楊生麗 孫大寬 羅星瑞 唐軍榮
(西南林業(yè)大學(xué)西南地區(qū)生物多樣性保育國(guó)家林業(yè)和草原局重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,云南 昆明 650224)
互葉白千層(Melaleuca alternifolia)為桃金娘科(Myrtaceae)白千層屬(Melaleuca)的芳香植物,原產(chǎn)澳大利亞[1]?;ト~白千層的枝葉中含大量精油,其主要成分為松油烯-4-醇、γ-松油烯、α-松油烯,其中松油烯-4-醇含量可達(dá)30%~40%[2,3]。其莖葉中提取的精油,在抗癌、抑菌、保鮮等方面效果顯著,廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、化妝品、日用化工等行業(yè)[4-7]。同時(shí),該樹(shù)種可用于綠化、環(huán)境治理[8,9]。鑒于互葉白千層較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值,在我國(guó)南方多個(gè)省區(qū)市均有推廣種植[10]。
在互葉白千層的規(guī)?;N植過(guò)程中,良種繁育是極其重要的一環(huán)。目前,植物組培快繁是互葉白千層優(yōu)良單株快速擴(kuò)繁的有效手段之一。采用植物組培技術(shù),可以在短時(shí)間內(nèi)獲得大量種苗,并可保持母株的優(yōu)良性狀,最終達(dá)到提高其遺傳增益的目的。由于組培育苗技術(shù)相對(duì)于傳統(tǒng)的種子育苗、扦插育苗等,其技術(shù)和工藝更為復(fù)雜。因此,對(duì)互葉白千層組培苗的生產(chǎn)成本進(jìn)行核算,可以清楚地認(rèn)識(shí)其生產(chǎn)成本構(gòu)成,為組培苗工廠化生產(chǎn)的成本控制提供方向,并為商品苗的銷售價(jià)格制定提供參考,最終達(dá)到提高組培苗工廠生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)效益的目的。
合理高效的生產(chǎn)工藝流程是確保互葉白千層工廠化生產(chǎn)順利進(jìn)行的基礎(chǔ),在確保苗木質(zhì)量的同時(shí),又能降低生產(chǎn)成本。在組培苗的工廠化生產(chǎn)過(guò)程中,不同的植物材料,其生產(chǎn)工藝會(huì)存在差別。一般而言,叢生芽增殖模式是組培快繁的常用方式,因此,互葉白千層的增殖采用叢生芽增殖模式。以高精油互葉白千層優(yōu)株為材料,采用莖段為外植體進(jìn)行腋芽誘導(dǎo),之后對(duì)腋芽進(jìn)行增殖誘導(dǎo),通過(guò)對(duì)叢生芽增殖后的材料不斷分割,通過(guò)反復(fù)循環(huán)此過(guò)程實(shí)現(xiàn)材料的大量增殖,待達(dá)到一定數(shù)量后進(jìn)行生根誘導(dǎo),從而完成瓶?jī)?nèi)的整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程,最后通過(guò)移栽煉苗,使其從瓶?jī)?nèi)向瓶外成功轉(zhuǎn)移。本研究的生產(chǎn)流程見(jiàn)圖1。
圖1 互葉白千層組培工廠化生產(chǎn)工藝流程
組培苗的生產(chǎn)成本主要由場(chǎng)地租金、固定資產(chǎn)投產(chǎn)、人工成本、水電費(fèi)、藥品、耗材等組成。為了計(jì)算方便,將以上要素按組培室建設(shè)前期投資成本、增殖階段成本、生根階段成本等3個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行計(jì)算,產(chǎn)量以100萬(wàn)株瓶?jī)?nèi)生根苗的規(guī)模進(jìn)行估算。
不論是工廠化生產(chǎn)還是實(shí)驗(yàn)室植物組織培養(yǎng),都需要投入一定的固定儀器設(shè)備,這些儀器設(shè)備的使用壽命都有一定期限,在進(jìn)行成本核算時(shí)應(yīng)將這些固定資產(chǎn)費(fèi)用(不包括場(chǎng)地改造費(fèi)用)計(jì)算在內(nèi)。前期投資費(fèi)用主要涉及組培室建設(shè),所需的主要儀器設(shè)備如表1所示,其對(duì)應(yīng)的銷售價(jià)格通過(guò)對(duì)多家生物公司的銷售報(bào)價(jià)綜合后得出。由表1可知,組培工廠的建設(shè)投入費(fèi)用為264800元,按每年10%的折舊進(jìn)行計(jì)算,則每年折舊費(fèi)用為26480元。此外,組培室場(chǎng)地面積約400~500m2,年租金約50000元。因此,年生產(chǎn)100萬(wàn)互葉白千層組培生根苗的前期投資費(fèi)用約為76480元。
2.2.1 單瓶增殖培養(yǎng)基配制成本
根據(jù)增殖培養(yǎng)基配方中所使用到的培養(yǎng)基組分和激素類型,結(jié)合多家試劑銷售公司的報(bào)價(jià),確定不同藥品的單價(jià),詳見(jiàn)表2。由表2可知,互葉白千層配置1L增殖培養(yǎng)基的藥品費(fèi)用為1.03996元;配制1L培養(yǎng)基需要加熱融解及滅菌等用電約0.7元;人工費(fèi)按每人200元·d-1計(jì),每天可完成10L增殖培養(yǎng)基的配制,包括瓶子清洗、母液配制、培養(yǎng)基分裝、滅菌等工作,則每升增殖培養(yǎng)基的人工成本為20元。最終將各項(xiàng)合計(jì),每升增殖培養(yǎng)基配制成本為21.73996元,按每1L分裝30瓶計(jì),折合每瓶為0.7247元。
表1 組培工廠化生產(chǎn)的儀器設(shè)備主要清單
表2 增殖培養(yǎng)基配制的藥品成本(1L)
2.2.2 單瓶增殖苗接種成本
增殖苗的接種成本主要計(jì)算接種人工費(fèi),根據(jù)前期的生產(chǎn)數(shù)據(jù),按每人8h平均接種增殖苗320瓶進(jìn)行計(jì)算,工人工資為200元·d-1,則每瓶增殖苗接種成本為0.625元。
2.2.3 單瓶增殖苗培養(yǎng)成本
增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)周期為40d,每層2只日光燈管(功率28W/只),每天光照12h,電費(fèi)0.39元/度,共計(jì)用電為10.48元,按第層擺放90瓶進(jìn)行計(jì)算,則每個(gè)培養(yǎng)周期每瓶用電為0.1164元。培養(yǎng)室空調(diào)24h控溫,以1.5度·h-1計(jì),每天用電為14.04元,一個(gè)周期(40d)用電為561.6元,每個(gè)培養(yǎng)室可放置9000瓶苗,則每個(gè)培養(yǎng)周期用電為0.0624元/瓶。由上可知,光照成本與空調(diào)控溫成本相加之后,每瓶增殖苗在一個(gè)培養(yǎng)周期內(nèi)的培養(yǎng)成本為0.1788元/瓶。
2.2.4 增殖階段總成本合計(jì)
由于要年產(chǎn)100萬(wàn)株生根苗,按10%的折損,則需要提供約111.2萬(wàn)株用于生根的苗,而為了滿足生根苗木數(shù)量需求,則需要111.2萬(wàn)株可以生根的增殖苗,再按總的10%折算,則需要對(duì)應(yīng)培養(yǎng)出123.6萬(wàn)個(gè)增殖的單芽用于生根。按每瓶增殖苗可切出60株用于生根的單芽,則需要增殖苗20600瓶,按81瓶母瓶開(kāi)始轉(zhuǎn)接,需擴(kuò)繁4次方可達(dá)到該數(shù)量,累計(jì)增殖母瓶轉(zhuǎn)接總數(shù)量為27441瓶,見(jiàn)表3。增殖階段的單瓶成本為1.5285元(增殖培養(yǎng)基配制成本加增殖苗接種成本加增殖苗培養(yǎng)成本),因此,增殖階段的總費(fèi)用為41943.5685元。
2.3.1 單瓶生根培養(yǎng)基配制成本
根據(jù)增殖培養(yǎng)基配方中所使用到的培養(yǎng)基組分和激素類型,結(jié)合多家試劑銷售公司的報(bào)價(jià),確定不同藥品的單價(jià),詳見(jiàn)表3。由表3可知,互葉白千層生根培養(yǎng)基費(fèi)用為1.171449元·L-1;配制1L培養(yǎng)基需要加熱融解及滅菌等用電約0.7元;人工費(fèi)按每人200元·d-1,按每天完成10L計(jì)算,包括瓶子清洗、母液配制、培養(yǎng)基配制、滅菌等工序,則生根培養(yǎng)基的人工成本為20元·L-1。最終將各項(xiàng)合計(jì),增殖培養(yǎng)基配制成本為21.871449元·L-1,按每升分裝30瓶計(jì),折合每瓶為0.729元。
表3 累計(jì)消耗的增殖瓶數(shù)
2.3.2 單瓶生根苗接種成本
接種成本主要計(jì)算接種人工費(fèi)。每人8h平均接種生根苗100瓶,工人工資為200元·d-1,則每瓶生根苗接種成本為2.0元。
表4 生根培養(yǎng)基配制成本
2.3.3 單瓶生根苗培養(yǎng)成本
生根培養(yǎng)的培養(yǎng)周期為35d,每層2只日光燈管(功率28W/只),每天光照12h,電費(fèi)0.39元/度,共計(jì)用電為9.1728元,按第層擺放90瓶進(jìn)行計(jì)算,則每個(gè)培養(yǎng)周期每瓶用電為0.10192元/瓶。培養(yǎng)室空調(diào)24h控溫,以1.5度·h-1計(jì),每天用電為14.04元,一個(gè)周期(35d)用電為491.4元,每個(gè)培養(yǎng)室可放置9000瓶苗,則每個(gè)培養(yǎng)周期用電為0.0546元/瓶。由上可知,光照成本與空調(diào)控溫成本相加之后,每瓶生根苗在一個(gè)培養(yǎng)周期內(nèi)的培養(yǎng)成本為0.1565元/瓶。
2.3.4 生根階段總成本合計(jì)
由于要年產(chǎn)100萬(wàn)株生根苗,按10%的折損,則需要提供約111.2萬(wàn)株用于生根的苗,每接種生根苗40株,則需接種生根苗共27800瓶。而單瓶生根苗為2.8855元(生根培養(yǎng)基配制成本加生根苗接種成本加生根苗培養(yǎng)成本),因此,生根階段階段的總費(fèi)用為80216.9元。
由于組培苗生產(chǎn)過(guò)程中,還需要管理人員1名,主要負(fù)責(zé)日常的管理運(yùn)行,包括考勤、轉(zhuǎn)接計(jì)劃安排、母瓶挑選等,按工資60000元·a-1計(jì)。同時(shí),其他費(fèi)用支出暫列10000元,如水費(fèi)、節(jié)日慰問(wèn)、母瓶準(zhǔn)備等其他支出。因此,綜合以上計(jì)算結(jié)果,年產(chǎn)量100萬(wàn)株互葉白千層組培苗的生產(chǎn)總費(fèi)用為268640.4685元,折合單株為0.27元/株,各支出項(xiàng)費(fèi)用、所占總費(fèi)用的比重詳見(jiàn)圖2。
為了更加直觀地了解組培苗的全部生產(chǎn)費(fèi)用構(gòu)成,分別按生產(chǎn)環(huán)節(jié)、項(xiàng)目類別2種方式進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)作圖。按生產(chǎn)環(huán)節(jié)進(jìn)行統(tǒng)計(jì),生根階段所占成本最高,為29.86%,其次為管理費(fèi)和場(chǎng)地年租金,見(jiàn)圖2a。按不同類別進(jìn)行統(tǒng)計(jì),人工費(fèi)所占比例最高,為63.12%,其次為場(chǎng)地年租金、資產(chǎn)年折舊費(fèi)用,見(jiàn)圖2b。
圖2 互葉白千層瓶?jī)?nèi)生根苗成本構(gòu)成
高質(zhì)量的母瓶,可提高生產(chǎn)效率。在生產(chǎn)中確保母瓶無(wú)菌、不帶病且生長(zhǎng)良好,是整個(gè)年生產(chǎn)計(jì)劃中最為關(guān)鍵的一步,對(duì)母瓶的把關(guān)要?jiǎng)?wù)必嚴(yán)格,要清楚母株的特點(diǎn)、來(lái)源等[11]。此外,要根據(jù)生產(chǎn)計(jì)劃合理貯備母瓶,長(zhǎng)期繼代后,也要適時(shí)進(jìn)行母瓶更新。這主要是由于長(zhǎng)期高頻繼代后容易出現(xiàn)細(xì)胞團(tuán)老化,芽的生長(zhǎng)受到限制,導(dǎo)致增殖倍數(shù)降低,延長(zhǎng)生長(zhǎng)周期,所以需要及時(shí)更換母瓶,確保組培苗的質(zhì)量。
最優(yōu)的生產(chǎn)工藝流程是確保生產(chǎn)效率和降低成本的有效措施。通過(guò)優(yōu)化高精油互葉白千層的組培快繁體系,提高增殖倍數(shù),確保增殖過(guò)程中的倍數(shù)穩(wěn)定和后期的高生根率和高移栽煉苗成活率,嚴(yán)格把控各階段的繼代周期?;ト~白千層最優(yōu)的工廠化育苗流程:芽的增殖培養(yǎng)→壯芽培養(yǎng)→生根培養(yǎng)→移栽→上袋→出圃[12]。此外,人工成本占整個(gè)成本的比重最高,因此,可以對(duì)增殖、生根環(huán)節(jié)進(jìn)行工節(jié)優(yōu)化,以達(dá)到提高生產(chǎn)效率的目的,如非洲菊在生根時(shí),通過(guò)采用叢接生根法可提高25%的接種效率,有效降低了人工成本[13]。對(duì)于互葉白千層的生根,后期可以嘗試采用叢接方式進(jìn)行生根,評(píng)估生根苗的質(zhì)量和效果,能否達(dá)到生產(chǎn)要求??偟膩?lái)講,工藝優(yōu)化時(shí),要結(jié)合自身植物材料特點(diǎn)和生產(chǎn)實(shí)際,有目的地進(jìn)行工藝結(jié)構(gòu)優(yōu)化,適當(dāng)降低成本,以獲得更大利潤(rùn)。
蔗糖作為碳源在植物組織培養(yǎng)中被廣泛應(yīng)用,蒸餾水有利于更精準(zhǔn)地調(diào)控培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分,但價(jià)格較高,在生產(chǎn)中為了降低成本,可使用自來(lái)水和白砂糖替換蒸餾水和蔗糖[14,15]。為了獲得更高的利潤(rùn),可嘗試開(kāi)放式培養(yǎng),去除無(wú)菌操作環(huán)境以及所需特定儀器設(shè)備所帶來(lái)的各項(xiàng)開(kāi)支,降低硬件的投入以及水電的消耗;采用增殖生根同時(shí)進(jìn)行的模式,節(jié)約資源,提高生產(chǎn)效率。此外,高精油互葉白千層的生根時(shí)間為3~7d,在其大部分苗都生根后將其移到溫室中直接煉苗,為增殖培養(yǎng)和下一輪生根苗培養(yǎng)騰出空間,并降低用電成本。
為了有效降低各階段的污染率、死亡率和增加有效苗的數(shù)量,應(yīng)提高接種工人的熟練度以及責(zé)任心。要確保母液以及激素按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)配制,且儲(chǔ)存過(guò)程中未受到污染,確保母液養(yǎng)分有效,同時(shí)在培養(yǎng)基配制時(shí),調(diào)節(jié)好pH值,確保pH在5.4~5.8,避免因酸堿度差別過(guò)高,導(dǎo)致互葉白千層在培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不良;按規(guī)定進(jìn)行高溫高壓滅菌,確保培養(yǎng)基滅菌充分,減少污染的發(fā)生。在接種環(huán)節(jié),要求對(duì)接種員工需培訓(xùn)合格后方可上崗,嚴(yán)格把控操作環(huán)境以及操作技術(shù),同時(shí),要注意培養(yǎng)室的環(huán)境問(wèn)題,以免培養(yǎng)過(guò)程中造成二次污染;要注意增殖階段有效苗的數(shù)量,以提供更多的有效芽進(jìn)行生根。
通過(guò)適時(shí)引進(jìn)自動(dòng)化設(shè)備,代替人工,如培養(yǎng)基自動(dòng)灌裝機(jī)、洗瓶機(jī)等,提高效率。制定合理的管理措施(精簡(jiǎn)管理人員、分工明確計(jì)件等),激發(fā)員工的工作積極性。