文│聶后福（湖南省瀏陽市淳口鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)農(nóng)村辦）

劉增再 楊輝 朱紅剛（湖南省長沙市動植物疫病預(yù)防控制中心）

黃甜（湖南省瀏陽市佳和養(yǎng)殖專業(yè)合作社）

近年來，隨著養(yǎng)禽業(yè)工廠化、商品化，湖南省瀏陽市引入了湘黃雞、桃源雞、東安雞等外來地方品種家禽，在利用地方品種獨特優(yōu)良性狀的基礎(chǔ)上，經(jīng)過長期的生產(chǎn)實踐培育出瀏黃雞、香黃雞等優(yōu)良地方品種家禽，對瀏陽市養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展起到了推動作用。高致病性禽流感、新城疫、禽白血病和雞白痢是嚴(yán)重危害我國家禽業(yè)健康發(fā)展的四種主要疫病，在我國大部分地方家禽中普遍存在，且發(fā)病種類和發(fā)病數(shù)量也長期居高不下，給家禽養(yǎng)殖場戶造成嚴(yán)重的經(jīng)濟損失，嚴(yán)重影響地方家禽品種的健康發(fā)展。為掌握湖南省瀏陽市地方品種規(guī)模雞場主要動物疫病的流行情況，2020年7月～2021年6月，筆者對瀏陽市的4個規(guī)模雞場進(jìn)行禽流感、新城疫、雞白痢和禽白血病4種疫病的監(jiān)測，以期為瀏陽市的地方品種雞主要疫病凈化工作提供依據(jù)。

一、材料與方法

1.試驗動物。由4個以地方品種為主的規(guī)模禽場提供，各養(yǎng)殖場布局規(guī)范合理，生物安全條件較好，設(shè)施設(shè)備齊全，管理制度健全，常年存欄商品生態(tài)土雞8萬多只，蛋雞5萬余羽，年出欄商品家禽30萬只左右，其中A場為湘黃雞，B場為桃源雞，C場為雪峰烏骨雞，D場為其他品種混養(yǎng)。

2.樣品采集。由4個規(guī)模禽場隨機從翅靜脈采集480份血液樣品，血清自然析出后置于1.5毫升離心管中，可直接進(jìn)行血清學(xué)抗體檢測。由4個規(guī)模雞場隨機采集480份咽-泄殖腔棉拭子樣品，以1.5毫升離心管取1毫升磷酸鹽緩沖液（pH7.2），用棉簽在雞只咽喉、泄殖腔內(nèi)左轉(zhuǎn)3圈，右轉(zhuǎn)3圈，刮取咽喉、泄殖腔內(nèi)側(cè)3～4厘米處黏液，注意不要刮出血。刮取后，將棉簽頭折斷放于離心管中靜置過夜，浸出液上清可直接進(jìn)行病原學(xué)檢測。

表1 4個規(guī)模雞場主要疫病血清學(xué)抗體檢測結(jié)果統(tǒng)計

3.檢測試劑。禽流感H5亞型（Re-11）、H5亞型（Re-12）、H7亞型（Re-2）和新城疫抗體檢測試劑，購于哈爾濱國生生物科技股份有限公司（批號分別為20191209、20191106、20191206和20191212）；禽白血病P27抗原檢測試劑（批號為MR358），購于IDEXX公司；雞白痢抗體試劑，購于北京中海生物科技有限公司（批號201801）；禽流感H5病毒、禽流感H7病毒和新城疫病毒核酸實時熒光RT-PCR檢測試劑，購于中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司（批號分別為20201007、20201208和20201106）。

4.檢測方法。血清抗體檢測，參照國家或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，按照試劑配套說明書進(jìn)行操作和結(jié)果判定。病毒核酸提取，取采集的咽-泄殖腔棉拭子浸出上清液200微升，運用西安天隆科技有限公司的核酸提取儀以及配套核酸提取試劑盒（磁珠法）提取病毒核酸，按試劑盒說明書進(jìn)行操作。實時熒光定量PCR檢測，按照相應(yīng)疫病的病毒核酸檢測試劑盒說明書進(jìn)行操作及結(jié)果判定。

二、結(jié)果

1.血清學(xué)抗體檢測結(jié)果。對480份血清學(xué)樣品分別進(jìn)行禽流感H5亞型（Re-11和Re-12）、禽流感H7亞型（Re-2）、新城疫抗體、雞白痢抗體檢測。從表1可知，禽流感H5亞型（Re-12）、禽流感H7亞型（Re-2）、新城疫抗體合格率均為100%；禽流感H5亞型（Re-11）抗體合格率C場為95%（114/120），其他三個場均為100%（120/120）。雞白痢抗體陽性率分別為：8.33%（10/120）、4.17%（5/120）、12.5%（15/120）和10.83%（13/120）。

2.病原學(xué)檢測結(jié)果。對480份咽-泄殖腔棉拭子樣品分別進(jìn)行禽流感H5亞型病毒核酸、禽流感H7亞型病毒核酸、新城疫病毒核酸、禽白血病病毒P27抗原檢測。從表2可知，禽流感H5亞型、H7亞型和新城疫病毒核酸檢測全部為陰性；禽白血病病毒P27抗原陽性率分別為11.67%（14/120）、5.83%（7/120）、24.17%（29/120）和17.5%（21/120）。

三、分析與討論

對4個地方品種規(guī)模雞場血清樣品分別檢測禽流感H5亞型（Re-11和Re-12）、禽流感H7亞型（Re-2）和新城疫抗體，檢測結(jié)果見表1。4個規(guī)模雞場的禽流感H5亞型、H7亞型和新城疫免疫抗體合格率較高，均超過95%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的不低于70%的標(biāo)準(zhǔn)。咽-泄殖腔棉拭子均未檢測出禽流感H5亞型、H7亞型和新城疫病毒核酸，雞群未感染相應(yīng)病毒。說明該4個規(guī)模雞場高致病性禽流感和新城疫免疫程序合理，疫苗免疫效果良好，為雞群提供了較好的保護力。

從雞白痢抗體監(jiān)測結(jié)果看，4個規(guī)模雞場均存在不同程度的感染，B場檢出率最低（4.17%），C場檢出率最高（12.5%），陽性感染率相差不大。目前雞白痢并沒有疫苗，主要以凈化為主要的綜合防控措施。

從禽白血病病毒P27抗原監(jiān)測結(jié)果看，4個規(guī)模雞場均檢出了陽性，陽性率在5.83%～24.17%之間，說明4個規(guī)模雞場在一定范圍內(nèi)存在禽白血病隱性感染情況，但由于未進(jìn)行禽白血病A/B和J亞群病毒的抗體檢測，雞群禽白血病真實感染率還需作進(jìn)一步檢測來確定，而且不同類型雞泄殖腔棉拭子禽白血病毒P27抗原檢測法存在較高的假陽性率和漏檢率。禽白血病尚無疫苗和特效藥，有效的防控方法是以“檢測-淘汰陽性雞”為主的凈化措施。

從監(jiān)測結(jié)果來看，4個規(guī)模雞場禽流感和新城疫的防控效果較為理想，基礎(chǔ)免疫效果良好，未檢出相應(yīng)的病原。禽白血病和沙門氏菌病存在一定程度的感染，且禽白血病感染較為嚴(yán)重，主要是因為管理水平參差不齊，技術(shù)操作不規(guī)范，清欄、消毒等措施落實不徹底。因此，要加強日常管理，提高生物安全意識，嚴(yán)格落實各項消毒制度，從而降低禽白血病和雞白痢的發(fā)生及危害。

四、結(jié)論

通過對湖南省瀏陽市4個地方品種規(guī)模雞場的960份樣品進(jìn)行的4種主要動物疫病免疫抗體和病原學(xué)的監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)該4個雞場禽流感、新城疫免疫抗體水平良好，雞群未攜帶相應(yīng)病原，禽白血病和雞白痢存在帶毒情況，且均為混合感染。因此，要重點加強養(yǎng)殖環(huán)節(jié)雞白痢和禽白血病的防控，有條件的規(guī)模雞場可探索開展“兩白”的凈化工作。

表2 4個規(guī)模雞場主要疫病病原學(xué)檢測結(jié)果統(tǒng)計