張國(guó)榮，張亮，張娟，王麗麗，湯曉琴

（西安萬(wàn)隆制藥股份有限公司，陜西 西安 710119）

丁香酚（Eugenol，圖1）主要來(lái)源于桃金娘科植物丁香（Syringa oblata Lindl.，圖2）的干燥花蕾經(jīng)蒸餾所得的揮發(fā)油成分[1-2]。丁香酚具有良好的藥理活性，在抗菌、抑制病毒、鎮(zhèn)痛方面具有一定的臨床效果，同時(shí)作為高反應(yīng)活性有機(jī)合成中間體在日化、醫(yī)藥、化工、香精、香料等諸多領(lǐng)域也獲得了廣泛應(yīng)用[3]。

圖1 丁香酚結(jié)構(gòu)式Fig.1 The structural formula of eugenol

圖2 中藥材丁香Fig.2 Chinese herbal medicine Syringa oblata Lindl

近年來(lái)，丁香酚在應(yīng)用領(lǐng)域分析檢測(cè)的研究綜述尚很少見(jiàn)，開(kāi)發(fā)高效便捷、操作簡(jiǎn)單、穩(wěn)定性好的分析檢測(cè)技術(shù)是多領(lǐng)域中丁香酚質(zhì)量控制的關(guān)鍵策略[4]。因此，本文綜述了丁香酚在藥品、食品、天然產(chǎn)物、水產(chǎn)品、日化品、飼料、血液及其他領(lǐng)域中的分析檢測(cè)研究，對(duì)較為新穎的分析檢測(cè)實(shí)例進(jìn)行總結(jié)報(bào)道，對(duì)相關(guān)應(yīng)用領(lǐng)域中丁香酚的檢測(cè)、質(zhì)量控制以及促進(jìn)丁香酚行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的建立具有指導(dǎo)意義，同時(shí)對(duì)其發(fā)展前景進(jìn)行了展望。

1 丁香酚的物化性質(zhì)及藥理活性

1.1 丁香酚的物化性質(zhì)

丁香酚化學(xué)名稱(chēng)為4-烯丙基-2-甲氧基苯酚，化學(xué)式：C10H12O2，分子量：164.2，CAS 登錄號(hào)：97-53-0。熔點(diǎn)-9.2 ℃，沸點(diǎn)253.2 ℃（101.3 kPa），密度1.065 g/cm3。丁香酚具有丁香花芬芳?xì)馕?，外觀為無(wú)色或淡黃色液體，幾乎不溶于水，與乙醇、乙醚及油可混溶。

丁香酚分子含有一個(gè)不飽和烯鍵和酚羥基，易被氧化，也可發(fā)生聚合反應(yīng)。丁香酚在氫氧化鉀中加熱時(shí)，丙烯基的雙鍵可發(fā)生重排作用，獲得異丁香酚（Isoeugenol）；經(jīng)氧化發(fā)生α-丙烯基斷裂反應(yīng)可獲得調(diào)味劑和香料的主要成分香草醛（Vanillin）。

1.2 丁香酚的藥理活性

丁香酚可通過(guò)調(diào)控沉默信息調(diào)節(jié)因子2 相關(guān)酶1（SIRT1）、單胺氧化酶A（MAO-A）信號(hào)通路而影響單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)5-羥色胺（5-HT）的代謝以及兒茶酚胺代謝通路中兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶（COMT）的活性和基因表達(dá)發(fā)揮良好的抗焦慮活性[5-6]；丁香酚能夠有效地抑制面包中霉菌和酵母菌的生長(zhǎng)[7]，還能有效抑制小麥根腐病菌的生長(zhǎng)，在小麥根腐病生物防治方面具有較大的應(yīng)用前景[8]；Alvarenga 等研究開(kāi)發(fā)了一系列作為血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ACE）抑制劑具有活性的葡萄糖苷，這些化合物是從丁香酚中提取的，活性測(cè)試表明丁香酚的葡萄糖苷衍生物是潛在的新候選藥物[9]。Akinshola 等[10]研究發(fā)現(xiàn)丁香酚及其衍生物是具有抗菌活性的平臥木植物中存在的次級(jí)代謝產(chǎn)物。

2 丁香酚檢測(cè)的研究進(jìn)展

近年來(lái)，相關(guān)研究工作者建立了多領(lǐng)域中丁香酚的分析檢測(cè)方法，開(kāi)發(fā)了適宜的分析檢測(cè)技術(shù)。本文重點(diǎn)報(bào)道了以下領(lǐng)域中丁香酚的檢測(cè)方法研究進(jìn) 展。

圖3 丁香酚分析檢測(cè)應(yīng)用領(lǐng)域Fig.3 The application field of eugenol analysis and detection

3 藥品中丁香酚的檢測(cè)研究

安神補(bǔ)心六味丸具有祛“赫依”，鎮(zhèn)靜的功效，用于心慌，氣短等癥狀。藥物組成主要包括牛心、木香、楓香脂、丁香、肉豆蔻、廣棗[11]。新圖雅等[12]建立了氣相色譜法測(cè)定蒙藥安神補(bǔ)心六味丸中丁香酚、去氫木香內(nèi)酯含量的方法。實(shí)驗(yàn)選用HP-5MS 毛細(xì)管色譜柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm），進(jìn)樣口溫度220 ℃，檢測(cè)器溫度為250 ℃，流速為1 mL/min，分流比為10 ∶1。測(cè)試結(jié)果表明丁香酚、去氫木香內(nèi)酯線性范圍分別為0.429 ～ 2.145 μg（r= 0.999 2）、0.196 ～ 0.976 μg（r= 0.999 2），線性關(guān)系良好，平均回收率分別為100.58%、103.34%。該檢測(cè)方法可高效、穩(wěn)定地測(cè)定蒙藥安神補(bǔ)心六味丸中丁香酚和去氫木香內(nèi)酯含量。

丁細(xì)牙痛膠囊具有清熱解毒，疏風(fēng)止痛之功效。用于風(fēng)火牙疼，癥見(jiàn)牙痛陣作；齒齦腫痛，得涼痛輕；急性牙髓炎、急性根尖周炎見(jiàn)上述癥狀者[13]。陳進(jìn)芳等[14]開(kāi)發(fā)了一種基于氣相色譜法同時(shí)測(cè)定丁細(xì)牙痛膠囊中丁香酚、甲基丁香酚、黃樟醚及異丁香酚4種成分含量的方法。實(shí)驗(yàn)優(yōu)選HP-1301 毛細(xì)管柱為色譜柱，程序升溫，檢測(cè)器為氫火焰離子化檢測(cè)器，檢測(cè)器溫度為260 ℃，進(jìn)樣口溫度為200 ℃。檢測(cè)結(jié)果表明丁香酚、甲基丁香酚、黃樟醚及異丁香酚的線性范圍分別為154.3 ～ 925.7 μg/mL（r= 0.999 8），71.8 ～ 430.6 μg/mL（r= 0.999 7），34.4 ～ 206.2 μg/mL（r= 0.999 5），40.2 ～ 241.4 μg/mL（r= 0.999 6），精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性和耐用性試驗(yàn)的RSD均小于1.6%。該檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)便、高效，穩(wěn)定性好。

固精麥斯哈片是由阿納其根、肉豆蔻、熏魯香、玫瑰花、西紅花、甘松、小豆蔻、丁香、草果、香附、郁金11 味藥材組成，具有增強(qiáng)機(jī)體捏住力、強(qiáng)身補(bǔ)腦、固精縮尿、烏發(fā)之功效[15]。趙敏等[16]建立了基于氣相色譜內(nèi)標(biāo)法測(cè)定固精麥斯哈片中丁香酚含量的方法。實(shí)驗(yàn)優(yōu)選HP-INNOWAX 毛細(xì)管柱（30 μm×530 μm×1.00 μm）為色譜柱。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：丁香酚在0.723 5 ～ 2.804 0 mg/mL 范圍內(nèi)呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，平均回收率99.36%。該分析檢測(cè)方法穩(wěn)定性好、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果可靠。王鴻宇等[14]建立了蒙藥圖樂(lè)吉古魯其-7 丸含量測(cè)定方法。實(shí)驗(yàn)采用顯微方法和薄層色譜法鑒別藥品中的主要成分，同時(shí)采用高效液相色譜法測(cè)定了丁香中丁香酚的含量。測(cè)試結(jié)果顯示分離效果良好，為圖樂(lè)吉古魯其-7 丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)修訂提供參考價(jià)值。

周茂君等[17]開(kāi)發(fā)了保健食品軟膠囊中檸檬烯、丁香酚氣相色譜-質(zhì)譜（GC/MS）分析方法。方法樣品用正己烷溶解定容后直接進(jìn)樣。檸檬烯、丁香酚經(jīng)HP-5MSUI 石英毛細(xì)管柱分離，用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）進(jìn)行定性、定量分析。結(jié)果檸檬烯、丁香酚濃度在25 ～ 500 μg/mL 范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，檸檬烯相關(guān)系數(shù)r= 0.999 0，丁香酚相關(guān)系數(shù)r= 0.997 4。樣品中加入低、高2 種濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，檸檬烯平均回收率分別為96.7%，99.9%；丁香酚平均回收率分別為103%，97.2%。檸檬烯最低檢出限為0.25g/100 g；丁香酚最低檢出限為0.35g/100 g。結(jié)論為本方法簡(jiǎn)便快速，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，適用于保健食品軟膠囊中檸檬烯、丁香酚的含量檢測(cè)。

王鴻宇等[18]采用顯微方法鑒別了蒙藥圖樂(lè)吉古魯其-7 丸中的天冬、丁香、益智仁，并采用高效液相色譜法測(cè)定丁香中丁香酚的含量。結(jié)果表明，顯微鑒別特征顯著，重現(xiàn)性好；丁香酚含量測(cè)定操作簡(jiǎn)單、分離效果良好，該質(zhì)量研究可為圖樂(lè)吉古魯其-7 丸的藥品質(zhì)量控制和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)修訂提供參考。

4 食品中丁香酚的檢測(cè)研究

柳蒿芽是菊科、蒿屬多年生草本植物。野生分布主要集中于大興安嶺東部，生長(zhǎng)在森林草原、草甸和林緣濕地。柳蒿芽既可食用，亦可全草入藥，幼嫩地上部的莖葉可作為一種營(yíng)養(yǎng)蔬菜食用，炒、燴都可以，也可燉魚(yú)時(shí)放一些使味道更加鮮美[19-20]。

王青虎等[21]采用氣相色譜法測(cè)定了柳蒿芽脂溶性部位中有效成分的相對(duì)含量。測(cè)試結(jié)果表明柳蒿芽脂溶性部位中有效成分有11 種，包括丁香酚、棕櫚酸、亞油酸、亞麻酸、油酸等化合物。這些化合物 的 線 性 范 圍 為5.0 ～ 100.0 μg/mL（r＞0.999 3）、1.0 ～ 50.0 μg/ mL（r＞0.999 4）。該研究建立了柳蒿芽脂溶性部位中多個(gè)有效成分的定量分析方法，為其在食品中的開(kāi)發(fā)利用奠定了基礎(chǔ)。

桃金娘科丁香是藥食同源植物，在在食品、藥品和香精香料等行業(yè)應(yīng)用廣泛。馬莎莎[22]以丁香為研究對(duì)象，對(duì)其營(yíng)養(yǎng)成分、食品安全以及復(fù)方保健食品的制備進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示丁香中的水分、總灰分、粗纖維、蛋白質(zhì)、總糖、油脂的含量分別占丁香干重的9.63%、5.36%、9.64%、6.06%、8.26%、59.3%，同時(shí)還富含鎂、錳、鐵、鉀、鈉、鈣礦質(zhì)元素。該研究以β-環(huán)糊精為壁材，采用飽和水溶液法制備丁香精油包合物，高效液相色譜法測(cè)定包合物中丁香酚含量為7.5%，抗脂質(zhì)過(guò)氧化能力為32.8%±0.44%，包合物具有很好的熱穩(wěn)定性及抗氧化性。

特殊醫(yī)學(xué)用途配方食品（Food for Special Medical Purpose， FSMP）是為了滿(mǎn)足進(jìn)食受限、消化吸收障礙、代謝紊亂或特定疾病狀態(tài)人群對(duì)營(yíng)養(yǎng)素或膳食的特殊需要，專(zhuān)門(mén)加工配制而成的配方食品。特殊醫(yī)學(xué)用途配方食品可以作為一種營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充途徑，對(duì)其治療、康復(fù)及機(jī)體功能維持等方面起著重要的營(yíng)養(yǎng)支持作用[23-24]。胡思怡[25]建立了針對(duì)特殊醫(yī)學(xué)用途配方食品中甲基香蘭素、乙基香蘭素、香蘭素、乙基麥芽酚、麥芽酚、香草酸、丁香酚等化合物的檢測(cè)方法。通過(guò)優(yōu)化液相色譜條件獲得的測(cè)試結(jié)果表明香料在一定濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.999 0。該研究工作為特殊醫(yī)學(xué)用途配方食品中多香料檢測(cè)提供了一定參考價(jià)值。

Wang 等[26]將殼聚糖、羥乙基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮作為粘合劑和穩(wěn)定劑、水性單壁碳納米管分散體引入到市售的聚（3，4-亞乙基二氧噻吩）：聚（苯乙烯磺酸鹽）（PEDOT：PSS）復(fù)合電極中，開(kāi)發(fā)了一種高水穩(wěn)定性的碳納米管，其在水中表現(xiàn)出良好的電極穩(wěn)定性和對(duì)丁香酚的電催化能力，利用該性能可制備選擇性高的丁香酚電化學(xué)分析傳感器。檢測(cè)結(jié)果表明，丁香酚在0.15 ～ 122.4 μm 的范圍內(nèi)表現(xiàn)出很寬的線性范圍，低檢測(cè)限為0.048 μm，具備高效、高靈敏度，可應(yīng)用于食品樣品中丁香酚含量的檢 測(cè)。

黃武等[27]建立了高效液相色譜法分析羅非魚(yú)中丁香酚殘留量的實(shí)驗(yàn)方法。實(shí)驗(yàn)中樣品采用乙腈為提取溶劑，經(jīng)超聲提取、正己烷脫脂凈化后，采用高效液相色譜檢測(cè)，以外標(biāo)法定量。結(jié)果表明，丁香酚具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.999 98。5.00 g 樣品中測(cè)定丁香酚殘留量的檢出限為0.03 mg/kg、定量限為0.10 mg/kg，平均回收率為80.5% ～ 101.2%。該檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)便、高效、穩(wěn)定性好，適用于羅非魚(yú)中丁香酚殘留量的質(zhì)量控制和批量檢測(cè)。

5 天然產(chǎn)物中丁香酚的檢測(cè)研究

天然植物性食品中的風(fēng)味成分是食品品質(zhì)的關(guān)鍵因素，主要包括游離態(tài)和鍵合態(tài)兩種[28]。楊旖旎[29]考察了武陵地區(qū)五種天然食品的風(fēng)味成分，結(jié)合頂空固相微萃取與針捕集兩種樣品前處理方式對(duì)老鷹茶揮發(fā)性成分進(jìn)行萃取，并用GC-MS 聯(lián)用分析技術(shù)鑒定出不同成熟階段的插田萢果實(shí)中的游離態(tài)和鍵合態(tài)揮發(fā)性化合物。游離態(tài)主要包括（E）-2-己烯-1-醇、1-己醇、2-庚醇、水楊酸甲酯、丁香酚等化合物，并在整個(gè)成熟過(guò)程中增加。該研究指出成熟的水果風(fēng)味特征為水果香和花香。逐漸釋放的鍵合態(tài)揮發(fā)性化合物可以增強(qiáng)水果味、花香氣味。

魏士剛[30]開(kāi)發(fā)了一種超聲霧化-加熱氣流傳輸-單滴微萃取法和超聲霧化-頂空離子液體單滴微萃取法，基于氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對(duì)天然產(chǎn)物中揮發(fā)性成分進(jìn)行分析檢測(cè)。結(jié)果表明，超聲霧化-頂空離子液體單滴微萃取法有著較高的富集效果，對(duì)樣品中丁香酚等揮發(fā)和半揮發(fā)性組分的富集效果較佳。余悅等[31]采用氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（GC-MS）對(duì)常用植物精油中的致敏成分進(jìn)行考察。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明15 種植物精油中含有丁香酚等11 種致敏成分。該研究提出了應(yīng)關(guān)注由植物精油原料帶入致敏成分的安全風(fēng)險(xiǎn)情況，為評(píng)估植物精油作為化妝品原料的安全性和規(guī)范性提供了理論指導(dǎo)。

6 水產(chǎn)品中丁香酚的檢測(cè)研究

石芳等[32]研究了基于分散固相萃取-高效液相色譜檢測(cè)水產(chǎn)品中普魯卡因、丁氧卡因、三卡因、丁香酚、甲基丁香酚、異丁香酚、甲基異丁香酚7 種麻醉劑的分析方法。前處理工藝為：采用分散固相萃取，1.0%甲酸-乙腈為提取溶劑，20 mg 苯乙烯-甲基丙烯酸縮水甘油酯聚合物微球（PS-GMA）、50 mg N-丙基乙二胺（PSA）和10 mg C18混合吸附劑為凈化劑。測(cè)試結(jié)果表明：7 種化合物采用Welch Welchrom C18色譜柱（250 mm×4.6 mm， 5 μm）進(jìn)行分離，檢測(cè)波長(zhǎng)為235、260 和290 nm，具有良好的線性關(guān)系（相關(guān)系數(shù)R2＞0.999），檢出限為0.011 ～ 0.043 mg/kg。該檢測(cè)方法簡(jiǎn)便、高效、穩(wěn)定好。

邵曼等[33]開(kāi)發(fā)了水產(chǎn)品及養(yǎng)殖水中丁香酚類(lèi)化合物的檢測(cè)方法。該研究基于食品補(bǔ)充檢驗(yàn)方法BJS 201908《水產(chǎn)品及水中丁香酚類(lèi)化合物的測(cè)定》，以海水魚(yú)、淡水魚(yú)、海水蝦、淡水蝦及養(yǎng)殖水作為基質(zhì)，測(cè)定6 種丁香酚類(lèi)化合物的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在水產(chǎn)品中丁香酚類(lèi)化合物較為常見(jiàn)，主要為丁香酚，檢出率為28.9%，海鮮水產(chǎn)批發(fā)市場(chǎng)和農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)的水產(chǎn)品中丁香酚的檢出率較高。

趙東豪等[34]建立了一種基于超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)魚(yú)肉和暫養(yǎng)水中的丁香酚殘留量的分析方法。前處理工藝為：魚(yú)肉樣品經(jīng)正己烷提取、水樣經(jīng)濃縮、富集與凈化，以電噴霧離子源負(fù)離子模式，內(nèi)標(biāo)法定量。結(jié)果表明，待測(cè)樣品在4 min內(nèi)完成分析測(cè)定，在1 200 μg/L 質(zhì)量濃度范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)（R2）大于0.996，魚(yú)肉樣品的加標(biāo)回收率在88.6% ～ 106%之間，丁香酚在魚(yú)肉和水樣中的定量限分別為2.5 μg/ kg 和0.05 μg/L。

王正全等[35]建立了基于氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析檢測(cè)流通環(huán)節(jié)中水產(chǎn)品運(yùn)輸和暫養(yǎng)水樣中丁香酚殘留的方法。運(yùn)輸和暫養(yǎng)水樣首先經(jīng)固相分散基質(zhì)萃取，再依次經(jīng)過(guò)聚合氧化鋁、N-丙基乙二胺和氯化鈉凈化，采用二氯甲烷和正己烷萃取，內(nèi)標(biāo)法定量檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，建立的分析方法檢測(cè)的丁香酚檢出限為0. 5 μg/L，定量限為1.5 μg/L，在1.5 ～ 50.0 μg/ L線性范圍內(nèi)檢測(cè)的回收率為82. 3% ～ 109. 9%，相關(guān)系數(shù)r為0.993 6。該檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)單、結(jié)果穩(wěn)定、靈敏度高，可滿(mǎn)足環(huán)境水樣復(fù)雜基質(zhì)檢驗(yàn)的實(shí)際檢測(cè)需要。同時(shí)，將分析方法應(yīng)用于滬浙閩地區(qū)18 個(gè)運(yùn)輸水樣和26 個(gè)暫養(yǎng)水樣的檢測(cè)中，陽(yáng)性檢出率大于20%，為水產(chǎn)品的質(zhì)量分析和監(jiān)控提供了技術(shù)指導(dǎo)。

含氟有機(jī)聚合物具有較大的比表面積和吸附容量，對(duì)丁香酚類(lèi)化合物具有特異性吸附功能[36]。王興益等[37]以2，3，5，6-四氟對(duì)二苯甲醛和1，3，5-三（4-氨苯基）苯為單體、三氟甲磺酸鈧作催化劑，于室溫下高效制備合成了一種含氟有機(jī)聚合物，并將其作為固相微萃取吸附劑，結(jié)合高效液相色譜-紫外檢測(cè)法對(duì)水產(chǎn)品中丁香酚、乙酸丁香酚酯和甲基丁香酚三種化合物進(jìn)行了分析測(cè)試。研究表明：工藝優(yōu)選萃取時(shí)間為30 min、攪拌速度為700 r/min、解吸溶劑為乙腈、解吸時(shí)間為10 min，在該最優(yōu)條件下待測(cè)化合物獲得了最佳的萃取效果。分析過(guò)程優(yōu)選Diamonsil Plus C18-B 色譜柱（250 mm×4.6 mm， 5 μm），甲醇-水（60 ∶40，v/v）為流動(dòng)相，流速0.800 mL/min，進(jìn)樣量20.0 μL，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm，柱溫30 ℃條件下，丁香酚和乙酸丁香酚酯在10 ～ 1 000 μg/L、甲基丁香酚在10 ～ 1 500 μg/L 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)（r2）大于0.996 1，方法檢出限為2.9 ～ 4.5 μg/ kg（S/ N = 3），精密度小于8.7%（n= 5）。該分析檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用于羅非魚(yú)和基圍蝦樣品的3 種麻醉劑殘留分析，獲得了滿(mǎn)意的回收率（76.7% ～ 104%），可滿(mǎn)足水產(chǎn)品中丁香酚類(lèi)麻醉劑的分析檢測(cè)要求。

何洪健等[38]建立了一種基于分子印跡固相萃取結(jié)合高效液相色譜法測(cè)定水產(chǎn)品中5 種丁香酚類(lèi)麻醉劑殘留的方法。分析過(guò)程分別采用丁香酚、甲基丙烯酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯作為模板分子、功能單體和交聯(lián)劑，采用本體聚合法制備合成分子印跡聚合物并制成萃取柱。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：該分析方法的線性范圍均為0.051 0 μg/mL，具有較好的線性關(guān)系。5 種丁香酚類(lèi)麻醉劑的定量限為0.05 mg/kg，樣品的回收率為82.04% ～ 99.29%，RSD 為0.06% ～ 3.96%。所建立的方法具有簡(jiǎn)便、高效、操作可行性高、有機(jī)溶劑耗量少等優(yōu)勢(shì)。

7 日化品中丁香酚的檢測(cè)研究

丁香酚是日化品中應(yīng)用較為活躍的化學(xué)原料，是一種必不可少的香精成分，通常添加量為1% ～ 5%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)w/w）。丁香酚可有效防止化妝品因微生物污染而導(dǎo)致的變質(zhì)、同時(shí)賦予其抗真菌、緩解皮膚氧化、抗衰老之功效[39]。

漆愛(ài)明等[40]優(yōu)化了GB/T 24800.10—2009《化妝品中十九種香料的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜法》中的檢測(cè)方法，并進(jìn)行了方法學(xué)檢驗(yàn)，并將所開(kāi)發(fā)的分析方法應(yīng)用于護(hù)膚類(lèi)44 批次、香水類(lèi)11 批次和口紅類(lèi)71 批次的化妝品進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明： 19 種香料的檢出限為0.000 14% ～ 0.000 16%，線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)R2均等于1.0。該研究為控制化妝品中丁香酚等香料的質(zhì)量提供保障，同時(shí)為化妝品監(jiān)管提供數(shù)據(jù)支撐。

王富楊等[41]開(kāi)發(fā)了高效液相色譜法測(cè)定牙膏中丁香酚含量的方法。實(shí)驗(yàn)優(yōu)選色譜柱為C18 柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），柱溫40 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)282 nm。測(cè)試結(jié)果：丁香酚在8.91 ～ 53.46 μg/ mL 范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好（R2= 0.999 9），平均回收率為98. 51%。該分析方法便捷高效、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性和準(zhǔn)確性良好，對(duì)牙膏中丁香酚的質(zhì)量控制提供參考價(jià)值。

張新新等[42]建立了氣相色譜法測(cè)定瑞克衛(wèi)瑞消毒液中桂皮醛和丁香酚的含量。實(shí)驗(yàn)采用SE-30 毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm），檢測(cè)器溫度240 ℃，進(jìn)樣口溫度220 ℃，分流比10∶1，程序升溫。氣相色譜法測(cè)定結(jié)果表明，桂皮醛和丁香酚均呈良好的線性關(guān)系，平均回收率分別為98.93%和99.58%。該檢測(cè)方法簡(jiǎn)便、重復(fù)性好。

8 飼料中丁香酚的檢測(cè)研究

王石等[43]建立了氣相色譜-氫火焰離子化檢測(cè) 器（Gas chromatography-flame ionization ditector，GC-FID）測(cè)定飼料中香芹酚、百里香酚、丁香酚、肉桂醛等多種香味物質(zhì)含量的分析方法。開(kāi)發(fā)了樣品的前處理方法：飼料樣品先經(jīng)去離子水潤(rùn)濕、再經(jīng)乙醇超聲提取2 次后定容。選擇HP-Innowax 毛細(xì)管色譜柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm）進(jìn)行分離測(cè)定，結(jié)果表明4 種香味劑在15 min 內(nèi)可完成基線分離，在1.0 ～ 500 μg/mL 時(shí)線性關(guān)系良好（R2≥0.999），定量限為20 mg/kg，平均回收率為75.9% ～ 108.5%。該研究所建立的分析方法便捷高效、安全可靠，可應(yīng)用于飼料香味劑產(chǎn)品的質(zhì)量評(píng)價(jià)及控制領(lǐng)域。

李會(huì)榮等[44]建立了氣相色譜測(cè)定飼料香味劑中麝香草酚、丁香酚和香蘭素含量的方法。實(shí)驗(yàn)優(yōu)選HP-5（30 m×0.25 μm）柱為分析柱，外標(biāo)法定量。結(jié)果表明：麝香草酚、丁香酚和香蘭素在1.0 ～ 500 μg/ mL 內(nèi)線性關(guān)系良好，分離度好，最低定量限為50 mg/kg，添加回收率為86% ～ 104%，變異系數(shù)為2.7% ～ 6.7%。

9 血液中丁香酚的檢測(cè)研究

程聰?shù)萚45]開(kāi)發(fā)了一種測(cè)定大鼠血漿中丁香酚質(zhì)量濃度的柱前衍生化高效液相色譜-質(zhì)譜法。試驗(yàn)中以麝香草酚為內(nèi)標(biāo)，血漿樣品經(jīng)丙酮沉淀蛋白和丹磺酰氯衍生化處理，優(yōu)選Key BDS Hypersil C8 色譜柱（50 mm×4.6 mm，3 μm），乙腈-水-甲酸（體積比85∶15∶0.5）作為流動(dòng)相。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：丁香酚在5.00 ～ 200 μg/L 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r≥0.994 6）、精密度RSD 小于7.7%、準(zhǔn)確度RE 值在2.3% ～ 4.5%之間、提取回收率均高于80.0%。該分析方法具有靈敏度高、穩(wěn)定性和選擇性好等優(yōu)勢(shì)，適用于大鼠血漿中丁香酚質(zhì)量濃度的準(zhǔn)確測(cè)定，同時(shí)為丁香作為主藥的中藥方劑藥動(dòng)學(xué)研究提供參考價(jià)值。

焦亞琴等[46]開(kāi)發(fā)了一種高效液相色譜法測(cè)定丁香酚藥浴麻醉鯉魚(yú)后，丁香酚在鯉魚(yú)血液中的含量及變化情況。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中對(duì)鯉魚(yú)血樣采用甲醇和乙腈混合溶劑提取、過(guò)濾，流動(dòng)相為甲醇-乙腈- 水（31∶31∶38）， 流 速 為1 mL/min， 紫 外吸收為280 nm，柱溫為35 ℃，進(jìn)樣量為20 μL。測(cè)試結(jié)果表明丁香酚在鯉魚(yú)血漿中回歸方程：Y= 19.146X+ 0.130 26 （r2= 0.999 01）， 檢 測(cè) 限 為0.828 ng/mL，定量限為1.656 ng/mL。平均添加回收率為86.74%。日內(nèi)精密度RSD 為4.135%，日間精密度RSD 為4.558%。穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)和重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果良好。該分析檢測(cè)方法適用于測(cè)定藥浴鯉魚(yú)血中丁香酚含量，為丁香酚作為鯉魚(yú)麻醉劑使用的安全性評(píng)價(jià)提供實(shí)驗(yàn)支持。

10 其他應(yīng)用領(lǐng)域中丁香酚的檢測(cè)研究

Shi 等[47]設(shè)計(jì)了一種基于鉑納米粒子嵌入樹(shù)莓狀二氧化硅的靈敏、選擇性高的電化學(xué)傳感器，并將其應(yīng)用于測(cè)定丁香酚和甲基丁香酚。該電化學(xué)傳感器是利用樹(shù)莓狀二氧化硅表面具有大量開(kāi)放的孔隙，該結(jié)構(gòu)作為載體不僅可以有效避免鉑納米粒子的團(tuán)聚，而且提高了催化性能。工作電位為0.65 V 時(shí)，丁香酚的線性范圍為0.50 ～ 60 μmol/L，工作電位為1.10 V時(shí)甲基丁香酚的線性范圍為0.50 ～ 50 μmol/L，檢測(cè)限分別為0.12 μmol/L 和0.16 μmol/L，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）分別為3.2%和4.5%，檢測(cè)過(guò)程高效、便捷。

黃艷婷等[48]基于核殼填料色譜柱技術(shù)建立了測(cè)定外用成人用品中普魯卡因、丁卡因、異丁香酚甲醚、丁香酚、鹽酸普莫卡因、地布卡因等化合物的高效液相色譜分析方法。實(shí)驗(yàn)優(yōu)選Agilent Poroshell 120 EC-C18（50 mm×4.6 mm×2.7 μm）為色譜柱，磷酸氫二鉀溶液（pH 值 = 3.0）-甲醇-乙腈為流動(dòng)相，流速1.5 mL/min，柱溫35 ℃，二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm 和280 nm，外標(biāo)法定量。測(cè)試結(jié)果顯示：所測(cè)定的化合物線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)不低于0.999 7。該分析方法可快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)外用成人用品中局麻成分。

解超男等[49]制備了一種采用膠體金克疫層析試紙條簡(jiǎn)便測(cè)定丁香酚殘留的分析方法。實(shí)驗(yàn)中采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金納米顆粒，標(biāo)記丁香酚單兊隆抗體構(gòu)筑膠體金-丁香酚單兊隆抗體復(fù)合物。然后以硝化纖維素膜為固相載體，丁香酚偶聯(lián)物為檢測(cè)帶（T 帶），羊抗鼠為質(zhì)控帶（C 帶）。檢測(cè)結(jié)果表明，膠體金克疫層析試紙條具有高靈敏度和特異性，丁香酚檢出限為2.0 mg/L，檢測(cè)過(guò)程十分便捷。

11 展望

丁香酚是應(yīng)用廣泛的有機(jī)合成中間體，具有良好的藥理活性。近年來(lái)，丁香酚在藥品、食品、天然產(chǎn)物、水產(chǎn)品、日化品、飼料等領(lǐng)域獲得了較為廣泛的應(yīng)用，相關(guān)工作者相繼開(kāi)發(fā)了氣相色譜法、氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法、高效液相色譜法、分散固相萃取-高效液相色譜、超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜等適宜的分析檢測(cè)方法，促進(jìn)了丁香酚在眾多領(lǐng)域中的分析檢測(cè)技術(shù)的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用。

隨著丁香酚應(yīng)用領(lǐng)域的多樣化、以及檢測(cè)樣品的復(fù)雜度不斷提高，促使相關(guān)工作者開(kāi)發(fā)更加便捷、穩(wěn)定、高效的檢測(cè)技術(shù)是未來(lái)檢測(cè)丁香酚的研究方向。醫(yī)藥和食品領(lǐng)域應(yīng)著重提高藥品與食品中丁香酚的檢測(cè)限度與殘留分析，提高檢測(cè)結(jié)果的靈敏度和穩(wěn)定性，為含有丁香酚成分的藥品和食品提供在線檢測(cè)的技術(shù)支持，同時(shí)確保嚴(yán)格的質(zhì)量要求；工業(yè)領(lǐng)域中應(yīng)重點(diǎn)開(kāi)發(fā)適用于特定檢測(cè)樣品中的丁香酚色譜柱，確保檢測(cè)過(guò)程的重現(xiàn)性、穩(wěn)定性，以滿(mǎn)足復(fù)雜樣品的分析檢測(cè)要求；開(kāi)發(fā)聯(lián)合分析檢測(cè)技術(shù)，實(shí)現(xiàn)更加靈敏、穩(wěn)定、高效的檢測(cè)方法；同時(shí)，應(yīng)關(guān)注含有丁香酚成分中藥材的結(jié)構(gòu)解析與檢測(cè)手段，促進(jìn)我國(guó)傳統(tǒng)中藥材的開(kāi)發(fā)與利用。相信丁香酚的分析檢測(cè)技術(shù)會(huì)獲得更大的發(fā)展。