黃淑丹，史文君，魯 藝

(1.青海大學(xué)，青海 西寧 810016；2.青海大學(xué)農(nóng)林科學(xué)院，青海 西寧 810016；3.青海高原林木遺傳育種實驗室，青海 西寧 810016)

苦水玫瑰(Rosasetate×Rosarugosa)，屬薔薇科(Rosaceae)薔薇屬(Rosa)落葉灌木，是鈍齒薔薇和中國傳統(tǒng)玫瑰的自然雜交種，是我國四大玫瑰品系之一，在甘肅省永登縣苦水鎮(zhèn)已有兩百多年的栽培歷史[1]，具有抗旱、耐寒、抗病蟲、根系發(fā)達(dá)、花朵產(chǎn)量高等特點，并且苦水玫瑰對土壤質(zhì)量要求較低，在酸性或堿性土壤中都能夠正常生長，抗逆性和根蘗性強(qiáng)，產(chǎn)油量高，香味獨特、濃郁，因此被人們稱之為“天下第一香”[2]。

苦水玫瑰在其產(chǎn)地主要采用壓條和分株繁殖，存在繁殖系數(shù)低、苗木質(zhì)量參差不齊、根系不發(fā)達(dá)、有許多人為造成的傷口、移栽成活率較低、大田長勢不一致等諸多缺點[3]。扦插繁殖有成苗速度較快、繁殖系數(shù)較高、操作容易、成本低、應(yīng)用廣泛、能夠保持親本的優(yōu)良性狀等特點，是快速高效繁殖植物體的一種常用方法，應(yīng)用前景廣闊，推廣價值高[4]。但以往對苦水玫瑰扦插研究的報道較少，崔興林[3]和劉瑋[5]等都得出苦水玫瑰最適合采用的生長素處理方法為500mg·ml-1ABT浸泡20min；周蘭勝[6]得出苦水玫瑰扦插生根的最適處理條件為150μg·ml-1IBA處理60min。

本研究以苦水玫瑰半木質(zhì)化枝條為試驗材料，研究了植物生長調(diào)節(jié)劑濃度和處理時間對插穗生根的影響，觀察了插穗生根進(jìn)程，從而找到適宜的處理組合，建立系統(tǒng)的苦水玫瑰嫩枝扦插繁殖體系，為扦插苗生產(chǎn)提供理論指導(dǎo)，以期快速獲得大量高品質(zhì)苗木，保證園林綠化和苦水玫瑰產(chǎn)業(yè)等的種苗供應(yīng)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

以栽植于青海省互助縣秀美農(nóng)林科技有限公司種植基地3-5a生優(yōu)良苦水玫瑰植株為母株，剪取其上生長健壯、無病蟲害的當(dāng)年生半木質(zhì)化枝條作為試驗材料。

1.2 方法

1.2.1 試驗設(shè)計

于2020年8月20日上午采集嫩枝插條并扦插。插穗用不同濃度(50、100、200mg·L-1)的ABT、NAA、IBA浸泡不同時間(0.5、1.0、2.0h)進(jìn)行處理，采用L9(34)正交試驗，清水做對照(CK)。試驗設(shè)計見表1：

1.2.2 扦插前準(zhǔn)備與插穗準(zhǔn)備

在青海大學(xué)農(nóng)林科學(xué)院的溫室內(nèi)進(jìn)行扦插試驗。搭建小型拱棚，準(zhǔn)備好穴盤。將基質(zhì)(蛭石∶泥炭∶珍珠巖=1∶1∶1)按比例拌勻后用0.3%的高錳酸鉀進(jìn)行消毒，消毒后裝入高腳林木50孔穴盤(上口徑4.8cm，下口徑2.0cm，深度8.5cm)，澆透水，靜置24h后扦插。上午采集半木質(zhì)化的枝條，立即放入冰盒帶回實驗室。將枝條剪成約10cm的插穗，其上端平剪，下端須呈45°角進(jìn)行斜剪，保留插穗上部復(fù)葉2-3片，每片復(fù)葉保留2-4個小葉(基部葉片摘除)。將修剪好的插穗浸泡在800倍多菌靈溶液中3min，進(jìn)行消毒。

1.2.3 扦插方法和扦插后管理

首先用比插穗稍粗的木棍在穴盤中打孔，然后將不同種類的生長調(diào)節(jié)劑(ABT、NAA、IBA)，50、100、200mg·L-1的3種濃度處理時間分別為0.5、1.0、2.0h及清水對照處理的插穗分組插入穴盤內(nèi)，扦插深度約為3.0cm，用手壓實，使插穗與基質(zhì)充分接觸，澆透水，做好標(biāo)記，用800倍多菌靈溶液消毒。隨后，溫室內(nèi)濕度保持在80%左右，溫度25±2℃。每7d噴1次多菌靈溶液進(jìn)行消毒，插穗生根后每15d噴一次。保持穴盤整潔，不留雜草。

扦插后每隔3d觀測插穗生根情況，并記錄愈傷產(chǎn)生時間，生根時間，扦插43d后統(tǒng)計各處理的愈傷率(%)、生根數(shù)(個)，生根率(%)，平均根長(cm)。愈傷率(%)=生成愈傷組織株數(shù)/總株數(shù)，生根率(%)=生根株數(shù)/總株數(shù)。

1.2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

數(shù)據(jù)使用Excel 2010進(jìn)行統(tǒng)計分析，用SPSS 22.0軟件進(jìn)行方差分析和多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 苦水玫瑰插穗生根動態(tài)變化

定期觀察發(fā)現(xiàn)扦插18d后，插穗切口處形成白色環(huán)狀愈傷組織，不同處理的插穗扦插18d后產(chǎn)生的愈傷組織見圖1。不同的生長調(diào)節(jié)劑處理插穗產(chǎn)生的愈傷組織略有差異，有些插穗形成連續(xù)的環(huán)狀愈傷組織，且愈傷組織顏色較白，如處理1-3、2-1等；有些插穗的愈傷組織較小，且不連續(xù)，顏色較黃，如處理1-1、1-2等。

1.處理1-1；B.處理1-2；C.處理1-3；D.處理2-1；E.處理2-2；6.處理2-3；G.處理3-1；H.處理3-2；I.處理3-3；J.對照；K.對照圖1 不同處理的插穗愈傷組織形態(tài)Fig.1 The callus morphology of the cuttings in different treatments

扦插后31d，觀察到插穗愈傷組織處形成不定根，這表明在插穗形成愈傷組織的18-31d為不定根形成期。不同處理的插穗產(chǎn)生的不定根存在差異見圖2。

A.處理1-1；B.處理1-2；C.處理1-3；D.處理2-1；E.處理2-2；F.處理2-3；G.處理3-1；H.處理3-2；I.處理3-3；J.對照；K.對照圖2 不同處理的插穗生根形態(tài)Fig.2 Rooting morphology of the cuttings in different treatments

扦插43d后，對所有插穗的生根情況進(jìn)行統(tǒng)計，發(fā)現(xiàn)所有產(chǎn)生不定根的插穗均有愈傷組織，愈傷組織與苦水玫瑰插穗生根密切相關(guān)。不同處理的插穗生根存在差異，生根率最高可達(dá)到81.94%，根數(shù)最多達(dá)到26條，根長最長可達(dá)14.08cm，說明插穗形成不定根的31-43d為插穗不定根的伸長期。不同處理的插穗長勢及生根情況見圖3。

A.處理1-1；B.處理1-2；C.處理1-3；D.處理2-1；E.處理2-2；F.處理2-3；G.處理3-1；H.處理3-2；I.處理3-3；J.對照；K.對照圖3 不同處理的插穗長勢及生根情況Fig.3 Growth and rooting of the cuttings in different treatments

2.2 苦水玫瑰插穗生根情況

由表2可以看出，不同處理組合的苦水玫瑰扦插生根有差異，其中生根率和愈傷率最高的處理是1-1(ABT，50mg·L-1，0.5h)，分別為81.94%和88.19%。平均根數(shù)最多的處理是2-3(NAA，200mg·L-1，0.5h)，達(dá)到了5.1條，而處理1-1的平均根數(shù)與處理2-3的無顯著性差異。因此，從生根率、平均根數(shù)和平均根長的總體情況來看，處理1-1(ABT，50mg·L-1，0.5h)最適于苦水玫瑰扦插生根。

表2 苦水玫瑰嫩枝扦插生根試驗情況Table.2 Rooting test of softwoodcuttings of Kushui Rose

3 結(jié)論與討論

3.1 愈傷組織與生根

通過研究發(fā)現(xiàn)，扦插18d后產(chǎn)生愈傷組織，在扦插中，愈傷組織的形成是產(chǎn)生不定根的前提，它的出現(xiàn)為根系的發(fā)育創(chuàng)造了穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境。插穗扦插后的1-18d為愈傷組織和不定根原基誘導(dǎo)期。產(chǎn)生不定根的苦水玫瑰插穗均有愈傷組織，說明苦水玫瑰的生根與愈傷組織密切相關(guān)，而愈傷組織過多的插穗往往生根較少，甚至不生根，這與王新剛[7]和張雨[8]對其他玫瑰品種研究得出的研究結(jié)果一致，與林艷[9]、黃燕文[10]和馬英[11]等得出的結(jié)果相似。

本研究中觀察到有些插穗的愈傷組織很大，幾乎覆蓋整個切口，顏色變成褐色，呈現(xiàn)老化狀態(tài)，這些扦插苗既不生根也不死亡。郭素娟關(guān)于林木扦插生根的研究發(fā)現(xiàn)，老化的愈傷組織中細(xì)胞分裂素含量高，生長素含量低[12]。因此，實際生產(chǎn)中，用植物激素處理玫瑰插穗時，嚴(yán)格控制激素的配比和用量，從而控制愈傷的生長量。

3.2 植物生長調(diào)節(jié)劑與插穗生根

植物激素是植物體內(nèi)的微量有機(jī)物質(zhì)，對植物的生長和發(fā)育有顯著影響。而植物生長調(diào)節(jié)劑是人工合成或從生物體內(nèi)提取的，與植物激素作用相似的物質(zhì)，能夠調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育，在不定根形成過程中起到了關(guān)鍵作用。ABT生根粉是一種復(fù)合型植物生根促進(jìn)劑，具有高效性和廣譜性，效果也很好[7]。由于生長調(diào)節(jié)劑和激素的理化性質(zhì)和生理功能各異，導(dǎo)致插穗生根情況不同。楊芷秋等[13]對大馬士革玫瑰的扦插結(jié)果表明，扦插成活率最高的處理組合為濃度10mg·kg-1的IBA。Marta Joanna Monde[14]研究發(fā)現(xiàn)，IBA和Tytanit在玫瑰扦插生根的質(zhì)量和數(shù)量上表現(xiàn)出不同的活性，其中用0.02%的Tytanit處理插穗能顯著提高玫瑰生根率。莫小鋒等[15]用ABT+H2O2復(fù)合激素處理的玫瑰插穗成活率最高，能顯著促進(jìn)生根。文佳君等[16]研究表明，用吲哚丁酸和萘乙酸處理玫瑰插穗的生根效果優(yōu)于用生根粉處理的生根效果，其中以1000mg·L-1NAA處理的插穗生長效果最好。

不同的植物生長調(diào)節(jié)劑濃度高低、處理時間長短均會影響插穗生根效果。通常情況下，高濃度短時間浸泡促進(jìn)生根，長時間浸泡會抑制生根，甚至導(dǎo)致插穗死亡；低濃度長時間浸泡促進(jìn)生根，短時間浸泡不能促進(jìn)生根，所以只有適宜的濃度和處理時間才能促進(jìn)生長[7]。本試驗結(jié)果表明，ABT濃度為50mg·L-1，處理時間為0.5h效果最佳；NAA濃度為100mg·L-1，處理時間為1.0h效果最佳；IBA濃度為50mg·L-1，處理時間為2.0h效果最佳。

本文研究了不同濃度的ABT、NAA、IBA處理不同時間(0.5、1.0、2.0h)對插穗生根的影響，得出處理1-1(ABT，50mg·L-1，0.5h)的插穗生根情況最好，生根率為81.9%，愈傷率為88.19%，平均根數(shù)為4.3條,平均根長為3.38cm。除了本試驗所設(shè)的處理組合外，還可將其它激素、濃度和處理時間對苦水玫瑰扦插生根的影響作進(jìn)一步探究。