間，每天飼喂4 次，一周調(diào)整一次飼喂量。每天換水 1/3，保證水溫在 25 ℃，ρ（氨氮）＜0.01 mg/L，ρ（溶解氧）＞5.5 mg/L。

1.4 測(cè)定指標(biāo)和方法

試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天，鯉禁食24 h，每組挑選健康的10 尾鯉，麻醉后于尾靜脈采血，4 ℃靜置24 h 后，離心取上層血清，于-20 ℃保存，用于測(cè)定血液中補(bǔ)體C3 和補(bǔ)體C4 含量。試驗(yàn)鯉解剖后去除頭腎和脾臟，于-20 ℃保存，用于測(cè)定溶菌酶和一氧化氮活性。以上各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定所用試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所，檢測(cè)方法參照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2015 進(jìn)行整理統(tǒng)計(jì)后，再采用SPSS 22.0 進(jìn)行單因素的方差分析，并用LSD 法對(duì)組間數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較。P<0.05 作為顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果以（平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤差）呈現(xiàn)。

2 結(jié)果

日糧中添加不同水平的精氨酸對(duì)鯉機(jī)體免疫功能的影響見表2。由表2 可見，在鯉日糧中添加精氨酸對(duì)鯉頭腎中的溶菌酶活性和血液中補(bǔ)體C4含量無(wú)顯著影響（P>0.05）。與對(duì)照組相比，添加2%的精氨酸可以顯著提高頭腎中一氧化氮活性（P<0.05），1%和3%精氨酸組頭腎中一氧化氮活性有升高趨勢(shì)，但差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。2%精氨酸組脾臟中溶菌酶活性較對(duì)照組顯著提高（P<0.05），1%和3%精氨酸組脾臟中溶菌酶活性有升高趨勢(shì)，但差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。1%，2%，3%精氨酸組的脾臟中一氧化氮活性均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。2%精氨酸組血清中補(bǔ)體C3 含量較對(duì)照組顯著提高（P<0.05），1%和3%精氨酸組血清中補(bǔ)體C3 含量有升高趨勢(shì)，但差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

表2 日糧中添加不同水平的精氨酸對(duì)鯉機(jī)體免疫功能的影響①

3 討論

研究發(fā)現(xiàn)，在鯉日糧中添加一定劑量的精氨酸可以顯著提高提高頭腎中一氧化氮活性、脾臟中溶菌酶活性、血清中補(bǔ)體C3 含量、脾臟中一氧化氮活性，說(shuō)明精氨酸可以有效地調(diào)節(jié)鯉機(jī)體的免疫功能，提高機(jī)體抗病力。廖英杰等[6]研究表明，在團(tuán)頭魴幼魚日糧中補(bǔ)充一定劑量的精氨酸可以顯著提高血清中補(bǔ)體C3 含量，有效地提高了機(jī)體的抗感染能力。程鎮(zhèn)燕等[7]研究發(fā)現(xiàn)，隨著精氨酸濃度的提高，鯉血清和肝胰臟中一氧化氮含量顯著提高。精氨酸提高鯉機(jī)體免疫功能的主要原因可能是精氨酸在機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的一氧化氮可以殺死鯉機(jī)體內(nèi)的細(xì)菌、寄生蟲、病毒等有害物質(zhì)，并能有效地抑制癌癥細(xì)胞的增殖，進(jìn)而提高鯉機(jī)體的免疫力和抗病能力[8]。

4 結(jié)論

該試驗(yàn)結(jié)果表明，添加2%的精氨酸可以顯著提高頭腎中一氧化氮活性、脾臟中溶菌酶活性、血清中補(bǔ)體C3 含量，1%，2%，3%精氨酸組的脾臟中一氧化氮活性均顯著提高。研究表明，在鯉日糧中添加一定劑量的精氨酸可顯著提高機(jī)體的免疫功能，且最適添加比例為2%。