張 飛，石 潔，謝意通，姜 麗*

（南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，江蘇 南京 210095）

紫背天葵（Gynura bicolorDC.），也稱紅鳳菜、觀音菜、血皮菜等，富含花青素、類黃酮、維生素、氨基酸和多種微量元素等物質(zhì)[1]，具有抗氧化、抗炎癥、抗癌癥[2-3]等活性。紫背天葵是一種集營(yíng)養(yǎng)保健價(jià)值和特殊風(fēng)味為一體的高檔蔬菜，多用于鮮食[4]。但是采后紫背天葵容易出現(xiàn)感官品質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值下降的問題，因此適當(dāng)?shù)牟珊蟊ｕr技術(shù)對(duì)紫背天葵而言非常重要。

目前國(guó)內(nèi)外應(yīng)用到采后紫背天葵的保鮮方法主要有應(yīng)用氣調(diào)[4]、植酸[5]、1-甲基環(huán)丙烯（1-methylcyclopropene，1-MCP）[6]、一氧化氮[7]和短波紫外線[8]等處理。1-MCP是一種無毒、無明顯氣味、穩(wěn)定性好且作用濃度低的保鮮劑，在蔬菜和水果的保鮮中運(yùn)用廣泛，研究顯示1-MCP處理對(duì)桃果實(shí)[9]、小青菜[10]、白菜[11]、羽衣甘藍(lán)[12]等具有顯著的保鮮效果。

活性氧（reactive oxygen species，ROS）是植物新陳代謝的重要產(chǎn)物，包括超氧陰離子、過氧化氫（H2O2）、單線態(tài)氧、羥自由基等[13]。正常環(huán)境下，植物細(xì)胞中ROS含量較低并維持著動(dòng)態(tài)平衡；當(dāng)植物衰老或受到脅迫時(shí)，ROS會(huì)大量積累并對(duì)生物分子如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等造成氧化損傷[14]。植物的抗氧化系統(tǒng)是維持ROS穩(wěn)態(tài)水平的關(guān)鍵，主要分為兩類，一類是非酶類抗氧化物質(zhì)，包括多酚、花青素、生育酚、抗壞血酸（ascorbic acid，AsA）、還原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）等；另一類是抗氧化酶，包括超氧化物歧化酶（superoxidase，SOD）、抗壞血酸過氧化物酶（ascorbate peroxidase，APX）、過氧化氫酶（catalase，CAT）、谷胱甘肽還原酶（glutathione reductase，GR）和過氧化物酶（peroxidase，POD）等[15]。姜麗[4]研究發(fā)現(xiàn)1-MCP處理能顯著抑制冷藏期間紫背天葵的腐爛，延緩了花青素、葉綠素和總酚等物質(zhì)含量的下降，并且能夠提高抗氧化酶的活性；另外，Jiang Li等[6]結(jié)合蛋白組學(xué)技術(shù)發(fā)現(xiàn)1-MCP處理能夠提高SOD和POD的蛋白質(zhì)豐度；Xu Xin等[16]進(jìn)一步對(duì)Cu/Zn SOD基因進(jìn)行克隆分析，發(fā)現(xiàn)1-MCP能顯著提高Cu/Zn SOD基因的相對(duì)表達(dá)量。但是1-MCP對(duì)于紫背天葵抗氧化系統(tǒng)的影響并非只在酶活力水平或單個(gè)酶的蛋白質(zhì)和基因表達(dá)水平的調(diào)控，目前1-MCP對(duì)于抗氧化系統(tǒng)的影響還缺乏一個(gè)系統(tǒng)和完善的認(rèn)知，同時(shí)1-MCP對(duì)抗氧化酶在轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控還不清楚。本實(shí)驗(yàn)旨在同時(shí)從抗氧化物質(zhì)、抗氧化酶活性及其基因表達(dá)并結(jié)合兩者相關(guān)性分析的角度來揭示1-MCP對(duì)采后紫背天葵的抗氧化系統(tǒng)的調(diào)控機(jī)理，為后續(xù)進(jìn)一步研究提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

紫背天葵采自蘇州潤(rùn)匯農(nóng)業(yè)有限公司，無機(jī)械損傷和病蟲害。

DL 2000 DNA Marker (3427A)、RNA prep Pure Plant Kit (RR9769)、PrimeScript? RT Master Mix (RR047A)、SYBR?Premix Ex Taq? (RR420A)試劑盒 寶生物工程（大連）有限公司；1-MCP粉末（純度4.3%） 咸陽(yáng)西秦生物科技有限公司；羥胺、過氧化氫 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；對(duì)氨基苯磺酸、α-萘胺、愈創(chuàng)木酚、核黃素、氮藍(lán)四唑 北京索萊寶科技有限公司；氧化型谷胱甘肽（oxidizedg lutathione，GSSG）；還原型輔酶II、乙二胺四乙酸、聚乙烯吡咯烷酮 上海瑞永生物科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

CheckMate 3頂空分析儀 丹麥PBI Dansensor公司；NanoDrop 2000微量分光光度計(jì) 美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司；ABI Quantstudio 5實(shí)時(shí)熒光定量分析儀、ABI 2720型熱循環(huán)儀 美國(guó)Applied Biosystems公司；DYY-10C電泳儀 北京市六一儀器廠；Alpha-1860A紫外-可見分光光度計(jì) 上海譜元有限公司；HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋 常州國(guó)華電器有限公司；TGL16M臺(tái)式高速冷凍離心機(jī) 長(zhǎng)沙維爾康湘鷹離心機(jī)有限公司。

1.3 方法

1.3.1 樣品處理

將紫背天葵隨機(jī)分為兩組，將1.5 kg紫背天葵正向朝上整齊立在泡沫箱（55 L）底部，1-MCP處理組使用10 μL/L 1-MCP于（20±2）℃條件下密閉熏蒸6 h，具體操作為：稱取28.5 mg 1-MCP粉末（純度4.3%）于離心管中，加入30 mL蒸餾水后迅速放入泡沫箱中（置于紫背天葵上方）進(jìn)行密閉熏蒸。對(duì)照組用同體積的蒸餾水作相同處理。每組處理設(shè)置3 個(gè)平行。熏蒸完畢后分裝于食品保鮮袋（每袋500 g），在（20±2）℃、相對(duì)濕度80%～90%條件下貯藏7 d。分別于0、1、3、5、7 d取樣并測(cè)定指標(biāo)，每次隨機(jī)抽取3 袋，取實(shí)驗(yàn)材料葉片的葉尖至1/3葉脈較少處，切碎并混合均勻，用液氮速凍處理后置于-80 ℃冰箱備用。

1.3.2 感官品質(zhì)評(píng)分

參考李雙芳等[17]方法略加修改對(duì)紫背天葵感官品質(zhì)進(jìn)行評(píng)定。從外觀、質(zhì)地、形態(tài)和紫背天葵特有的氣味4 個(gè)方面進(jìn)行綜合評(píng)定，每項(xiàng)滿分25 分，合計(jì)100 分，具體評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見表1。結(jié)果基于10 名評(píng)定員的感官評(píng)分計(jì)算平均值得出。

表1 紫背天葵感官品質(zhì)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)Table 1 Criteria for sensory evaluation of G.bicolor

1.3.3 呼吸強(qiáng)度測(cè)定

將300 g的紫背天葵樣品放入玻璃密封罐，室溫放置2 h后使用O2/CO2氣體分析儀測(cè)定呼吸強(qiáng)度。單位為mg CO2/（kg·h）（本實(shí)驗(yàn)結(jié)果均以鮮質(zhì)量計(jì)）。

1.3.4 超氧陰離子生成速率和H2O2含量測(cè)定

超氧陰離子生成速率、H2O2含量測(cè)定參照文獻(xiàn)[9]，單位分別為nmol/（min·g）和mmol/g。

1.3.5 AsA和GSH含量測(cè)定

AsA含量和GSH含量測(cè)定參照文獻(xiàn)[10]，單位均為mg/kg。

1.3.6 抗氧化酶活力測(cè)定

準(zhǔn)確稱量0.5 g樣品，加入5 mL 50 mmol/L、pH 7.8的磷酸緩沖液（含0.1 mmol/L乙二胺四乙酸和質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%聚乙烯吡咯烷酮，后同）并勻漿，低溫振蕩提取10 min，于4 ℃條件下10 000×g離心20 min，上清液用于SOD和GR活力測(cè)定。APX和CAT粗酶液的提取使用5 mL 50 mmol/L、pH 7.0的磷酸緩沖液，POD粗酶液的提取使用5 mL 50 mmol/L、pH 6.0的磷酸緩沖液，緩沖溶液均包含0.1 mmol/L乙二胺四乙酸和2% PVP，且其他提取步驟同SOD和GR活力測(cè)定。SOD、CAT和POD活力測(cè)定均參照文獻(xiàn)[4]；APX和GR活力測(cè)定參照Fukuoka等[18]方法。SOD活力以體系每分鐘抑制氮藍(lán)四唑光化還原的50%所需要的酶量為一個(gè)酶活力單位（U），單位為U/g。分別定義每分鐘A240nm、A290nm、A340nm、A460nm變化0.01為CAT、APX、GR、POD的一個(gè)酶活力單位（U），單位均為U/g。

1.3.7 RNA提取、cDNA合成和實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

參考RNA prep Pure Plant Kit說明書提取RNA。使用微量分光光度計(jì)測(cè)定RNA濃度，通過1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)RNA完整性。使用PrimeScript? RT Master Mix合成cDNA。根據(jù)三代加二代全長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄組學(xué)測(cè)序結(jié)果獲得的基因序列，使用Oligo 7.0和Primer premier 5軟件設(shè)計(jì)特異性引物（表2），并按照SYBR?Premix Ex Taq?試劑盒說明書配制體系并進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量多聚核苷酸鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，運(yùn)行程序?yàn)椋?4 ℃、30 s；95 ℃、5 s，55 ℃、30 s，72 ℃、30s，40 個(gè)循環(huán)。以Actin為內(nèi)參基因，采用2-ΔΔCt法計(jì)算基因相對(duì)表達(dá)量。

表2 內(nèi)參基因和目的基因的引物序列Table 2 Primer sequences used for reference and target gene amplification

1.4 數(shù)據(jù)處理和分析

實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用Excel 2019和SPSS 19.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和相關(guān)性分析，采用Duncan多重比較法檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的差異顯著性，P＜0.05表示差異顯著。采用Origin 18.0軟件和Visio 2019軟件繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 1-MCP對(duì)紫背天葵感官品質(zhì)的影響

感官評(píng)價(jià)是紫背天葵品質(zhì)指標(biāo)中最直觀的項(xiàng)目，在貯藏第1天，兩組紫背天葵間無顯著差異，新鮮度很高，葉片平整飽滿，色澤鮮艷有光澤感，帶有特殊香味。貯藏1 d后，紫背天葵的感官品質(zhì)均迅速下降，葉片出現(xiàn)褐變、卷曲甚至黃化腐爛等現(xiàn)象，但1-MCP處理顯著延緩了紫背天葵感官品質(zhì)的下降（P＜0.05）（圖1）。

圖1 1-MCP對(duì)紫背天葵感官品質(zhì)的影響Fig.1 Effect of 1-MCP treatment on the sensory quality of G.bicolor

2.2 1-MCP處理對(duì)紫背天葵呼吸強(qiáng)度的影響

紫背天葵的呼吸強(qiáng)度在貯藏第1天迅速下降，之后隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)緩慢下降（圖2），1-MCP處理組的呼吸強(qiáng)度在第1天后一直顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。

圖2 采后1-MCP處理對(duì)紫背天葵呼吸強(qiáng)度的影響Fig.2 Effect of 1-MCP treatment on the respiration intensity of G.bicolor

2.3 1-MCP處理對(duì)紫背天葵超氧陰離子生成速率和H2O2含量的影響

紫背天葵的超氧陰離子生成速率隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸增加（圖3A）。對(duì)照組的H2O2含量呈持續(xù)上升的趨勢(shì)，而1-MCP處理組的H2O2含量在第1天迅速達(dá)到峰值后開始下降直到貯藏期結(jié)束（圖3B）。與對(duì)照組相比，1-MCP處理顯著提高了第1天的超氧陰離子生成速率和H2O2含量，在第3天后反而顯著降低了超氧陰離子生成速率和H2O2的積累（P＜0.05）。本實(shí)驗(yàn)說明1-MCP提高了貯藏前期的ROS水平，造成了氧化應(yīng)激，但降低了后期ROS的積累，從而減少ROS對(duì)細(xì)胞的氧化損傷。

圖3 采后1-MCP處理對(duì)紫背天葵葉片超氧陰離子生成速率（A）和H2O2含量（B）的影響Fig.3 Effect of 1-MCP treatment on superoxide anion production rate (A) and H2O2 content (B) in G.bicolor leaves

2.4 1-MCP處理對(duì)紫背天葵AsA和GSH含量的影響

對(duì)照組紫背天葵的AsA含量隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸下降，1-MCP處理組在第1天AsA含量迅速下降隨后上升（圖4A）。除第1天外，1-MCP處理AsA含量始終高于對(duì)照組。紫背天葵的GSH含量在貯藏期間先上升后緩慢下降（圖4B），1-MCP處理組和對(duì)照組分別在第3天和第5天達(dá)到峰值，1-MCP處理顯著提高了前3 d的GSH含量（P＜0.05）。本實(shí)驗(yàn)說明1-MCP能夠較好地保持AsA和GSH含量，有利于維持紫背天葵的高還原能力和抗氧化能力。

圖4 采后1-MCP處理對(duì)紫背天葵葉片AsA（A）、GSH含量（B）的影響Fig.4 Effect of 1-MCP treatment on the contents of ascorbic acid (A)and glutathione (B) in G.bicolor leaves

2.5 1-MCP處理對(duì)紫背天葵SOD活力及其基因表達(dá)的影響

紫背天葵的SOD活力在第1天迅速上升并達(dá)到最大值，隨后下降直到貯藏期結(jié)束，與對(duì)照組相比，1-MCP處理顯著抑制了第3天后的SOD活力的下降（P＜0.05）（圖5A）。與SOD活力不同，1-MCP處理提高了紫背天葵貯藏前期GbSOD的表達(dá)水平，而在后期顯著下調(diào)了該基因的表達(dá)水平（P＜0.05）（圖5B）。本實(shí)驗(yàn)證明，1-MCP處理提高了紫背天葵的SOD活力和貯藏前期的GbSOD的相對(duì)表達(dá)量，有利于ROS的清除并維持其動(dòng)態(tài)平衡。

圖5 采后1-MCP處理對(duì)紫背天葵葉片SOD活力（A）和GbSOD相對(duì)表達(dá)量（B）的影響Fig.5 Effect of 1-MCP treatment on SOD activity (A) and the relative expression of GbSOD (B) in G.bicolor leaves

2.6 1-MCP處理對(duì)紫背天葵APX和CAT活力及其基因表達(dá)的影響

貯藏期間紫背天葵APX和CAT活力及其基因相對(duì)表達(dá)量變化趨勢(shì)如圖6所示，1-MCP處理組的APX活力（圖6A）和GbAPX1相對(duì)表達(dá)量（圖6C）在貯藏期間總體呈先上升后下降的趨勢(shì)，而對(duì)照組呈波動(dòng)下降的趨勢(shì)。APX活力和GbAPX1相對(duì)表達(dá)量顯著相關(guān)（r＝0.75，P＜0.05）。與對(duì)照組相比，1-MCP處理顯著提高了貯藏前期的APX活力和GbAPX表達(dá)量（P＜0.05），分別在第1天和第3天提高了54.7%和66.4%的APX活力以及43.5%和98.11%的GbAPX1相對(duì)表達(dá)量，但在貯藏后期對(duì)兩者均無顯著影響。

紫背天葵的CAT活力（圖6B）和GbCAT相對(duì)表達(dá)量（圖6D）顯著相關(guān)（r＝0.82，P＜0.05），在貯藏期間均先上升后下降，并在第3天達(dá)到峰值。在貯藏期間，1-MCP組的CAT活力和GbCAT相對(duì)表達(dá)量高于對(duì)照組，但在第3天后差異才達(dá)到顯著水平（P＜0.05）。本實(shí)驗(yàn)證明，1-MCP處理通過提高紫背天葵的GbAPX1和GbCAT的相對(duì)表達(dá)量，從而分別在貯藏前期和后期提高了APX和CAT的活力，維持了較高的抗氧化活性。

圖6 采后1-MCP處理對(duì)紫背天葵葉片APX（A）和CAT（B）活力、GbAPX1（C）和GbCAT（D）相對(duì)表達(dá)量的影響Fig.6 Effect of 1-MCP treatment on the activity of APX (A) and CAT (B), and the relative expression of GbAPX1 (C) and GbCAT (D) in G.bicolor leaves

2.7 1-MCP處理對(duì)紫背天葵GR活力及其基因表達(dá)的影響

對(duì)照組紫背天葵的GR活力在貯藏期間持續(xù)下降，而1-MCP組的持續(xù)上升直到第3天達(dá)到峰值后才下降（圖7A）。紫背天葵的GbGR相對(duì)表達(dá)量與GR活力顯著相關(guān)（r＝0.75，P＜0.05）（圖7B）。與對(duì)照組相比，1-MCP處理提高了紫背天葵貯藏期間的GR活力和GbGR相對(duì)表達(dá)量，尤其在第3天處理組的GR活力和GbGR相對(duì)表達(dá)量均為對(duì)照組的2 倍多。本實(shí)驗(yàn)表明，1-MCP處理刺激了紫背天葵葉片的GbGR表達(dá)并提高了GR活力，從而提高紫背天葵的抗氧化能力。

圖7 采后1-MCP處理對(duì)紫背天葵葉片GR活力（A）和GbGR相對(duì)表達(dá)量（B）的影響Fig.7 Effect of 1-MCP treatment on GR activity (A) and the relative expression of GbGR (B) in G.bicolor leaves

2.8 1-MCP處理對(duì)紫背天葵POD活力及其基因表達(dá)的影響

紫背天葵的POD活力在貯藏期間呈先上升后下降的趨勢(shì)，與對(duì)照組相比，1-MCP處理顯著提高了紫背天葵第1天的POD活力，但在之后反而顯著降低了POD活力（P＜0.05）（圖8A）。此外，1-MCP處理也在第1天顯著上調(diào)了紫背天葵葉片的GbPOD42相對(duì)表達(dá)量（P＜0.05），隨后GbPOD42相對(duì)表達(dá)量迅速下調(diào)，3～7 d 1-MCP處理對(duì)其表達(dá)影響較?。▓D8B）。本實(shí)驗(yàn)證明，1-MCP處理在第1天迅速提高了POD活力和GbPOD42相對(duì)表達(dá)量，而在后期顯著降低了POD的活力（P＜0.05）。

圖8 采后1-MCP處理對(duì)紫背天葵葉片POD活力（A）和GbPOD42相對(duì)表達(dá)量（B）的影響Fig.8 Effect of 1-MCP treatment on peroxidase activity (A) and the relative expression of GbPOD42 (B) in G.bicolor leaves

3 討 論

在貯藏過程中，紫背天葵會(huì)出現(xiàn)褐變暗沉、葉片卷曲、失水萎焉、黃化和腐爛等現(xiàn)象，導(dǎo)致感官品質(zhì)下降，本實(shí)驗(yàn)中1-MCP能有效抑制紫背天葵感官品質(zhì)的下降。呼吸強(qiáng)度是果蔬貯藏期間的重要指標(biāo)。有氧呼吸代謝過程會(huì)產(chǎn)生ROS[19]，過高的呼吸強(qiáng)度會(huì)加速植物衰老。與1-MCP處理對(duì)韭菜[20]和茭白[19]的影響一樣，1-MCP處理能降低紫背天葵的呼吸強(qiáng)度，從而減少營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗。低濃度的ROS可以作為信號(hào)分子激活植物的防御途徑，過多的ROS積累對(duì)細(xì)胞有毒性，會(huì)加速植物的衰老進(jìn)程[13]。本實(shí)驗(yàn)中1-MCP處理在前期提高了超氧陰離子的生成速率和H2O2的含量，從而提高了紫背天葵的抗氧化和抗壓能力，但在后期抑制了超氧陰離子和H2O2的積累以防止過高的ROS水平氧化細(xì)胞成分和破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，這與1-MCP處理小青菜的研究結(jié)果[9]一致。AsA和GSH是植物中的抗氧化劑，通過協(xié)同作用清除超氧陰離子和H2O2來保護(hù)不穩(wěn)定的大分子免受攻擊[21]。本研究中1-MCP能保持采后紫背天葵AsA和GSH的含量，這對(duì)于清除ROS并維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)水平至關(guān)重要。

SOD作為植物防御體系的第一條線，能特異性地將超氧陰離子歧化為H2O2和O2。本實(shí)驗(yàn)證明1-MCP能提高SOD酶的活性從而減少超氧陰離子對(duì)植物的毒害作用，這與香菜的研究結(jié)果[22]一致。1-MCP在貯藏前期提高但在后期下調(diào)了GbSOD的相對(duì)表達(dá)量，這與1-MCP對(duì)蘋果的Cu/Zn SOD基因的調(diào)控結(jié)果[23]一致。植物來源的SOD的表達(dá)與其生長(zhǎng)發(fā)育階段有關(guān)，當(dāng)植物處于逆境脅迫時(shí)內(nèi)源激素與ROS共同調(diào)節(jié)SOD的表達(dá)[24]，本實(shí)驗(yàn)中GbSOD相對(duì)表達(dá)量與H2O2含量顯著相關(guān)（r＝0.83，P＜0.05），說明1-MCP通過提高或降低H2O2含量來調(diào)控GbSOD的相對(duì)表達(dá)量。轉(zhuǎn)錄水平的上升或下降并不完全代表酶活性的上升或下降，酶活性不僅受轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控，還與轉(zhuǎn)錄后加工、翻譯與翻譯后修飾密切相關(guān)[25-26]。硝基化和S-谷胱甘肽化是SOD酶的兩種翻譯后修飾方式，均能不同程度地抑制SOD活性，并且與細(xì)胞內(nèi)ROS水平密切相關(guān)。其中，多氧硝酸鹽是硝基化修飾中的硝化劑，由超氧陰離子與一氧化氮反應(yīng)生成；S-谷胱甘肽化修飾取決于細(xì)胞內(nèi)ROS水平，由氧化和亞硝化應(yīng)激誘導(dǎo)[27-28]。因此，推測(cè)本實(shí)驗(yàn)中1-MCP在貯藏前期通過刺激GbSOD相對(duì)表達(dá)量提高SOD的合成，而在貯藏后期通過降低ROS水平從而減少SOD硝基化和S-谷胱甘肽化修飾，從而保持高于對(duì)照組的SOD活性水平。

APX和CAT負(fù)責(zé)進(jìn)一步清除SOD的產(chǎn)物H2O2。1-MCP分別在貯藏前期和后期提高了紫背天葵葉片的APX和CAT活力，這可能是由于兩種酶是不同的H2O2清除酶類別，即APX可能負(fù)責(zé)精細(xì)調(diào)節(jié)ROS中間體的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，而CAT可能負(fù)責(zé)清除過量的ROS[29]。另外1-MCP對(duì)兩種酶活性的提高可能是因?yàn)榇碳げ⑸险{(diào)了GbAPX和GbCAT的相對(duì)表達(dá)量。GR是AsA-GSH循環(huán)中重要的酶，負(fù)責(zé)將GSSG轉(zhuǎn)化為GSH[30]。本研究發(fā)現(xiàn)1-MCP可能通過刺激GbGR的表達(dá)，提高GR活性，從而合成了更多的GSH，這有助于在各種非生物脅迫下保持GSH/GSSG的高比例。POD能夠分解H2O2為H2O和O2。本研究表明，1-MCP處理能在第1天顯著刺激GbPOD42相對(duì)表達(dá)量并提高POD活性，這可能是受到了ROS迸發(fā)的誘導(dǎo)。但同時(shí)POD也能將多酚類物質(zhì)氧化為醌類物質(zhì)[31]，醌類物質(zhì)反向歧化為鄰醌自由基，間接參與ROS的生成[32]。本研究表明，1-MCP處理后期降低了POD的活性，從而直接降低了酚類氧化的風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)間接地減少了ROS的積累。1-MCP對(duì)采后紫背天葵葉片抗氧化系統(tǒng)的影響如圖9所示。

圖9 1-MCP對(duì)采后紫背天葵葉片抗氧化系統(tǒng)影響的簡(jiǎn)要模型Fig.9 Simple model for the effect of 1-MCP on the antioxidant system in G.bicolor leaves

綜上，本實(shí)驗(yàn)利用10 μL/L 1-MCP處理紫背天葵，結(jié)果發(fā)現(xiàn)1-MCP提高了紫背天葵的感官品質(zhì)，抑制了呼吸強(qiáng)度，減少了超氧陰離子和H2O2的積累，保持了AsA和GSH含量，同時(shí)在不同的貯藏時(shí)間總體上不同程度地上調(diào)抗氧化酶相關(guān)基因（GbSOD、GbAPX1、GbCAT、GbGR）的相對(duì)表達(dá)量并提高了SOD、APX、CAT、GR的活力，從而提高了抗氧化能力，延緩了采后紫背天葵衰老進(jìn)程。