梁 博, 李國東, 崔 昭

(1. 河北省保定市第二醫(yī)院 皮膚科, 河北 保定, 071000;2. 河北省保定市第一中心醫(yī)院 消化三科, 河北 保定, 071000)

玫瑰痤瘡為臨床常見疾病，是主要發(fā)生在顏面中部的一種慢性炎癥性皮膚病[1]。玫瑰痤瘡主要表現(xiàn)為陣發(fā)性潮紅、紅斑、丘疹、膿皰等癥狀[2], 少數(shù)患者可發(fā)展成鼻贅，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。玫瑰痤瘡的發(fā)生與天然免疫、微生物感染、血管神經(jīng)功能失調(diào)及皮膚屏障受損等因素有關(guān)[3]。研究[4]表明，玫瑰痤瘡患者常伴有菌群失調(diào)，與克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎等胃腸道疾病有關(guān)。內(nèi)毒素為革蘭陰性菌的主要致病物質(zhì)，與腸道疾病感染關(guān)系密切[5], 能夠引發(fā)白細(xì)胞反應(yīng)、發(fā)熱反應(yīng)、內(nèi)毒素休克等毒性反應(yīng)。血管活性腸肽是一種神經(jīng)遞質(zhì)，能夠舒張腸道平滑肌，是胃腸道疾病研究的重要指標(biāo)[6]。本研究分別使用凝膠法和免疫組化法檢測內(nèi)毒素、血管活性腸肽在玫瑰痤瘡患者中的表達(dá)水平，探討內(nèi)毒素、血管活性腸肽與腸道菌群失調(diào)的相關(guān)性，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2018年10月—2020年6月收治的玫瑰痤瘡患者70例為玫瑰痤瘡組，同期體檢健康患者70例為對照組。玫瑰痤瘡組納入標(biāo)準(zhǔn): ① 所有患者均知情本研究內(nèi)容并由本院倫理委員會批準(zhǔn); ② 所有患者均符合《中國玫瑰痤瘡診療專家共識》[7]中玫瑰痤瘡的診斷標(biāo)準(zhǔn); ③ 能夠配合并完成本研究內(nèi)容的患者。排除標(biāo)準(zhǔn): ① 合并其他皮膚疾病患者; ② 合并嚴(yán)重肝腎功能不全患者; ③合并心血管疾病、腫瘤疾病患者。玫瑰痤瘡的診斷必備條件: 鼻部或口周或面頰無明顯誘因出現(xiàn)陣發(fā)性潮紅，且受紫外線、情緒及溫度等影響，或有持久性紅斑出現(xiàn)。次要條件: ① 眼部癥狀; ② 口周、面頰及鼻部肥大增生改變; ③ 鼻部、口周或面頰丘膿皰疹或丘疹; ④ 鼻部、口周或面頰毛細(xì)血管擴(kuò)張; ⑤ 瘙癢、干燥、刺痛或灼熱等皮膚過敏癥狀。排除因局部外用糖皮質(zhì)激素或化學(xué)換膚或口服異維A酸膠囊等明顯誘因引起的皮膚屏障受損導(dǎo)致的持久性紅斑或陣發(fā)性潮紅。滿足必備條件及1個(gè)次要條件即可確診。對照組年齡22～45歲，平均(33.42±3.73)歲; 體質(zhì)量指數(shù)(BMI)為19.60～22.43 kg/m2, 平均(21.51±0.68) kg/m2; 無皮膚問題及胃腸疾病。玫瑰痤瘡組年齡20～46歲，平均(32.89±3.71)歲; 病程3個(gè)月～6年，平均(2.58±0.65)年; BMI為20.10～22.62 kg/m2, 平均(21.64±0.69) kg/m2; 輕度45例，中度15例，重度10例。2組患者年齡、性別、BMI等資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。

表1 2組患者一般資料比較

1.2 方法

采集患者清晨空腹靜脈血5 mL, 以3 000轉(zhuǎn)/min的速度分離血清，于-30 ℃冰箱內(nèi)保存待檢。分別使用凝膠法、免疫組化法檢測血清內(nèi)毒素、血管活性腸肽水平，試劑盒均購自上海伊華公司。腸道菌群培養(yǎng)方法: 使用無菌便盒收取大便標(biāo)本，使用系列稀釋法稀釋大便，使用雙歧桿菌BS培養(yǎng)基(Bifidobacterium BS Medium)250培養(yǎng)雙歧桿菌; 經(jīng)MRS培養(yǎng)基(deMan-Rogosa-Sharpe medium)培養(yǎng)乳酸桿菌; 麥康凱瓊脂板培養(yǎng)大腸埃希桿菌; 腸球菌培養(yǎng)基(MERCK)培養(yǎng)糞腸球菌。乳酸桿菌和雙歧桿菌的培養(yǎng)需在37 ℃的厭氧環(huán)境中使用孵箱培養(yǎng)3 d, 大腸埃希桿菌和糞腸球菌需在37 ℃的需氧條件下使用孵箱培養(yǎng)2～4 d。使用ATB(Automicrobic)半自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)鑒定細(xì)菌，以每克糞便濕重中菌落形成的單位對數(shù)值表示結(jié)果(lg CFU/g)。

1.3 皮損面積評分

參照2004年美國國家玫瑰痤瘡協(xié)會專家委員會制定的分型分級評分標(biāo)準(zhǔn)[8]: 將重度、輕度、中度患者(主癥狀評分為0～3分)作為研究對象，其中輕度45例，中度15例，重度10例。皮損評分標(biāo)準(zhǔn)為: 0分為無皮損、丘疹及膿包、毛細(xì)血管擴(kuò)張及紅斑; 1分為皮損面積不足面部面積的10%, 丘疹及膿包0～10個(gè)，毛細(xì)血管輕度擴(kuò)張，紅斑輕度發(fā)紅; 2分為皮損面積為面部面積的10%～30%, 丘疹及膿包10～20個(gè)，毛細(xì)血管中度擴(kuò)張，紅斑中度發(fā)紅; 3分為皮損面積超過面部面積的30%，丘疹及膿包≥20個(gè)，毛細(xì)血管重度擴(kuò)張，紅斑重度發(fā)紅或紫紅。依據(jù)嚴(yán)重程度指數(shù)及皮損面積，分別對皮損面積、丘疹與膿包指數(shù)、毛細(xì)血管擴(kuò)張、紅斑進(jìn)行評分，皮損總面積評分=(丘疹及膿包數(shù)目+毛細(xì)血管擴(kuò)張?jiān)u分+紅斑評分)×皮損面積評分。玫瑰痤瘡組皮損面積評分為5～23分，平均評分為(14.12±3.25)分。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS 22.0軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用t檢驗(yàn); 多組間差異比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn); 相關(guān)性行Pearson相關(guān)性分析，計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn);P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 2組患者血清內(nèi)毒素、血管活性腸肽水平比較

玫瑰痤瘡組血清內(nèi)毒素、血管活性腸肽水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 2組血清內(nèi)毒素、血管活性腸肽水平比較

2.2 2組患者菌群情況比較

玫瑰痤瘡組腸球菌、大腸埃希桿菌、糞腸球菌數(shù)量高于對照組，雙歧桿菌數(shù)量、雙歧桿菌與腸桿菌的數(shù)量比值(B/E值)低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 2組患者菌群情況比較 lg CFU/g

2.3 不同程度玫瑰痤瘡患者血清內(nèi)毒素、血管活性腸肽水平比較

輕度、中度、重度患者血清內(nèi)毒素、血管活性腸肽水平呈逐漸升高趨勢，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 不同程度玫瑰痤瘡患者血清內(nèi)毒素、血管活性腸肽水平比較

2.4 血清內(nèi)毒素、血管活性腸肽與腸道菌群數(shù)量的相關(guān)性分析

將血清內(nèi)毒素、血管活性腸肽與腸道菌群分布情況行Pearson相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，血清內(nèi)毒素、血管活性腸肽水平與腸道菌群中腸球菌、大腸埃希桿菌、糞腸球菌數(shù)量均呈正相關(guān)(P<0.05), 與雙歧桿菌數(shù)量均呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。見表5。

表5 血清內(nèi)毒素、血管活性腸肽與腸道菌群數(shù)量的相關(guān)性分析

3 討 論

腸道菌群在維生素合成、免疫調(diào)節(jié)及營養(yǎng)物質(zhì)代謝等過程中發(fā)揮重要作用[9]。腸道菌群的數(shù)量、組成、生物活性及分布與人體消化系統(tǒng)疾病、代謝活動(dòng)、感染及免疫功能等密切相關(guān)[10]。在人體腸道菌群中，雙歧桿菌是腸道的優(yōu)勢菌群，是保護(hù)性有益菌; 腸球菌、大腸埃希桿菌、糞腸球菌均為致病菌[11-12]。定植抗力是評估機(jī)體菌群紊亂的常用指標(biāo), B/E為雙歧桿菌與腸桿菌的比值, B/E≥1表示腸道定植抗力正常, B/E<1表示定植抗力降低。研究[13]發(fā)現(xiàn)，腸道菌群失調(diào)與代謝綜合征、炎癥性腸病、2型糖尿病、肥胖、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、高血壓等多種疾病有關(guān)。早在1930年，有學(xué)者[14]提出“腸-腦-皮膚”軸理論，認(rèn)為精神狀態(tài)、皮膚狀態(tài)均與腸道環(huán)境有關(guān)。腸道菌群失調(diào)可能與玫瑰痤瘡的發(fā)病關(guān)系密切，玫瑰痤瘡中41.7%患者存在空腸未知細(xì)菌的過度生長，而處于丘疹皰疹期的患者可達(dá)52.8%。研究[15]發(fā)現(xiàn)，抑制空腸未知細(xì)菌過度生長可顯著提高玫瑰痤瘡的治愈率，降低復(fù)發(fā)率，推測玫瑰痤瘡與腸道菌群失調(diào)具有一定相關(guān)性。本研究結(jié)果顯示，玫瑰痤瘡組腸球菌、大腸埃希桿菌、糞腸球菌數(shù)量高于對照組，雙歧桿菌數(shù)量、B/E值低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 提示玫瑰痤瘡患者腸道菌群出現(xiàn)失調(diào)，分析原因可能是腸道菌群失調(diào)情況下，人體腸道免疫、代謝功能出現(xiàn)異常，進(jìn)而導(dǎo)致玫瑰痤瘡的發(fā)生。

腸道菌群參與玫瑰痤瘡的作用機(jī)制目前尚不完全清楚，研究[16]報(bào)道玫瑰痤瘡患者核轉(zhuǎn)錄因子Kappa B、Toll樣受體(TLR)2、TRL4呈高表達(dá)，說明腸道菌群經(jīng)TRL模式識別并激活轉(zhuǎn)錄因子Kappa B通路，進(jìn)而將下游的腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-1β等炎性因子激活，使其釋放進(jìn)入外周血。血管活性腸肽作為神經(jīng)內(nèi)分泌肽在胃腸道黏膜中含量較為豐富，能夠抑制胃腸道環(huán)形平滑肌，能夠與周圍嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)、肥大細(xì)胞相互作用，形成神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫系統(tǒng)。腸道菌群失調(diào)是導(dǎo)致內(nèi)毒素水平升高的因素之一，正常情況下，腸道菌群能夠產(chǎn)生少量內(nèi)毒素，可清除大分子化合物、微生物及體內(nèi)毒素[19]。本研究對患者血管活性腸肽及內(nèi)毒素水平進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，玫瑰痤瘡患者血清內(nèi)毒素、血管活性腸肽水平高于對照組，且在輕度、中度、重度患者血清中依次升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 提示血清內(nèi)毒素、血管活性腸肽可能在玫瑰痤瘡的發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用。分析原因可能是玫瑰痤瘡患者腸道菌群失調(diào)，導(dǎo)致內(nèi)毒素生成增多[17], 誘導(dǎo)血管活性腸肽的釋放[18], 進(jìn)而損傷毛囊、血管內(nèi)皮，最終誘導(dǎo)玫瑰痤瘡的發(fā)生，并促進(jìn)其進(jìn)一步發(fā)展。本研究還發(fā)現(xiàn)玫瑰痤瘡患者血清內(nèi)毒素、血管活性腸肽水平與腸道菌群中腸球菌、大腸埃希桿菌、糞腸球菌數(shù)量均呈正相關(guān)，與雙歧桿菌數(shù)量均呈負(fù)相關(guān)，推測血清內(nèi)毒素、血管活性腸肽升高與腸道菌群失調(diào)密切相關(guān)，二者水平升高又可引發(fā)機(jī)體炎癥因子釋放，加重炎癥反應(yīng)，進(jìn)一步加重痤瘡程度。

綜上所述，玫瑰痤瘡患者血清內(nèi)毒素、血管活性腸肽呈高表達(dá)，其水平隨疾病嚴(yán)重程度的加重逐漸升高，且患者腸道菌群呈失調(diào)狀態(tài)，與血清內(nèi)毒素、血管活性腸肽水平具有一定相關(guān)性，可能在玫瑰痤瘡發(fā)生發(fā)展過程中起一定作用。