劉德舉, 張 敏, 莊英瑞, 畢 萌, 宮相忠

恩諾沙星、磺胺嘧啶和呋喃西林對共培養(yǎng)的萱藻絲狀體和膨脹色球藻生長的影響

劉德舉, 張 敏, 莊英瑞, 畢 萌, 宮相忠

(中國海洋大學海洋生命學院, 山東 青島 266003)

為有效抑制萱藻種質保存和絲狀體擴增時膨脹色球藻的污染, 本實驗應用實驗生態(tài)學法, 研究了恩諾沙星、磺胺嘧啶和呋喃西林3種抗菌藥對共培養(yǎng)的萱藻絲狀體和膨脹色球藻生長的影響。結果顯示: 在5～100 mg/L范圍內, 50 mg/L恩諾沙星適于除去萱藻種質保存或絲狀體擴增過程中出現的膨脹色球藻, 實驗第18 d膨脹色球藻的日均增長率為–2.67%, 萱藻絲狀體的單室孢子囊發(fā)育良好; 在10～150 mg/L范圍內, 100 mg/L磺胺嘧啶能有效抑制膨脹色球藻的生長, 實驗第18 d膨脹色球藻的日均增長率為–0.58%, 萱藻絲狀體日均增長率為2.91%, 單室孢子囊發(fā)育良好; 150 mg/L磺胺嘧啶會使萱藻絲狀體的部分細胞呈淺褐色, 單室孢子囊發(fā)育不良; 在1～20 mg/L范圍內, 20 mg/L呋喃西林能抑制膨脹色球藻的生長, 實驗第18 d膨脹色球藻日均增長率為–0.78%, 但同時影響了萱藻絲狀體的正常生長, 單室孢子囊發(fā)育不良。實驗證明, 50 mg/L恩諾沙星和100 mg/L磺胺嘧啶最適于解決萱藻種質保存和絲狀體擴增過程中膨脹色球藻的污染。

萱藻; 絲狀體; 膨脹色球藻; 共培養(yǎng); 抗菌藥

萱藻()系廣溫性大型海藻, 隸屬于褐藻門(Phaeophyta), 褐子綱(Phaeosporeae), 萱藻科(Scytosiphonaceae), 廣泛分布于南美洲、北美洲、大洋洲、歐洲以及亞洲沿海海域, 在中國主要分布于遼東半島至廣東省海陵島之間的沿海海域[1-2]。萱藻生長在在中潮帶、低潮帶的石頭、基巖等堅硬的基質及潮池中, 與其他海藻一起構成近岸海洋初級生產者, 在海洋生態(tài)系統中扮演著重要的角色[3]。萱藻的營養(yǎng)價值高, 富含氨基酸、蛋白質、不溶性膳食纖維和脂肪等成分[4]。此外, 萱藻中還富含褐藻膠、巖藻聚糖酸內酯及酚類物質。褐藻膠有助于人體排鉛[5], 還可作為食品添加劑用來改良口感[6]; 巖藻聚糖酸內酯有抗凝血及抗血栓的作用[7]; 萱藻多酚可通過清除羥自由基以達到抗衰老和美白的效果[8]。萱藻的乙醇提取物對人結腸癌腫瘤細胞(HT-29)具有很強的選擇性活性(LD50=1.49 μg/mL), 甲醇提取物對人肺腺癌腫瘤細胞(A-549)、白血病腫瘤細胞(HL-60)的抑制率大于80%[7, 9]。因此, 萱藻在食品、工業(yè)、醫(yī)藥和生態(tài)等方面發(fā)揮著重要作用, 是一種極具開發(fā)潛力的經濟海藻。

膨脹色球藻()是一種藍藻, 隸屬于藍藻門(Cyanophyta), 色球藻目(Chroo-coc-cales),色球藻科(Chroococcaceae), 色球藻屬(), 生長繁殖過程中能產生種類繁多的次生代謝物, 這些次生代謝物釋放到水體中會對其他生物的生長繁殖產生不利影響, 如膨脹色球藻的正己烷提取物對革蘭氏陰性菌有明顯的抑制作用[10]。萱藻在種質保存和絲狀體擴增過程中極易被膨脹色球藻污染, 若不及時抑制或清除, 膨脹色球藻會迅速繁殖并產生大量次生代謝物, 造成萱藻絲狀體發(fā)育不良, 生長受阻甚至死亡。膨脹色球藻作為一種原核生物, 其細胞壁化學成分與細菌存在相似性, 細胞壁中均含有肽聚糖并存在抗生素分子的作用靶點, 因此, 鏈霉素(100 mg/L)、氯霉素(10 mg/L)、卡那霉素(100 mg/L)和頭孢噻肟鈉(100 mg/L)等抗生素可作用于膨脹色球藻并抑制其生長[11-12], 但以上抗生素經多次使用后也會使病原菌產生耐藥性[13], 在水產養(yǎng)殖領域中被禁止大量使用。

與某些微生物產生的抗生素相比, 人工合成的抗菌藥在養(yǎng)殖領域使用更加廣泛, 目前關于人工合成的抗菌藥對萱藻絲狀體和膨脹色球藻生長的影響尚未見報道。因此, 研究應用人工合成抗菌藥抑制膨脹色球藻的生長對于萱藻的種質保存和絲狀體擴增具有積極意義。氟喹諾酮類抗菌藥和磺胺類抗菌藥被廣泛應用于水產養(yǎng)殖領域, 硝基呋喃類抗菌藥則曾在畜禽養(yǎng)殖業(yè)被廣泛使用。本文研究了3種抗菌藥恩諾沙星(enrofloxacin, ENFX)、磺胺嘧啶(sulfa-dia-zine, SD)和呋喃西林(nitrofurazone, NFZ)對共培養(yǎng)的膨脹色球藻和萱藻絲狀體生長的影響, 比較了其對共培養(yǎng)體系中膨脹色球藻生長的抑制效果, 該研究將為萱藻種質保存和絲狀體擴增時膨脹色球藻的污染問題提供有效的解決方法。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 萱藻絲狀體

取自中國海洋大學海藻繁殖生物學研究室種質庫, 培養(yǎng)條件為: 溫度21 ℃、光照強度86.40～ 97.20 μmol/(m2·s)、光周期L︰D=14︰10, 培養(yǎng)液為F1培養(yǎng)液[14-15]。

1.1.2 膨脹色球藻

從被污染的萱藻種質中分離出膨脹色球藻, 進行擴增培養(yǎng)。培養(yǎng)條件為: 溫度21 ℃, 光周期L︰D= 14︰10, 光照強度54.00～67.00 μmol/(m2·s), 培養(yǎng)液為F1培養(yǎng)液。

1.1.3 抗菌藥

三種抗菌藥恩諾沙星、磺胺嘧啶和呋喃西林均購于北京索萊寶科技有限公司, 根據《分子克隆實驗指南》[16]配置成溶液。

1.2 實驗方法

1.2.1 三種抗菌藥對共培養(yǎng)的膨脹色球藻和萱藻絲狀體生長的影響

取生長狀態(tài)良好的萱藻絲狀體, 用組織勻漿機點切10次, 得到長度為180～200 μm的絲狀體, 用200目篩絹過濾上述絲狀體并用無菌海水反復沖洗, 配制成生物量為0.5 mg/mL萱藻藻液, 取400 mL該藻液置于500 mL三角燒瓶中。將處于對數生長期的膨脹色球藻接種到萱藻藻液中, 接種密度是1.0×104ind/mL, 各抗菌藥的濃度如表1所示, 每個濃度設置3個平行樣, 并設置對照組。在實驗第0、3、6、9、12、15和18 d, 從各平行樣中取20 mL藻液, 稱量萱藻鮮重, 計數每0.1 μL藻液中膨脹色球藻細胞數量。培養(yǎng)條件為: 光周期L︰D=14︰10, 溫度21 ℃, 光照強度84.6～97.2 μmol/(m2·s)。通過計算日均增長率來探究各抗菌藥對共培養(yǎng)的萱藻絲狀體和膨脹色球藻生長的影響。

萱藻絲狀體日均增長率的計算公式[17]:

=[(Lnt–Ln0)/]×100%, (1)

此公式中,表示萱藻絲狀體的日均增長率;表示稱重的時間間隔(d);0表示萱藻絲狀體的起始鮮重;t表示萱藻絲狀體時的鮮重。

膨脹色球藻日均增長率的計算公式[17]:

C=[(Lnt–Ln0)/]×100%, (2)

此公式中,C表示膨脹色球藻細胞的日均增長率,表示稱重的時間間隔(d);0表示膨脹色球藻的起始細胞密度;t表示膨脹色球藻時的細胞密度。

表1 抗菌藥的實驗濃度

注: -表示未設置該組別

1.2.2 三種抗菌藥停用后萱藻絲狀體的發(fā)育情況

共培養(yǎng)18 d后, 用200目篩絹過濾各平行樣中的藻液, 并用無菌海水反復沖洗, 將上述對照組和各實驗組中的萱藻絲狀體分別配成0.5 mg/mL的藻液, 置于500 mL三角燒瓶中, 進行孢子囊誘導實驗。條件為: 溫度17 ℃, 光暗周期10L︰14D, 光照強度28.8～43.2 μmol/(m2·s) 。誘導20 d后, 從各平行樣中取少量藻液, 在顯微鏡下隨機取10個視野統計單室孢子囊細胞數及萱藻絲狀體細胞數, 測量單室孢子囊直徑并計算孢子囊比例。

單室孢子囊比例的計算公式:

1.3 數據處理

應用SPSS19.0和Sigmaplot10.0分析軟件進行單因素方差分析, 使用IS Capture軟件進行圖像采集和孢子囊直徑測量。

2 結果與分析

2.1 恩諾沙星對膨脹色球藻和萱藻絲狀體生長的影響

在5～100 mg/L范圍內, 恩諾沙星對膨脹色球藻的生長均有抑制作用, 且隨著恩諾沙星濃度的增大, 抑制作用增強(圖1a)。第18 d, 50 mg/L和100 mg/L實驗組中日均增長率分別為–0.97%和–1.78%, 膨脹色球藻的生長完全受抑制。觀察發(fā)現, 對照組中的膨脹色球藻生長旺盛, 單細胞的直徑為5～12 μm, 外被寬厚的膠質鞘, 胞質充盈, 呈藍綠色(圖2a)。50 mg/L實驗組中, 色球藻的膠質鞘變薄, 細胞呈淺藍綠色。100 mg/L實驗組中, 未見膠質狀群體, 膨脹色球藻多以單細胞的形式存在, 呈淺藍綠色, 細胞的直徑為4～8 μm, 部分細胞發(fā)生解體(圖2b)。

圖1 恩諾沙星對膨脹色球藻與萱藻絲狀體生長發(fā)育的影響

注: 不同字母表示差異性顯著(<0.05)

在5～20 mg/L范圍內, 萱藻絲狀體日均增長率隨著恩諾沙星濃度的增大而升高, 在20～100 mg/L范圍內, 日均增長率隨著濃度的增大而降低(圖1b)。實驗第18 d, 100 mg/L實驗組日均增長率(1.33%)低于對照組(2.74%), 萱藻絲狀體的生長受到抑制。50 mg/L實驗組中萱藻絲狀體日均增長率為3.18%, 觀察發(fā)現, 萱藻絲狀體長勢良好, 細胞呈深褐色, 胞質充盈(圖2c); 100 mg/L實驗組中絲狀體的部分細胞呈淺褐色,原生質體收縮成一小團并聚集到細胞的一端(圖2b)。

在整個誘導周期, 50 mg/L實驗組的單室孢子囊比例均高于對照組, 孢子囊發(fā)育較好, 100 mg/L實驗組的單室孢子囊比例均低于對照組, 孢子囊發(fā)育較差。實驗第20 d, 對照組、50 mg/L實驗組和100 mg/L實驗組的單室孢子囊比例分別為6.52%、8.56%和5.64%, 單室孢子囊直徑分別為(18.02±0.12) μm、(19.35± 1.04) μm和(14.32±0.51) μm。

圖2 共培養(yǎng)18d時膨脹色球藻和萱藻絲狀體的生長情況

注: 箭頭a指示的是萱藻絲狀體細胞, 箭頭b指示的是膨脹色球藻細胞

綜上分析, 50 mg/L和100 mg/L恩諾沙星均能有效抑制膨脹色球藻的生長, 50 mg/L實驗組中萱藻絲狀體的生長發(fā)育未受影響, 但100 mg/L實驗組中萱藻絲狀體生長狀況差且單室孢子囊發(fā)育不良。因此, 在不影響萱藻絲狀體生長發(fā)育的前提下, 50 mg/L恩諾沙星適于抑制共培養(yǎng)體系中膨脹色球藻的生長。

2.2 磺胺嘧啶對膨脹色球藻和萱藻絲狀體生長的影響

在10～150 mg/L范圍內, 膨脹色球藻的日均增長率隨著磺胺嘧啶濃度的增加而降低(圖3a)。實驗第18 d, 100 mg/L和150 mg/L實驗組日均增長率分別為–0.58%和–2.27%, 遠低于對照組(20.21%), 膨脹色球藻的生長完全受抑制。觀察發(fā)現, 100 mg/L實驗組中, 絕大部分膠質群體的公共膠質鞘被破壞并有內容物流出, 細胞開始破碎(圖2d)。150 mg/L磺胺嘧啶對膨脹色球藻的抑制效果最明顯, 未發(fā)現具有完整結構的細胞個體, 大數細胞破碎成碎片或碎渣并包裹在萱藻絲狀體周圍(圖2e)。

在10～100 mg/L范圍內, 萱藻絲狀體的日均增長率均高于對照組; 150 mg/L實驗組的日均增長率均低于對照組(圖3b)。實驗第18 d, 150 mg/L實驗組的日均增長率僅1.41%, 但未出現負增長, 萱藻絲狀體的生長受到不利影響。觀察發(fā)現, 100 mg/L實驗組中的萱藻絲狀體長勢良好, 胞質充盈, 顏色為深褐色, 大多數細胞呈念珠狀(圖2d); 而150 mg/L實驗組中多數細胞顏色變深, 呈黑褐色, 部分細胞的原生質體皺縮或消失(圖2e)。

在整個誘導周期中, 10～100 mg/L實驗組的單室孢子囊比例均高于對照組, 150 mg/L實驗組的單室孢子囊比例低于對照組(圖3c)。實驗第20 d, 100 mg/L實驗組的單室孢子囊比例為7.13%, 單室孢子囊直徑為(19.71±0.44) μm; 150 mg/L實驗組的單室孢子囊比例僅4.73%, 低于對照組(6.62%), 對照組的單室孢子囊直徑為(18.02±0.12) μm, 而150 mg/L實驗組僅(12.24±1.02) μm, 與對照組相比較小。

綜上分析, 100 mg/L和150 mg/L磺胺嘧啶可有效抑制膨脹色球藻的生長, 100 mg/L實驗組中的萱藻絲狀體能正常生長發(fā)育, 但150 mg/L實驗組中的萱藻絲狀體生長狀況差且單室孢子囊發(fā)育不良。因此, 在不影響萱藻絲狀體生長發(fā)育的前提下, 100 mg/L磺胺嘧啶可作為抑制共培養(yǎng)體系中膨脹色球藻生長的最佳濃度。

圖3 磺胺嘧啶對膨脹色球藻與萱藻絲狀體生長發(fā)育的影響

注: 不同字母表示差異性顯著(<0.05)

2.3 呋喃西林對膨脹色球藻和萱藻絲狀體生長的影響

在1～20 mg/L范圍, 膨脹色球藻的日均增長率隨著呋喃西林濃度的增加而逐漸降低(圖4a)。實驗第18 d, 20 mg/L實驗組中膨脹色球藻日均增長率僅–0.78%, 與對照組(20.21%)相比差異顯著(<0.05), 膨脹色球藻的生長完全被抑制。觀察發(fā)現, 20 mg/L實驗組中未見完整的單細胞個體或細胞群體, 細胞碎片呈淺藍綠色甚至無色(圖2f)。

在1～20 mg/L范圍, 萱藻絲狀體的日均增長率隨著呋喃西林濃度的增加而逐漸降低(圖4b)。實驗第18 d, 10 mg/L和20 mg/L實驗組的日均增長率分別為–1.06%和–3.26%, 均顯著低于對照組(2.74%) (<0.05), 萱藻絲狀體的生長均受到抑制。觀察發(fā)現, 20 mg/L實驗組中, 萱藻絲狀體生長狀況差, 部分細胞的原生質體收縮, 細胞呈黃褐色或無色(圖2f)。

實驗第18 d, 10 mg/L實驗組中萱藻絲狀體的生長完全被抑制, 日均增長率為–1.06%; 膨脹色球藻的生長未被完全抑制, 日均增長率為4.6%。

在整個誘導周期, 萱藻絲狀體的單室孢子囊比例隨著呋喃西林濃度的增大而降低(圖4c)。實驗第20 d, 20 mg/L實驗組的單室孢子囊比例顯著低于對照組(6.52%)(<0.05)。觀察發(fā)現, 20 mg/L實驗組中的萱藻絲狀體的單室孢子囊呈游離態(tài), 直徑偏小, 僅(8.81±0.11) μm。

綜上分析, 在1～20 mg/L 范圍內, 20 mg/L呋喃西林能對膨脹色球藻的生長進行有效抑制, 但此濃度下的萱藻絲狀體生長狀況差, 且單室孢子囊發(fā)育不良。因此, 在1～20 mg/L范圍內, 呋喃西林不適于抑制和清除萱藻絲狀體和膨脹色球藻共培養(yǎng)體系中的膨脹色球藻。

3 討論

恩諾沙星屬于氟喹諾酮類抗菌藥, 能抑制大多數細菌的DNA回旋酶和拓撲異構酶IV, 使細菌不能進行正常的DNA復制與分裂, 最終導致細菌死亡[18-19]。連鵬等[20]曾報道, 濃度低于10 mg/L的恩諾沙星對亞心形扁藻()的生長有促進作用, 但濃度高于10 mg/L時會阻礙葉綠素的合成, 25 mg/L恩諾沙星對亞心形扁藻的生長抑制率高達79.50%。由于膨脹色球藻外具有膠質鞘, 低濃度的抗菌藥可能很難進入藻細胞。在本研究中, 100 mg/L實驗組從第12 d開始萱藻絲狀體日均增長率低于未加抗菌藥的對照組但未出現負增長, 可能是因為恩諾沙星濃度過高阻礙了萱藻絲狀體葉綠素的合成, 光合作用不能正常進行, 最終導致萱藻絲狀體細胞生長滯緩。

圖4 呋喃西林對膨脹色球藻與萱藻絲狀體生長發(fā)育的影響

注: 不同字母表示差異性顯著(<0.05)

Notes: Different letters indicate significant differences(<0.05)

磺胺嘧啶屬于磺胺類抗菌藥, 很多細菌的生命活動離不開葉酸[21], 葉酸的合成需要對氨基苯甲酸(PABA)和二氫喋酸合成酶(DHPS)的參與, 磺胺類抗菌藥的結構與PABA相似, 和PABA產生競爭拮抗作用, 從而干擾了PABA與DHPS合成葉酸[22]。磺胺嘧啶可能通過阻礙膨脹色球藻葉酸的合成抑制其生長。趙玲等[23]曾報道, 高濃度(80 mg/L)的磺胺嘧啶會使球形棕囊藻()細胞嚴重破損從而抑制其生長, 在本研究中, 高濃度(150 mg/L)的磺胺嘧啶會使膨脹色球藻細胞破碎成碎片, 細胞破碎后的形態(tài)與趙玲等報道的細胞受損后的狀態(tài)一致。

呋喃西林屬于硝基呋喃類抗菌藥, 可以通過干擾細菌體內的氧化還原酶系統, 進而阻礙菌體的糖代謝過程, 致使細菌代謝過程發(fā)生紊亂[24]。但是, 濫用硝基呋喃類抗菌藥會使藥物殘留在食物表面, 再通過食物鏈和食物網傳遞給人體, 產生致癌、致畸或致突變等毒副作用[25]。近年來, 呋喃西林已禁止作為漁藥使用[26], 在本研究中呋喃西林僅用于解決實驗室范圍內萱藻種質保存和絲狀體擴增時膨脹色球藻的污染問題, 以比較在水產養(yǎng)殖中允許使用與禁止使用的抗菌藥之間作用效果的差異。在1～20 mg/L范圍內, 呋喃西林對膨脹色球藻和萱藻絲狀體的生長均產生了抑制作用, 20 mg/L時對二者的抑制作用最強, 原因可能是高濃度的呋喃西林干擾了膨脹色球藻和萱藻絲狀體細胞的氧化還原酶系統, 光合作用和呼吸作用不能正常進行, 代謝活動紊亂, 日均增長率降低。

恩諾沙星、磺胺嘧啶對膨脹色球藻的抑制作用及對萱藻絲狀體生長發(fā)育的影響存在差異性。通過比較相同濃度的恩諾沙星和磺胺嘧啶對共培養(yǎng)體系的影響發(fā)現, 第18 d, 100 mg/L恩諾沙星和磺胺嘧啶實驗組中膨脹色球藻的日均增長率分別為–2.67%和–0.58%, 100 mg/L恩諾沙星實驗組中萱藻絲狀體的部分細胞呈淺褐色, 原生質體收縮成一小團并聚集到細胞的一端(圖2b), 100 mg/L磺胺嘧啶實驗組中萱藻絲狀體長勢良好, 胞質充盈, 顏色為深褐色, 大多數細胞呈念珠狀(圖2d)。停藥20 d后, 50 mg/L恩諾沙星實驗組和100 mg/L磺胺嘧啶實驗組萱藻絲狀體生長發(fā)育未受影響, 絲狀體細胞胞質充盈, 顏色為深褐色, 大多數細胞呈念珠狀(圖5)。由此推斷, 同一濃度下恩諾沙星對膨脹色球藻和萱藻絲狀體的抑制作用強于磺胺嘧啶。對于恩諾沙星、磺胺嘧啶聯合使用是否能更有效地清除膨脹色球藻, 有待進一步探討。

圖5 停藥后20 d萱藻絲狀體的生長情況

4 結論

本研究表明, 50 mg/L恩諾沙星和100 mg/L磺胺嘧啶既能有效抑制膨脹色球藻的生長, 又不影響萱藻絲狀體的生長和單室孢子囊的發(fā)育, 可用于解決萱藻種質保存和絲狀體擴增過程中膨脹色球藻的污染。100 mg/L恩諾沙星和150 mg/L磺胺嘧啶對膨脹色球藻有更強的抑制效果, 但影響了萱藻絲狀體的正常生長發(fā)育, 在實際應用中, 可根據具體情況選擇合適的抗菌藥濃度。在1～20 mg/L范圍內, 呋喃西林不適于抑制和清除萱藻絲狀體和膨脹色球藻共培養(yǎng)體系中的膨脹色球藻。

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Effects of enrofloxacin, sulfadiazine and nitrofurazone on the growth of filaments ofandin the co-cultured condition

LIU De-ju, ZHANG Min, ZHUANG Ying-rui, BI Meng, GONG Xiang-zhong

(College of Marine Life Sciences, Ocean University of China, Qingdao 266003, China)

In order to inhibit the growth ofduring the germplasm preservation and the amplification of filaments of, effects of enrofloxacin, sulfadiazine and nitrofurazone on the growth of filaments ofandin the co-cultured condition are studied by experimental ecology methods. Results indicated that: ①In the range of 5～100mg/L, 50mg/L enrofloxacin is suitable for inhibitingfrom the germplasm preservation and the amplification of filaments of. The average daily growth rate ofis –2.67% and the development of unilocular sporangia of filaments ofis well on the 18th day; ②In the range of 10～150mg/L, 100mg/L is the optimum concentration of sulfadiazine to inhibit the growth of. On the 18th day, the average daily growth rate ofis –0.58%, the average daily growth rate ofis 2.91% and the development of unilocular sporangia of filaments ofis well; The growth of filaments ofis in bad condition and unilocular sporangia was poorly developed at 150mg/L; ③In the range of 1～20 mg/L, 20 mg/L nitrofurazone has the inhibitory effect onand the filaments of, the average daily growth rate ofis –0.78% on the 18th day, and at the same time, the normal growth of filaments ofalso be affect, and the unilocular sporangia developed poorly. All this experiments have proved that: 50mg/L enrofloxacin and 100mg/L sulfadiazine are suitable for solving the contamination ofduring the germplasm preservation and amplification of filaments of.

; filaments;; co-culture; antimicrobial

Oct. 12, 2020

Q14

A

1000-3096(2022)02-0046-09

10.11759/hykx20201012002

2020-10-12;

2021-01-22

山東省重點研發(fā)計劃(2016GSF115042)

[The Key Research and Development Program of Shandong Province, No. 2016GSF115042]

劉德舉(1996—), 山東菏澤人, 碩士研究生, 主要從事海藻繁殖生物學研究, E-mail: q1074759745@163.com; 張敏(1994—), 共同第一作者, 山東聊城人, 碩士研究生, 主要從事海藻繁殖生物學研究, E-mail: m18753853893@163.com; 宮相忠(1963—), 山東青島人,通信作者, 教授, 主要從事海藻學、海藻實驗生態(tài)學以及海藻繁殖生物學研究, E-mail: gxzhw@163.com

(本文編輯: 楊 悅)