劉宇曉，郭鳳霞，陳垣,3，劉金印，陳永中，金建琴，許宏亮

(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院，甘肅省中藥材規(guī)范化生產(chǎn)技術(shù)創(chuàng)新重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅省藥用植物栽培育種工程研究中心，甘肅省干旱生境作物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅 蘭州 730070；2.天津市現(xiàn)代中藥資源研究企業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津天士力現(xiàn)代中藥資源有限公司，天津 300410；3.甘肅天士力中天藥業(yè)有限責(zé)任公司，甘肅省特色藥用植物資源保護(hù)與利用工程實(shí)驗(yàn)室，甘肅省特色藥材規(guī)范化可追溯栽培工程技術(shù)研究中心，甘肅 定西 748100)

傘形科植物當(dāng)歸(Angelicasinensis)的干燥根，有濃郁的香氣，味甘、辛、微苦，有補(bǔ)血活血，調(diào)經(jīng)止痛，潤(rùn)腸通便等功能，主治血虛萎黃，眩暈心悸，月經(jīng)不調(diào)等癥[1]，已被列入既是食品又是中藥材的物質(zhì)(食藥物質(zhì))目錄(食品安全標(biāo)準(zhǔn)與監(jiān)測(cè)評(píng)估司2019年第8號(hào))。甘肅省岷縣一帶是當(dāng)歸的傳統(tǒng)優(yōu)質(zhì)道地主產(chǎn)區(qū)，氣候寒冷陰濕，被推介為“中國(guó)當(dāng)歸之鄉(xiāng)”，藥材世稱岷歸，產(chǎn)品享譽(yù)海內(nèi)外[2]。當(dāng)歸野生資源已趨瀕危[3]，藥源以栽培品種為主[4]。由于當(dāng)歸為多年生植物，當(dāng)歸地上部分生長(zhǎng)繁茂，產(chǎn)草量大，是高寒區(qū)農(nóng)牧交錯(cuò)帶的重要藥飼兼用型優(yōu)良品種，在高寒農(nóng)牧區(qū)土壤改良中發(fā)揮了積極作用。

然而，當(dāng)歸栽培品種主要為農(nóng)家地方品種，為多種類型的混合體[5]，隨著種植年限的延長(zhǎng)，品種退化明顯，表現(xiàn)為早期抽薹率高，根病嚴(yán)重，成藥率很低。盡管有研究者[5]開展了當(dāng)歸新品種選育研究，選育的岷歸系列品種早期抽薹率為13.9%～19.1%，麻口病率為27.9%～45.0%，病情指數(shù)為9.3%～18.3%，但實(shí)際成藥率只有35.9%～58.2%，且這些新品種尚處于繁種階段。當(dāng)歸正常種子為3年生植株的種子[6-7]，2年生植株抽薹稱為早期抽薹，根部木質(zhì)化不能入藥[8]，所結(jié)種子稱為火藥籽，用火藥籽育苗其后代早期抽薹率更高。正常成熟種子也唯有成藥性能好且抗病性強(qiáng)的個(gè)體才能成藥和繁種，純有機(jī)栽培可顯著提高當(dāng)歸成藥率[8]。

航天誘變育種是通過將植物種子搭載宇宙飛船或返回式衛(wèi)星，利用航天中的強(qiáng)輻射、微重力、高真空和弱磁場(chǎng)等使種子性狀發(fā)生變異，然后從中選育出具有優(yōu)良特性種子的現(xiàn)代育種新技術(shù)[9-12]。太空中的微重力等因素能夠影響植物細(xì)胞質(zhì)膜、轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組、細(xì)胞壁和Ca2+信號(hào)傳導(dǎo)狀態(tài)[10]，不僅能誘導(dǎo)出長(zhǎng)勢(shì)旺盛的植株，而且還可提高產(chǎn)量和品質(zhì)，這對(duì)側(cè)重于性狀特異性選育的藥用植物育種來講應(yīng)用潛力巨大[9]。利用太空誘變選育中藥材品種已初步應(yīng)用[13-24]，但至今對(duì)航天誘變當(dāng)歸品種選育的研究報(bào)道很少。近年來，受全球氣候變暖影響，加上連作重茬，化肥投入比增大，當(dāng)歸早期抽薹率更高，根病加重，成藥率更低[8-9]，嚴(yán)重影響了藥農(nóng)栽培當(dāng)歸的經(jīng)濟(jì)效益，而生產(chǎn)上早期抽薹率低、抗病性強(qiáng)的高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)當(dāng)歸品種極其缺乏。有機(jī)種植是在種植過程中完全使用自然原料投入的種植方法，有機(jī)肥替代化肥是藥用植物栽培發(fā)展的必然趨勢(shì)[25],選育適宜生態(tài)有機(jī)栽培的當(dāng)歸優(yōu)良新品種是道地藥材當(dāng)歸可持續(xù)發(fā)展的重要戰(zhàn)略目標(biāo)。因此，在有機(jī)栽培條件下探索當(dāng)歸航天誘變新品種選育途徑具有重要意義。本研究對(duì)航天搭載的當(dāng)歸種子SP1的生長(zhǎng)發(fā)育狀況和藥材活性成分進(jìn)行測(cè)定，以期選育符合育種目標(biāo)的當(dāng)歸新品種。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地位于甘肅省定西市岷縣禾馱鄉(xiāng)石家臺(tái)村，地理位置為N 34°25′36″，E 104°16′ 03″，屬典型高寒陰濕區(qū)，海拔3 186.75 m，年均降水量600～800 mm，平均溫度4.7 ℃，4-10月當(dāng)歸生長(zhǎng)期平均溫度5.5 ℃。土壤類型為高寒草甸土，土質(zhì)肥沃疏松，適宜當(dāng)歸生長(zhǎng)和繁育，是當(dāng)歸主要道地產(chǎn)區(qū)[2,4]。

1.2 種子來源及航天搭載

供試當(dāng)歸種子2015年8月10日采自岷縣當(dāng)歸地方農(nóng)家品種3年生種株，由甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院陳垣教授鑒定。

根據(jù)航天搭載要求，由天士力控股集團(tuán)醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司委托國(guó)家航天局搭載“長(zhǎng)征七號(hào)”運(yùn)載火箭發(fā)射的貨運(yùn)飛船和長(zhǎng)征二號(hào)運(yùn)載火箭發(fā)射的“神舟十一號(hào)”載人飛船對(duì)應(yīng)載種器。

長(zhǎng)征七號(hào)返回艙于2016 年6月26日返回，在太空運(yùn)行22 h，攜載當(dāng)歸種子20 g，編號(hào)為長(zhǎng)征22 h(22 h)?！吧裰凼惶?hào)”于2016年10月17日7∶30在酒泉衛(wèi)星發(fā)射中心由長(zhǎng)征2號(hào)運(yùn)載火箭發(fā)射，2016年11月18日13∶59返回艙在內(nèi)蒙古中部著陸，歷時(shí)33 d，攜載當(dāng)歸種子100 g，編號(hào)為神舟33 d(33 d)。返回地面后種子均在低溫4 ℃干燥條件下貯藏[7]。

1.3 航天搭載當(dāng)歸種子播種育苗

育苗前清選種子，除去果柄和殘留物，計(jì)取粒數(shù)。留樣后播種，種子播種量和種子數(shù)詳見表1。種子于2017年6月2日在岷縣高寒草甸生荒地進(jìn)行播種，處理有3個(gè)，即長(zhǎng)征22 h和神舟33 d當(dāng)歸種子，未搭載種子(CK)。播種前結(jié)合整地?fù)焓半s草，施有機(jī)肥1 800 kg/hm2，小區(qū)間距0.75 m，中間起埂相隔，各處理坡度和土壤條件一致，小區(qū)長(zhǎng)4.5 m，小區(qū)寬按種子量確定。為嚴(yán)防品種混雜，每個(gè)處理集中播種，自西向東依次播種CK1、33 d、22 h和CK2當(dāng)歸種子。CK1和33 d小區(qū)面積均為4.5 m2(4.5 m×1.0 m)，小區(qū)播種量均為30 g；22 h和CK2面積均為0.75 m2(1.5 m×0.5 m)，小區(qū)播種量均為6 g，播后覆蓋麥草保墑，田間管理均一致[7]。育苗期懸掛生態(tài)黃板防蟲，采用鼠夾嚴(yán)防鼠害，7月每小區(qū)撒施草木灰(300 kg/hm2)1次，其他管理同大田，共除草5次。

2017年10月7日采挖種苗，裹鮮土扎把并掛牌標(biāo)記，裝入尼龍網(wǎng)袋窖藏越冬。每處理裝1袋，分別編號(hào)為CK、航天群體一代種苗(Space population，SP1)33 d和22 h，越冬貯藏種苗數(shù)詳見表1。

表1 當(dāng)歸種子播種量和育成種苗數(shù)

1.4 航天搭載當(dāng)歸種子育成SP1種苗移栽

移栽前剔除病爛苗，移栽種苗數(shù)詳見表1。種苗于2018年4月7日移栽，移栽采用單因素試驗(yàn)方案，隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，2次重復(fù)，共6個(gè)小區(qū)，小區(qū)間距0.8 cm，拉線起埂相隔，小區(qū)內(nèi)拉線劃行穴栽，行距40 cm，每穴栽1株，株距30 cm。試驗(yàn)地結(jié)合整地均勻撒施草木灰300 kg/m2，有機(jī)肥1 800 kg/m2。按照大田管理每隔20 d中耕鋤草1次，共除草5次，全生育期不施用化肥和農(nóng)藥，采用生態(tài)黃板防蟲，鼠夾防鼠，7月每小區(qū)追施草木灰(300 kg/hm2)1次。

1.5 當(dāng)歸成藥栽培期個(gè)體物候和生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo)測(cè)定

當(dāng)歸移栽后觀察各小區(qū)種苗返青動(dòng)態(tài)，每月中旬統(tǒng)計(jì)返青株和早期抽薹株數(shù)，藥材采挖期統(tǒng)計(jì)成藥株數(shù)和返青死亡株數(shù)，最后計(jì)算返青率、早期抽薹率、返青成藥率、返青死株率和種苗成藥率[4,6-7]。返青結(jié)束，每小區(qū)隨機(jī)選擇15株掛牌標(biāo)記，每處理30株，對(duì)照越冬成活種苗少，全部測(cè)定。在5-10月每月中旬測(cè)定植株生長(zhǎng)指標(biāo)。株高和株幅用卷尺測(cè)定(精度1/10 cm)，莖粗用數(shù)顯游標(biāo)卡尺測(cè)定(精度1/100 mm)。株高是根莖基部至頂部的距離，株幅為植株地上部展開所能形成的最大寬度，莖粗為根莖基部直徑[6-7]。

返青率=(返青株數(shù)/移栽總苗數(shù))×100%

早期抽薹率=(早期抽薹株數(shù)/返青總株數(shù))×100%

返青成藥率=(成藥株數(shù)/返青總株數(shù))×100%

返青后死株率=[(返青株數(shù)-早期抽薹株數(shù)-成藥株數(shù))/返青總株數(shù)]×100%

種苗成藥率=(成藥株數(shù)/移栽總苗數(shù))×100%

變異系數(shù)(CV)=(標(biāo)準(zhǔn)差SD/平均數(shù))×100%

由于當(dāng)歸以根入藥，早期抽薹后地上部生長(zhǎng)難以區(qū)分品種間有利變異的差異性，因此，按返青結(jié)束早期抽薹未發(fā)生前計(jì)算各處理生長(zhǎng)指標(biāo)的變異系數(shù)。

1.6 當(dāng)歸藥材活性成分測(cè)定

當(dāng)歸采挖后參照《中國(guó)藥典》[1]去除泥土和須根，揉制晾干[7]。浸出物含量參照(通則2201)熱浸法測(cè)定，用70%乙醇作為溶劑[1]。當(dāng)歸阿魏酸含量參照高效液相色譜法(通則0512)測(cè)定，色譜條件以乙腈-0.085%磷酸溶液(17∶83)為流動(dòng)相；柱溫35 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為316 nm[1]。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用Excel 2007進(jìn)行數(shù)據(jù)整理和制圖，生長(zhǎng)指標(biāo)的平均數(shù)差異性檢驗(yàn)采用t檢驗(yàn)。表中數(shù)據(jù)為平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差SD，圖中數(shù)據(jù)點(diǎn)為平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤SE。

2 結(jié)果與分析

2.1 航天誘變對(duì)當(dāng)歸種苗返青和早期抽薹的影響

不同處理當(dāng)歸種子成苗率差異性很大(表1)，普通種子成苗率僅6.8%，而航天搭載神舟33 d和長(zhǎng)征22 h種子分別為11.2%和42.3%，分別較未搭載普通種子提高4.4%和35.6%。種苗越冬率差異性更大，對(duì)照為29.6%，22 h和33 d分別為59.6%和52.5%。說明當(dāng)歸成苗率很低，航天搭載有利于提高成苗率，搭載22 h誘導(dǎo)(長(zhǎng)征七號(hào)太空條件)效應(yīng)更為明顯。

不同處理當(dāng)歸種子育成種苗移栽返青后，航天搭載當(dāng)歸群體的返青率和早期抽薹率均顯著高于CK(表2)，與CK相比較，33 d和22 h返青率分別提高24.0%(t=5.58，P<0.05)和14.9%(t=3.43，P<0.05)，早期抽薹率分別提高29.7%(t=9.56，P<0.01)和21.4%(t=4.43，P<0.05)。航天誘變?nèi)后w的返青株成藥率略低于CK，但差異不顯著(P>0.05)。33 d返青株的死株率較CK極顯著降低26.8%(t=15.00，P<0.01)，22 h的死株率較CK顯著降低16.0%(t=7.12，P<0.05)。各處理返青率和早期抽薹率高低次序均為33 d>22 h>CK，而返青株成藥率和死亡率均為CK>22 h>33 d，最終使種苗成藥率依次為33 d>22 h>CK(表2)。

2.2 航天誘變對(duì)當(dāng)歸返青株生長(zhǎng)的影響

神舟33 d和長(zhǎng)征22 h當(dāng)歸種子育成種苗移栽后，成藥栽培期返青株群體與CK的生長(zhǎng)指標(biāo)整體變化趨勢(shì)相似(圖1)，返青植株在8月中旬前持續(xù)增高和展開，株冠達(dá)到最大，并不斷長(zhǎng)出新葉，在6月下旬已進(jìn)入?yún)踩~期，基部莖粗在7月中旬已達(dá)到最大。8月中旬后植株不再增高和擴(kuò)展，功能葉維持相對(duì)穩(wěn)定狀態(tài)直到9月下旬，成藥株進(jìn)入根部營(yíng)養(yǎng)積累轉(zhuǎn)化期，10月上旬老葉枯黃脫落。

表2 當(dāng)歸種苗的返青率和成藥率

神舟33 d和長(zhǎng)征22 h的當(dāng)歸返青株均較CK株生長(zhǎng)快，生長(zhǎng)量大(圖1)。4月上旬返青期33 d和22 h返青株分別較CK增高0.54 cm(t=1.73，P>0.05)和0.05 cm(t=0.10，P>0.05)，株幅分別增大0.39 cm(t=3.39，P>0.05)和0.39 cm，莖粗和葉數(shù)與CK的差異均不顯著。6月開始生長(zhǎng)差距拉大，6月下旬33 d和22 h較CK植株分別極顯著增高8.34 cm(t=5.59，P<0.01)和7.31 cm(t=5.06，P<0.01)，此后誘變?nèi)后w迅速生長(zhǎng)，在8月中旬均達(dá)到最大值并趨于穩(wěn)定，而CK在9月上旬趨于穩(wěn)定。當(dāng)歸誘變?nèi)后w莖粗的迅速生長(zhǎng)期較CK提早20 d左右，并且快速增長(zhǎng)的時(shí)間比CK延長(zhǎng)。植株葉片迅速增多主要有2個(gè)時(shí)期，第1個(gè)時(shí)期為5月上旬至6月下旬，葉片數(shù)依次為33 d>22 h>CK，第2個(gè)增長(zhǎng)期為7月上旬至8月中旬，葉片數(shù)依次為CK>22 h>33 d，但莖粗和葉片數(shù)的差異三者均未達(dá)到顯著水平(P>0.05)。

圖1 當(dāng)歸種苗成藥期植株生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)Fig.1 Plant growth dynamics of A.sinensis seeding in medicinal stage

各處理返青期形態(tài)指標(biāo)的變異系數(shù)顯示(表3)，當(dāng)歸返青期株高和株幅的CV依次為22 h>33 d>CK，葉片數(shù)的CV依次為33 d>CK>22 h，莖粗的CV依次為CK>22 h>33 d。各指標(biāo)平均CV依次為莖粗>株幅>株高>葉片數(shù)，22 h和33 d群體株高和株幅的CV均高于CK，33 d群體葉片數(shù)的CV最大。說明太空誘變使當(dāng)歸株型發(fā)生改變，株高和株幅誘變效應(yīng)更大，創(chuàng)造優(yōu)異變異群體的幾率更高，這從生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)也可得到驗(yàn)證(圖2)，也與早期抽薹率統(tǒng)計(jì)的結(jié)果相似(表1，表2)。太空誘變使莖粗趨于更穩(wěn)定，因?yàn)镃K莖粗的CV最大，也說明岷歸地方農(nóng)家群體中個(gè)體的差異性較大。

表3 SP1代種苗成藥期植株生長(zhǎng)指標(biāo)的變異系數(shù)

圖2 成藥根阿魏酸HPLC色譜圖Fig.2 HPLC chromatogram of ferulic acid in A.sinensis medicinal stage

2.3 航天誘變對(duì)當(dāng)歸藥材主要成分含量的影響

33 d和22 h的SP1藥材樣品和CK藥材樣品在測(cè)定時(shí)間段內(nèi)均出現(xiàn)多個(gè)峰且峰數(shù)基本一致，33 d和22 h的對(duì)應(yīng)峰均較CK面積大，22 h藥材樣品的阿魏酸峰值最高(圖2)。在0～10 min以33 d的峰面積最大，22 h次之，CK均最小。對(duì)當(dāng)歸藥材活性成分的組成影響不大(表4)。

表4 藥材根主要成分

不同太空誘變時(shí)間對(duì)當(dāng)歸藥材主要成分含量的影響雖未達(dá)到顯著水平，但均不同程度誘導(dǎo)當(dāng)歸藥材主要成分含量發(fā)生變化(表4)，阿魏酸含量從高到低依次為22 h>33 d>CK，搭載33 d和22 h當(dāng)歸藥材阿魏酸含量較CK分別提高0.01%(P>0.05)和0.02%(P>0.05)。33 d藥材的浸出物含量最高，較CK提高3.8%，22 h較CK的浸出物含量降低2.8%。

3 討論

3.1 航天搭載當(dāng)歸種子增強(qiáng)了當(dāng)歸SP1代的抗逆性和繁殖力

當(dāng)歸多年栽培成藥，第1年種子育苗，第2年成藥栽培，第3年繁種[4]。成藥期早期抽薹也是當(dāng)歸在極端環(huán)境條件脅迫下通過自我繁殖進(jìn)行生態(tài)補(bǔ)償?shù)谋憩F(xiàn)[8]。根腐病、麻口病等土傳病害與當(dāng)歸連作重茬自毒和土壤病原微生物的富集有關(guān)，道地產(chǎn)區(qū)土地面積極其有限，單一化種植為病原物的積累和傳播擴(kuò)散創(chuàng)造了條件。目前早期抽薹和根病成為限制當(dāng)歸栽培成效的主要因子，早期抽薹率高達(dá)40%以上[5-8]。新選育的岷歸系列新品種因早期抽薹和麻口病造成的實(shí)際成藥率也只有35.9%～58.2%，本課題組在產(chǎn)區(qū)大田調(diào)查農(nóng)家地方品種早期抽薹率和死株率均在40%以上。本研究發(fā)現(xiàn)，航天搭載當(dāng)歸種子其SP1代個(gè)體株型發(fā)生明顯變化，普遍增強(qiáng)了存活個(gè)體的抗逆性和繁殖力，CK種子的成苗率僅6.8%，而航天搭載33 d和22 h種子的成苗率分別較CK種子提高4.4%和35.6%，這也揭示了普通當(dāng)歸種子成苗率低的生產(chǎn)現(xiàn)實(shí)，航天搭載有利于提高種子的成苗率，長(zhǎng)征22 h誘變正向效應(yīng)更為明顯。另外，成藥栽培期CK群體返青率僅為62.5%，早期抽薹率為40.2%，神舟33 d和長(zhǎng)征22 h處理當(dāng)歸群體的返青率分別提高到70%以上，早期抽薹率分別提高到60%以上，返青后死株率卻降低20%左右，使當(dāng)歸種苗成藥率均維持在20.0%以上，留地健壯的成藥株為下一年的繁種和建立優(yōu)異變異群體奠定了良好基礎(chǔ)。由于種苗移栽后的返青率是反映植株對(duì)環(huán)境適應(yīng)性和抗逆性的主要指標(biāo)，田間發(fā)現(xiàn)越冬死苗和未返青苗一般都是根病引發(fā)腐爛死亡，說明經(jīng)過太空誘變后的當(dāng)歸成活個(gè)體株增強(qiáng)了對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性和應(yīng)激能力，從而提高了極端環(huán)境條件下的存活率。太空誘導(dǎo)當(dāng)歸早期抽薹率的提高也進(jìn)一步說明太空誘變?cè)鰪?qiáng)了存活個(gè)體的熟性分配比率和年際間個(gè)體繁衍配比，增強(qiáng)了物種的生態(tài)適應(yīng)性，由于早期抽薹株無法形成正常肉質(zhì)根，不利于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，進(jìn)一步揭示太空誘變具有雙向誘導(dǎo)效應(yīng)，帶來有利正向變異的同時(shí)也帶來不利于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的反向變異。

3.2 航天搭載當(dāng)歸種子促進(jìn)了當(dāng)歸SP1個(gè)體的生長(zhǎng)發(fā)育

航天誘變有擴(kuò)大黃芩(Scutellariabaicalensis)各性狀變異譜的作用[13]，使決明(Cassiaobtrusively)農(nóng)藝性狀表現(xiàn)出豐富的遺傳多樣性[18]?？傮w來看，航天搭載黃芩[13]和桔梗(Platycodongrandiflorum)[14]對(duì)其SP1代的負(fù)效應(yīng)大于正效應(yīng)。這與本研究中航天搭載33 d和22 h當(dāng)歸種子育成SP1種苗移栽后，其成藥群體株高和株幅的CV增大的結(jié)果較為一致。不同的是，返青株群體的株高、株幅和莖粗較CK顯著提高，說明太空誘變對(duì)當(dāng)歸成藥期生長(zhǎng)具有正向誘導(dǎo)效應(yīng)，生長(zhǎng)更旺盛，植株高大，可能是當(dāng)歸等多年生藥用植物在育苗期和越冬返青期已將誘變受損的不利基因型自然淘汰的緣故，另外早期抽薹株比例的增大也是造成其群體生長(zhǎng)勢(shì)增強(qiáng)的原因。航天搭載33 d和22 h群體成藥期生長(zhǎng)前期的葉片數(shù)的增長(zhǎng)速度比CK快，但后期較CK慢，說明太空誘變影響了當(dāng)歸植株葉片的時(shí)空異速增長(zhǎng)，返青后植株迅速抽枝散葉，首先占據(jù)優(yōu)勢(shì)生態(tài)位，而對(duì)照則在返青后經(jīng)歷了一定時(shí)間的環(huán)境適應(yīng)性，后期才迅速生長(zhǎng)，這一結(jié)果從其他藥用植物的研究也可以得到印證，經(jīng)航天誘變后藥用植物決明[18]和丹參[19]植株的生長(zhǎng)勢(shì)明顯優(yōu)于對(duì)照品種，均表現(xiàn)為促進(jìn)作用，而在黃芩[13]和桔梗[14]上卻表現(xiàn)為抑制作用，這可能是由于復(fù)雜的空間環(huán)境因素對(duì)種子的誘變作用因物種的不同而異，不同基因型植物種子對(duì)太空誘變的敏感程度也會(huì)有一定的差異。航天誘變后二色胡枝子(Lespedezabicolor)變異系數(shù)較對(duì)照提高30%～70%[20]。本研究中，航天誘變33 d和22 h使當(dāng)歸SP1成藥期植株性狀發(fā)生明顯變異，增大了返青期的變異幅度，創(chuàng)造出多樣化的變異株后代群體，搭載22 h對(duì)生長(zhǎng)指標(biāo)的正向誘導(dǎo)效應(yīng)更大。前期葉片數(shù)越多的群體后期葉片越少，這可能也與當(dāng)歸的早期抽薹有關(guān)，因?yàn)榉登嗪笾仓晟L(zhǎng)越旺盛的植株早期抽薹率越高，營(yíng)養(yǎng)優(yōu)先供應(yīng)抽薹、開花和結(jié)實(shí)等有性繁育，基葉數(shù)增長(zhǎng)較少，而未抽薹成藥株需要抽生基生葉為肉質(zhì)根生長(zhǎng)膨大及活性成分積累轉(zhuǎn)化提供養(yǎng)分，也說明成藥期當(dāng)歸基葉新生也是衡量當(dāng)歸成藥特性的重要指標(biāo)。

3.3 航天搭載種子對(duì)當(dāng)歸SP1成藥根有效成分含量具有一定正向效應(yīng)

藥用植物內(nèi)在品質(zhì)和化學(xué)組分是基因型與環(huán)境共同作用的結(jié)果，也是維持個(gè)體生存并延續(xù)后代的物質(zhì)基礎(chǔ)。航天誘變對(duì)藥用植物牛膝(Achyranthesbidentata)[21]、甘草(Glycyrrhizauralensis)[22]的某些化學(xué)成分含量均產(chǎn)生影響。廣東紫珠(Callicarpakwangtungensis)經(jīng)航天誘變后優(yōu)選F3品系藥物總含量和對(duì)照的差異不明顯[23]，但高文遠(yuǎn)等[24]將甘草種子搭載返回式衛(wèi)星18 d種子發(fā)育成熟根的甘草酸和甘草苷含量分別比對(duì)照組高2.19倍和1.18倍。當(dāng)歸是我國(guó)的主要道地中藥材品種，2020版《中國(guó)藥典》規(guī)定當(dāng)歸的浸出物含量不得少于45%，阿魏酸含量不得低于0.05%。本研究發(fā)現(xiàn)，在有機(jī)栽培條件下，岷縣產(chǎn)當(dāng)歸主要成分遠(yuǎn)高于《中國(guó)藥典》最低標(biāo)準(zhǔn)，平均浸出物含量為54.1%，阿魏酸含量為0.10%，航天誘變當(dāng)歸種子后，盡管SP1代藥材成分差異性未達(dá)到顯著水平，但也可揭示航天誘變的雙向效應(yīng)，搭載33 d和22 h處理的阿魏酸含量分別高于CK，浸出物含量因搭載條件而不同，33 d當(dāng)歸SP1藥材浸出物含量比CK高出3.8%，22 h浸出物含量比CK降低2.8%。說明不同物種對(duì)航天誘變的敏感性不同，航天誘變具有不確定性，藥用植物經(jīng)過航天誘變后有可能會(huì)提高某些成分含量，但也有可能降低某成分，航天誘變創(chuàng)造的優(yōu)異變異群體為后世代內(nèi)在品質(zhì)目標(biāo)性狀的選擇奠定了良好種質(zhì)基礎(chǔ)。本研究首次通過航天誘變創(chuàng)造當(dāng)歸變異群體并進(jìn)行新品種選育探索，對(duì)獲得的優(yōu)異變異株后代群體還有待在有機(jī)栽培條件下進(jìn)一步連續(xù)定向選擇和鑒定，以期選育出抗逆性強(qiáng)，早期抽薹率低，豐產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的當(dāng)歸新品種。

4 結(jié)論

當(dāng)歸地方農(nóng)家品種種子成苗率僅6.8%，種苗成藥率僅20.8%，種子經(jīng)航天誘變后可增強(qiáng)抗逆性，育成種苗的返青率和成活率顯著提高，對(duì)株高、株幅和莖粗等主要農(nóng)藝性狀具有正向誘變效應(yīng)，并提高了藥材根內(nèi)在品質(zhì)的豐富度，但同時(shí)也提高了SP1代早期抽薹率，各處理種苗成藥率依次為33 d(26.0%)>22 h(21.4%)>CK(20.8%)，獲得的抗逆成藥株將是新品種選育的優(yōu)異寶貴種質(zhì)資源。由于誘導(dǎo)的變異隨機(jī)發(fā)生，第1代誘變株基因分離的局限性大,性狀穩(wěn)定性差，需要在后時(shí)代大量定向選育，并結(jié)合分子鑒定技術(shù)，才能選育出符合性狀整齊一致、遺傳穩(wěn)定和主要性狀突出的當(dāng)歸優(yōu)良新品種。

致謝：天士力控股集團(tuán)董事局閆希軍主席、周水平、朱永宏，天津天士力現(xiàn)代中藥資源有限公司張?zhí)m蘭、張學(xué)敏、徐波、韓亞朋，甘肅數(shù)字本草檢驗(yàn)中心有限公司王浩亮等提供合作與幫助。甘肅省定西市岷縣郎銀忠、李雪芳和賈哈柱提供試驗(yàn)地和種苗貯藏條件并協(xié)助田間管理。隴西縣鞏昌鎮(zhèn)園藝村郭志軍、郭天明、郭太平、郭愛偉和郭愛峰提供種子貯藏條件并協(xié)助田間管理及取樣。甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)博士生白剛、高雪、姜小鳳、梁偉，碩士生王紅燕、葛鑫、劉蘭蘭、焦旭升、袁洪超、金彥博參與當(dāng)歸育苗、移栽及指標(biāo)測(cè)定。