張靖雪,李盼盼,于 洋,曾 蘇,余 冉*,楊廣平

基于固液分離預(yù)處理的餐廚垃圾厭氧發(fā)酵

張靖雪1,2,李盼盼1,于 洋1,曾 蘇1,余 冉1*,楊廣平3

(1.東南大學(xué)能源與環(huán)境學(xué)院,江蘇 南京 210096；2.南京環(huán)境集團有限公司,江蘇 南京 210046；3.南京清元景和環(huán)境科技有限公司,江蘇 南京 210019)

研究不同預(yù)處理方法所獲餐廚垃圾漿料的半連續(xù)式厭氧發(fā)酵效果,評價該類餐廚垃圾的產(chǎn)甲烷資源化潛能.結(jié)果表明,固液油三相分離預(yù)處理后的液相餐廚垃圾作為進料較固液混合相餐廚垃圾在厭氧發(fā)酵時具有更高的VS去除率,實際產(chǎn)甲烷潛能和甲烷轉(zhuǎn)化率,分別為91.2%, 531.5mLCH4/gVS和54.3%,表明液相餐廚垃圾半連續(xù)中溫濕式厭氧發(fā)酵具有良好的減量化和資源化效能.微生物群落分析表明,不同預(yù)處理方式影響了餐廚垃圾厭氧發(fā)酵系統(tǒng)的微生物群落演替,氨氮濃度是導(dǎo)致古菌群落轉(zhuǎn)移和豐度變化的關(guān)鍵因素.液相餐廚垃圾厭氧發(fā)酵時是以氫營養(yǎng)型產(chǎn)甲烷菌為主,而在固液混合相餐廚垃圾厭氧發(fā)酵時則以耐高濃度氨氮的多功能產(chǎn)甲烷菌為主.

餐廚垃圾；厭氧發(fā)酵；預(yù)處理；微生物群落

餐廚垃圾包括餐廳垃圾,菜市場垃圾和家庭廚房垃圾等,是城市生活垃圾的重要組成部分[1].由于餐廚垃圾具有高產(chǎn)量(占城市生活垃圾的37%～ 62%[2]),高含水率,高含油率,高鹽和高有機質(zhì)占比(約占干重的95%～98%)的特點,易腐爛發(fā)臭,滋生蚊蠅,傳播疾病,如不及時處理,將對周圍環(huán)境造成嚴重影響.在中國,厭氧發(fā)酵和好氧堆肥技術(shù)被廣泛應(yīng)用于餐廚垃圾的資源化處理[3].與堆肥相比,厭氧發(fā)酵具有碳排放量低,二次污染少,運營成本低,適合集中大規(guī)模處理等優(yōu)點[4],且因其可產(chǎn)生清潔能源沼氣逐漸成為我國固廢資源化利用方式之一.

為了提高餐廚垃圾厭氧發(fā)酵的產(chǎn)沼氣性能,采用預(yù)處理可以提高底物的生物可降解性.預(yù)處理方法主要包括物理處理,化學(xué)處理,生物處理及多種處理方法的結(jié)合.目前國內(nèi)在實際工程運用上對餐廚垃圾厭氧發(fā)酵的主要的預(yù)處理方式為機械破碎,加熱制漿和固液油三相分離組合方法以獲得固相,液相餐廚垃圾和油脂[5].其中油脂可回收制作生物柴油,而固相和液相垃圾則有兩種不同的處理方法,一種是將固相和液相垃圾混合均質(zhì)化后作為底物加入?yún)捬醢l(fā)酵系統(tǒng),另一種是僅把液相垃圾加入?yún)捬醢l(fā)酵系統(tǒng),固相垃圾則干化后外運焚燒發(fā)電.已有研究[6]通過餐廚垃圾分選系統(tǒng)獲得了5種不同類型的餐廚垃圾并進行了厭氧發(fā)酵,結(jié)果表明餐廚垃圾漿液具有更高的甲烷產(chǎn)率.已知單位體積的液相餐廚垃圾底物相比固液混合相具有更多的可溶性有機物,而單位體積的固液混合相垃圾比液相垃圾具有更多的有機質(zhì).但二者對厭氧發(fā)酵的運行及有機質(zhì)去除率,產(chǎn)甲烷潛能的影響尚缺乏相關(guān)研究.

本文以南京市某餐廚垃圾處置中心預(yù)處理環(huán)節(jié)所獲餐廚垃圾底物為研究對象,參考其厭氧發(fā)酵運行參數(shù),進行半連續(xù)中溫濕式厭氧發(fā)酵試驗,探究不同預(yù)處理方式對餐廚垃圾厭氧發(fā)酵產(chǎn)甲烷的影響,并通過分析微生物群落變化解析了影響厭氧發(fā)酵產(chǎn)甲烷的主要因素,研究結(jié)果旨在為國內(nèi)餐廚垃圾厭氧發(fā)酵的實際工程應(yīng)用提供借鑒.

1 材料與方法

1.1 預(yù)處理樣品采集

厭氧發(fā)酵試驗餐廚垃圾取自南京市某餐廚垃圾處置中心固液油三相分離預(yù)處理后的液相垃圾和固液混合相垃圾,采集密封后在4℃下冷藏保存作為后續(xù)厭氧發(fā)酵底物.厭氧污泥取自該處置中心厭氧發(fā)酵罐.

1.2 揮發(fā)性固體含量去除率

揮發(fā)性固體含量(VS)去除率可以表征厭氧發(fā)酵的有機質(zhì)去除效果,其計算方法可按照式(1)計算:

式中:r表示VS去除率,%;表示VS,%;表示總固體含量(TS),%;下標e表示出料,f表示進料[7].

1.3 實際產(chǎn)甲烷潛能

實際產(chǎn)甲烷潛能(EMP)計算公式見式(2):

式中:表示EMP,mLCH4/gVS;CH4為標準狀態(tài)下產(chǎn)生CH4的體積,mL;d為反應(yīng)器內(nèi)實際消耗的VS量,g[7].

1.4 餐廚垃圾半連續(xù)式中溫濕式厭氧發(fā)酵

啟動馴化階段,記為S0,將5L厭氧污泥置于反應(yīng)罐中(圖1).氮吹密封后每日定時進出樣.當系統(tǒng)運行穩(wěn)定后,首先每天定時進液相餐廚垃圾,連續(xù)運行30d,該階段記為S1階段;后將固液混合相混合垃圾底物以相同有機負荷加入?yún)捬醢l(fā)酵系統(tǒng),連續(xù)運行30d,該階段記為S2階段,餐廚垃圾及厭氧污泥理化特性見表1,餐廚垃圾半連續(xù)式中溫濕式厭氧發(fā)酵運行參數(shù)見表2.每日記錄產(chǎn)氣量,每兩日收集氣體進行氣體成分分析,每日留樣做指標分析.

圖1 半連續(xù)厭氧發(fā)酵試驗裝置示意

1.補堿口; 2.補酸口; 3.機械攪拌器; 4.出氣口; 5.進樣口; 6.溫度監(jiān)測探頭; 7.pH值監(jiān)測探頭; 8.取樣口; 9.出料口; 10.控溫隔層; 11.循環(huán)水浴加熱器; 12.控制系統(tǒng)

1.5 微生物群落分析

試驗選取S1和S2厭氧發(fā)酵階段始末的污泥作樣品,編號分別為S1-1, S1-2, S2-2,其中因S1體系結(jié)束即為S2體系的開始,故S2體系的起始污泥樣品等同樣品S1-2.樣品DNA提取采用快速DNA提取法(FastDNA Spin Kit for Soil, MP土壤DNA提取試劑盒).將DNA樣品送至上海生工生物工程股份有限公司進行微生物高通量測序,使用16s V4引物515F和806R進行細菌群落分析,使用巢式PCR引物V3-V4進行兩輪擴增,第1輪引物340F和1000R,第2輪引物349F和806R進行古菌群落分析[8].

1.6 分析指標及測定方法

TS參考《生活垃圾采樣和物理分析方法》[9][CJ/T313-2009]的相關(guān)方法測定;VS參考《生活垃圾化學(xué)特性通用檢測方法》[10][CJ/T 96-2013]的灼燒法測定;含鹽量參考《食品中氯化物的測定》[11][GB 5009.44-2016]的直接滴定法測定;pH值采用pH計(Testo, 206pH2)測定;餐廚垃圾中C, N等有機元素采用元素分析儀測定(德國艾力蒙塔公司, Vario EL cube);甲烷濃度采用氣相色譜儀(普分科技有限公司,C3900)測定;揮發(fā)性脂肪酸(VFA)采用氣相色譜分析儀(Agilent, 7890B)測定;氨氮參考《水質(zhì)氨氮的測定納氏試劑分光光度計法》[12][HJ 535-2009]測定;厭氧發(fā)酵產(chǎn)氣量采用排水法測定.分析指標測定每次設(shè)置3個平行樣,結(jié)果取平均值.

表1 餐廚垃圾及厭氧污泥理化特性

表2 厭氧發(fā)酵運行條件

2 結(jié)果與討論

2.1 沼氣成分和CH4日產(chǎn)量

從圖2可知,有機負荷從馴化期(S0)0.6gVS/(L·d)升至液相厭氧發(fā)酵階段(S1) 2.0gVS/(L·d)后,S1的CH4濃度在初始有小范圍上升,最高至63.5%,之后穩(wěn)定在60.1%,固液混合相厭氧發(fā)酵階段(S2)的CH4濃度上升至61.3%.在產(chǎn)氣方面,S1穩(wěn)定后的 CH4日產(chǎn)氣量為4859.3mL; S2的CH4日產(chǎn)氣量整體高于S1,其平均值為5276.0mL.固液混合相餐廚垃圾厭氧發(fā)酵S2段產(chǎn)生的CH4濃度和液相餐廚垃圾厭氧發(fā)酵S1段無顯著性差異,但CH4日產(chǎn)量在S2段高于S1段,而S2的CH4日產(chǎn)量波動較大,這可能與固液混合相餐廚垃圾的不均質(zhì)有關(guān).

2.2 VFA和氨氮

根據(jù)圖2可以看出,厭氧發(fā)酵正式運行后,由于有機負荷的提升,系統(tǒng)受到了沖擊負荷, VFA迅速積累后逐漸降低最后穩(wěn)定的過程.這是因為馴化期轉(zhuǎn)液相餐廚垃圾厭氧發(fā)酵時有機負荷上調(diào),餐廚垃圾被產(chǎn)酸菌快速降解,后產(chǎn)甲烷菌活性增強將VFA降解轉(zhuǎn)化.在厭氧發(fā)酵進行12d后丙酸含量已低出檢測限,VFA主要以乙酸的形態(tài)存在,S1和S2兩個階段并無明顯差異.VFA趨于穩(wěn)定后在2.0gVS/(L·d)有機負荷下濃度低于200mg/L,可知該半連續(xù)式中溫濕式厭氧發(fā)酵系統(tǒng)可以在較高濃度的有機負荷下正常運行.氨氮積累方面,S1階段氨氮積累較緩慢,經(jīng)過30d半連續(xù)厭氧發(fā)酵后氨氮增長了16.9%,而S2階段氨氮積累較快,氨氮增長了29.0%.發(fā)酵液中的氨氮主要來自于微生物對蛋白質(zhì)等有機物的降解,以游離氨和銨根離子的形式存在,其中游離氨被認為是抑制厭氧微生物的主要原因.餐廚垃圾經(jīng)過固液油三相分離后的固液混合相垃圾在單位體積下比液相垃圾具有更多的蛋白質(zhì),更多的有機氮可轉(zhuǎn)化為無機氮,導(dǎo)致分解蛋白質(zhì)產(chǎn)生的氨氮大于微生物消耗氨氮的量,從而氨氮濃度呈上升趨勢,長期運行會導(dǎo)致厭氧微生物尤其是產(chǎn)甲烷菌生長受到抑制[13].結(jié)合EMP可知S2氨氮的快速積累抑制了厭氧發(fā)酵的有機質(zhì)轉(zhuǎn)化效率.結(jié)合表1可知,厭氧發(fā)酵所用餐廚垃圾的C/N偏低,即氮元素太多造成氨氮不能被微生物及時轉(zhuǎn)化利用,導(dǎo)致系統(tǒng)的氨氮濃度升高,故提高厭氧發(fā)酵底物碳源,調(diào)節(jié)C/N至20～30可緩解氨氮積累.

圖2 餐廚垃圾半連續(xù)式厭氧發(fā)酵運行性能

2.3 VS去除率和EMP

從圖2可知,雖然S1和S2階段VS去除率平均值相近,分別為91.2%和91.0%,但S1的VS去除率是逐漸上升的趨勢,VS去除率維持在87.3%～92.9%,而在S2階段整體呈下降趨勢,VS去除率維持在89.4%～92.6%.對比已有文獻[7,14]報道的中溫半連續(xù)餐廚垃圾厭氧發(fā)酵VS去除率在85%～94%,本實驗S1和S2兩階段VS去除率均處于較高水平.而液相垃圾厭氧發(fā)酵相較固液混合相垃圾厭氧發(fā)酵具有更高的VS去除率,一方面是因為氨氮快速積累抑制固液混合相垃圾厭氧發(fā)酵,另一方面因為液相垃圾的小分子和可溶性有機質(zhì)占比一般高于粒徑不一的固液混合相垃圾,生物可降解性更高.從圖2可以看出,EMP在S1階段逐漸上升,最高時可達到633.0mLCH4/gVS,平均值為531.5mLCH4/gVS;與之對比在S2階段,EMP值整體下降,最高時僅達到545.8mLCH4/gVS,平均值為465.8mLCH4/gVS,且數(shù)值較為波動.對比Tampio等[15]進行中溫半連續(xù)餐廚垃圾厭氧發(fā)酵實驗,在3gVS/(L·d)的有機負荷下得到最高483mLCH4/gVS的甲烷產(chǎn)率,本厭氧發(fā)酵試驗在2gVS/(L·d)有機負荷下具有更高EMP. Zhang等[6]對5種不同類型的餐廚垃圾進行先中溫35℃后高溫55℃的厭氧發(fā)酵結(jié)果表明,餐廚和蔬菜殘渣混合物壓濾后的漿液厭氧發(fā)酵表現(xiàn)出最高的比甲烷產(chǎn)率,而植物殘渣經(jīng)過壓濾的漿液厭氧發(fā)酵最低.故液相餐廚垃圾因為其具有大量的可溶性有機質(zhì)從而具有更高的EMP,在半連續(xù)式中溫濕式厭氧發(fā)酵工藝中液相餐廚垃圾比固液混合相餐廚垃圾產(chǎn)甲烷效率更高.

2.4 厭氧發(fā)酵系統(tǒng)物料平衡

純液相和固液混合相餐廚垃圾厭氧發(fā)酵2個階段每日進料150mL,純液相餐廚垃圾VS為6.6%,固液混合相餐廚垃圾的VS為8.3%.2個階段各選擇穩(wěn)定時即反應(yīng)第15d和16d的數(shù)據(jù)進行碳平衡計算,根據(jù)質(zhì)量守恒可得式(3):

式中:為反應(yīng)器每天進料的總碳質(zhì)量,g;為反應(yīng)器每天出料的總碳質(zhì)量,g;為每天產(chǎn)生的沼氣總碳質(zhì)量,g.已知兩個階段選取的第15d和16d數(shù)據(jù)見表3.其中總碳TC≈VS×47%[16].

表3 碳平衡計算選取參數(shù)

注:進料碳含量以干基計算.

可計算出S1階段和S2階段,,和TC利用率及甲烷轉(zhuǎn)化率(表4).由碳平衡計算可知S1階段的TC利用率和甲烷轉(zhuǎn)化率比S2階段分別高4.3%和1.4%,即液相餐廚垃圾進行半連續(xù)式中溫濕式厭氧發(fā)酵時可以將更多的有機質(zhì)轉(zhuǎn)化為沼氣和甲烷.

表4 餐廚垃圾厭氧發(fā)酵碳平衡計算

2.5 厭氧發(fā)酵微生物群落分析

如表5所示,S1階段隨著厭氧發(fā)酵的進行,細菌群落分布豐富度(Chao1和ACE指數(shù))呈增大的趨勢而S2階段在降低.用來估算群落分布多樣性的Shannon指數(shù)值越大,說明群落多樣性越高,而Simpson指數(shù)數(shù)值越大說明群落多樣性越低.S1階段Shannon指數(shù)和Simpson指數(shù)分別降低和增加,表示細菌群落多樣性在降低.與之對比S2階段細菌群落多樣性則表現(xiàn)出增大的趨勢.

S1階段隨著發(fā)酵的進行古菌群落豐富度(Chao1和ACE指數(shù))無顯著變化,而古菌群落多樣性(Shannon和Simpson指數(shù))在增大.在S2階段隨著厭氧發(fā)酵的進行,古菌群落豐富度和多樣性均在減小.

表5 不同預(yù)處理進料條件下的厭氧發(fā)酵反應(yīng)器中細菌和古菌群落分析

如圖3所示,因為兩個厭氧發(fā)酵階段的古菌在門水平上均屬于Euryarchaeota,故在屬水平上進行群落結(jié)構(gòu)分析.圖中橫坐標為樣品編號,縱坐標為相對豐度比例.顏色對應(yīng)了此分類水平各物種的名稱,顏色寬度表示不同物種相對豐度比例.

圖3 餐廚垃圾厭氧發(fā)酵反應(yīng)器中細菌群落在門水平和古菌群落在屬水平上的相對豐度

如圖3所示,Bacteroidetes, Cloacimonetes和Firmicutes是兩個厭氧發(fā)酵階段中最主要的細菌門類.其中Bacteroidetes的微生物菌群被報道存于在碳水化合物發(fā)酵,生理穩(wěn)態(tài)和類固醇代謝中,可以生產(chǎn)各種分解酶,包括降解復(fù)雜的有機化合物的水解酶,蛋白酶和脂肪酶[17-19]. Cloacimonetes被報道與其他耗氫和利用乙酸鹽的細菌共同作用時,可以在低氨氮條件下降解纖維素,參與丙酸的共氧氧化和氨基酸降解為乙酸鹽,CO2和H2[20]. Firmicutes由大量分泌裂解酶包括纖維素酶,脂肪酶,蛋白酶和其它胞外酶的細菌組成,由于可以形成孢子,這些細菌可以在極端環(huán)境條件下存活[21-22].在S1體系開始時Bacteroidetes(60.8%)和Firmicutes(22.4%)占優(yōu)勢,在厭氧發(fā)酵結(jié)束時Bacteroidetes(61.6%)無明顯變化,而Cloacimonetes(14.4%)成為優(yōu)勢門之一, Firmicutes(9.8%)降低了12.6%成為第3優(yōu)勢門.在S2階段Bacteroidetes(43.8%)相對豐度相比起始降低了17.8%,Cloacimonetes(28.1%)和Firmicutes(16.85%)分別增長了13.8%和7.1%. Cloacimonetes的出現(xiàn)并在S2體系內(nèi)作為優(yōu)勢門,說明固液混合相餐廚垃圾的復(fù)雜成分使體系內(nèi)的功能菌群發(fā)生了變化,固液混合相餐廚垃圾厭氧發(fā)酵體系除了需要Bacteroidetes和Firmicutes分泌大量水解酶來降解大分子有機物,還需要Cloacimonetes的協(xié)同降解纖維素、氨基酸等.

由圖3可以看出,和是2個厭氧發(fā)酵階段中產(chǎn)甲烷古菌的主要優(yōu)勢屬.可以利用甲醇,甲胺,乙酸鹽以及H2和CO2生產(chǎn)甲烷,能夠利用不少于9種的產(chǎn)甲烷基質(zhì),且具有較快的生長速率可以快速適應(yīng)周圍環(huán)境變化[23-24].是氫營養(yǎng)型產(chǎn)甲烷菌,可以利用H2和甲酸鹽作為主要的電子供體將CO2還原為CH4[25]. S2階段中相對豐度較高的和同為氫營養(yǎng)型產(chǎn)甲烷菌,都是利用H2作為電子供體將CO2還原為CH4[25-26].在S1階段可以看出隨著厭氧發(fā)酵的進行相對豐度下降37%,與之對應(yīng)相對豐度升高至49.0%,成為主要優(yōu)勢屬.在S2階段回到了最高相對豐度(70.1%),下降至7.2%,其相對豐度下降了41.8%. S1反應(yīng)體系內(nèi)主要為氫營養(yǎng)型產(chǎn)甲烷菌,占據(jù)了相對豐度的57.9%, S2反應(yīng)體系內(nèi)主要為多功能的為主,占據(jù)了相對豐度的70.1%,其可以在甲基營養(yǎng)型,乙酸營養(yǎng)型和氫營養(yǎng)型三種模式下產(chǎn)甲烷[27].S2階段的大量富集,是因為對高濃度的氨氮具有更強的抵抗力[28-29],結(jié)合兩個厭氧發(fā)酵階段的氨氮濃度變化,可以解釋該富集現(xiàn)象.與之相反因為S1階段的氨氮濃度相對較低,適宜更多種類的產(chǎn)甲烷菌生長,所以氫營養(yǎng)型和乙酸營養(yǎng)型產(chǎn)甲烷菌開始富集.結(jié)合表5的2個厭氧發(fā)酵階段中古菌多樣性分析,與S2相比S1具有更高的群落分布豐富度和多樣性,證明了氨氮濃度是導(dǎo)致古菌種群轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因素[30].

3 結(jié)論

3.1 固液油三相分離預(yù)處理后,液相餐廚垃圾比固液混合相餐廚垃圾在厭氧發(fā)酵過程中具有更高的VS去除率(91.2%),實際產(chǎn)甲烷潛能(531.5mLCH4/ gVS)和甲烷轉(zhuǎn)化率(54.3%),且氨氮積累較慢.

3.2 微生物群落分析表明氨氮濃度是導(dǎo)致古菌群落轉(zhuǎn)移和豐度變化的關(guān)鍵因素,在液相餐廚垃圾厭氧發(fā)酵時因其氨氮濃度較低,致使古菌群落具有更高的豐富度和多樣性,古菌群落向氫營養(yǎng)型和乙酸營養(yǎng)型產(chǎn)甲烷模式進化;而在固液混合相餐廚垃圾厭氧發(fā)酵時因其氨氮濃度較高使古菌群落以耐高濃度氨氮的多功能產(chǎn)甲烷菌為主.

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Study on anaerobic digestion of kitchen waste based on solid-liquid separation pretreatment.

ZHANG Jing-xue1,2, LI Pan-pan1, YU Yang1, ZENG Su1, YU Ran1*, YANG Guang-ping3

(1.Department of Energy and Environment, Southeast University, Nanjing 210096, China；2.Nanjing Environment Group Co.LTD, Nanjing 210046, China；3.Chinair Environmental Science and Technology Co. LTD, Nanjing 210019, China)., 2022,42(3)：1252～1258

A semi-continuous anaerobic digestion (AD) experiment was set up to evaluate the methanogenesis potential of kitchen waste (KW) after different pretreatment modes. After the solid, liquid and oil three-phase separation pretreatment, the liquid-phase KW achieved a higher volatile solid (VS) removal rate, experimental methane potential (EMP) and methane conversion rate than the mixed one of solid-liquid phases, which were 91.2%, 531.5mLCH4/gVS, and 54.3%, respectively. The results indicated that the medium-temperature wet AD displayed a satisfying effect on KW reduction and resource utilization when using the liquid-phase KW as the feedstock. The microbial community analysis showed that the microbial community succession in the AD system was affected by the KW pretreatment method. The ammonia concentration was the key factor to induce the variation and abundance shifts of the archaeal community. The hydrogenotrophic methanogen,was the dominant methanogens in the AD system with the KW liquid phase as the feedstock. The, which was reported to be able to resist high concentrations of ammonia nitrogen was the dominant methanogens in the AD system with the feedstock of the KW solid-liquid phase mixture.

kitchen waste；anaerobic digestion；pretreatment；microbial community

X705

A

1000-6923(2022)03-1252-07

張靖雪(1995-),女,河南平頂山人,東南大學(xué)博士研究生,主要從事固體廢棄物處理與處置研究.

2021-08-01

2020年度江蘇省建設(shè)系統(tǒng)科技項目(指導(dǎo)類)(2020ZD61)

*責(zé)任作者, 教授, yuran@seu.edu.cn