祖彬,李鴻瑞,李峰,王曉燕

(1.齊齊哈爾大學(xué) 輕工與紡織學(xué)院，黑龍江 齊齊哈爾 161000；2.齊齊哈爾大學(xué) 生命科學(xué)與農(nóng)林學(xué)院，黑龍江 齊齊哈爾 161000；3.齊齊哈爾正弘德食品有限公司，黑龍江 齊齊哈爾 161000；4.齊齊哈爾大學(xué) 食品與生物工程學(xué)院，黑龍江 齊齊哈爾 161000)

1 玉米漿處理液的生產(chǎn)

1.1 玉米漿生產(chǎn)工藝

1.1.1 浸泡

玉米籽粒經(jīng)過篩分凈化，除去鐵、砂石及玉米芯后，一般采用浸泡時(shí)間短，可溶性物質(zhì)溶出多的連續(xù)逆流浸漬工藝，而不溶性蛋白則在后續(xù)生產(chǎn)中被分離出來成為玉米黃粉。玉米籽粒從儲(chǔ)庫中輸送到浸泡罐中，首先要用除鐵器除去在玉米籽粒中的鐵質(zhì)，鐵質(zhì)在浸泡過程中進(jìn)入到浸泡水中會(huì)造成浸泡液中灰分過大，最后濃縮的玉米漿顏色深，不利于厚層通風(fēng)制曲中米曲霉的生長繁殖，還會(huì)抑制對(duì)醬油風(fēng)味起到促進(jìn)作用的魯氏酵母和醬醪結(jié)合酵母的生長代謝。其次是在濕法輸送玉米籽粒時(shí)在除砂上料罐中對(duì)玉米進(jìn)行洗滌，利用玉米籽粒與砂石的不同沉降系數(shù)，利用旋流除砂器使密度大的砂石沉積到除砂上料罐的底部，起到了去除砂石的作用。砂石在中和工序時(shí)會(huì)使連接管路堵塞，在玉米漿處理液生產(chǎn)時(shí)容易在板框過濾過程中破壞濾布纖維，形成孔洞，過濾時(shí)濾液在孔洞處形成短路現(xiàn)象，使玉米漿處理液渾濁，在厚層通風(fēng)制曲時(shí)會(huì)造成玉米漿處理液濃度不均勻，影響成曲質(zhì)量。

玉米籽粒浸泡的目的是破壞玉米蛋白質(zhì)網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的二硫鍵及致密的外皮結(jié)構(gòu)，使玉米籽粒變軟，蛋白質(zhì)、淀粉質(zhì)吸水膨脹，淀粉與非淀粉物質(zhì)分開，大部分可溶性物質(zhì)進(jìn)入到浸泡液中，產(chǎn)生玉米浸泡水。使用老的浸泡液酸度高，浸泡時(shí)間短，玉米籽粒中的水溶性物質(zhì)進(jìn)入浸泡水中的速度快，所以，浸泡水是含有水溶性氮、水溶性小分子糖及灰分的多種營養(yǎng)物質(zhì)的集合體，這就是玉米浸泡水在厚層通風(fēng)制曲中作為營養(yǎng)液的原因。

玉米浸泡水酸度大的原因：一是在浸泡過程中添加濃度為0.15%～0.30%的亞硫酸對(duì)玉米進(jìn)行浸泡。采用亞硫酸浸泡的目的：防止玉米籽粒在浸泡過程中腐??；破壞玉米的組織結(jié)構(gòu)，使玉米籽粒膨脹，易于浸出淀粉及可溶性玉米蛋白；有利于乳酸菌的繁殖與代謝。二是玉米籽粒的乳酸菌作用。乳酸菌主要是加入原玉米浸泡液中帶入的，還有吸附在玉米籽粒表面的乳酸菌及在浸泡車間環(huán)境中進(jìn)入到浸泡罐中。乳酸菌作用使玉米籽粒中的糖分變成乳酸，酸度可以抑制大部分中堿性細(xì)菌的繁殖與代謝，提高淀粉的產(chǎn)率及生產(chǎn)的安全性，如果浸泡時(shí)間長，過度發(fā)酵，使部分能提取的淀粉質(zhì)變成了乳酸，淀粉產(chǎn)率下降。乳酸含量越高，微生物分解的氮素越多，玉米浸泡水中的水溶性氮也高。浸泡水中氮素含量與玉米籽粒中水溶性氮及浸泡過程中乳酸發(fā)酵的程度相關(guān)聯(lián)，一般情況下浸泡水的pH為4.2左右。

影響浸泡水質(zhì)量的因素有溫度、加水量、時(shí)間等。溫度高，水分進(jìn)入到玉米籽?？?，玉米軟化、膨脹速度快。溫度高還可以抑制部分低溫型細(xì)菌繁殖，保證乳酸發(fā)酵的安全性。浸泡溫度低、浸泡時(shí)間長，不利于生產(chǎn)周期縮短，增加生產(chǎn)成本。玉米籽粒浸泡溫度保持在48～53 ℃為宜。浸泡時(shí)采用間接加熱方式，物料品溫受熱均勻，蛋白質(zhì)變性程度小，浸泡液中可溶性物質(zhì)含量高；直接用蒸汽加熱，蛋白質(zhì)變性程度大，可溶性物質(zhì)進(jìn)入浸泡液中少，造成局部物料品溫過高，殺死部分浸泡液中的乳酸菌，使玉米籽粒中的淀粉和蛋白分離困難。生產(chǎn)過程中如果采用經(jīng)過高溫干燥的玉米粒籽，部分蛋白質(zhì)產(chǎn)生變性，水溶性氮含量下降，浸泡液中氮素少。浸泡時(shí)料水比一般為1∶1.2(以質(zhì)量計(jì))。加水量大，浸泡液中營養(yǎng)物質(zhì)總量多，但濃度低，在生產(chǎn)玉米漿時(shí)，能耗多不利于企業(yè)的節(jié)能減排工作。浸泡時(shí)間短，浸泡液中水溶性營養(yǎng)物少，為乳酸發(fā)酵提供的碳源、氮源及微量元素不足，乳酸發(fā)酵緩慢，不利于玉米籽粒中淀粉及蛋白的提取。玉米籽粒的浸泡時(shí)間為50 h左右。因此，玉米浸泡水的營養(yǎng)物質(zhì)含量略有差異，在厚層通風(fēng)制曲時(shí)，要根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果精確計(jì)算添加量，否則厚層通風(fēng)成曲的質(zhì)量達(dá)不到工藝指標(biāo)，影響原料利用率及產(chǎn)品質(zhì)量。

1.1.2 倒罐

罐內(nèi)玉米籽粒不動(dòng)，通過動(dòng)力泵使水循環(huán)流動(dòng)，利用二次尾氣加熱使溫度保持在80 ℃左右，從二效蒸發(fā)器進(jìn)料，四效蒸發(fā)器出料。玉米浸泡水經(jīng)逆流浸泡倒罐產(chǎn)生一淋水。

1.1.3 濃縮

一淋水再經(jīng)五效蒸發(fā)濃縮至固形物含量40%左右，由泵體輸送至儲(chǔ)存罐，即為玉米漿(密度1.18～1.20)。玉米漿濃度可以根據(jù)市場需求進(jìn)行濃縮，調(diào)整固形物含量。

1 t玉米產(chǎn)0.7 t玉米浸泡水，玉米浸泡水與玉米漿的濃縮比為3∶1～4∶1。

1.2 玉米漿處理液的生產(chǎn)

1.2.1 玉米漿營養(yǎng)豐富

玉米漿是玉米浸泡水的濃縮物。在玉米中含有4%左右的可溶性物質(zhì)，經(jīng)過浸泡工序，有2%左右的可溶性物質(zhì)如蛋白質(zhì)、小分子糖分、維生素、礦物質(zhì)等會(huì)進(jìn)入浸泡水中[1]，浸泡水經(jīng)過多效蒸發(fā)濃縮得到高酸度、高營養(yǎng)、高濃度、高礦物質(zhì)的玉米漿。

玉米漿中水溶性蛋白質(zhì)含量高，特別是小分子的蛋白質(zhì)水解物氨基酸態(tài)氮≥1.0 g/dL(以氮計(jì))，可以給醬油生產(chǎn)中米曲霉等微生物培養(yǎng)提供氮源。

1.2.2 玉米漿處理液工藝要點(diǎn)

淀粉廠生產(chǎn)的玉米漿不能直接作為微生物的氮源，這也是多年玉米漿在發(fā)酵工程中應(yīng)用受限的原因。

玉米漿在浸泡過程中產(chǎn)生高達(dá)10 g/dL(以乙酸計(jì))有機(jī)酸，pH為3.0～3.5，米曲霉生長最適宜的pH為6.0～7.0，所以玉米漿必須要進(jìn)行中和，才能在醬油米曲霉生長過程中作為氮源。玉米籽粒在浸泡中產(chǎn)生的乳酸鹽對(duì)米曲霉有抑制作用，在玉米漿中和工序中要采取復(fù)合中和劑，既能快速中和玉米漿中的酸，又能除去大部分有抑菌作用的乳酸鹽。為了提高中和反應(yīng)的速度，反應(yīng)釜內(nèi)品溫應(yīng)該控制在85～95 ℃，同時(shí)還要科學(xué)地加入中和劑，先加入反應(yīng)速度快的中和劑，然后加入反應(yīng)速度慢的中和劑，這樣可以縮短反應(yīng)時(shí)間。當(dāng)玉米漿的pH為6.2～6.5時(shí)即可停止加入中和劑。反應(yīng)后的物料中含有大量的乳酸鹽和顆粒料，呈渾濁狀態(tài)，溫度在80 ℃左右時(shí)要立即進(jìn)行板框壓濾，當(dāng)物料低于30 ℃時(shí)黏度急速上升，壓濾時(shí)間會(huì)延長，所以應(yīng)該選擇耐高溫的板框進(jìn)行壓濾。

板框壓濾液后玉米漿處理液中含有大量可溶性營養(yǎng)物質(zhì)，如小分子的氨基酸、淀粉分解產(chǎn)物小分子糖及耐熱性的微生物，極易發(fā)生產(chǎn)氣、產(chǎn)酸、腐敗等二次發(fā)酵現(xiàn)象，在生產(chǎn)過程中為了保證原料的安全性，玉米漿處理液添加營養(yǎng)鹽后，要經(jīng)過高于90 ℃滅酶30 min，即可得到用于厚層通風(fēng)制曲的玉米漿處理液。玉米漿處理液的濃度大，有較好的防腐特性，一般情況下在低于20 ℃的條件下儲(chǔ)存即可。

2 厚層通風(fēng)制曲

厚層通風(fēng)制曲是醬油生產(chǎn)常用的培養(yǎng)微生物的方式，為了提高制曲酶活力的多元性，采用了分別由齊齊哈爾大學(xué)提供的QU3601-5米曲霉種曲和上海迪發(fā)釀造生物制品有限公司提供的米曲霉曲精，加入量為每1000 kg原料加入2 kg種曲、200 g曲精。

2.1 玉米漿處理液加入要均勻

玉米漿處理液要在潤水時(shí)加入。經(jīng)過多次試驗(yàn)，當(dāng)玉米漿處理液加入量為2%時(shí)效果最好，小于最佳添加量時(shí)效果不明顯，大于最佳添加量會(huì)抑制米曲霉的繁殖。NK罐潤水時(shí)要使用定量加水罐，將玉米漿處理液和水混合均勻，防止局部物料營養(yǎng)不均衡，每次加水工序完成后，要及時(shí)清洗加水罐，防止高營養(yǎng)的玉米漿處理液發(fā)生腐敗現(xiàn)象，產(chǎn)生異味。

為了使?jié)櫵鶆?，玉米漿處理液快速進(jìn)入曲料內(nèi)部，在生產(chǎn)中對(duì)于大顆粒的脫脂大豆如豆餅要進(jìn)行粉碎，否則會(huì)出現(xiàn)大顆粒豆餅潤水不均，大顆粒內(nèi)部水分少，米曲霉生長不茂盛的現(xiàn)象。小顆粒物料會(huì)過度潤水，水分大，玉米漿處理液含量高，原料蒸煮后，黏度大，通風(fēng)不暢，容易使厭氧性的產(chǎn)酸細(xì)菌快速繁殖，使成曲酸度高，酶活力下降，生產(chǎn)的成品酸度大，風(fēng)味差。

蛋白質(zhì)物料吸水速度慢，淀粉質(zhì)物料潤水速度快，正常情況下，蛋白質(zhì)物料要先潤水，淀粉質(zhì)物料后潤水，使物料水分含量均勻一致。在冬季寒冷季節(jié)，也可以采用蛋白質(zhì)物料入罐后，通入蒸汽進(jìn)行預(yù)蒸煮，俗稱“干蒸”，使蛋白質(zhì)物料組織膨脹，品溫提高，使蛋白質(zhì)物料和淀粉質(zhì)物料的潤水速度趨于一致，防止?jié)櫵痪啊案甥焾F(tuán)”現(xiàn)象。

2.2 厚層通風(fēng)制曲時(shí)應(yīng)該注意事項(xiàng)

加入玉米漿處理液可以使米曲霉孢子快速吸收營養(yǎng)，縮短孢子的發(fā)芽時(shí)間。不添加玉米漿處理液的物料，米曲霉要吸收曲料分解后的營養(yǎng)物質(zhì)才能發(fā)芽繁殖。玉米漿處理液中含有大量小分子的氨基酸、短鏈糖類及其他營養(yǎng)物質(zhì)，使米曲霉孢子迅速吸收，縮短了米曲霉發(fā)芽時(shí)間，同時(shí)米曲霉生長優(yōu)勢得到了加強(qiáng)，也抑制了雜菌的侵入。

潤水時(shí)要把玉米漿處理液均勻地混入曲料中，曲料蒸煮后，蛋白質(zhì)適度變性，淀粉充分糊化，殺死了物料中一切微生物。加入玉米漿處理液的曲料在蒸煮時(shí)要采取高溫短時(shí)間的工藝。如果曲料蒸煮后在NK罐內(nèi)滯留時(shí)間長，俗稱“留鍋”，曲料中淀粉質(zhì)在高溫作用下產(chǎn)生的短鏈小分子糖與玉米漿處理液中的氨基酸發(fā)生美拉德反應(yīng)，使曲料的顏色加深，降低了玉米漿促長液的氮源作用，產(chǎn)生的顏色物質(zhì)類黑素對(duì)厚層通風(fēng)制曲中米曲霉的繁殖與代謝有抑制作用，所以在蒸煮時(shí)不宜采用“留鍋”方法。

曲料經(jīng)NK罐高壓蒸煮后，要采用水力噴射器、絞龍、風(fēng)機(jī)等降溫方式，使熟料快速冷卻，防止大豆蛋白質(zhì)過度變性，熟料蛋白質(zhì)消化率要大于85%，水分為46%左右。當(dāng)物料冷卻后，品溫達(dá)到35 ℃時(shí)加入定量由齊齊哈爾大學(xué)提供的QU3601-5米曲霉種曲和上海迪發(fā)釀造生物制品有限公司提供的米曲霉曲精，進(jìn)入厚層通風(fēng)曲池進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。

入池時(shí)曲料疏松度要均勻。米曲霉是好養(yǎng)性微生物，當(dāng)曲料中加入玉米漿處理液后，很快被米曲霉吸收利用。米曲霉孢子吸水后體積膨脹，玉米漿處理液進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，水溶性營養(yǎng)物質(zhì)被利用，米曲霉的孢子由于吸收了玉米漿處理液，發(fā)芽時(shí)間由8～10 h縮短為6～8 h。加入玉米漿處理液后，發(fā)芽時(shí)間縮短，曲料升溫快，通風(fēng)時(shí)間比原工藝提前，菌絲生長旺盛，在間隙通風(fēng)的條件下，適當(dāng)增加新鮮風(fēng)的通風(fēng)比例，滿足米曲霉對(duì)氧氣的需求。當(dāng)曲料疏松度不均勻時(shí)，曲料溫差加大，局部高溫會(huì)使曲料中米曲霉的繁殖受到抑制，酶的積累量少，嚴(yán)重時(shí)會(huì)形成局部“燒曲”現(xiàn)象。曲料前期“燒曲”使菌絲長勢不好，菌絲少，嚴(yán)重時(shí)物料呈現(xiàn)熟料本色，后期“燒曲”曲料呈現(xiàn)黑色，無黃綠色米曲霉孢子，酶活力下降。如果污染了腐敗性細(xì)菌，曲料有明顯的氨味。

加入玉米漿處理液后，米曲霉的生長速度加快，菌絲多，菌絲長，品溫上升快，要及時(shí)通風(fēng)降溫通氧，通風(fēng)阻力較大時(shí)要進(jìn)行第一次翻曲，調(diào)節(jié)曲料的品溫、水分，疏松物料，降低風(fēng)壓損失。翻曲最好使用翻曲機(jī)，手工翻曲速度要快，打碎大塊曲料，消除曲料裂縫。當(dāng)曲料表面長滿白色菌絲，曲池四周與曲料明顯出現(xiàn)裂縫時(shí)進(jìn)行第二次翻曲。第二次翻曲后，曲料再出現(xiàn)裂縫要進(jìn)行鏟曲。

自接種后經(jīng)過28～36 h培養(yǎng)，米曲霉進(jìn)入孢子形成期，曲料有黃色分生孢子生成，孢子也逐漸成熟，呼吸熱和代謝熱減少，品溫開始下降，曲料呈現(xiàn)嫩黃色時(shí)，即為成曲。厚層通風(fēng)制曲培養(yǎng)時(shí)間長，產(chǎn)生大量孢子，會(huì)降低原料的利用率，釀制的成品有明顯的苦味[2]。

加入玉米漿處理液的蛋白酶酶活力為每克曲(干基)960 U；未加入玉米漿處理液的蛋白酶酶活力為每克曲(干基)854 U；酶活力提高12%。加入玉米漿處理液成曲細(xì)菌數(shù)為42億/g曲，未加入玉米漿處理液成曲細(xì)菌數(shù)為48億/g曲，細(xì)菌數(shù)降低8.7%。

厚層通風(fēng)制曲品溫變化曲線圖見圖1，厚層通風(fēng)制曲酶活力變化曲線圖見圖2。

圖1 厚層通風(fēng)制曲品溫變化曲線圖Fig.1 The temperature variation curves of koji making through thick-layer ventilative cultivation

圖2 厚層通風(fēng)制曲酶活力變化曲線圖Fig.2 The enzyme activity variation curves of koji making through thick-layer ventilative cultivation

3 結(jié)論

玉米漿處理液含有大量的小分子氨基酸、短鏈淀粉水解物及其他營養(yǎng)物質(zhì)，在醬油厚層通風(fēng)制曲曲料中加入，可以縮短成曲的培養(yǎng)時(shí)間，減少雜菌的污染，提高成曲的酶活力。玉米漿處理液的利用為其他微生物培養(yǎng)提供了新的氮源，可以緩解玉米加工廠玉米漿利用及環(huán)境保護(hù)的難題，提高了企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。