賈彥龍

（渭源縣北寨鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，甘肅 渭源 748200）

0 引言

1 發(fā)病機(jī)制

豬圓環(huán)病毒病是由豬圓環(huán)病毒（PCV）引起的一種傳染病。豬圓環(huán)病毒是迄今發(fā)現(xiàn)的最小的動物病毒，主要分為Ⅰ、Ⅱ兩種血清型，其中Ⅱ型PCV（PCV-2）具有致病性。PCV主要存在于豬只部分器官（肺臟、脾臟、扁桃體）的淋巴組織中，進(jìn)而侵害豬只的免疫系統(tǒng)。此外，豬圓環(huán)病毒可與巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞等免疫細(xì)胞共生，導(dǎo)致患病豬只體內(nèi)單核細(xì)胞數(shù)量增多，B、T淋巴細(xì)胞中CD4+數(shù)量減少，干擾細(xì)胞的正常增殖，形成免疫抑制后導(dǎo)致豬只自免疫缺陷［1］。

2 臨床癥狀

感染豬圓環(huán)病毒的豬只由于生長發(fā)育階段不同，故其在臨床上的表現(xiàn)也不同，主要分為以下4種。

2.1 斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征

1周左右的仔豬感染豬圓環(huán)病毒后最易出現(xiàn)斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征，主要表現(xiàn)為食欲不振、精神低沉、皮膚蒼白、被毛蓬亂無光澤、行動遲緩，還伴有呼吸困難等呼吸障礙。部分患病仔豬會出現(xiàn)腹瀉、神經(jīng)紊亂等癥狀，出現(xiàn)概率較小但病死率極高。極少患病豬嗜睡或突然死亡，同時患病豬只的部分器官會發(fā)生病變，如出現(xiàn)心包積液，呈絨毛心狀，肺伴有間質(zhì)水腫、粘連。

2.2 新生仔豬先天震顫

只有新出生的仔豬感染豬圓環(huán)病毒后會出現(xiàn)先天震顫癥狀，病豬在躺臥或睡覺時會不停地顫抖。若外部環(huán)境發(fā)生變化，如氣溫突然下降或突如其來的異響等，都會引起顫抖加強(qiáng)。新生仔豬先天震顫可分為輕微、嚴(yán)重兩種。嚴(yán)重震顫的仔豬在出生5～7 d內(nèi)會因無法正常吮乳而餓死，存活下來的仔豬在14～21 d內(nèi)機(jī)體會逐漸恢復(fù)。

2.3 妊娠母豬繁殖障礙

妊娠母豬感染豬圓環(huán)病毒后會出現(xiàn)繁殖障礙。病豬妊娠早期感染會出現(xiàn)胎兒死亡，妊娠后期感染則會出現(xiàn)流產(chǎn)，即使未流產(chǎn)，也會導(dǎo)致出現(xiàn)死胎、弱胎、木乃伊胎等。

2.4 豬增生性壞死性間質(zhì)性肺炎

育肥期的豬只感染豬圓環(huán)病毒后會出現(xiàn)增生性壞死性間質(zhì)性肺炎，主要表現(xiàn)為病豬生長發(fā)育速度受阻，育肥速度減緩，采食量下降，全身被毛粗糙無光澤。解剖病死豬，可以看到肺部明顯腫大、炎癥反應(yīng)明顯，間質(zhì)變寬且在表面有紅色的斑點(diǎn)，有大量壞死的細(xì)胞存在于肺泡內(nèi)，且含有蛋白樣的物質(zhì)［2］。

3 病理變化

患豬圓環(huán)病毒病的豬只最顯著特征為全身淋巴結(jié)腫大，其中腸系膜、腹股溝淋巴結(jié)腫大后是正常狀態(tài)下的2～5倍，切面白色；可在肺部發(fā)現(xiàn)炎癥和腫脹，有橡皮樣的彌漫性病灶；腎臟水腫，質(zhì)地蒼白，并伴有壞死灶出現(xiàn)；脾臟發(fā)生腫大；心臟脂肪和心內(nèi)膜上有出血點(diǎn)，心包積液；小腸和結(jié)腸多腫脹并伴有壞死灶，腸系膜及腹部有黃染的脂肪；膀胱中有黃褐色的尿液；還有心肌炎等多種炎癥出現(xiàn)［3］。

4 診斷方法

經(jīng)驗(yàn)豐富的獸醫(yī)可根據(jù)病豬的臨床表現(xiàn)進(jìn)行初步診斷，進(jìn)一步確診則需要結(jié)合患病豬的病理剖檢及專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果。目前，該病較精確的診斷方法主要有免疫學(xué)診斷和分子生物學(xué)診斷。

④環(huán)境管理:根據(jù)血站業(yè)務(wù)工作的具體流程,合理進(jìn)行布局、分區(qū)。分為采血區(qū)和非采血區(qū)、清潔區(qū)和污染區(qū),均需要隔離開來。確保采供血工作有條不紊的進(jìn)行。加強(qiáng)環(huán)境管理,為患者提供安全、舒適的獻(xiàn)血環(huán)境。由專人負(fù)責(zé)引導(dǎo)工作,指導(dǎo)獻(xiàn)血者有序的進(jìn)行檢驗(yàn)和采血。采血環(huán)境應(yīng)保持整潔衛(wèi)生,并嚴(yán)格進(jìn)行消毒,預(yù)防血液污染,并對報廢血和受到污染的血液進(jìn)行妥善處理,確保血液質(zhì)量,采供血過程信息完整的記錄在檔案當(dāng)中。

4.1 免疫學(xué)診斷

免疫學(xué)診斷方法主要是采集患病豬血液后分離血清進(jìn)行檢測，包括酶聯(lián)免疫吸附法、競爭性酶聯(lián)免疫吸附法、免疫膠體金檢測法等，每種方法都有各自的優(yōu)勢。養(yǎng)殖戶可根據(jù)實(shí)際情況選擇適合的方法進(jìn)行診斷。

4.1.1 酶聯(lián)免疫吸附法。酶聯(lián)免疫吸附法即ELISA。診斷人員用一次性采血器采集患病豬的靜脈血，離心后分離血清備用，然后嚴(yán)格按照豬圓環(huán)病毒酶聯(lián)免疫吸附診斷試劑盒的使用說明對采集的病豬樣本進(jìn)行診斷。該方法具有較高的靈敏性、較強(qiáng)的特異性、較快的診斷速度等，適合養(yǎng)殖規(guī)模較大的豬場進(jìn)行大規(guī)模檢測，且操作簡單，可在基層進(jìn)行推廣普及。

4.1.2 競爭性酶聯(lián)免疫吸附法。診斷人員先要采集患病豬的血液并分離出血清備用，然后對照競爭性酶聯(lián)免疫試劑盒的操作說明逐步進(jìn)行操作。簡要操作步驟如下：診斷人員先進(jìn)行洗板，接著按照說明書在免疫板中加入抗原（即分離出的患病豬只的血清）、競爭試劑（即PCV-2的特異性單克隆抗體）競爭30 min，最后加入顯色底物后在酶標(biāo)儀450 nm處進(jìn)行測定，顏色越淺則說明檢測結(jié)果為陽性，即可確診該豬感染了豬圓環(huán)病毒。

4.1.3 免疫膠體金檢測法。免疫膠體金檢測法的原理是利用銀顯影液增強(qiáng)的標(biāo)記效果，將還原的銀覆蓋在金顆粒的表面，提高膠體金的檢測限度。診斷人員通過被標(biāo)記到膠體金上的特異性抗體與細(xì)胞懸液涂片或組織切片中的抗原進(jìn)行特異性結(jié)合，然后在光學(xué)顯微鏡下觀察抗原與抗體表面的結(jié)合位點(diǎn)，從而進(jìn)行準(zhǔn)確判斷。該方法除了對Ⅱ型豬圓環(huán)病毒血清表現(xiàn)出極高的特異性外，不會對其他病毒免疫血清出現(xiàn)交叉反應(yīng)［4］。

4.2 分子生物學(xué)診斷

分子生物學(xué)檢測技術(shù)均是以PCR技術(shù)為基礎(chǔ)，主要包括常規(guī)PCR、熒光定量PCR及PCR限制性片段長度多態(tài)性分析。

4.2.1 常規(guī)PCR。常規(guī)PCR檢測方法歷史悠久，且敏感性、特異性均較高。診斷人員首先要采集患病豬的肝臟、肺臟等組織進(jìn)行病毒核酸的提取，將其剪碎后置于2 mL的EP管中，加入PBS并進(jìn)行研磨，反復(fù)凍融3次后離心取上清液，按照病毒DNA提取試劑盒的說明書提取樣品中的DNA，然后用其作為模板進(jìn)行PCR檢測（具體PCR操作流程參考使用說明書），接著用高保真酶對PCV-2的16SrRNA進(jìn)行擴(kuò)增，最后對患病豬樣品的PCV-2核酸進(jìn)行檢測。若在特點(diǎn)片段處出現(xiàn)了特異性條帶，則說明該豬感染了PCV-2病毒。

4.2.2 熒光定量PCR。診斷人員首先采集患病豬的血液，將血液離心后獲得血清，并采用核酸提取試劑盒進(jìn)行病毒核酸的提取工作，然后制備豬圓環(huán)病毒的重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品，接著采用熒光定量PCR檢測豬圓環(huán)病毒的核酸，并通過設(shè)置陰性對照來評估特異性，分別以重組質(zhì)粒濃度的對數(shù)和Ct值作X、Y軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。當(dāng)PCV在533～580 nm波長處出現(xiàn)了擴(kuò)增曲線時，說明該豬感染了豬圓環(huán)病毒病。

4.2.3 PCR限制性片段長度多態(tài)性分析。診斷人員首先要采集患病豬的血液，將血液分離得到血清，然后使用限制性內(nèi)切酶從血清中分離出豬圓環(huán)病毒的DNA，接著進(jìn)行凝膠電泳，并使雙鏈的DNA變性成單鏈，再進(jìn)行Southern印跡，將帶有DNA的尼龍膜暴露于帶有放射性互補(bǔ)核苷酸探針的溶液中，使探針與尼龍膜上特定選擇的DNA序列雜交，最后將尼龍膜放置在X射線膠片上，產(chǎn)生放射自顯影圖，再根據(jù)RFLP分析以檢測模式差異來確認(rèn)多態(tài)性，從而對該豬是否感染豬圓環(huán)病毒病進(jìn)行診斷。

5 治療措施

5.1 常規(guī)治療措施

第一，治療人員可根據(jù)患病豬的體質(zhì)量，按照0.1 mL/kg的劑量用炎康注射液對患病豬進(jìn)行肌內(nèi)注射，同時聯(lián)合應(yīng)用鹽酸嗎啉胍（具體用量可參照使用說明書），連用2 d即可。第二，治療人員可將山藥、麥芽各35 g，黃芪、洋參、山楂、甘草、白砂糖各20 g，黃芩15 g，桑葉10 g，紅花5 g，以及復(fù)合維生素B（用量0.002 g/kg）混合后研制成粉末，混入飼料中對患病豬進(jìn)行飼喂，一日3次。第三，對于抗病力較弱且已經(jīng)感染豬圓環(huán)病毒病的豬只，治療人員需要根據(jù)不同階段豬的體質(zhì)量，用白細(xì)胞干擾素和黃芪多糖注射液（各10 mL，充分混合）混合液，對3～10日齡的仔豬、斷奶仔豬、育肥豬分別注射1、2、4 mL/頭，一日1次，連用3 d，以提高豬只免疫力和抵抗力；再分別稱取黃芪150 g，黨參、金銀花、連翹各50 g，甘草25 g，板藍(lán)根、茵陳各20 g，然后加1 000 mL水進(jìn)行煎煮，共煎煮3次，待藥水冷卻至室溫后再根據(jù)患病豬的體質(zhì)量，按照1 mL/kg的劑量對豬只進(jìn)行灌服，一日2次，連用5 d，即可起到良好的防治效果。

5.2 患病仔豬的治療措施

治療人員可根據(jù)患病豬的體質(zhì)量，按照0.2 mL/kg的劑量，對患病仔豬注射黃芪多糖，一日2次，還可對每頭豬肌內(nèi)注射聚肌胞4 mg，連用5 d即可［3］。該治療方案適合治療出現(xiàn)消化不良、腹瀉、消瘦癥狀的仔豬。

5.3 患病母豬的治療措施

治療人員可在患病母豬日糧中分別添加利高霉素1.2 kg/t、15%金霉素2.5 kg/t、阿莫西林150 g/t，添加時間為母豬分娩前7 d和母豬分娩后7 d，共用藥14 d即可［5］。

5.4 患病公豬的治療措施

治療人員應(yīng)該根據(jù)患病公豬的體質(zhì)量，按照1.5 mL/kg的劑量對豬肌內(nèi)注射黃芪多糖注射液，一日1次，連用3 d。同時，為了防止發(fā)生繼發(fā)感染，治療人員需要在豬飼料中拌入頭孢噻呋鈉水溶性粉4 g/kg，一日2次，連用5 d。

6 預(yù)防措施

6.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

科學(xué)的飼養(yǎng)管理可有效減少養(yǎng)殖場豬圓環(huán)病毒病的發(fā)生及流行。第一，養(yǎng)殖人員要做好圈舍的消毒工作，制定嚴(yán)格的消毒制度，每15 d進(jìn)行一次全面、嚴(yán)格的消毒，確保圈舍的清潔衛(wèi)生。第二，養(yǎng)殖人員要在天氣晴朗的時候?qū)︷B(yǎng)殖場進(jìn)行通風(fēng)換氣，并在炎熱的夏季做好降溫工作，在寒冷的冬季做好保暖工作，以確保為豬只提供適宜的生長環(huán)境，有效避免生豬因應(yīng)激導(dǎo)致免疫力低下帶來的疫病。第三，養(yǎng)殖人員要做到科學(xué)飼喂，根據(jù)豬只的營養(yǎng)需求制訂適合不同階段豬只的飼料配方，嚴(yán)格把控飼料質(zhì)量關(guān)，禁止飼喂發(fā)霉變質(zhì)、冷凍腐爛的飼料，可在飼料中添加一些中草藥制劑（板藍(lán)根、蒲公英、黃芪多糖等）、微生態(tài)制劑（益生菌、益生元等），以提高豬只的免疫力和抵抗力，預(yù)防豬只發(fā)生豬圓環(huán)病毒病。

6.2 疫苗免疫接種

疫苗免疫接種是各畜禽養(yǎng)殖場有效減少疫病發(fā)生的重要預(yù)防手段之一，因此制定科學(xué)高效的免疫程序至關(guān)重要。養(yǎng)殖人員要根據(jù)養(yǎng)殖場的實(shí)際情況，制定切實(shí)可行的免疫制度，并做好疫苗免疫接種相關(guān)工作，減少疫病的發(fā)生及流行。為預(yù)防豬圓環(huán)病毒病，養(yǎng)殖場要加強(qiáng)豬圓環(huán)病毒疫苗接種工作，在妊娠母豬產(chǎn)前四五周內(nèi)對其接種Ⅱ型豬圓環(huán)病毒滅活疫苗，在仔豬出生后兩三周內(nèi)對其接種疫苗，疫苗接種量按照說明執(zhí)行。養(yǎng)殖人員對豬只接種疫苗時要事先了解疫苗免疫方法及用量，保證免疫效果和免疫質(zhì)量，以進(jìn)一步降低豬群的帶菌率，提升豬群的免疫力。

6.3 科學(xué)引種繁殖

科學(xué)引種繁殖可減少養(yǎng)殖場疫病的發(fā)生。第一，養(yǎng)殖人員在引種之前要確保所引進(jìn)豬只的健康，提前對豬只所在豬場的疫苗接種情況、豬只的免疫抗體等進(jìn)行詳細(xì)檢查，并進(jìn)行抽血檢測，必須由引種地的檢疫部門出具健康檢疫證明。第二，在運(yùn)輸過程中，養(yǎng)殖人員要做好運(yùn)輸車輛和運(yùn)輸人員的消毒工作，避免運(yùn)輸過程中豬只感染某些疫病，并盡量縮短運(yùn)輸?shù)臅r間和距離，避免過度顛簸造成豬只應(yīng)激，或在運(yùn)輸之前適當(dāng)在飲水中加入恩諾沙星、阿莫西林等藥物進(jìn)行預(yù)防。第三，新引入的豬只到達(dá)場區(qū)后，一定要在隔離后進(jìn)行混養(yǎng)，一般需要對新引入的豬只進(jìn)行一個月的隔離，隔離圈舍與其他圈舍的距離要大于50 m。在隔離期間，養(yǎng)殖人員要對引入豬只完成高發(fā)傳染病的檢測，確定引入豬只未攜帶其他病原后再和原豬群進(jìn)行混養(yǎng)。

7 結(jié)語

近年來，豬圓環(huán)病毒病在各地養(yǎng)殖場普遍發(fā)生，給養(yǎng)殖場造成了極大的損失。因此，生豬養(yǎng)殖人員要充分了解該病的發(fā)病機(jī)制、臨床癥狀、病理變化等基礎(chǔ)知識，掌握先進(jìn)科學(xué)的診斷技術(shù)，對該病進(jìn)行科學(xué)治療及防控，以保障養(yǎng)殖場的效益，推動生豬養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展。