齊麗穎,郭倩,趙明,張樹軍,時志春,王偉明,王麗艷
(1.齊齊哈爾大學 化學與化學工程學院,黑龍江 齊齊哈爾 161006;2.國家市場監(jiān)管技術創(chuàng)新中心(工業(yè)大麻),黑龍江 齊齊哈爾 161006)
火麻(Cannabis sativaL.)是??拼舐閷僦参铮卜Q為工業(yè)大麻,是一種無毒大麻.在我國東北、華北、華南等多地有種植,作為纖維或油料作物使用.火麻莖皮可用來織布、造紙或編制繩索;葉可用來入藥,《普濟方》中就有記載其用來治療瘧疾;種子可榨油,油渣可以用作動物飼料.火麻成熟干燥果實稱為火麻籽,呈扁卵圓形,頂端略尖,長約4~5 mm,直徑2.5~4 mm,常見為灰色、灰褐色,表面有類似西瓜的條紋,兩邊有棱,別名大麻子、麻子仁等.火麻籽去殼得火麻仁,火麻仁含有大量蛋白質、不飽和脂肪酸、卵磷酸、多種人體必需的氨基酸以及微量元素.據(jù)古籍記載,火麻仁具有醫(yī)療活性,可以入藥.麻仁潤腸丸就是以火麻仁為主要成分的中成藥[1],關于其藥用特性始見于《神農(nóng)本草經(jīng)》,后在《千金方》《肘后方》《近效方》等多本醫(yī)學古籍中也有記載,其具有滋陰補虛、潤腸通便、助消化、治療血虛津虧等藥效,對高血壓、膽固醇等疾病也有療效.此外,火麻仁由于類似堅果口感,還可作為食物食用,2002 年,火麻仁正式被公布作為藥食同源物質.
據(jù)報導,火麻仁中的蛋白質主要為麻仁球蛋白和麻仁白蛋白,其蛋白含量在20%~25%,去除油脂后的火麻仁籽粕中蛋白含量可達68.66%[2].而且火麻仁蛋白中氨基酸種類豐富,含有多種人體必需的氨基酸且其含量較高,以谷氨酸和精氨酸為主[3],因此,可以認為火麻仁蛋白是一種相對優(yōu)質的植物蛋白資源.將火麻仁蛋白水解,得到火麻仁多肽.由于生物活性肽具有抗氧化、降血壓、降血糖、調節(jié)免疫等特性[4-8],受到研究者的廣泛關注.目前,對火麻仁的研究利用大多止于油脂提取,在榨取了火麻仁油后,剩余的火麻仁粕中還含有火麻仁蛋白,往往被用作動物飼料或者直接丟棄,造成環(huán)境污染及資源浪費,對火麻仁中蛋白及多肽的研究還相對較少.因此,本文主要闡述了火麻仁蛋白及多肽的提取工藝,以期在未來可以將此作為重點研究內(nèi)容,從而拓寬火麻仁的應用范圍.
大多數(shù)蛋白在堿性環(huán)境下易溶解,故可以利用其在堿性溶液中生成易溶物、在酸性溶液中生成沉淀的性質使用堿溶酸沉法獲取蛋白,堿溶酸沉法是目前應用較多的提取方法.伍圣文[9]等從脫殼處理的火麻仁粕中提取的火麻仁蛋白回收率為(83.90±0.69)%,具有較好的持水性、持油性、起泡性和乳化性,而且經(jīng)過體外模擬消化后,火麻仁蛋白消化率達到(92.66±0.23)%.徐鵬偉[10]等以機械壓榨(脫殼)脫脂火麻仁粉為原料,采用堿溶酸沉法制備的火麻仁蛋白含量為85.9%,蛋白回收率高.劉淑霞[11]等采用堿溶酸沉法并利用響應面法優(yōu)化得到火麻仁蛋白質最大實際提取率為24.47%.
酶解法即使用酶將蛋白質水解,進而提取的方法.李曉君[12]等利用酶解法,采用正交實驗得到最佳條件為:中性蛋白酶添加量1.0%,液料比6∶1,提取溫度50℃,提取時間1.5 h,此時蛋白提取率為(41.6±0.8)%.
除采用常規(guī)方法提取蛋白外,學者還嘗試采用新技術手段提取蛋白,以提高蛋白提取率.徐鵬偉[10]等以脫脂火麻仁粉為原料,采用鹽溶鹽析法制備的火麻仁蛋白含量94.8%,較堿溶酸沉法提取的蛋白含量(85.9%)高,外觀色澤亮白,其蛋白主要為火麻仁球蛋白,且含有高達15.09%的精氨酸,有利于心血管健康.程艷波[13]等采用水酶法制備火麻仁蛋白,比較了酸性蛋白酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、果膠酶、纖維素酶對火麻仁蛋白的提取率,在10%~75%之間.通過單因素與正交實驗法最終確定火麻仁蛋白的最佳提取工藝條件:固液比為1∶15,pH=7.5,酶添加量為1.5%,反應時間為90 min.此條件下火麻仁蛋白提取率為74.12%.Hadnadev[14]等采用膠束化法,使用氯化鈉溶液溶解火麻仁蛋白,通過透析袋脫鹽,最終使蛋白質沉淀析出.吳俊鋒[15]等利用噴射蒸煮技術從火麻仁榨油后的下腳料(含蛋白質83.21%)中提取火麻仁蛋白質,確定了最佳工藝條件:料液比1∶10,pH=9.0,攪拌時間30 min,膠體磨6 000 r/min研磨10 min,調pH=9.0,攪拌20 min,所得蛋白質含量為45.37%.黎科亮[16]等采用亞臨界萃取工藝得到脫脂火麻粕,粉碎后制成火麻粗蛋白粉,最佳工藝條件為:料液比1∶10,萃取時間35 min,萃取溫度32℃,所得火麻粗蛋白粉蛋白質含量為75.31%.沈慧[17]等采用超聲輔助有機溶劑法提取火麻蛋白,通過單因素與正交實驗結合的方法確定最佳條件:料液比為1∶40,超聲時間30 min,超聲溫度30℃,超聲頻率25 kHz,所得火麻仁蛋白粉純度為74.41%,提取率為69.25%.
火麻仁蛋白常用提取方法的優(yōu)點、不足及提取率見表1.
表1 火麻仁蛋白常用提取方法
植物多肽近些年受到廣泛關注,但是目前對火麻仁多肽的研究報導相對較少,且對于火麻仁多肽的提取主要使用酶解法,其它方法還鮮有甚至不曾有過報導.
酶解法是指用生物酶催化蛋白質獲得多肽的方法.該方法制備的多肽分子量較小且具有較強的活性和多樣性,被廣泛應用于多肽制備.陳霞[20]等采用堿溶酸沉法提取火麻仁粕中的蛋白質,然后使用堿性蛋白酶酶解蛋白12 h,得到火麻仁粕蛋白肽,其水解度為16.62%.魏連會[21]等選擇木瓜蛋白酶和堿性蛋白酶進行雙酶水解漢麻粕蛋白研究,最佳水解度可達26.42%.衛(wèi)萍[22]等以堿性蛋白酶、中性蛋白酶、風味酶和木瓜蛋白酶單酶酶解以及雙酶復合酶解火麻蛋白,以ACE 抑制率為指標,確定了火麻蛋白最佳分步酶解組合與最佳工藝條件,為開發(fā)具有市場潛力的火麻多肽類降血壓藥物和營養(yǎng)素提供基礎.
微生物發(fā)酵法屬于生物工程范疇的新技術,是指通過控制微生物的代謝和發(fā)酵使球蛋白轉化為多肽的方法.該方法具有成本低廉、無污染、所得產(chǎn)物產(chǎn)量高、生物成分營養(yǎng)損失少等優(yōu)點.林金鶯[23-24]等對火麻仁粕進行液體發(fā)酵研究,確定了制備多肽最佳條件:火麻仁粕含量7%,pH 為7.5,發(fā)酵溫度30℃,發(fā)酵48 h,所得多肽含量最高,有希望應用于調味品領域;利用枯草芽孢桿菌對火麻仁粕進行發(fā)酵,確定最佳發(fā)酵條件:底物濃度為5%,枯草芽孢桿菌添加量為15%,發(fā)酵溫度37℃,發(fā)酵時間30 h,此參數(shù)下多肽得率可達50.5%.目前,發(fā)酵法研究較少,如何通過控制發(fā)酵條件達到所需效果是需要關注的難點.
本文結合火麻仁產(chǎn)業(yè)的現(xiàn)狀及蛋白、多肽的提取工藝,剖析目前火麻仁蛋白、多肽提取存在的問題,以期對火麻仁蛋白、多肽的提取研究提供思路.為火麻仁多肽的高效制備和抗氧化肽等高附加值產(chǎn)品的研發(fā)提供理論依據(jù),有望應用于醫(yī)藥、保健品、食品和水基化妝品等領域.以火麻仁多肽為基礎,研發(fā)降壓藥、降糖藥、降脂藥、面膜、乳液等產(chǎn)品配方,進一步推動我國火麻產(chǎn)業(yè)的發(fā)展建設.