侯 靜， 藺 艷， 劉 勇， 王玉潔

(1.西南醫(yī)科大學附屬醫(yī)院， 四川 瀘州 646000 2.西南醫(yī)科大學腫瘤研究所， 四川 瀘州 646000)

經(jīng)流行病學調查[1]發(fā)現(xiàn)，IgA腎病約占原發(fā)性腎小球疾病的20.0%～50.0%，其中約有三分之一的患者在疾病診斷后的25年內可發(fā)展到終末期腎衰竭(end-stage renal disease,ESRD)。盡管患者接受腎移植等方法治療，仍有50%以上患者在術后2年出現(xiàn)IgA腎病復發(fā)現(xiàn)象。有研究[2]指出，IgA腎病的發(fā)生與IgA1分子糖基化異常有關。也有研究[3]表示，Th17細胞失衡是導致IgA腎病發(fā)生的關鍵。但臨床上關于Th17細胞與Gd-IgA1在IgA腎病作用及機制的研究報道較少，尚未闡明。故本次選取50例IgA腎病患者與50例健康體檢人員的臨床資料進行回顧性分析，旨在探討IgA腎病患者IgA1分子糖基化異常與Th17細胞的相關性分析?，F(xiàn)將其報告如下：

1 資料與方法

1.1臨床資料:回顧性分析2018年2月至2020年5月診治的50例IgA腎病患者與50例健康體檢人員的臨床資料。診斷標準：符合“原發(fā)性IgA腎病診治循證指南(2016)”[4]中關于IgA腎病的診斷標準，經(jīng)腎臟病理活檢以系膜細胞和系膜基質增生為主，伴有IgA為主的免疫復合物沉積，且伴有血尿、蛋白尿、腎功損害等表現(xiàn)。IgA腎病組納入標準：①臨床資料完整，如血清指標等；②納入實驗前未經(jīng)糖皮質激素或其他免疫抑制劑治療；③無惡性腫瘤等疾病。健康對照組納入標準：①認知功能正常；②身體健康；③生化指標資料完整。排除標準：①伴有嚴重心功能不全；②妊娠、哺乳階段；③凝血功能異常。

1.2方 法

1.2.1調查內容及其方法：設計統(tǒng)一的病例調查表，由專業(yè)醫(yī)師收集IgA腎病患者與健康體檢人員的臨床資料，包括Th17細胞、Treg細胞、Th17/Treg、異常糖基化IgA1(Gd-IgA1)、轉化生長因子-β(Transforming Growth Factor-β,TGF-β)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白介素-17(Interleukin-17,IL-17)、白介素-21(Interleukin-21,IL-21)、白介素-23(Interleukin-23,IL-23)、血肌酐、白蛋白及尿蛋白定量等。

1.2.2血清指標檢測方法：于清晨狀態(tài)下采集受檢人員外周靜脈血5mL，3000r/min離心15min，提取血清待檢。其中，Th17細胞、Treg細胞采用流式細胞儀檢測，計算Th17/Treg比值，試劑盒由美國eBioscience公司提供；TGF-β、IL-6、IL-17、IL-21、IL-23采用ELISA法檢測，試劑盒由杭州聯(lián)科生物科技有限公司提供；Gd-IgA1采用人半乳糖缺乏IgA1酶聯(lián)免疫檢測試劑盒檢測；血肌酐采用電化學發(fā)光免疫分析法檢測，白蛋白采用溴甲酚綠法檢測，試劑盒均由中生北控生物科技股份有限公司提供。

1.2.3尿液指標檢測方法：留取受檢人員24h尿液，采用比色法檢測尿蛋白。

2 結 果

2.1一般資料比較:兩組在性別、年齡、BMI等一般資料比較中，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。詳見表1。

表1 兩組一般資料比較

2.2Gd-IgA1及Th17細胞、Treg細胞比較:IgA腎病組的Th17細胞、Th17/Treg、Gd-IgA1均高于健康對照組，而Treg細胞低于健康對照組(P<0.05)。詳見表2。

表2 Th17細胞 Treg細胞及Gd-IgA1比較

2.3Th17細胞相關細胞因子比較:IgA腎病組的TGF-β低于健康對照組，而IL-6、IL-17、IL-21、IL-23高于健康對照組(P<0.05)。詳見表3。

表3 兩組TGF-β IL-6 IL-17 IL-21 IL-23比較

2.4血肌酐、血清白蛋白及尿蛋白定量比較:IgA腎病組的血肌酐、尿蛋白定量高于健康對照組，而白蛋白低于健康對照組(P<0.05)。詳見表4。

表4 兩組血肌酐血清白蛋白及尿蛋白定量比較

2.5相關性分析

2.5.1Th17細胞、Treg細胞與Gd-IgA1的相關性分析Pearson相關性顯示，Gd-IgA1與Th17細胞、Th17/Treg呈正相關(r=0.737、0.810，P<0.05)，與Treg細胞呈負相關(r=-0.487，P<0.05)。詳見表5。

表5 分析Gd-IgA1與Th17細胞 Treg細胞的相關性

2.5.2細胞因子與Gd-IgA1的相關性分析Pearson相關性顯示，Gd-IgA1與TGF-β呈負相關(r=-0.260，P<0.05)，與IL-6、IL-17、IL-21、IL-23呈正相關(r=0.796/0.776/0.714/0.819，P<0.05)。詳見表6。

表6 分析細胞因子與Gd-IgA1的相關性

3 討 論

目前臨床上對于IgA腎病的發(fā)病機制尚未闡述，因此臨床上缺乏特異有效的治療措施。近年來，有眾多研究[4]發(fā)現(xiàn)，IgA1分子糖基化異常在IgA腎病的發(fā)生、發(fā)展中具有至關重要的作用，因其能刺激機體產(chǎn)生抗聚糖IgG自身抗體，再通過與抗體結合，形成免疫復合物，通過逃避血液循環(huán)中正常的清除機制，使得IgA沉淀于腎小球系膜區(qū)，繼而誘導炎癥反應及促使系膜細胞增殖，造成腎小球損傷。其中，IgA1分子糖基化異常與遺傳因素、環(huán)境因素，以及參與糖基化過程的相關酶類異常表達有關[5]。且有大量研究數(shù)據(jù)[6]表明，輔助性T細胞(Th細胞)免疫失衡在調控IgA1分子產(chǎn)生和糖基化過程中起著重要作用。當Th細胞免疫失衡，可釋放大量的細胞因子，如IL-6、IL-17、IL-21、IL-23等，通過抑制參與糖基化過程的β-1,3-半乳糖基轉移酶(β3GalT)及其分子伴侶Cosmc的表達，促進IgA1分子的糖基化異常。研究結果顯示，IgA腎病組的Th17細胞、Treg細胞、Th17/Treg表達均高于健康對照組，提示Th細胞參考了IgA腎病的發(fā)生發(fā)展。

Th17細胞是新近發(fā)現(xiàn)的一類Th細胞亞群，與Th1、Th2細胞不同，主要作用在于通過產(chǎn)生IL-17、IL-17F、IL-22等，誘導組織細胞產(chǎn)生促炎癥細胞因子、趨化因子及金屬蛋白酶類，清除Th1和Th2細胞無法清除的細胞外病原體[7]。研究結果顯示，Th17細胞與IL-6、IL-17、IL-21、IL-23呈正相關，說明細胞因子會隨著Th17細胞的失衡而大量分泌。其中，IL-17是Th17細胞的標志性細胞因子，因Th17細胞介導產(chǎn)生的生物學效應是通過IL-17細胞因子所發(fā)揮，但當Th17細胞失衡，則會促使IL-17高表達，繼而促進IgA抗體的產(chǎn)生，且誘導Th2型細胞反應，故臨床認為Th17細胞可能會在一定程度上影響Th2細胞的生物學效應[8]。而Th2型細胞，目前已證實其參與調控IgA腎病中的IgA1分子糖基化異常。基于上述結果，認為Th17細胞與Th2細胞能相互作用，故推測Th17細胞也會影響IgA1分子產(chǎn)生和糖基化異常。在Pearson相關性中，Gd-IgA1與Th17細胞呈正相關，說明兩者相互影響，從而促使IgA腎病的發(fā)生。另外，有研究[9]表示，炎癥狀態(tài)下細胞因子會在一定程度上影響IgA1分子糖基化異常。雖然目前尚無相關文獻報道，炎癥介質是否參與調控IgA1分子產(chǎn)生和糖基化異常，但在本文相關性分析中，發(fā)現(xiàn)Gd-IgA1與TGF-β呈負相關，與IL-6、IL-17、IL-21、IL-23呈正相關，故推測炎性細胞因子可能參與了IgA1分子糖基化異常，但因本研究樣本較小，所收治的均為本院IgA腎病患者，仍需擴大樣本，進一步研究及證實。

綜上所述，Th17細胞與Gd-IgA1呈正相關，即參與了IgA1分子糖基化異常的過程，可通過評估Th17細胞表達量，為臨床診治IgA腎病提供客觀依據(jù)。