袁庭娟，王 君，陳利峰，郭 垚

（西安申亞動(dòng)物保健品有限公司，陜西 西安 710000）

豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome, PRRS）俗稱“藍(lán)耳病”，最早1987年在美國暴發(fā)，除極少數(shù)養(yǎng)豬國家沒有發(fā)生以外，已在美洲、非洲、歐亞大陸，甚至澳洲普遍發(fā)生并成為危害世界養(yǎng)豬業(yè)最重要的疾病之一[1-2]。我國作為世界上最大的養(yǎng)豬和豬肉生產(chǎn)、消費(fèi)國，受PRRS的影響尤其嚴(yán)重，特別是高致病性藍(lán)耳病病毒（Highly Pathogenic PRRSV,HP-PRRSV）的出現(xiàn)，使得該病成為我國第一大豬病。雖然，養(yǎng)豬生產(chǎn)者、獸醫(yī)、專家教授等相關(guān)科學(xué)家經(jīng)過20多年與該病斗爭，通過各種途徑來控制和凈化該病并取得了很大進(jìn)展，但仍未能得到理想的控制。免疫作為控制PRRS的重要措施，一直以來毀譽(yù)參半，飽受爭議。本文將主要介紹現(xiàn)階段甘肅省平?jīng)鍪心池i場PRRSV的感染規(guī)律、優(yōu)勢致病毒株特點(diǎn)，并通過充分認(rèn)識免疫PRRSV疫苗可能存在的挑戰(zhàn)、現(xiàn)有不同疫苗毒株的特點(diǎn)以及豬場不同感染狀態(tài)的評估，來探討不同PRRSV感染類型的豬場如何實(shí)施合理的、適合本場的免疫策略。目前，中國豬品類養(yǎng)殖業(yè)中，51%為規(guī)?；笮宛B(yǎng)殖場，49%為中小養(yǎng)殖戶甚至散戶。筆者2020年3月至2021年8月走訪甘肅省平?jīng)鍪卸嗟氐酿B(yǎng)豬場發(fā)現(xiàn)，大型養(yǎng)殖場的生物安全措施相對而言較為嚴(yán)格、全面，而中小養(yǎng)殖戶多以豬瘟、偽狂犬病、圓環(huán)病毒病免疫接種為主，農(nóng)散戶基本不接種任何疫苗。不接種藍(lán)耳病疫苗。筆者從多個(gè)家庭農(nóng)場型養(yǎng)殖場采集血樣進(jìn)行抗體檢測，結(jié)果顯示，未注射豬繁殖與呼吸綜合征的任何毒株疫苗的豬場，抗體檢出率很高。采集部分病料抗原檢測，分離出經(jīng)典株。

豬圓環(huán)病毒（Porcine circovirus, PCV）是迄今為止發(fā)現(xiàn)的一種最小的脊椎動(dòng)物病毒[3]。圓環(huán)病毒1型（PCV1）無致病性，而圓環(huán)病毒2型（PCV2）具有致病性。圓環(huán)病毒2型在臨床上主要與斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）、豬皮炎腎病綜合征（PDNS）、仔豬先天性震顫（CT）、壞死性間質(zhì)性肺炎（PNP）、豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）混感[4]。其中豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的高度傳染病，又稱豬藍(lán)耳病[5-6]。各種年齡階段的豬只都易感染。

1 發(fā)病情況、臨床癥狀、剖檢癥狀

母豬斷奶不發(fā)情、流產(chǎn)。斷奶仔豬腹式呼吸、氣喘、反復(fù)咳嗽、斷奶傷亡占比50%，仔豬消瘦、露脊梁骨、眼結(jié)膜發(fā)紺、有淚斑、腹股溝淋巴結(jié)腫大青紫，保育和肥育發(fā)病豬均出現(xiàn)耳尖發(fā)紺。個(gè)別肥豬皮膚出現(xiàn)圓點(diǎn)狀潰瘍。種公豬射精量減少，精子活力下降。全群食欲減退，部分豬只體溫升高至40 ℃及以上。

剖檢發(fā)現(xiàn)，病死豬胸腔有大量積液，心臟呈纖維素性絨毛樣，氣管內(nèi)有大量泡沫，腹股溝淋巴結(jié)腫大、青紫、切面斑點(diǎn)狀，肺臟邊緣肉樣變，肝臟腫大變黃。腎臟腫大、表面凹凸不平、針狀出血點(diǎn)，腎盂膿性液體。脾臟腫大、變色。

采集發(fā)病豬前中后期血樣，剖檢豬只采取淋巴結(jié)、腎臟、脾臟、肺臟、流產(chǎn)胎兒，每頭豬樣品單獨(dú)包裝，防止交叉污染。

豬場免疫程序：仔豬1日齡偽狂犬病滴鼻、21日齡豬瘟疫苗接種，母豬跟胎做。

2 實(shí)驗(yàn)室檢測

2.1 試驗(yàn)地點(diǎn)

病料（組織樣品5份，血樣12份），送實(shí)驗(yàn)室檢測中心檢測。

2.2 試驗(yàn)試劑

柱式DNA核酸提取試劑盒，哈爾濱元亨生物，生產(chǎn)批號YDNA-TQ 20210501P；柱式RNA核酸提取試劑盒，哈爾濱元亨生物，生產(chǎn)批號YRNA-TQ 20210505P；豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體ELISA檢測試劑盒，哈爾濱元亨生物，生產(chǎn)批號PRRSV20201021E；豬圓環(huán)病毒2型抗體酶免檢測試劑盒，哈爾濱元亨生物，生產(chǎn)批號PCV20210518E；豬繁殖與呼吸綜合征病毒經(jīng)典株實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測試劑盒，哈爾濱元亨生物，生產(chǎn)批號PRRSV20200820P；豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Nsp2 1594-1680變異株）實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測試劑盒，哈爾濱元亨生物，生產(chǎn)批號HPRRSV20200602P；蛋白酶K，哈爾濱元亨生物，生產(chǎn)批號TH030101。

2.3 試驗(yàn)器材

RT-6100酶標(biāo)分析儀，572105033X，深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司；Real-Time PCR System全自動(dòng)PCR分析系統(tǒng)Gentier 32R，西安天隆科技有限公司；HH-2數(shù)顯恒溫水浴鍋，上海力辰邦西儀器科技有限公司；TB16-W離心機(jī)，湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司；BBS-DDC醫(yī)用潔凈工作臺，濟(jì)南鑫貝西生物技術(shù)有限公司。

2.4 檢測方法

2.4.1 抗體檢測 提取血清，包被孵育，洗板，酶結(jié)合孵育，二次洗板，顯色，上機(jī)讀板。

2.4.2 抗原檢測

（1）樣品處理：組織樣品需要充分研磨處理，棉拭子需充分浸泡處理，全血需冷藏自然稀出。所有的樣品均需要高速離心，取上清液用。

（2）用DNA、RNA提取試劑盒提取對應(yīng)樣品的DNA模板、RNA模板。

（3）按照各項(xiàng)目配置體系，設(shè)置運(yùn)行步驟，運(yùn)行監(jiān)測，結(jié)果分析。

3 結(jié)果與分析

3.1 血清學(xué)檢測結(jié)果分析

根據(jù)豬場免疫情況，藍(lán)耳病疫苗未免疫，檢出陽性率27.2%，離散度高達(dá)70.4%（表1）。圓環(huán)病毒未免疫，陽性率25%，離散度高達(dá)139.9%。表示藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒病處于發(fā)病期。

3.2 病原學(xué)檢測結(jié)果分析

3.2.1 PCV2結(jié)果分析 5份組織樣品，經(jīng)過核酸提取，檢測結(jié)果均為陽性（表2、表3），且病毒載量較高。符合豬場臨床診斷，斷奶仔豬消瘦、露脊梁骨，生長遲緩，厭食，精神遲緩，皮膚蒼白，被毛蓬亂，呼吸困難、咳嗽，部分豬只出現(xiàn)反復(fù)腹瀉。腹股溝淋巴結(jié)腫大青紫，保育豬或肥育豬出現(xiàn)皮膚圓點(diǎn)狀潰爛。剖檢出現(xiàn)全身淋巴結(jié)腫大，切面多汁，土色樣變，腸淋巴結(jié)腫大。脾臟嚴(yán)重變形，邊緣出現(xiàn)梗死。腎臟、肝臟有出血點(diǎn)，肺臟肉樣變嚴(yán)重，無彈性。腎臟水腫嚴(yán)重，蒼白，被膜下有壞死灶。見圖1—圖3。

表2 樣本圓環(huán)病毒病、藍(lán)耳?。ń?jīng)典株）、高致病性藍(lán)耳?。ㄗ儺愔辏z測結(jié)果統(tǒng)計(jì)

表3 豬圓環(huán)病毒2型檢測結(jié)果記錄

圖1 皮炎

圖2 斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征

圖3 脾臟腫大梗死

3.2.2 PRRSV結(jié)果分析 5份組織樣品，經(jīng)過核酸提取，檢測3份為陽性，2份陰性（表4、表5）。符合豬場臨床診斷，斷奶仔豬腹式呼吸，斷奶傷亡大，母豬流產(chǎn)，耳尖發(fā)紺。由此診斷此豬場藍(lán)耳?。ń?jīng)典株）發(fā)病。見圖4、圖5。

表4 豬藍(lán)耳?。ń?jīng)典株）檢測結(jié)果記錄

表5 豬藍(lán)耳病（高致病型）檢測結(jié)果記錄

圖4 耳尖發(fā)紺

圖5 母豬流產(chǎn)

4 治療方案

4.1 生物安全

4.1.1 消毒與隔離

（1）消毒。全場進(jìn)行消毒，使用濃度為1/200的消毒藥消毒，先用過氧乙酸、次日用濃戊二醛（強(qiáng)酸強(qiáng)堿交替使用）。各圈舍、工具、可帶豬消毒（消毒藥遠(yuǎn)離豬只口腔、眼睛），圈舍先清掃干凈、消毒時(shí)間選擇溫度高的時(shí)間，噴灑后密閉10～20 min，后開窗開門通風(fēng)。

（2）隔離。對于發(fā)病豬隔離出欄，單獨(dú)飼喂、治療。病癥嚴(yán)重直接淘汰。種公豬帶毒直接淘汰。母豬和仔豬使用藥物壓制。

4.1.2 免疫 經(jīng)過核酸檢測，斷定為普通豬繁殖與呼吸綜合征。

產(chǎn)后仔豬1日齡偽狂犬病滴鼻1頭份，產(chǎn)后7日齡肌注藍(lán)耳?。ń?jīng)典株）1頭份，產(chǎn)后14日齡圓環(huán)病毒病免疫0.5頭份，產(chǎn)后21日齡圓環(huán)病毒病免疫0.5頭份，28日齡豬瘟免疫1頭份。35日齡偽狂犬病免疫1頭份，56日齡豬瘟免疫2頭份，70日齡口蹄疫免疫1頭份。

母豬、公豬按季度普免，每3個(gè)季度各免疫一次圓環(huán)病毒病疫苗、豬瘟疫苗、偽狂犬病疫苗；季度性免疫口蹄疫疫苗、傳染性胃腸炎和流行性腹瀉二聯(lián)苗。

4.2 母豬治療

4.2.1 治療階段 囊非安2 kg、雙聯(lián)抗可溶性粉1 kg、藍(lán)力凈400 g，拌料1 t，連用15 d。以妊娠母豬用量計(jì)，哺乳母豬使用量減半。

4.2.2 保健階段 疫力多糖粉500 g、母豬健2.5 kg、活力康2.5 kg、補(bǔ)氣生血素500 g，拌料1 t，連用20 d。以妊娠母豬用量計(jì)，哺乳母豬使用量減半。

4.3 仔豬治療

4.3.1 治療階段 疫力多糖粉1 kg、雙黃連可溶性粉1 kg、替米考星預(yù)混劑1.5 kg、阿莫西林可溶性粉1 kg，拌料1 t，連用10～15 d。

4.3.2 保健階段 疫力多糖粉500 g、仔豬健2.5 kg、活力康2.5 kg、補(bǔ)氣生血素500 g、混合型飼料添加劑（百里香酚+香芹酚+肉桂醛）Ⅰ型260 g，拌料1 t，連用20 d。

4.4 免疫

確定豬場穩(wěn)定后，采樣繼續(xù)檢測，找到同種病毒，設(shè)定免疫程序進(jìn)行免疫。

5 結(jié)果跟蹤

經(jīng)過2個(gè)月的藥物壓制，疫苗免疫，抵抗力提升。豬場現(xiàn)狀如下：斷奶發(fā)情率達(dá)93%，經(jīng)過25 d后測孕，受胎率100%。藥物壓制后未出現(xiàn)母豬流產(chǎn)現(xiàn)象。產(chǎn)房仔豬及斷奶仔豬出現(xiàn)的淚斑、眼瞼水腫、腹股溝淋巴結(jié)青紫腫大現(xiàn)象、腹式呼吸癥狀等消失。仔豬采食量增加，皮毛光滑、有光澤、糞便正常，健康度很好?？蛻舴答伜軡M意。病原學(xué)檢測顯示母豬未出現(xiàn)藍(lán)耳?。ń?jīng)典株、高致病株）陽性，圓環(huán)病毒未出現(xiàn)陽性。仔豬血清學(xué)檢測藍(lán)耳病苗、圓環(huán)病毒病苗、偽狂犬病苗、豬瘟苗抗體水平達(dá)90%及以上，且抗體離散度較小。

6 分析與討論

綜上所述，該豬場未免疫圓環(huán)病毒病、藍(lán)耳病疫苗，血清學(xué)檢測檢出陽性抗體存在，病原學(xué)檢測出病毒含量和毒株類型。檢測結(jié)果符合臨床癥狀和剖檢判定。方案出具后，嚴(yán)格執(zhí)行，經(jīng)過2個(gè)月的跟蹤觀察，效果顯著。

（1）引起本場本次發(fā)病的誘因主要是該場的生物安全未做到位。消毒、免疫意識差，衛(wèi)生條件不達(dá)標(biāo)。廠區(qū)消毒需做到：消毒到位，濃度適中，圈舍清潔。豬場所有豬只嚴(yán)格按照免疫程序免疫相應(yīng)的疫苗，合適的免疫劑量。

（2）加強(qiáng)斷奶仔豬管理。豬只自身抵抗力差。斷奶仔豬受斷奶應(yīng)激、換料應(yīng)激、母源抗體降低的三重影響，使得斷奶傷亡過半。選擇優(yōu)質(zhì)飼料，盡可能減少斷奶應(yīng)激，及早教槽、減少換料應(yīng)激，及時(shí)注射疫苗。圈舍溫度、豬群密度合理控制。

（3）加強(qiáng)母豬飼養(yǎng)管理，合理調(diào)整飼糧配比，粗蛋白質(zhì)含量、粗脂肪含量科學(xué)合理。適當(dāng)補(bǔ)充母豬所需礦物質(zhì)、維生素、鈣鐵制劑。母豬處于不斷的妊娠、發(fā)情階段，所需微量元素、維生素等更需要持續(xù)補(bǔ)充。

藥物壓制只能解決表象問題，要想豬場全年處于穩(wěn)定的生產(chǎn)環(huán)境下，疫苗防控、營養(yǎng)搭配、生產(chǎn)管理需互相搭配合理。