陳劍 ，曾艷 ，高子正 ，胡譽懷 ，顏皓 ，徐志飛 ，羅沛華 ，楊波 ，何俏軍

（1. 浙江大學(xué)藥學(xué)院，浙江 杭州 310058；2. 浙江大學(xué)智能創(chuàng)新藥物研究院 浙江省抗腫瘤藥物臨床前研究重點實驗室，浙江 杭州 310018）

早在1962年，Ashford 和 Porter等學(xué)者在人肝細(xì)胞中便觀察到了自噬現(xiàn)象，并在1963年由Christian de Duve提出自噬（autophagy）的概念。當(dāng)細(xì)胞處于營養(yǎng)缺乏或應(yīng)激條件下時，細(xì)胞會將胞質(zhì)中的蛋白或受損細(xì)胞器通過囊泡包裹并運送到溶酶體降解，從而維持能量供應(yīng)和清除有害物質(zhì)[1]。自噬的發(fā)生機制十分復(fù)雜，目前已有40余個自噬相關(guān)基因（autophagy-related genes，ATG）被報道參與自噬體的形成過程，此外自噬還受到多種上游蛋白的協(xié)同調(diào)控[2]。自噬在生物體的生理病理進(jìn)程中發(fā)揮了重要的作用，如參與生物體生長發(fā)育、代謝調(diào)節(jié)以及衰老等過程，同時也與腫瘤的形成、神經(jīng)退行性疾病、心血管系統(tǒng)疾病、克羅恩病和肌病等疾病密切相關(guān)[3]。此外，細(xì)胞自噬在藥物誘導(dǎo)的毒性過程中也發(fā)揮重要的作用，機體內(nèi)自噬的功能或活性異?？烧T導(dǎo)臟器毒性。本文對自噬調(diào)控機制、生理病理作用及在抗腫瘤藥物毒性中的作用與機制進(jìn)行了綜述。

1 自噬的基本概念

細(xì)胞自噬是細(xì)胞的一種自我降解途徑，可以將大量的胞質(zhì)蛋白或細(xì)胞器輸送到哺乳動物細(xì)胞的溶酶體或植物和酵母細(xì)胞的液泡中進(jìn)行降解[4]。這種分解代謝過程在真核細(xì)胞的進(jìn)化過程中高度保守，對于防止細(xì)胞損傷、在能量或營養(yǎng)匱乏的情況下維持細(xì)胞的存活具有重要意義[5]。在對自噬過程的研究中，目前已發(fā)現(xiàn)3種將物質(zhì)遞送到溶酶體中進(jìn)行降解的轉(zhuǎn)運模式，由此可將自噬歸納為3種類型：巨自噬（macroautophagy）、微自噬（microautophagy）和分子伴侶介導(dǎo)的自噬（chaperone-mediated autophagy）。巨自噬是最常見的自噬形式，在此過程中，細(xì)胞會產(chǎn)生雙層膜結(jié)構(gòu)，包裹胞內(nèi)的異常蛋白或受損細(xì)胞器形成自噬體，自噬體最終會與液泡或溶酶體融合并降解其中的“貨物”；在微自噬過程中，液泡膜或溶酶體膜會直接內(nèi)陷并吞噬邊界膜上的細(xì)胞質(zhì)“貨物”；由分子伴侶介導(dǎo)的自噬其底物具有特定序列，由熱休克蛋白70（heat shock protein 70，HSP70）和其他分子伴侶蛋白介導(dǎo)，與溶酶體上的受體LAMP-2A結(jié)合從而進(jìn)入溶酶體降解自噬底物[6-7]。巨自噬是調(diào)控環(huán)境變化和生理信號的主要自噬形式，無特殊說明，本文中提到的自噬均指巨自噬。

2 自噬的過程和分子機制

2.1 自噬的過程

細(xì)胞自噬的過程可分為以下幾步：1）在自噬的啟動階段，酵母細(xì)胞中會形成自噬體前體結(jié)構(gòu)（preautophagosomal structure，PAS）并招募其他Atg蛋白和囊泡等膜成分定位，而在哺乳動物細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上會形成歐米茄體（omegasome）并和分離膜形成杯狀結(jié)構(gòu)。2）在多種Atg（酵母細(xì)胞）/ATG（哺乳動物細(xì)胞）蛋白的協(xié)助下，自噬體的雙層膜延伸并包裹各種胞內(nèi)成分，最終封閉形成自噬體。3）自噬體的外膜與哺乳動物細(xì)胞中溶酶體或酵母中的液泡膜融合，形成自噬溶酶體；內(nèi)膜和其中的包含物被溶酶體內(nèi)的蛋白酶、脂肪酶等分解為小分子，降解產(chǎn)物會返回細(xì)胞質(zhì)被重新用于構(gòu)建新的分子，這在細(xì)胞的新陳代謝中發(fā)揮重要作用[2,5,8]（見圖1[9]）。

圖1 自噬的發(fā)生過程Figure 1 The process of autophagy

2.2 自噬的分子機制

自噬過程從啟動到終止受到多種蛋白質(zhì)的協(xié)同精密調(diào)控，目前在酵母中已鑒定出了40余種ATG基因，其中大多數(shù)在哺乳動物基因組之間表現(xiàn)出顯著的同源性[2]。在眾多基因當(dāng)中，約有18個核心基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞自噬過程中起關(guān)鍵的調(diào)控作用[10]，例如：1）Atg1/unc-51樣激酶（unc-51-like kinase，ULK）復(fù)合體；2）含Atg9/ATG9A的囊泡；3）磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）復(fù)合體；4）類泛素化結(jié)合系統(tǒng)。

2.2.1 Atg1/ULK復(fù)合體Atg1是酵母細(xì)胞中的一種自噬特異性的激酶，Atg1，Atg13，Atg17，Atg29和Atg31共同組成了Atg1 核心復(fù)合體，在自噬體的形成過程中起關(guān)鍵作用。在營養(yǎng)豐富的條件下，雷帕霉素復(fù)合物1（target of rapamycin complex 1，TORC1）與Atg13緊密結(jié)合并使其磷酸化，阻斷其與Atg1和Atg17-Atg31-Atg29復(fù)合物的相互作用[11-13]。在營養(yǎng)剝奪或用雷帕霉素處理抑制TORC1后，Atg13會迅速脫磷酸化并與Atg1結(jié)合，這使得Atg1激酶活性上調(diào)，發(fā)生自身磷酸化并形成二聚體，促進(jìn)分離膜的形成[14-15]。哺乳動物細(xì)胞中與Atg1同源的蛋白是ULK1/2，ULK1/2與ATG13、相對分子質(zhì)量為200 000的黏著斑激酶家族相互作用蛋白（focal adhesion kinase family interacting protein of 200 000，F(xiàn)IR200）和ATG101構(gòu)成ULK1/2復(fù)合體[16]。正常情況下，TORC1能夠與ULK1/2復(fù)合物結(jié)合使其磷酸化來抑制其激酶活性，而在能量匱乏的情況下，TORC1活性降低，ULK1/2被激活并觸發(fā)ATG13，ULK和FIP200的磷酸化[17]。激活的Atg1/ULK復(fù)合體可直接磷酸化酵母中的Atg4和Atg9，以及哺乳動物細(xì)胞中ATG4B，ATG9，ATG14L和PI3K復(fù)合物的亞基BECLIN1等多種蛋白質(zhì)，從而驅(qū)動自噬的發(fā)生。

2.2.2 含Atg9/ATG9A的囊泡Atg9/ATG9A蛋白是自噬相關(guān)蛋白中唯一的跨膜蛋白，研究表明其在引導(dǎo)供體細(xì)胞器膜以形成自噬體過程中起關(guān)鍵作用。在酵母細(xì)胞中，Atg9位于細(xì)胞質(zhì)的移動囊泡上，這些囊泡定位于特定的區(qū)域，可以看做是Atg9在胞質(zhì)中的貯存庫，自噬發(fā)生時，Atg9會在酵母PAS和胞質(zhì)的儲存庫之間來回轉(zhuǎn)運，為自噬體的形成提供脂質(zhì)和蛋白質(zhì)，為分離膜擴張?zhí)峁┰希@個過程需要Atg23和Atg27等蛋白的協(xié)助[18-19]。在哺乳動物細(xì)胞中，ATG9A（Atg9的同源物）的細(xì)胞內(nèi)定位更為復(fù)雜，ATG9A囊泡在反式高爾基體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)（trans Golgi network，TGN）中產(chǎn)生，TGN與ATG9A隔室之間的循環(huán)中包含了豐富的小管和囊泡簇。在能量匱乏的情況下，ATG9A可依賴ULK1和PI3K的活性從反式高爾基體轉(zhuǎn)移到晚期內(nèi)體和自噬泡上。ATG9A也定位于質(zhì)膜，從中產(chǎn)生ATG9A囊泡并運輸?shù)窖h(huán)內(nèi)體，ATG9A隔室和循環(huán)內(nèi)體都被認(rèn)為是自噬體膜的來源[20-22]。

2.2.3 磷脂酰肌醇3-激酶復(fù)合體PI3K是一類重要的信號調(diào)控分子。根據(jù)結(jié)構(gòu)特征和基質(zhì)特異性，PI3K可以分為3類，其中第Ⅲ類的PI3K復(fù)合物（class III PI3K complex，PI3KC3）可磷酸化膜上的磷脂酰肌醇（phosphatidylinositol，PI）來調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長、分化和物質(zhì)運輸[23]，同時也是自噬體形成過程中的主要蛋白復(fù)合物。酵母細(xì)胞中的PI3K復(fù)合物由膜泡分揀蛋白15（vacuolar protein sorting 15，Vps15），Atg6，Vps34，Atg14和Atg38組成[24]， 自噬發(fā)生時，Atg6介導(dǎo)與Atg14的相互作用，將PI3KC3定位于PAS上，復(fù)合物中的Vps34能夠激活PI3K，催化PI磷酸化形成磷脂酰肌醇3-磷酸（phosphatidylinositol 3-phosphate，PI3P），自噬膜上的PI3P可結(jié)合膜結(jié)合蛋白Atg18并將其募集到雙層膜上，故其對于自噬體的伸長和完成至關(guān)重要[25]。在哺乳動物細(xì)胞中，PI3K復(fù)合物參與自噬體的形成及晚期的成熟和轉(zhuǎn)運。Atg6的同源蛋白BECLIN1可與VPS34和VPS15結(jié)合形成核心復(fù)合物[26]，自噬發(fā)生時，BECLIN1-VPS34-VPS15可與ATG14L結(jié)合形成ATG14L-BECLIN1-VPS34-VPS15復(fù)合物參與自噬體的形成，還可與紫外線抵抗相關(guān)基因（UV radiation resistance-associated gene，UVRAG）編碼的蛋白結(jié)合形成UVRAG-BECLIN1-VPS34-VPS15復(fù)合物，在自噬體的成熟和轉(zhuǎn)運中產(chǎn)生重要影響[27-28]。

2.2.4 類泛素化結(jié)合系統(tǒng)細(xì)胞自噬過程中存在2個與泛素修飾系統(tǒng)相似的蛋白質(zhì)結(jié)合系統(tǒng)，這2種結(jié)合體系在進(jìn)化上都是保守的，在自噬體的延伸過程中發(fā)揮重要的作用。其一是Atg12連接體系，在自噬進(jìn)程中泛素活化酶（ubiquitin-activating enzyme，E1）樣酶Atg7以ATP依賴的方式與Atg12羧基末端的甘氨酸殘基結(jié)合并將它激活，接著將Atg12轉(zhuǎn)移至泛素結(jié)合酶（ubquitin-conjugation enzyme，E2）樣酶Atg10，Atg10有類似E2的作用，介導(dǎo)Atg12與Atg5的賴氨酸殘基結(jié)合，再與Atg16結(jié)合形成Atg12-Atg5-Atg16復(fù)合物[29]。Atg16含有卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域，可以自身結(jié)合，最終構(gòu)成2 : 2 : 2的復(fù)合體，此多聚復(fù)合物為自噬過程所必需[30]。其二是Atg8連接體系，首先Atg8的C端被蛋白酶Atg4剪切，末端變?yōu)楦拾彼?，之后E1樣酶Atg7將Atg8傳遞到E2樣酶Atg3，在Atg12-Atg5-Atg16復(fù)合物的協(xié)助定位下，最終與雙層膜上的磷脂酰乙醇胺（phosphatidyl ethanolamine，PE）結(jié)合，幫助自噬體雙層膜的擴展[31-32]。在哺乳動物細(xì)胞中，LC3是Atg8的同源蛋白，被hATG4B剪切變成LC3-Ⅰ，再同樣經(jīng)過ATG7和ATG3的協(xié)助與膜上的PE結(jié)合，成為膜結(jié)合形式LC3-Ⅱ[33]。LC3-Ⅱ與自噬體膜緊密結(jié)合，當(dāng)與溶酶體融合后則會被降解，因此常將LC3-Ⅱ作為自噬體的表面標(biāo)記物[34]。

2.3 自噬的調(diào)控機制

2.3.1 依賴哺乳動物雷帕霉素靶蛋白的調(diào)節(jié)通路哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）屬于絲氨酸/蘇氨酸激酶，參與細(xì)胞發(fā)育、核糖體生成和代謝調(diào)控等生物學(xué)過程。mTOR以2種形式存在：mTORC1和mTORC2，前者主要在細(xì)胞生長、凋亡和自噬中發(fā)揮作用，后者調(diào)控細(xì)胞骨架蛋白的構(gòu)建和存活[35-36]。mTORC1通過磷酸化Atg1/ULK復(fù)合體使其失活，對細(xì)胞自噬起負(fù)調(diào)控作用，可被雷帕霉素阻斷；mTORC2對雷帕霉素不敏感，不直接參與自噬調(diào)節(jié)。一般認(rèn)為，mTOR是調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、增殖和自噬等上游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的聚集點，如腺苷酸活化蛋白激酶（AMPactived protein kinase，AMPK）、絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）和PI3KC1等多種信號[37]。

1）腺苷酸活化蛋白激酶信號通路

AMPK是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，能夠感知AMP/ATP的變化，在細(xì)胞中充當(dāng)能量傳感器。在各種生理和病理條件下，AMPK可被上游激酶磷酸化，并與AMP或ADP結(jié)合導(dǎo)致其活化，從而調(diào)節(jié)各種代謝過程[35]。AMPK通過磷酸化mTORC1，ULK1和PIK3C3/VPS34復(fù) 合 物 等自噬相關(guān)蛋白，或通過調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子[如叉頭框蛋白O3（Forkhead box O3，F(xiàn)OXO3），轉(zhuǎn)錄因子EB（transcription factor EB，TFEB）和溴結(jié)構(gòu)域蛋白4（bromodomain-containing protein 4，BRD4）]調(diào)控下游ATG的表達(dá)，直接促進(jìn)自噬發(fā)生。此外，由于AMPK可誘導(dǎo)受損線粒體的片段化，并促進(jìn)自噬體向受損線粒體的易位，其還可上調(diào)線粒體的自噬降解水平[38-39]。

2）絲裂原活化蛋白激酶信號通路

與AMPK類似，MAPK作為另一類重要的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，參與細(xì)胞的生長、分化、對環(huán)境的應(yīng)激適應(yīng)和炎癥反應(yīng)等多種重要的生理/病理過程。MAPK信號通路有4條主要的分支路線，分別為：細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracellular regulated protein kinase，ERK）、c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK）、P38 MAPK和ERK5。MAPK/ERK信號通路可被受體酪氨酸激酶激活，活化的ERK二聚體可直接激活mTOR或通過影響結(jié)節(jié)性硬化復(fù)合物（tuberous sclerosis complex，TSC）1/2的形成調(diào)控mTOR，從而影響自噬[40]。另有研究表明，JNK通路的激活可誘導(dǎo)癌細(xì)胞的自噬和凋亡，P38 MAPK信號通路可介導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑誘導(dǎo)人牙齦細(xì)胞自噬[41]。

3）PI3K/AKT/mTOR信號通路

PI3K/蛋白激酶B（protein kinase B，PKB，即AKT）/mTOR信號通路是調(diào)控細(xì)胞生命活動的經(jīng)典通路之一，參與調(diào)控細(xì)胞分裂、分化、凋亡、能量代謝和腫瘤發(fā)生等過程。PI3K/AKT是mTOR上游的主要調(diào)節(jié)劑，當(dāng)Ⅰ類PI3K被激活后，它能作用于磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸[phosphatidylinositol (4，5) bisphosphate，PIP2]并 使 其 轉(zhuǎn) 變 為PIP3，PIP3募集AKT和3-磷酸肌醇依賴性蛋白激酶-1（3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1，PDK1）到細(xì)胞內(nèi)膜附近，同時AKT蛋白的Ser308位點被磷酸化而激活?；罨腁KT可以磷酸化TSC1/2并使RAS蛋白腦組織同源類似物（RAS homolog enriched in brain，RHEB）與三磷酸尿苷水解酶（GTP酶）結(jié)合最終促進(jìn)mTOR的累積和活化，從而抑制自噬的發(fā)生。此外，AKT也可直接通過磷酸化mTOR分子來抑制自噬[42]。

4）P53信號通路

P53是一種腫瘤抑制因子，在細(xì)胞中可被廣泛的應(yīng)激條件激活，例如DNA損傷、缺氧或異常癌基因表達(dá)，以促進(jìn)細(xì)胞周期檢查點、DNA修復(fù)、細(xì)胞衰老和凋亡。有關(guān)P53的研究多集中在其與凋亡的關(guān)系上，但近年的文章也發(fā)現(xiàn)了它與自噬間的關(guān)系。在營養(yǎng)缺乏或毒性的刺激下，P53可以通過激活A(yù)MPK或通過DNA損傷調(diào)節(jié)自噬調(diào)控因子（DNA damage regulated autophagy modulator，DRAM）的反式激活抑制mTOR并刺激自噬[43-45]。另一個促進(jìn)自噬的P53靶基因是ISG20L1，ISG20L1的過表達(dá)能促進(jìn)自噬和細(xì)胞死亡[46]。

2.3.2 不依賴mTOR的調(diào)節(jié)通路BECLIN1是組成PI3KC3復(fù)合物的蛋白之一，在自噬形成的早期階段起到重要的作用。然而，在自噬過程中BECLIN1除了能與PI3KC3結(jié)合外，還能與UVRAG，Bax相互作用因子1（Bax interacting factor 1，BIF-1）和BECLIN1調(diào)節(jié)自噬的激活分子（activating molecule in BECLIN1 regulated autophagy，AMBRA）等蛋白結(jié)合，并正向調(diào)節(jié)PI3KC3復(fù)合物的活性來激活自噬。此外，BECLIN1還能與抗凋亡蛋白BCL-2[B細(xì)胞淋巴瘤/白血病2基因（B-cell lymphoma 2，BCL-2）編碼產(chǎn)物]以及BCL-XL結(jié)合，所形成的復(fù)合物具有抑制自噬信號的功能[47-48]。

3 自噬在生理病理中的作用

3.1 自噬的生理作用

細(xì)胞自噬廣泛存在于人體正常細(xì)胞的生理過程中，總體來說，自噬介導(dǎo)了細(xì)胞中的幾種生物功能，例如細(xì)胞質(zhì)物質(zhì)的清除、降解產(chǎn)物的產(chǎn)生以及物質(zhì)從細(xì)胞質(zhì)到溶酶體的轉(zhuǎn)運[49-50]。自噬最基本的作用是適應(yīng)機體的代謝需求，在饑餓或能量需求增加的情況下，細(xì)胞通過自噬溶酶體降解產(chǎn)物的再利用維持正常能量供應(yīng)和蛋白質(zhì)的合成。實驗表明，新生的小鼠在中斷胎盤營養(yǎng)供應(yīng)后可通過上調(diào)細(xì)胞自噬水平來維持生存[51]。同時自噬能起到維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的作用，在一些長壽細(xì)胞群中，細(xì)胞不能夠通過增殖來更新?lián)Q代，細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的一些有害物質(zhì)如異常蛋白質(zhì)聚集體或損傷的細(xì)胞器可通過自噬途徑清除，以維持細(xì)胞的正常狀態(tài)。此外，在病原體感染過程中，自噬通過降解細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌和病毒來幫助免疫反應(yīng)。還有研究表明自噬有助于延長哺乳動物的壽命和“健康跨度”[52]。例如在正?；蜻m度應(yīng)激的心肌細(xì)胞中，自噬可以降解失活的蛋白質(zhì)為氨基酸，作為心肌細(xì)胞生存和發(fā)育的物質(zhì)來源之一；在缺氧的條件下，自噬可以增加ATP的合成，維持心肌細(xì)胞的能量代謝；另外，心肌細(xì)胞富含線粒體，在不良條件下線粒體容易發(fā)生損傷，釋放促凋亡因子如細(xì)胞色素c誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，而自噬能夠清除受損線粒體阻斷凋亡，保護心肌細(xì)胞免受損傷[53]。

3.2 自噬的病理作用

在大多數(shù)情況下，自噬作為一種重要的細(xì)胞保護機制發(fā)生在較低的基礎(chǔ)水平，能在不利條件下提高細(xì)胞抗壓能力并維持存活，而自噬的功能破壞與許多疾病的發(fā)生發(fā)展存在相關(guān)性。動物實驗的結(jié)果顯示自噬關(guān)鍵編碼基因敲減或缺失小鼠的自噬水平受到抑制，導(dǎo)致機體喪失自我調(diào)節(jié)的能力，無法應(yīng)對外界生存環(huán)境中的變化。對人類來說，自噬功能障礙會導(dǎo)致許多疾病的發(fā)生發(fā)展，包括癌癥、心血管系統(tǒng)疾病、克羅恩病和神經(jīng)退行性疾病如阿爾茨海默病、亨廷頓病和帕金森病等。

3.2.1 癌癥自噬在腫瘤中發(fā)揮的作用具有雙向性，在腫瘤發(fā)展的早期階段，自噬可以防止腫瘤發(fā)生并抑制癌癥進(jìn)展，然而在腫瘤發(fā)展的后期階段或是在應(yīng)激條件下，自噬可以作為一種保護機制促進(jìn)腫瘤的發(fā)展[23]。BECLIN1是在細(xì)胞自噬中發(fā)揮重要作用的蛋白，在75%的人類肝癌、乳腺癌、卵巢癌和前列腺癌病例中都能觀察到BECLIN1基因的缺失，Qu等[54]采用基因敲除的方法建立Beclin1+/-小鼠模型，發(fā)現(xiàn)Beclin1單等位基因缺失可以增加自發(fā)性惡性腫瘤的頻率，并且加速了乙型肝炎病毒誘導(dǎo)的癌前病變的發(fā)展，說明Beclin1基因缺失導(dǎo)致的自噬水平下降可促進(jìn)癌癥的發(fā)展。在另一些癌癥如胃癌、結(jié)直腸癌、宮頸癌患者組織中可以觀察到BECLIN1自噬基因的上調(diào)，這是由于在應(yīng)激條件下，自噬可以幫助腫瘤細(xì)胞去除受損的線粒體、抑制DNA損傷、維持基因組穩(wěn)定、限制炎癥，從而有助于腫瘤細(xì)胞的存活[23]。以上結(jié)果說明自噬與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，但在不同的腫瘤或腫瘤發(fā)展的不同階段，自噬所起到的作用會存在差別。

3.2.2 心血管系統(tǒng)疾病心血管系統(tǒng)疾病包括缺血/再灌注損傷（ischemia-reperfusion injury，IRI）、心肌梗死、心肌肥厚和心力衰竭等，心肌細(xì)胞的死亡是誘發(fā)此類疾病的關(guān)鍵因素，而自噬調(diào)控在心血管系統(tǒng)疾病中發(fā)揮重要作用[55]。自噬過程的抑制是心功能障礙和重構(gòu)心肌細(xì)胞死亡的關(guān)鍵原因，在多種心臟病中都伴有自噬活性的降低[56]。在斑馬魚心肌細(xì)胞中特異性敲除atg5，atg7和beclin1，會導(dǎo)致斑馬魚心臟缺陷，并降低斑馬魚生存率。心肌細(xì)胞特異性缺失atg5會引起心肌肥厚和功能障礙，心肌細(xì)胞特異性缺失atg7會引起心臟收縮功能障礙[57]。而自噬體-溶酶體融合所需的溶酶體相關(guān)膜蛋白LAMP-2的全身敲除會導(dǎo)致自噬空泡的積累，降低小鼠的心臟收縮能力和生存率，IRI可通過損害自噬體-溶酶體融合以及損害自噬小體清除引起心肌細(xì)胞死亡[58]。另一方面，非適應(yīng)性的自噬水平可能會通過影響關(guān)鍵底物蛋白的降解導(dǎo)致心肌細(xì)胞死亡。蘇尼替尼會誘導(dǎo)心肌細(xì)胞關(guān)鍵蛋白細(xì)胞通信網(wǎng)絡(luò)因子2（cellular communication network factor 2，CCN2）的過度自噬降解，從而導(dǎo)致心肌細(xì)胞死亡[59-60]，自噬抑制也可能通過促進(jìn)有害蛋白的積累而導(dǎo)致心肌細(xì)胞死亡和心功能障礙。這說明自噬活性的精細(xì)調(diào)控對正常心功能和內(nèi)穩(wěn)態(tài)是必需的，靶向自噬活性異?？赡苁菍棺允上嚓P(guān)心血管系統(tǒng)疾病的可行策略。

3.2.3 克羅恩病克羅恩病是一種胃腸道的慢性非特異性炎癥性腸病，其發(fā)病原因與多種因素有關(guān)，包括Paneth細(xì)胞功能障礙、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、炎癥反應(yīng)和自噬缺陷等。在克羅恩病與自噬相關(guān)的研究中，自噬基因ATG16L1被認(rèn)為是克羅恩病的風(fēng)險等位基因[61]，ATG16L1基因N端區(qū)域（在酵母ATG16中保守）和C端WD重復(fù)結(jié)構(gòu)域之間的T300A突變增加了克羅恩病的風(fēng)險。Atg16L1基因缺失或Atg16L1T300A敲入小鼠具有各種異常表型，例如巨噬細(xì)胞中促炎細(xì)胞因子的釋放增強，Paneth細(xì)胞的顆粒分泌減少，對沙門菌感染的易感性增加以及T細(xì)胞免疫失調(diào)，這可能都與克羅恩病的發(fā)生相關(guān)[62-64]。

3.2.4 神經(jīng)退行性疾病神經(jīng)退行性疾病是年齡依賴性遺傳性或散發(fā)性疾病，表現(xiàn)為神經(jīng)功能退行性喪失。線粒體功能障礙或由于突變和清除機制受損而導(dǎo)致的蛋白質(zhì)聚集體積累是引發(fā)神經(jīng)退行性疾病的主要原因。神經(jīng)元是不可再生細(xì)胞，無法通過細(xì)胞分裂去除受損的細(xì)胞，而細(xì)胞自噬作為清除異常蛋白質(zhì)的方式可以防止神經(jīng)元的損傷。在小鼠模型中，特異性敲除神經(jīng)元細(xì)胞的自噬基因會使泛素化蛋白包涵體的堆積增多，誘發(fā)神經(jīng)退行性疾病[65-66]。同樣，神經(jīng)退行性疾病患者的自噬水平也發(fā)生失調(diào)，如帕金森病患者的多巴胺能神經(jīng)元中α-突觸核蛋白錯誤折疊和聚集，而這種蛋白的蓄積具有細(xì)胞毒性，可能通過阻斷內(nèi)質(zhì)網(wǎng)-高爾基體水泡運輸而阻礙自噬。在亨廷頓病中，亨廷頓蛋白基因中CAG三核苷酸的序列發(fā)生重復(fù)并擴增，使翻譯出的蛋白質(zhì)含有膨脹的聚谷氨酰胺束，最終錯誤折疊形成致病構(gòu)象。在治療手段上，增強神經(jīng)退行性疾病患者的自噬水平已被證明可以減少異常蛋白質(zhì)的積累并起到治療作用[49,67]。

4 自噬在抗腫瘤藥物毒性中的作用與分子機制

腫瘤的治療一直是醫(yī)藥學(xué)領(lǐng)域的研究熱點和難點，惡性腫瘤即癌癥已成為導(dǎo)致人類死亡的主要原因之一，對人類的生命健康造成了很大的威脅。目前臨床上治療惡性腫瘤的方法以化療為主，這些化療藥物包括烷化劑類藥物、抗腫瘤抗生素、抗腫瘤激素類藥物、金屬鉑類藥物、抗代謝藥物和抗腫瘤植物藥等[68]。然而，抗腫瘤藥物的連續(xù)、大量使用，在殺死腫瘤細(xì)胞的同時可能也會造成正常細(xì)胞的損傷而產(chǎn)生毒性，包括心臟毒性、肺毒性、肝臟毒性、胃腸道毒性、血液毒性和神經(jīng)毒性等[69]。這些藥物相關(guān)毒性限制了抗腫瘤治療過程中的藥物使用劑量和療程，降低了患者的總體預(yù)后與生存質(zhì)量。因此，通過研究抗腫瘤藥物引起毒性的分子機制，找到合適的干預(yù)策略以降低毒性并提高療效成為一個亟待解決的問題。目前許多有關(guān)抗腫瘤藥物引起臟器毒性機制的研究表明，自噬在其中起到了重要作用，某些抗腫瘤藥物會破壞機體正常的自噬水平，這可能引發(fā)保護性自噬或?qū)е轮滤佬宰允傻陌l(fā)生。

4.1 抗腫瘤藥物的毒性誘發(fā)機體產(chǎn)生保護性自噬

某些抗腫瘤藥物在應(yīng)用后其副作用會導(dǎo)致臟器的損傷，在這種條件下機體可能會激活自身的保護性自噬，這有助于不良因素的清除，維持細(xì)胞在惡劣條件下的存活（見圖2）。

圖2 保護性自噬的機制Figure 2 Mechanisms of protective autophagy

蛋白激酶抑制劑達(dá)沙替尼在臨床上用于治療慢性髓細(xì)胞性白血?。╟hronic myelogenous leukemia，CML）。然而該藥具有較強的肝毒性，在CML患者中超過半數(shù)患者體內(nèi)谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶含量升高，此外還有少數(shù)伴有膽紅素的升高[70]。Yang等[71]研究發(fā)現(xiàn)達(dá)沙替尼在導(dǎo)致大鼠肝細(xì)胞毒性的同時也升高了肝細(xì)胞中LC3-Ⅱ的水平，表明其誘導(dǎo)了自噬。若通過PI3KC3抑制劑3-MA或siRNA沉默Atg5來抑制細(xì)胞自噬，則會增加達(dá)沙替尼引起的肝細(xì)胞凋亡，由此說明達(dá)沙替尼自身誘導(dǎo)的自噬對肝細(xì)胞具有保護作用，若激活肝細(xì)胞的自噬水平則有利于改善藥物的肝毒性。后續(xù)的實驗表明達(dá)沙替尼通過活化P38-MAPK通路激活自噬，而P38可作為改善肝毒性的潛在靶點。鹽酸異丙腎上腺素（isoproterenol，ISO）具有激活P38的作用，對肝細(xì)胞合用達(dá)沙替尼和ISO后結(jié)果顯示細(xì)胞的自噬水平增強、細(xì)胞死亡數(shù)減少，證明ISO可通過激活P38誘導(dǎo)自噬來減少達(dá)沙替尼對肝臟的毒性作用。

順鉑是一種含鉑的抗癌藥物，臨床上對卵巢癌、前列腺癌、睪丸癌、肺癌、鼻咽癌和食道癌等多種癌癥具有療效。然而，25% ～ 30%的順鉑治療患者可能會出現(xiàn)腎毒性，如急性腎損傷，限制了其臨床應(yīng)用[72]。Zhu等[73]研究發(fā)現(xiàn)用順鉑處理48 h的HK2細(xì)胞中LC3-Ⅱ水平升高，而P62水平降低，在合用自噬激活劑雷帕霉素或拉帕替尼后觀察到細(xì)胞活力增加，而合用自噬抑制劑羥氯喹后細(xì)胞活力進(jìn)一步降低，表明自噬在順鉑誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷中起保護作用。先前的研究表明海藻糖可改善多囊腎和Akt2敲除誘導(dǎo)的小鼠胰島素抵抗模型中的腎功能[74]， Zhu等[73]進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)海藻糖可通過增加自噬轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)劑TFEB的活化來增強自噬，協(xié)同機體自身的保護性自噬減輕順鉑誘導(dǎo)的急性腎損傷。

4.2 抗腫瘤藥物過度激活自噬導(dǎo)致臟器損傷

4.2.1 自噬進(jìn)程通暢，導(dǎo)致關(guān)鍵蛋白降解，引發(fā)損傷有的抗腫瘤藥物在發(fā)揮治療作用的同時可能會誘導(dǎo)細(xì)胞自噬水平的升高，過度的自噬會導(dǎo)致關(guān)鍵蛋白被降解，影響細(xì)胞正常功能，或通過促進(jìn)細(xì)胞凋亡，從而產(chǎn)生毒性（見圖3）。

圖3 抗腫瘤藥物相關(guān)毒性的發(fā)生機制Figure 3 Mechanisms of anti-tumor drug-related toxicity

蘇尼替尼是一種小分子多靶點的酪氨酸激酶抑制劑，對腎細(xì)胞癌、胃腸間質(zhì)瘤等多種腫瘤具有治療作用，但其具有顯著的心臟毒性，會造成左心室功能障礙和心肌細(xì)胞的死亡。Xu等[59]研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)蘇尼替尼處理后，心肌細(xì)胞中LC3-Ⅱ的表達(dá)呈時間和濃度依賴性增加，表明蘇尼替尼升高了心肌細(xì)胞的自噬水平，而自噬的激活使得心臟中的一種細(xì)胞通信相關(guān)的關(guān)鍵蛋白CCN2通過自噬溶酶體途徑降解。CCN2蛋白在心臟中高度表達(dá)，但其生理病理學(xué)作用復(fù)雜，目前尚未完全闡明，但感染帶有靶向CCN2的siRNA的腺相關(guān)病毒9（adeno-associated virus 9，AAV9）以敲低小鼠心臟CCN2水平可導(dǎo)致心肌細(xì)胞凋亡和心功能障礙，說明了CCN2與心臟損傷的相關(guān)性。此外，在小鼠心肌細(xì)胞中特異性雜合敲除Atg7能夠逆轉(zhuǎn)蘇尼替尼導(dǎo)致的心臟損傷。以上結(jié)果說明蘇尼替尼能夠激活心肌細(xì)胞的自噬，使關(guān)鍵蛋白CCN2通過自噬途徑降解，從而引發(fā)了心臟損傷。

吉非替尼是非小細(xì)胞肺癌臨床使用最為廣泛的藥物，然而在接受吉非替尼治療的患者中，高達(dá)50% ～ 70%的患者出現(xiàn)了肝損傷，影響了吉非替尼治療的總體療效。Luo等[75]通過實驗發(fā)現(xiàn)吉非替尼的應(yīng)用增加了肝細(xì)胞中凋亡標(biāo)記物多聚（ADP-核糖）聚合酶（裂解的）[ cleaved poly(ADP-ribose)polymerase，c-PARP]和自噬標(biāo)記物L(fēng)C3-Ⅱ的表達(dá)水平，GFP-mCherry-LC3轉(zhuǎn)染細(xì)胞檢測自噬流發(fā)現(xiàn)綠色熒光消失，紅色熒光保持穩(wěn)定，說明吉非替尼激活了肝細(xì)胞的自噬和凋亡；對線粒體數(shù)量的檢測顯示吉非替尼對線粒體并沒有影響，因此推測某些關(guān)鍵蛋白質(zhì)的降解可能是肝損傷的原因；通過蛋白質(zhì)組學(xué)的方法比較對照組、吉非替尼組和吉非替尼合用氯喹組，篩選出3種差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，其中細(xì)胞色素c氧化酶6A1（cytochrome c oxidase subunit 6A1，COX6A1）的表達(dá)量受吉非替尼時效和量效影響最大；為了驗證COX6A1通過自噬降解，作者用免疫熒光的方法發(fā)現(xiàn)在吉非替尼加氯喹的作用下COX6A1與mCherry-GFP-LC3B發(fā)生共定位，表明COX6A1存在于自噬體中；用siRNA構(gòu)建COX6A1缺陷的肝細(xì)胞發(fā)現(xiàn)這促進(jìn)了肝細(xì)胞的凋亡。這些證據(jù)表明吉非替尼誘導(dǎo)肝細(xì)胞自噬過度激活，降解了關(guān)鍵蛋白COX6A1，這種蛋白的缺失導(dǎo)致肝細(xì)胞凋亡的增加，由此產(chǎn)生了肝臟毒性。

4.2.2 自噬進(jìn)程阻斷，導(dǎo)致自噬體累積、蛋白質(zhì)異常累積，引發(fā)損傷若抗腫瘤藥物影響自噬的進(jìn)程，如抑制自噬體溶酶體的融合，或是降低溶酶體的降解功能，則會導(dǎo)致自噬不能正常清除細(xì)胞內(nèi)的異常蛋白質(zhì)或受損細(xì)胞器，由此會對細(xì)胞產(chǎn)生毒性。

伊馬替尼是首個被批準(zhǔn)的酪氨酸激酶抑制劑，在臨床可用于治療CML、急性淋巴細(xì)胞白血病、胃腸道間質(zhì)腫瘤和肥大細(xì)胞增多癥等，然而伊馬替尼的使用可能會引起不良反應(yīng)，如水腫、肌痛、胃腸道刺激、血液毒性和肝臟毒性等。Roos等[76]用人肝癌細(xì)胞系HepG-2和HuH-7細(xì)胞研究了伊馬替尼導(dǎo)致肝毒性的機制。他們發(fā)現(xiàn)在給予伊馬替尼后，細(xì)胞中的溶酶體數(shù)量和體積都顯著增加，通過吖啶橙染色評估溶酶體pH，結(jié)果顯示伊馬替尼升高了溶酶體pH并擾亂了水解酶的活性。溶酶體功能的障礙激活了轉(zhuǎn)錄因子TFEB，TEFB具有增加溶酶體合成和增強自噬的功能。對自噬相關(guān)基因BECLIN1，P62，UVRAG和微管相關(guān)蛋白1輕鏈3β（microtubule associated protein 1 light chain 3 beta，MAP1LC3B）的表達(dá)進(jìn)行檢測發(fā)現(xiàn)伊馬替尼上調(diào)了上述基因，且電子顯微鏡下觀察可看到細(xì)胞中自噬體數(shù)量的增多。由于mTORC1和TEFB之間存在相關(guān)性，Roos等又對mTORC1進(jìn)行了評估發(fā)現(xiàn)其含量下調(diào)?？傮w而言，伊馬替尼會誘導(dǎo)溶酶體功能障礙，這導(dǎo)致TEFB的活化和mTORC1活性下降，細(xì)胞自噬增強，自噬體積累，并最終誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，從而產(chǎn)生了肝臟毒性。

5 基于自噬水平調(diào)控的抗腫瘤藥物毒性干預(yù)策略

調(diào)控抗腫瘤藥物毒性作用引起的自噬，也就是在自噬發(fā)生的不同階段進(jìn)行干預(yù)從而恢復(fù)機體正常的自噬水平。總體可以分為兩方面，一是升高自噬水平來緩解藥物毒性，二是降低過度激活的自噬水平以減輕毒性作用。

5.1 升高自噬水平減輕藥物毒性

某些抗腫瘤藥物在發(fā)揮治療作用的同時，可能會降低某些臟器細(xì)胞的自噬水平，導(dǎo)致一些有害蛋白或受損細(xì)胞器的積累，從而產(chǎn)生一定的毒性。因此，通過合適的途徑升高細(xì)胞的自噬水平是一種可行的治療方法。

抗癌抗生素博來霉素能通過抑制胸腺嘧啶核苷酸摻入DNA，從而干擾DNA的合成，在臨床上用于治療肺癌、宮頸癌、陰道癌、食道癌、頭頸部及皮膚鱗狀癌。然而，應(yīng)用博來霉素的患者會出現(xiàn)間質(zhì)性肺炎的癥狀，且常發(fā)展為肺纖維化，限制了博來霉素的應(yīng)用和治療效果[77]。在博來霉素誘導(dǎo)的小鼠肺纖維化模型中可觀察到肺組織中LC3-Ⅱ/Ⅰ和BECLIN1的表達(dá)被顯著抑制，而P62的表達(dá)增加，說明自噬受到抑制。先前的研究表明，博來霉素會引起PI3K/AKT/mTOR途徑的異常激活，已有許多策略通過靶向此信號通路產(chǎn)生抗肺纖維化作用[78]。Mu等[79]通過生酮飲食模擬饑餓的代謝狀態(tài)，抑制過度激活的PI3K/AKT/mTOR信號通路，促進(jìn)自噬來減輕肺纖維化。此外，Baek等[80]研究發(fā)現(xiàn)采用內(nèi)源性多胺——亞精胺，同樣可以誘導(dǎo)自噬和抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激來緩解博來霉素誘導(dǎo)的肺纖維化。

5.2 降低自噬水平減輕藥物毒性

另一些抗腫瘤藥物在治療疾病時會導(dǎo)致自噬的過度激活，從而導(dǎo)致細(xì)胞中一些關(guān)鍵蛋白被降解，或是引起細(xì)胞程序性死亡而產(chǎn)生毒性作用，因此通過相應(yīng)手段抑制自噬能夠減輕毒性。

抗腫瘤抗生素阿霉素的抗瘤譜較廣，對多種腫瘤疾病如白血病、惡性淋巴瘤和乳腺癌等具有治療作用。然而阿霉素的心臟毒性是其最嚴(yán)重的毒性和副作用，限制了其在臨床上的應(yīng)用。目前提出的阿霉素引起心臟毒性的機制包括氧化應(yīng)激增加、活性氧（reactive oxygen species，ROS）積累、心肌細(xì)胞鈣離子水平失調(diào)以及細(xì)胞自噬和凋亡水平升高等[81]。 自噬在阿霉素的心臟毒性中起到一定的作用，阿霉素可能通過P53介導(dǎo)的GATA結(jié)合蛋白4（GATA binding protein 4，GATA4）抑制誘導(dǎo)自噬啟動，導(dǎo)致BCL-2蛋白下調(diào)，BECLIN1，ATG5，ATG12和ATG4等蛋白上調(diào)，過度激活的自噬導(dǎo)致了心肌細(xì)胞死亡[82]。 在治療策略上，研究表明二甲雙胍能夠降低細(xì)胞中H2O2的水平，并通過AMPK激活為線粒體損傷提供保護機制，其還能抑制自噬的異常激活，維持大鼠自噬標(biāo)志物如LC3B-Ⅱ和P62在正常水平，從而改善心臟功能[83]。此外，還有研究表明姜黃素可上調(diào)PI3K/AKT/mTOR通路，減少自噬水平而顯示出對心臟毒性的保護作用[84]。

中草藥雷公藤的主要有效成分為雷公藤甲素（triptolide，TP），臨床上廣泛用于治療各種腫瘤、炎癥和自身免疫性疾病。然而，TP的毒性和副作用明顯，對消化系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)和泌尿系統(tǒng)均有損傷作用，其中肝臟毒性最為明顯。TP導(dǎo)致肝毒性的機制十分復(fù)雜，包括脂質(zhì)過氧化損傷、肝臟代謝紊亂、誘發(fā)自噬和凋亡等[85-86]。Zhang等[87]研究發(fā)現(xiàn)，給予TP后肝細(xì)胞中的LC3-Ⅱ和BECLIN1表達(dá)上調(diào)，表明其可激活自噬進(jìn)程。TP合用mTOR抑制劑RAPA提高自噬水平會進(jìn)一步降低肝細(xì)胞活力，合用自噬抑制劑3-MA降低自噬水平則能逆轉(zhuǎn)毒性，證明自噬激活是TP誘導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷的重要機制之一。先前有研究表明，梓醇對TP誘導(dǎo)的肝毒性具有保護作用，Zhang等[87]進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)TP誘導(dǎo)的過度自噬是通過蛋白激酶R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶（protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase，PERK）-活化轉(zhuǎn)錄因子4（activating transcription factor 4，ATF4）-C/EBP同源蛋白（C/EBP-homologous protein，CHOP）通路介導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激導(dǎo)致的，而梓醇可以抑制PERK-ATF4-CHOP 通路，下調(diào)過度的自噬，從而達(dá)到緩解TP肝毒性的作用。

6 總結(jié)與展望

腫瘤是嚴(yán)重威脅人類健康的重要疾病之一，抗腫瘤藥物的研發(fā)始終受到廣泛關(guān)注。然而，抗腫瘤藥物常存在安全性問題，主要集中于器官的毒性問題，這也是導(dǎo)致抗腫瘤藥物研發(fā)失敗的關(guān)鍵因素，因此尋找抗腫瘤藥物毒性的干預(yù)策略成為一個亟待解決的問題。自噬是細(xì)胞中重要的物質(zhì)降解途徑，在許多生理病理活動中發(fā)揮作用。近年來隨著人們對自噬機制的認(rèn)識的不斷深入，自噬和藥物毒性之間的研究也逐漸增多。在抗腫瘤藥物引發(fā)的臟器毒性中，自噬發(fā)揮的角色具有雙向作用。一是抗腫瘤藥物引發(fā)的毒性可激活細(xì)胞的保護性自噬，二是抗腫瘤藥物引起細(xì)胞的致死性自噬，這可能與關(guān)鍵蛋白的降解或自噬體-溶酶體融合的阻斷有關(guān)。針對基于自噬水平調(diào)控的干預(yù)策略來說，使用自噬泛抑制劑往往會抑制基礎(chǔ)自噬水平，對心臟和肝臟等基礎(chǔ)代謝水平較高的臟器造成損傷。因此更需對抗腫瘤藥物引起過度自噬的機制進(jìn)行深入研究，找到合適的干預(yù)手段，克服抗腫瘤藥物毒性問題，同時這也有助于建立精準(zhǔn)毒性篩選模型，提高藥物研發(fā)成功率。

目前有關(guān)自噬與抗腫瘤藥物毒性之間的研究主要集中于自噬下游關(guān)鍵底物蛋白的變化，如自噬的過度激活影響了心肌細(xì)胞中CCN2的表達(dá)水平，使得心肌細(xì)胞凋亡從而產(chǎn)生了心臟毒性。然而，在抗腫瘤藥物毒性的發(fā)生和發(fā)展過程中起作用的可能有數(shù)種蛋白，僅研究某種底物蛋白的含量變化難以全面而準(zhǔn)確地揭示抗腫瘤藥物的毒性機制，并且僅對底物蛋白進(jìn)行研究也難以推動毒性干預(yù)策略的發(fā)現(xiàn)。藥物毒性的干預(yù)靶標(biāo)通常是在某一信號通路的上游，然而目前針對抗腫瘤藥物調(diào)控自噬水平的上游關(guān)鍵靶蛋白的研究還不夠深入，尚不確定抗腫瘤藥物是否通過影響AMPK，MAPK，PI3K/AKT/mTOR等上游激酶的活性引起自噬水平的改變。相應(yīng)的研究有助于找到對應(yīng)的干預(yù)策略，比如合用其他藥物，在不影響抗腫瘤治療效果的同時減少自噬相關(guān)的毒性和副作用。另外，明確上游位點參與調(diào)控自噬水平的關(guān)鍵作用也是自噬領(lǐng)域的研究重點之一，由于不同的抗腫瘤藥物導(dǎo)致毒性的機制存在差異，以此為切入點找到對應(yīng)的自噬相關(guān)上游位點并深入研究該位點參與自噬調(diào)控的普適性，可以發(fā)現(xiàn)自噬調(diào)控的全新分子機制，進(jìn)一步促進(jìn)自噬的基礎(chǔ)理論研究，但仍需利用更多自噬評價模型去深入探索關(guān)鍵位點與自噬的整個進(jìn)程之間的關(guān)系。