童銣烯 陳金水 吳天敏 陳金雄 范柳芳 薛文娟

摘要：目的 觀察益氣活血中藥對糖尿病心肌病致射血分數(shù)保留心衰大鼠心功能的影響。方法 選取SPF級雄性 SD 大鼠，隨機分為空白對照組、模型組及益氣活血中藥組，每組15只。空白對照組大鼠繼續(xù)以普通飼料喂養(yǎng)，單次腹腔注射生理鹽水;模型組及中藥組大鼠以高糖高脂飼料喂養(yǎng)，以鏈脲佐菌素腹腔注射制作大鼠糖尿病心肌病模型，造模成功后8周空白對照組單次腹腔注射生理鹽水，模型組單次腹腔注射鏈脲佐菌素，益氣活血中藥組單次腹腔注射鏈脲佐菌素，隨后應用中藥生藥灌胃，連續(xù)處理10d。采用頸動脈心室內(nèi)插管法評估各組大鼠心臟血流動力學指標。結(jié)果 各組大鼠心率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。與正常對照組比較，模型組左室舒張末壓（LVEDP）水平顯著升高（P<0.01），左室壓力最大上升速率（LV+dp/dt max）、左室壓力最大下降速率（LV-dp/dt max）水平顯著下降（P<0.01）;與模型組比較，益氣活血中藥組LVEDP顯著下降（P<0.01），LV+dp/dt max水平明顯升高（P<0.05），LV-dp/dt max絕對值顯著升高（P<0.01）。結(jié)論 益氣活血中藥對糖尿病大鼠心臟舒張功能具有一定改善作用。

關(guān)鍵詞：益氣活血中藥;糖尿病心肌病;射血分數(shù);動物實驗;大鼠

中圖分類號：R285.5?? 文獻標志碼：A?? 文章編號：1007-2349（2022）01-0076-03

糖尿病心肌?。―iabetic Cardiomyopathy，DCM）是指由糖尿病發(fā)展導致的心肌壞死，不同于高血壓、冠心病和其他心臟瓣膜疾病等引起的心肌病變，屬于特殊心肌病，疾病發(fā)展進程可分為2個階段，早期表現(xiàn)為心肌舒張功能障礙，晚期表現(xiàn)為心肌纖維化逐步加重，舒張功能和收縮功能障礙，定義為射血分數(shù)保留的心力衰竭（Heart failure with preserved ejection fraction，HFPEF）。HFPEF是DCM的主要臨床特征，其病理改變?yōu)樾募〕衫w維細胞過度增殖。王好[1]通過基礎(chǔ)研究證實高血糖可引起心肌細胞過分表達，促進心肌纖維化，導致DCM的形成和發(fā)展，糖尿病患者糖代謝紊亂可進一步促進HFPEF進展。近年來國內(nèi)關(guān)于中醫(yī)藥治療糖尿病的研究不斷深入，基礎(chǔ)研究和臨床試驗均證實益氣活血方可通過調(diào)節(jié)糖代謝改善血糖水平[2]。HFPEF缺乏有效的治療手段，為了改善此現(xiàn)狀，本研究通過前瞻性研究觀察益氣活血中藥對HFPEF大鼠心功能的影響，啟動早期治療，為制定規(guī)范化治療方案提供思路。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 45只SPF級6～8周齡雄性SD大鼠，體質(zhì)量為（200±20）g，購置于上海斯萊克實驗動物有限責任公司，許可證編號SCXK（滬）2017-0005。

1.1.2 藥物 黨參10 g，黃芪30 g，丹參15 g，當歸8 g，白術(shù)10 g，桃仁15 g，紅花10 g，茯苓10 g，川芎10 g，甘草5 g，白芍15 g，上述飲片購置于福建中醫(yī)藥大學附屬第三人民醫(yī)院，經(jīng)常規(guī)方法煎煮后制成含5 g/mL生藥的藥液放4℃ 冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.3 主要試劑和儀器 鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ，購自Sigma-Aldrich，貨號：S0130-500mg）、戊巴比妥鈉（sigma公司，貨號：P3761，產(chǎn)品CAS：57-33-0）、powerlab多道生理記錄儀由埃德儀器國際貿(mào)易（上海）有限公司提供，穏豪微量血糖測定儀及配套血糖試紙購自美國強生。

1.2 方法

1.2.1 造模 45只隨機分為空白對照組、模型組及益氣活血中藥組（簡稱中藥組），每組15只。所有大鼠搬到實驗動物房后以普通飼料喂養(yǎng)1周，密切觀察大鼠毛發(fā)及排泄物。適應性喂養(yǎng)后禁食12h開始實驗。模型組及益氣活血中藥組以高糖高脂飼料喂養(yǎng)，以STZ（10 mmol/L，60 mg/kg）單次腹腔注射制作大鼠糖尿病心肌病模型，尾靜脈血漿葡萄糖濃度>16.7mmoL/L 可認為糖尿病心肌病模型造模成功?？瞻讓φ战M繼續(xù)以普通飼料喂養(yǎng)，以同體積生理鹽水單次腹腔注射。

1.2.2 給藥 造模成功后繼續(xù)普通飼料喂養(yǎng)8周，符合要求的大鼠進一步進行實驗?？瞻讓φ战M單次腹腔注射生理鹽水，模型組單次腹腔注射STZ，益氣活血中藥組單次腹腔注射STZ，隨后應用中藥生藥灌胃，劑量為100 g/（kg·d），灌胃液體積2 mL/100 g，共連續(xù)處理10 d。每日稱重，根據(jù)體重調(diào)整藥物劑量。

1.3 對比指標

1.3.1 大鼠一般情況 實驗期間嚴密觀察大鼠攝食、飲水、排尿及精神狀態(tài)，監(jiān)測大鼠體重及血糖。

1.3.2 血流動力學檢測 采用頸動脈心室內(nèi)插管法評估各組大鼠心臟血流動力學指標。3%戊巴比妥鈉0.1～0.15 mL/100 g腹腔注射麻醉，暴露右側(cè)頸外動脈，插管后連接多道生理記錄儀壓力換能器，采集生物信號，記錄左室收縮末壓（LVESP）、左室舒張末壓（LVEDP）以及左室壓力最大上升或下降速率（LV+dp/dtmax/LV-dp/dtmax）。

1.4 統(tǒng)計學方法 本次研究所有數(shù)據(jù)使用SPSS22.0軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料采用（x±s）表示，組間采用單因素方差分析（ANOVA），組間涼涼比較采用LSD-t檢驗，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義，P<0.01為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 造模結(jié)果 模型組及造模成功大鼠共計30只，取材前模型組大鼠死亡3只，益氣活血中藥組大鼠死亡2只，原因為血糖過高引起感染。

2.2 各組大鼠一般情況 空白對照組大鼠無多飲、多食、小便增多、體重減輕情況，精神狀態(tài)好，活動自如;模型組大鼠有多飲、多食、小便增多、體重減輕情況，精神狀態(tài)差;益氣活血中藥組灌胃期間癥狀有所改善。各組大鼠體重及血糖情況見表1。

2.3 各組大鼠血流動力學指標比較 各組大鼠心率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。與正常對照組比較，模型組（LVEDP）水平顯著升高（P<0.01），（LV+dp/dt max）、（LV-dp/dt max）水平顯著下降（P<0.01）;與模型組比較，中藥組（LVEDP）顯著下降（P<0.01），LV+dp/dt max水平明顯升高（P<0.05），LV-dp/dt max絕對值顯著升高（P<0.01），見表2。

3 討論

中醫(yī)古籍中無糖尿病心肌病這一病名，《傷寒論》中提到“消渴，氣上撞心，心中痛熱”，認為其具有“消渴”+“心病”的癥狀，命名為“消渴病心病”，陰虛是該病發(fā)病的根本，且貫穿始終，痰濁、瘀血是疾病發(fā)展的產(chǎn)物，分期辯證早期以氣陰兩虛，心脈不和為主，治療上以補氣陰為主，中期發(fā)展為痰瘀互結(jié)，注重祛痰化瘀，進一步發(fā)展終致氣血陰陽俱虛，以滋陰溫陽為主[5]。西醫(yī)認為DCM是獨立與高血壓病、冠脈微血管功能障礙、心房顫動之外的糖尿病心臟損害，通常以舒張性心力衰竭（Diastolic Heart Failure，DHF）為早期表現(xiàn)，即心肌松弛性減低和僵硬度增大，隨著研究不斷深入，學者發(fā)現(xiàn)該類患者后期同時伴隨收縮功能不全，因此重新定義為HFPEF[6-7]。該病目前尚無有效藥物，亦缺乏有效的治療手段，且再住院率很高，高達1/3的患者因心衰再住院，為了改善這一限制，在明確其發(fā)病機制的同時，應啟動早期診治。

多數(shù)中醫(yī)學者在中醫(yī)辨證論治思想的指導下，對HFPEF的治療準則進行探索，認為益氣活血是基本治則[8-11]。本次研究中建立了DCM大鼠模型，給予益氣活血中藥灌胃干預后發(fā)現(xiàn)，模型組大鼠出現(xiàn)LVEDP顯著上升，LV+dp/dt max水平及LV-dp/dt max絕對值明顯降低。中藥組上述指標較模型組有所改善，各項心功能指標有所恢復，提示益氣活血中藥可改善糖尿病致射血分數(shù)保留心力衰竭大鼠心功能，有效延緩心衰的發(fā)展進程，甚至抑制心衰的發(fā)生，是治療HFPEF的挑戰(zhàn)與機遇，有待于進一步完善研究，證實益氣活血中藥對糖尿病心肌病致射血分數(shù)保留心衰大鼠心功能的影響。

近年來，雖然不少研究表明，口服中藥聯(lián)合西醫(yī)常規(guī)治療在改善DHF患者舒張功能指標、癥狀體征、運動耐力以及提高患者生活質(zhì)量等方面優(yōu)于單用西醫(yī)治療，并且口服中藥安全性較好[12]，但受納入試驗數(shù)量和質(zhì)量限制，尚不能對口服中藥治療DHF的效果和安全性做出最終的結(jié)論。目前針對糖尿病心肌病的組方研究仍較少。本研究觀察到益氣活血中藥對糖尿病心肌病大鼠舒張功能有一定改善作用，為探索中藥早期干預糖尿病導致心功能不全提供一定理論基礎(chǔ)和臨床思路。未來應繼續(xù)開展口服中藥治療糖尿病射血分數(shù)保留心力衰竭機制的隨機對照臨床試驗，優(yōu)化方案。

參考文獻：

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（收稿日期：2021-04-07）