母種培養(yǎng)

母種培養(yǎng)是指用組織分離或孢子分離得到的菌種。母種培養(yǎng)基的制備通常用土豆洋菜培養(yǎng)基。配制1000ml培養(yǎng)基，用土豆200g、瓊脂18～20g、葡萄糖20g。

做法：先將土豆洗凈去皮，切成蠶豆粒小塊，放入1000ml水中煮沸30分鐘，用6～8層紗布過濾，補足損失水分。將瓊脂加入溶化后，加進溶解的糖，補充水分至1000ml。以后分裝試管，每管裝量1/5～1/4，并加棉塞、包紙。在1.2kg壓力下滅菌30分鐘，趁熱擺成斜面。冷卻后置于25～27℃條件下觀察無雜菌即可接種。一支母種可轉(zhuǎn)管25～30支。

在無菌操作下接種的試管置于25℃左右恒溫條件下培養(yǎng)，半個月左右菌絲可長滿試管。培養(yǎng)過程中應(yīng)注意除掉雜菌污染的試管。培養(yǎng)好的母種移入冰箱，在4℃條件下保存半年，或室溫下保存3個月。

原種培養(yǎng)

原料可用木屑或棉籽皮。木屑培養(yǎng)基配方：木屑78%、麥麩或米糠20%、糖1%、石膏1%。棉籽皮培養(yǎng)基配方：用50kg棉籽皮加土豆浸出汁水3%（1.5kg土豆切成泥煮沸30分鐘的濾液），糖0.1%、硫酸鎂0.1%。

做法：培養(yǎng)料加水拌均勻，濕度以用手緊握料，指縫內(nèi)見水珠而滴不下來為宜，一般料水比1：1.2或1：1.3。然后裝瓶，裝瓶方法是邊裝邊將瓶輕輕地抖動，使瓶上下部緊密適中，裝至瓶肩部將料壓平，洗凈瓶口內(nèi)外的培養(yǎng)料，加棉塞、包紙捆好放進高壓消毒鍋內(nèi)進行滅菌，在1.5kg壓力下滅菌一小時。冷卻后，在無菌操作條件下接種。將試管中母種接入瓶中，一支母種可接4～5瓶原種，接種后置于25℃恒溫條件下培養(yǎng)一個月左右菌絲可長滿瓶，即為原種。

栽培種培養(yǎng)

栽培種的制備實際上就是原種進行一次擴大培植。裝瓶后滅菌，在無菌條件下，把原種菌種接入栽培種瓶內(nèi)。一瓶750ml原種可接80～100瓶栽培種。接種后置于25℃恒溫條件下培育一個月左右，長滿瓶后即可播種。在培養(yǎng)原種和栽培種時，接種后每隔2～3天要檢查一次，直至菌絲長滿料面后每周檢查一次。揀出有雜菌污染的菌種，并遠離培養(yǎng)室處理掉。（據(jù)余姚市農(nóng)業(yè)信息網(wǎng)）