廖春潔，葉美萍，石 梅，顧 昕，周平玉

性傳播疾?。⊿TD）是指主要通過(guò)性接觸傳播的一組傳染性疾病，不僅可以引起泌尿生殖器官病變，甚至可以通過(guò)血液播散侵犯全身各個(gè)組織和器官，嚴(yán)重危害患者身心健康。近年來(lái)，STD發(fā)病人數(shù)在我國(guó)呈逐年上升的趨勢(shì)[1-2]，其中淋病奈瑟菌（Neisseria gonorrhoeae）、沙眼衣原體（Chlamydia trachomatis）和解脲脲原體 （Ureaplasma urealyticum）是引起STD的常見(jiàn)病原體，并與男性尿道炎、附睪炎、精囊炎、前列腺炎等，女性宮頸炎、子宮內(nèi)膜炎及盆腔炎等密切相關(guān)，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致患者不孕不育[3-4]。由于檢測(cè)人群、社會(huì)經(jīng)濟(jì)、性教育程度和地區(qū)流行性的不同，各研究結(jié)果間存在差異[5-7]，為了解近年上海地區(qū)性病門(mén)診患者泌尿生殖道淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和解脲脲原體感染的人群特征和混合感染情況，本研究選取2018年7月—2020年11月在上海市皮膚病醫(yī)院虬江路分院性病門(mén)診就診且疑似泌尿生殖道感染的893例患者，統(tǒng)計(jì)分析患者泌尿生殖道分泌物中淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和解脲脲原體的核酸檢測(cè)結(jié)果，為制定和開(kāi)展性病防治工作提供流行病學(xué)參考。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2018年8月—2020年11月就診于本院性病門(mén)診疑似泌尿生殖道感染的893例患者，男性496例，女性397例。

1.2 樣本采集

男性樣本采集：使用無(wú)菌拭子輕柔伸入尿道2～3 cm處輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)拭子取出分泌物；女性樣本采集：使用無(wú)菌拭子插入宮頸口1～2 cm內(nèi)旋轉(zhuǎn)數(shù)次并停留數(shù)秒后取出。將取樣后的拭子按檢測(cè)要求浸入無(wú)菌生理鹽水中保存，進(jìn)行后續(xù)PCR檢測(cè)。

1.3 樣本檢測(cè)

采用PCR熒光探針?lè)▽?duì)沙眼衣原體、淋病奈瑟菌和解脲脲原體進(jìn)行檢測(cè)，先通過(guò)熱裂解法提取分泌物樣本中病原微生物的DNA，以其作為模板，用PCR熒光探針試劑盒中相應(yīng)的沙眼衣原體、淋病奈瑟菌和解脲脲原體的引物進(jìn)行產(chǎn)物擴(kuò)增。PCR 反應(yīng)條件為：50℃ UNG酶處理2 min，93℃預(yù)變性2 min；93℃ 變性10 s，60℃ 退火、延伸及檢測(cè)熒光30 s，共 40 個(gè)循環(huán)。PCR反應(yīng)完成后，讀取實(shí)驗(yàn)結(jié)果，陽(yáng)性結(jié)果為樣本循環(huán)域值(Ct)≤37，而Ct無(wú)數(shù)值或≥40為陰性結(jié)果，若37＜Ct＜40則再進(jìn)行復(fù)測(cè)，復(fù)測(cè)結(jié)果＜40為陽(yáng)性，否則為陰性。PCR檢測(cè)采用ABI 7500 實(shí)時(shí)熒光PCR儀器，PCR熒光探針試劑盒購(gòu)自上?？迫A生物工程有限公司。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 25.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和解脲脲原體總體感染情況及性別分布

893例患者中女397例，男496例，平均年齡（36.2±10.9）歲。不考慮性別因素，淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和解脲脲原體單一病原菌陽(yáng)性檢出率分別為8.0% （71/893）、11.2%（100/893）和42.7%（381/893）。在男性患者中淋病奈瑟菌的陽(yáng)性檢出率11.9%（59/496）顯著高于女性3.0%（12/397），同時(shí)女性患者中解脲脲原體陽(yáng)性率66.2%（263/397）顯著高于男性23.8%（118/496），差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001），不同性別患者中沙眼衣原體的陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和解脲脲原體感染情況Table 1 Overall prevalence of Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis and Ureaplasma urealyticum infection

2.2 淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和解脲脲原體混合感染類型及分析

893例患者泌尿生殖道分泌物中檢測(cè)出淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和解脲脲原體不同類型的混合感染共75例，混合感染總陽(yáng)性率為 8.4%（75/893），男性和女性混合感染陽(yáng)性率分別為7.5%（37 /496) 和9.6%（38 /397)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）?？傮w上混合感染類型以沙眼衣原體 + 解脲脲原體為主（4.8%），淋病奈瑟菌+解脲脲原體（1.7%）次之，并且女性患者沙眼衣原體+解脲脲原體混合感染陽(yáng)性率顯著高于男性（7.1%對(duì)3.0%，P＜ 0.05）。有0.7%的患者同時(shí)檢測(cè)出淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和解脲脲原體3種病原菌感染。見(jiàn)表2。

表2 淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和解脲脲原體混合感染類型及分布Table 2 Prevalence of co-infection with Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis and Ureaplasma urealyticum

2.3 不同性別、年齡段淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和解脲脲原體的檢出率

對(duì)不同年齡段陽(yáng)性檢出情況進(jìn)行分析，總體結(jié)果顯示淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和解脲脲原體的感染人群主要分布在20～40歲，該年齡段人群就診人數(shù)占比高，同時(shí)陽(yáng)性檢出者人數(shù)較多；＜20歲患者淋病奈瑟菌和沙眼衣原體陽(yáng)性檢出率較高，隨著年齡的增加，淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和解脲脲原體的陽(yáng)性檢出率整體呈降低趨勢(shì)?？紤]性別因素，男性淋病奈瑟菌、沙眼衣原體、解脲脲原體檢出陽(yáng)性患者主要分布在20～40歲，同時(shí)檢出率以＞40歲最低；女性患者中解脲脲原體的檢出陽(yáng)性率以20～30歲最高，陽(yáng)性檢出率高達(dá)72.6%，而女性淋病奈瑟菌和沙眼衣原體的感染率以＜20歲最高，其次為20～30歲。見(jiàn)表3。

表3 不同性別及年齡段淋病奈瑟菌、沙眼衣原體、解脲脲原體檢出陽(yáng)性率比較Table 3 Prevalence of Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis and Ureaplasma urealyticum infections in terms of patient age and sex

3 討論

性病門(mén)診就診者是STD的高發(fā)人群，對(duì)該人群進(jìn)行淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和解脲脲原體的流行病學(xué)分析對(duì)性病的防治具有十分重要的意義。本研究采用熒光定量PCR方法檢測(cè)了上海市皮膚病醫(yī)院虬江路院區(qū)性病門(mén)診就診者泌尿生殖道淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和解脲脲原體的感染率，結(jié)果顯示在性病門(mén)診893例就診者中淋病奈瑟菌、沙眼衣原體、解脲脲原體陽(yáng)性檢出率分別為8.0%、 11.2%、42.7%，其中以解脲脲原體的陽(yáng)性檢出率最高（42.7%），且女性解脲脲原體的陽(yáng)性檢出率高達(dá)66.2%，顯著高于男性（23.8%），這一結(jié)果略高于徐麗玲等[6]報(bào)道的1996—2003年性病門(mén)診患者解脲脲原體的檢出率（37.5%），并且高于曲沛等[8]報(bào)道的2017—2019年北京某醫(yī)院性病門(mén)診患者解脲脲原體的檢出率（21.8%），同時(shí)相關(guān)研究均顯示女性解脲脲原體的檢出率明顯高于男性，與本研究結(jié)果一致[6-8]。有研究顯示解脲脲原體在女性生殖道的高感染性與女性泌尿生殖道的解剖結(jié)構(gòu)有關(guān)，女性生殖道的微環(huán)境（溫度、濕度等）可能更適合解脲脲原體生存，解脲脲原體可能是女性生殖道正常菌群之一，大多數(shù)情況下女性泌尿生殖道解脲脲原體感染并不致病[9-10]；但也有研究顯示，當(dāng)機(jī)體免疫力低下時(shí)，解脲脲原體可大量繁殖引起泌尿生殖道的炎癥，從而導(dǎo)致不孕等不良結(jié)局[11-12]。因此，臨床醫(yī)師在分析女性解脲脲原體感染時(shí)，既不能盲目治療，導(dǎo)致抗生素濫用，同時(shí)也要考慮解脲脲原體可能引起的泌尿生殖道的炎癥，精準(zhǔn)把握治理時(shí)機(jī)，以免延誤治療，導(dǎo)致不孕等不良結(jié)局。解脲脲原體同樣是引起男性非淋病性尿道炎重要的病原菌，越來(lái)越多的研究顯示不育男性患者解脲脲原體的感染率更高，解脲脲原體感染可以通過(guò)干擾精子的產(chǎn)生和成熟，引起男性的精子質(zhì)量下降導(dǎo)致男性不育[13-14]，所以臨床需重視不育男性患者解脲脲原體的篩查和治療。

不同于解脲脲原體，沙眼衣原體被公認(rèn)為是泌尿生殖道的致病菌。盡管男性和女性在感染沙眼衣原體后其臨床表現(xiàn)均輕微甚至無(wú)癥狀，但沙眼衣原體長(zhǎng)期慢性感染所導(dǎo)致的男性附睪炎、精囊炎；女性盆腔炎、輸卵管炎等被廣泛認(rèn)為與不孕不育相關(guān)[15-16]。由于作為診斷金標(biāo)準(zhǔn)的衣原體培養(yǎng)技術(shù)繁瑣且難度高，國(guó)內(nèi)臨床常不用該技術(shù)診斷沙眼衣原體，而用做臨床診斷的抗原抗體試驗(yàn)敏感性低[17]。沙眼衣原體的無(wú)癥狀感染和診斷陽(yáng)性率低的現(xiàn)狀干擾我國(guó)沙眼衣原體感染的真實(shí)發(fā)病率[18]，將可能嚴(yán)重影響我國(guó)生殖健康國(guó)策的制定。本研究采用了靈敏度和特異度均較高的核酸檢測(cè)技術(shù)，結(jié)果顯示我院性病門(mén)診患者沙眼衣原體的陽(yáng)性檢出率為11.2%，并且沙眼衣原體感染無(wú)明顯性別差異，與2018年袁柳鳳等[19]報(bào)道的北京某醫(yī)院皮膚性病門(mén)診患者沙眼衣原體檢出率（11.29%）和感染特征一致（PCR熒光探針?lè)z測(cè)），而在普通人群中沙眼衣原體的檢出率低于5%[18]，因此，性病門(mén)診是抗衣原體感染的前哨，臨床不僅要治療患者本身，更應(yīng)重視其配偶、性伴侶的檢測(cè)和共同治療，減少交叉感染，阻斷傳染源。

淋病奈瑟菌感染可導(dǎo)致泌尿生殖系統(tǒng)化膿性炎癥，其中女性患者癥狀多隱匿，女性患者未治療或治療不當(dāng)時(shí)不僅可以引起附件炎，導(dǎo)致輸卵管堵塞而形成不孕或異位妊娠[20]，也可通過(guò)垂直傳播引起胎兒早產(chǎn)、流產(chǎn)、新生兒淋病奈瑟菌性結(jié)膜炎等嚴(yán)重結(jié)局[21]，因此，及時(shí)發(fā)現(xiàn)無(wú)癥狀女性淋病奈瑟菌感染對(duì)我國(guó)的生殖健康國(guó)策意義重大。本研究結(jié)果顯示性病門(mén)診患者淋病奈瑟菌的感染陽(yáng)性率為8.0%，在男性中淋病奈瑟菌感染陽(yáng)性率（11.9%）顯著高于女性（3.0%），2015—2019年中國(guó)淋病的流行趨勢(shì)也顯示各年報(bào)道的男性淋病發(fā)病率約為女性的5倍，這可能反映在女性患者中存在病例發(fā)現(xiàn)明顯不足的現(xiàn)象[22]，男性感染淋病奈瑟菌時(shí)泌尿生殖道炎性癥狀明顯，主動(dòng)就診率高，而女性感染淋病奈瑟菌后常無(wú)明顯癥狀，易被忽視延誤就診，因此在臨床工作中需擴(kuò)大對(duì)淋病奈瑟菌陽(yáng)性男性患者性伴侶的篩查，積極倡導(dǎo)孕前檢測(cè)，減少女性患者隱匿感染帶來(lái)的嚴(yán)重危害。

目前多種性病病原菌混合感染的情況日益嚴(yán)重[23-24]，病原菌的混合感染讓患者的臨床癥狀變得不典型甚至掩蓋癥狀，例如淋菌性尿道炎可以掩蓋非淋菌性尿道炎的癥狀，影響醫(yī)師的診斷和治療，所以了解目前性病門(mén)診混合感染的現(xiàn)狀對(duì)性病的防治具有重要意義。本研究對(duì)性病門(mén)診患者淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和解脲脲原體同時(shí)檢出情況進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)893例患者中有75例存在病原菌的混合感染，混合感染總陽(yáng)性率為8.4%，高于1996—2003年我院性病門(mén)診患者淋病奈瑟菌、沙眼衣原體、解脲脲原體的混合感染率（3.8%）[6]，與陳佳婕等[25]報(bào)道的2016—2017年上海某醫(yī)院門(mén)診淋病奈瑟菌、沙眼衣原體、解脲脲原體混合感染率（7.08%）相近。我們的研究顯示不同類型的混合感染中以沙眼衣原體+解脲脲原體的感染率最高，達(dá)4.8%，并且女性沙眼衣原體+解脲脲原體的混合感染率（7.1%）明顯高于男性（3.0%），這與其他文獻(xiàn)報(bào)道的混合感染特征一致[26-27]，有研究顯示沙眼衣原體+解脲脲原體混合感染的孕產(chǎn)婦胎膜早破的發(fā)生率高于單純沙眼衣原體感染的孕產(chǎn)婦[28]，沙眼衣原體+解脲脲原體混合感染增加了胎膜早破的風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)于感染沙眼衣原體的孕產(chǎn)婦要重視解脲脲原體的篩查。性病病原菌混合感染的存在可能會(huì)加重患者臨床癥狀并給治療帶來(lái)困難，臨床診治時(shí)應(yīng)注意多種性病病原菌的篩查，防止不良結(jié)局的產(chǎn)生。

對(duì)不同年齡段性病感染情況進(jìn)行分析，我們發(fā)現(xiàn)20～40 歲人群就診人數(shù)占比高，淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和解脲脲原體檢測(cè)陽(yáng)性患者也多分布在該年齡段中，這可能與該年齡段人群性行為活躍、性伴侶相對(duì)不固定有關(guān)，同時(shí)不考慮性別因素，結(jié)果顯示＜20歲患者沙眼衣原體和淋病奈瑟菌的陽(yáng)性檢出率較高，與相關(guān)研究[23,26]結(jié)果一致，這可能與該年齡段人群性教育缺乏、自我保護(hù)意識(shí)薄弱、未采取安全性行為等因素有關(guān)[29-30]，也可能與＜20歲患者就診基數(shù)較小有關(guān)。目前需進(jìn)一步加強(qiáng)對(duì)各年齡段人群性安全的宣傳教育工作，尤其針對(duì)青少年人群在校園開(kāi)展相應(yīng)的性健康講座，積極提倡安全性行為，以減少STD的發(fā)生。

綜上所述，在性病門(mén)診患者中解脲脲原體、沙眼衣原體、淋病奈瑟菌具有較高的陽(yáng)性檢出率，同時(shí)存在多種性病病原體混合感染現(xiàn)象，并且感染呈年輕化趨勢(shì)，需引起重視。解脲脲原體、沙眼衣原體、淋病奈瑟菌感染都可能會(huì)導(dǎo)致男女性不育不孕，且女性通過(guò)垂直傳播造成胎兒流產(chǎn)、早產(chǎn)等不良結(jié)局的發(fā)生，嚴(yán)重影響患者的身心健康，臨床醫(yī)師在工作中應(yīng)注意混合感染的篩查，尤其是對(duì)于高危人群以及治療后癥狀反復(fù)的患者，力求早發(fā)現(xiàn)、早治療，提高治愈率，減少不良結(jié)局的發(fā)生。