陳雪濤，蔣秀梅，趙三虎，曹葉霞，周妍英

（1.忻州師范學(xué)院化學(xué)系，沙棘工程技術(shù)研究中心，山西忻州 034000；2.忻州師范學(xué)院生物系，山西忻州 034000）

沙棘（Hippophae rhamnoidesL.）屬胡頹子科、沙棘屬落葉多刺喬木，廣泛分布于亞洲和歐洲[1]，我國(guó)是其主要產(chǎn)區(qū)之一。沙棘營(yíng)養(yǎng)豐富，漿果、種子、葉子、莖皮和根是生物活性物質(zhì)的重要來源[2]。沙棘葉在中國(guó)藏族和蒙古族作為食品和草藥的應(yīng)用歷史悠久。2013 年，中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)發(fā)布將沙棘葉作為普通食品管理[3]。Saggu 等[4]研究發(fā)現(xiàn)，即使在亞急性（30 d）最大有效劑量給藥后，沙棘葉水提取物也沒有毒性。沙棘葉中富含酚類[5-6]、類黃酮（兒茶素、蘆丁、槲皮素、山奈酚、異鼠李素）、精油、類胡蘿卜素、生育酚、糖、脂肪酸[7]和抗壞血酸[8]等。Masoodi 等[9]研究發(fā)現(xiàn)從沙棘葉中提取的末端水相混合物（SKICDDL-3）在體外可抑制前列腺癌細(xì)胞的增殖并降低前列腺特異性抗原的表達(dá)。許多研究表明沙棘葉提取物在體內(nèi)外均具有抗氧化、細(xì)胞保護(hù)、抗菌[10]、抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長(zhǎng)[11]、抗病毒、抗炎、抗疲勞、抗內(nèi)臟肥胖等功效[12]。因此，在一些國(guó)家，沙棘葉被用于制造提取物、茶葉、動(dòng)物飼料、藥品和化妝品[1,12]。因?yàn)樯臣~安全、營(yíng)養(yǎng)豐富且來源較廣，近年來，人們對(duì)沙棘葉茶越發(fā)感興趣，沙棘葉茶的生產(chǎn)及加工多是參照傳統(tǒng)茶葉的工藝[13]，市面上售賣的沙棘葉綠茶和紅茶較多，然而沙棘葉茶的加工和品質(zhì)并無統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，并且相關(guān)研究較少，導(dǎo)致市場(chǎng)上的沙棘葉茶品質(zhì)參差不齊。

本研究通過比較不同產(chǎn)地沙棘葉茶中總多酚、總黃酮、異鼠李素等含量以及其抗氧化活性，體外抑制α-葡萄糖苷酶活性和體外抑制胰脂肪酶活性，從而為沙棘葉茶的加工提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

沙棘葉茶基本信息見表1。綠茶，均采摘6 月份的沙棘葉，經(jīng)鍋炒殺青、揉捻、干燥得到樣品。紅茶，均采摘6月份的沙棘葉，經(jīng)萎凋、揉捻、發(fā)酵、干燥得到樣品。

表1 沙棘葉茶基本信息Table 1 Information of sea buckthorn leaf tea

沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品，CAS 149-91-7，色譜純；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品，CAS 153-18-4，色譜純；異鼠李素標(biāo)準(zhǔn)品，CAS 480-19-3，色譜純；1,1-二苯基-2-苦基肼（DPPH），CAS 1898-66-4，分析純；福林酚（2 mol/L），生物試劑，對(duì)硝基苯基-α-D-葡萄糖苷（PNPG），CAS 3767-28-0；生物試劑，α-葡萄糖苷酶，CAS 9001-42-7，70 U/mg；蒽酮，CAS 90-44-8，分析純；豬胰脂肪酶，CAS 9001-62-1，3 萬U/g，三羥基氨基甲烷（Tris），CAS 77-86-1，分析純；以上試劑均購(gòu)自上海源葉生物科技有限公司。對(duì)硝基苯基月桂酸酯（PNP），CAS 1956-11-2，色譜純，Sigma；甲醇，67-56-1，色譜純，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所。

1.2 儀器與設(shè)備

Agilent 1100 高效液相色譜儀，美國(guó)Agilent 公司；DNZ-9806 型酶標(biāo)分析儀，北京普朗新技術(shù)有限公司；V-1200 型分光光度計(jì)，上海美浦達(dá)有限公司；TG-16 離心機(jī)，常州市萬合儀器制造有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-52AA，上海亞榮生化儀器廠；DF-101S 集熱式數(shù)顯恒溫磁力攪拌器，山東鄄城華魯電熱儀器有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

將不同種類沙棘葉茶磨成粉末，過20 目篩，稱取粉末3 g，用60%乙醇提取，料液比為1∶20（g∶mL），65 ℃、100 W 超聲提取3 次，時(shí)間分別為60、30、30 min，提取液8 000 r/min 離心5 min，倒出上清液，合并3 次上清液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上60 ℃旋干，用60%乙醇定容至25 mL，每份提取3 個(gè)平行，提取液放在-4 ℃冰箱里保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 沙棘葉茶的測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 水分含量

根據(jù)《中國(guó)藥典》2015 版[14]中水分測(cè)定法的第二法烘干法，測(cè)定沙棘葉茶中的水分含量。

1.4.2 總黃酮含量

沙棘葉茶總黃酮含量按照Chen 等[15]的方法稍作改動(dòng)。將沙棘葉茶提取物0.2 mL 置于10 mL 試管中，加入4.8 mL 乙醇，向其中加入0.4 mL 5%亞硝酸鈉溶液，靜置6 min，再加入0.4 mL 5%的硝酸鋁溶液，靜置6 min。最后，加入4 mL 4%的氫氧化鈉溶液?；靹蚝箪o置15 min，在510 nm 處測(cè)定吸光度。以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)建立樣品總黃酮含量的線性方程，總黃酮含量以mg 蘆丁當(dāng)量（RT）/g 干質(zhì)量表示。

1.4.3 可溶性總多酚含量

沙棘葉茶可溶性總多酚含量測(cè)定方法在Chen 等[15]的基礎(chǔ)上稍作改動(dòng)。向45 μL 沙棘葉茶提取物中加入360 μL 乙醇和120 μL 福林酚試劑，混合均勻在室溫下靜置5 min，最后向混合物中添加120 μL 20%的碳酸鈉終止反應(yīng)，在680 nm 處測(cè)量吸光度。使用沒食子酸作為標(biāo)準(zhǔn)品繪制校準(zhǔn)曲線?？扇苄钥偠喾雍恳詍g 沒食子酸當(dāng)量（GAE）/g 干質(zhì)量表示。

1.4.4 水溶性碳水化合物含量

取沙棘葉茶醇提取物10 mL，揮去溶劑，用10 mL 水定容，采用硫酸-蒽酮法[15]。測(cè)定其中水溶性碳水化合物含量，向2 mL 沙棘葉提取物水復(fù)溶液中加入5 mL 含0.2%蒽酮的硫酸溶液，將其置于沸水浴中10 min 后，流水冷卻，在620 nm 處測(cè)量其吸光度。定量基于葡萄糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.4.5 異鼠李素含量

色譜條件：色譜柱為Kromasil 100-5-C18 色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動(dòng)相為A 相甲醇和B 相0.4%磷酸溶液（58∶42）；檢測(cè)波長(zhǎng)為370 nm；流速為1 mL/min；柱溫為25 ℃。

取沙棘葉茶提取液370 μL，加350 μL HCl，75 ℃水浴1 h，冷卻至室溫后加醇4.3 mL。吸取處理過的沙棘葉茶提取液10 μL，按上述色譜條件測(cè)定。其中標(biāo)準(zhǔn)曲線用不同濃度的異鼠李素測(cè)定。

1.4.6 抗氧化活性

（1）DPPH·清除能力

沙棘葉茶DPPH·清除能力測(cè)定方法是在Chen 等[15]的基礎(chǔ)上稍作改動(dòng)。將不同濃度沙棘葉茶提取物200 μL與100 μL DPPH 混合?；旌暇鶆蚝?，在室溫下黑暗中靜置20 min。測(cè)量反應(yīng)溶液在517 nm 處的吸光度。以60%乙醇代替提取液為空白對(duì)照。自由基清除率計(jì)算公式見式（1）。

式中，A樣品為樣品的吸光度；A空白為空白的吸光度。

EC50值是清除50%DPPH 自由基的有效濃度，通過線性回歸方程分析獲得；下同。

（2）還原力

沙棘葉茶還原力測(cè)定是在Chen 等[15]的基礎(chǔ)上稍作改動(dòng)。向加有1mL 樣品的具塞試管中加入2.5mL0.2mol/L磷酸鹽緩沖液（pH 6.6）和2.5 mL 1%鐵氰化鉀。在50 ℃下孵育20min 后，立即用冰水冷卻，向混合物中添加0.5 mL 10%三氯乙酸，在3 000 r/min 離心10 min。將1 mL 上清液與1 mL 蒸餾水及0.2 mL 0.1%三氯化鐵混合，10 min后，在700 nm 下測(cè)定溶液的吸光度。使用不同濃度的抗壞血酸（AC）制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，還原力表示為μmol AC/g dw。

（3）OH·清除能力

沙棘葉茶OH·清除能力測(cè)定按照Chen 等[16]方法稍作修改。分別取2.2 mL 不同濃度的沙棘葉茶提取物按順序與1.5 mL 0.2 mol/L 磷酸鈉緩沖液（pH 7.4）、0.2 mL 520 μg/mL 藏紅花T 溶液、0.7 mL 2.0 mmol/L EDTANa2Fe（Ⅱ）、0.4 mL 過氧化氫（6%，V/V）混合，混合物在37 ℃下孵育30 min，520 nm 處測(cè)量吸光度。以60%乙醇代替提取液為空白對(duì)照。OH·清除率計(jì)算公式見式（2）。

式中，A樣品為樣品的吸光度；A空白為空白的吸光度。

（4）NO2·清除能力

沙棘葉茶NO2·清除能力測(cè)定在Lee 等[17]的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改動(dòng)。將90 μL 不同濃度的沙棘葉茶提取物按順序與50 μL 50 mg/L 亞硝酸鈉、250 μL 0.1 mol/L 檸檬酸鹽緩沖液（pH=3.0）、110 μL 水混合，并在37 ℃下孵育30 min。冷卻至室溫后，向混合物中添加1 mL 0.4%對(duì)氨基苯磺酸，5 min 后，向混合物中添加500 μL 0.2%N-(1-萘基)乙二胺鹽酸鹽和3 mL 蒸餾水?；旌虾?，將混合物置于室溫下15 min，并在538 nm 處測(cè)量吸光度。以60%乙醇代替提取液為空白對(duì)照。NO2·清除率計(jì)算公式見式（3）。

式中，A樣品為樣品的吸光度；A空白為空白的吸光度。

（5）抗氧化活性（antioxidant potency composite，APC）綜合指數(shù)的計(jì)算

沙棘葉茶綜合抗氧化活性采用APC 綜合指數(shù)法[18]進(jìn)行比較，按照式（4）計(jì)算APC 綜合指數(shù)。

1.4.7α-糖苷酶抑制活性

沙棘葉茶α-糖苷酶抑制活性測(cè)定在Miao 等[19]方法的基礎(chǔ)上進(jìn)行了微小的修改。將不同濃度（100 μL）的樣品溶液與60 μLα-葡萄糖苷酶溶液（5 U/mL）混合于2 mL離心管中，加入350 μL 0.1 mol/L 磷酸鹽緩沖液（pH=6.8）。在37 ℃下孵育10 min 后，加入10 μL 10 mmol/L 于溶解于0.1 mol/L 磷酸鹽緩沖液（pH=6.8）溶液的PNPG?；旌衔镌?7 ℃下孵育30 min 后加入500 μL 碳酸鈉（0.5 mol/L）終止反應(yīng)，在405 nm 下測(cè)定吸光度。以超純水代替提取液為空白對(duì)照。α-葡萄糖苷酶抑制率（百分比）的計(jì)算公式見式（5）。

式中，A樣品為樣品吸光度；A空白為空白吸光度。

1.4.8 胰脂肪酶抑制活性

沙棘葉茶胰脂肪酶抑制活性測(cè)定在Mcdougall 等[20]方法的基礎(chǔ)上進(jìn)行了修改。將豬胰脂肪酶以5 mg/mL 溶解于超純水中，以8 000 r/min 離心5 min 后取上清液，將PNP溶解于含1%曲拉通X-100 的5 mmoL/L 醋酸鈉（pH 5.0）配成0.8 mg/mL 的底物。將0.1 moL/L（pH 8.2）的Tris 緩沖液400μL 和豬胰腺脂肪酶100μL 混合，加入100μL 含有相同量總多酚或總黃酮的樣品和450 μL 底物，并在37 ℃下孵育60 min，在405 nm 處測(cè)量吸光度。以超純水代替提取液為空白對(duì)照。胰脂肪酶抑制率計(jì)算公式見式（6）。

式中，A樣品為樣品的吸光度；A空白為空白的吸光度。

1.4.9 統(tǒng)計(jì)分析方法

所有測(cè)定重復(fù)3 次，數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”的形式表示。使用IBM SPSS 20 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性分析和聚類分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 沙棘葉茶活性物質(zhì)的含量

沙棘葉茶水分、水溶性總多酚、總黃酮、異鼠李素和水溶性碳水化合物含量見表2（見上頁）。由表可知，沙棘葉茶的含水率為4.43%～6.93%，符合國(guó)標(biāo)中茶葉水分含量低于7%的要求[21-22]。

表2 沙棘葉茶中主要成分含量Table 2 Content of main components of seabuckthorn leaf tea

水溶性總多酚含量為40.55～106.57 mg GAE/g，其中紅茶中水溶性總多酚含量為40.55～84.06 mg GAE/g，綠茶中水溶性總多酚含量為76.95～106.57 mg GAE/g。同一產(chǎn)地的綠茶和紅茶相比，綠茶中水溶性總多酚含量高于紅茶。這與吳清華等[23]報(bào)道的綠茶發(fā)酵后茶多酚總量總體上呈下降趨勢(shì)一致。這是由于紅茶在加工過程中受濕熱條件和微生物的作用，茶多酚發(fā)生褐變，形成暗褐色的茶褐素和其他多酚類高聚物。XJ-G 中水溶性總多酚含量高于XJ-YG，而YA-SB 中的水溶性總多酚含量高于YA-AB，這個(gè)結(jié)果與陳海銀[24]所報(bào)道的8 月份之前沙棘葉中多酚含量呈增高趨勢(shì)一致。這可能是由于沙棘葉內(nèi)多酚的積累主要與碳代謝相關(guān)，在夏季光合作用時(shí)間長(zhǎng)從而使得次級(jí)代謝產(chǎn)物多酚含量較高[25]。

總黃酮含量為33.16～54.54 mg RT/g，其中紅茶中黃酮含量為33.1～52.14 mg RT/g，綠茶中黃酮含量為43.74～54.54 mg RT/g。同一產(chǎn)地的綠茶和紅茶相比，綠茶中黃酮含量高于紅茶，這與王麗麗等[26]的測(cè)定結(jié)果一致，這可能是和發(fā)酵有關(guān)。XJ-G 中總黃酮含量高于XJ-YG，而YA-SB 中的總黃酮含量高于YA-AB，施榮富等[27]報(bào)道得出6 月采摘的沙棘葉中總黃酮含量最高，黃酮類化合物是植物酚類化合物中最大的一類[28]，與植物體內(nèi)的次級(jí)代謝相關(guān)。

異鼠李素含量為0.65～2.02 mg/g，SY-B 中異鼠李素含量高于SY-G，在沙棘葉中異鼠李素主要是以苷元的形式和糖基結(jié)合的異鼠李素糖苷類化合物形式存在[29]，黃酮苷類在紅茶發(fā)酵過程中分解為黃酮苷元和葡萄糖。YA-SB 中的異鼠李素含量高于YA-AB，XJ-G 中異鼠李素含量高于XJ-YG，這與總黃酮含量測(cè)定的結(jié)果一致，推測(cè)和植物體內(nèi)的次級(jí)代謝相關(guān)。

水溶性碳水化合物在1.23%～4.54%，XZ-B 中水溶性碳水化合物含量高于XZ-G，在沙棘葉中黃酮醇苷是一類主要的活性成分，常見的糖殘基是葡萄糖和半乳糖[30]，在紅茶發(fā)酵過程中糖苷酶解釋放出糖基[31]，導(dǎo)致紅茶中水溶性碳水化合物含量較高。YA-AB 中的水溶性碳水化合物含量高于YA-SB，推測(cè)可能是由于在夏季植物的次級(jí)代謝較強(qiáng)，碳水化合物轉(zhuǎn)化較多，到了秋季植物的次級(jí)代謝減弱，碳水化合物在植物內(nèi)保留較多。

2.2 沙棘葉茶的抗氧化活性

沙棘葉茶的抗氧化能力通過DPPH·清除能力、OH·清除能力、NO2·清除能力和還原能力的測(cè)定進(jìn)行評(píng)估，結(jié)果見表3。自由基清除能力實(shí)驗(yàn)中EC50值越低則該茶的清除自由基能力越強(qiáng)。DPPH·清除實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示EC50值在0.075 4～0.315 3 mg/mL 之間，同一產(chǎn)地綠茶清除DPPH·的能力更強(qiáng)，XJ-G 清除DPPH·的能力強(qiáng)于XJ-YG，YA-SB 清除DPPH·的能力強(qiáng)于YA-AB。活性成分和抗氧化活性相關(guān)性分析結(jié)果見表5（見第32 頁），由表可知，可溶性總多酚含量和總黃酮含量與DPPH·清除能力的EC50值呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.922，r=-0.883，P＜0.01）。

OH·清除實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示EC50值在1.052 0～3.595 9 mg/mL 之間，同一產(chǎn)地紅茶OH·清除能力強(qiáng)于綠茶，XJ-YG 清除OH·能力強(qiáng)于XJ-G，YA-SB 清除OH·的能力強(qiáng)于YA-AB?；钚猿煞趾涂寡趸钚韵嚓P(guān)性分析結(jié)果（表5）顯示，異鼠李素含量和水溶性碳水化合物含量與OH·清除能力的EC50值呈強(qiáng)的負(fù)相關(guān)（r=-0.815，r=-0.758，P＜0.05）。

NO2·清除實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示EC50值在3.977～20.132 mg/mL 之間，同一產(chǎn)地綠茶清除NO2·的能力更強(qiáng)，XJ-G清除NO2·的能力強(qiáng)于XJ-YG，YA-SB 清除NO2·的能力強(qiáng)于YA-AB?；钚猿煞趾涂寡趸钚韵嚓P(guān)性分析結(jié)果（表5）顯示，可溶性總多酚含量與NO2·清除能力的EC50值呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.913，P＜0.01）。

還原力實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，沙棘葉茶還原力在52.46～165.04 μmol AC/g dw 之間，SY-G 還原力顯著強(qiáng)于SY-B。XZ-B 和XZ-G 還原力較強(qiáng)，但是它們之間并無顯著性差異，XJ-YG 還原力強(qiáng)于XJ-G，YA-SB 還原力強(qiáng)于YA-AB?；钚猿煞趾涂寡趸钚韵嚓P(guān)性分析結(jié)果（表5）顯示，還原力與可溶性總多酚含量呈顯著正相關(guān)（r=0.896，P＜0.01），與總黃酮含量和水溶性碳水化合物含量呈強(qiáng)的正相關(guān)（r=0.807，r=0.754，P＜0.05）。

由上述結(jié)果可知，沙棘葉茶在4 種抗氧化方法中的測(cè)定結(jié)果并不一致，主要因?yàn)椴煌椒ǚ磻?yīng)原理不同[18]，因此，為了全面評(píng)價(jià)沙棘葉茶的抗氧化活性，采用APC綜合指數(shù)法對(duì)4 種方法測(cè)得結(jié)果進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，結(jié)果見表3。同一產(chǎn)地，綠茶的APC 綜合指數(shù)大于紅茶，這與周金偉等[32]對(duì)傳統(tǒng)茶葉研究結(jié)果一致，主要由于發(fā)酵過程導(dǎo)致多酚類成分含量減少。YA-SB 的APC 綜合指數(shù)大于YA-AB，這與陳海銀[24]報(bào)道的6 月份沙棘葉總抗氧化性出現(xiàn)最高值，而6—8 月份沙棘葉處于成熟狀態(tài)，理化指標(biāo)處于穩(wěn)定狀態(tài)，導(dǎo)致總抗氧化性下降。XJ-G 的APC綜合指數(shù)和XJ-YG 相差較小。

表3 沙棘葉茶抗氧化活性及抗氧化活性綜合指數(shù)Table 3 Antioxidant capacity and antioxidant potency composite (APC) index of sea buckthorn leaf tea

2.3 不同沙棘葉茶的酶抑制活性

2.3.1 不同沙棘葉茶的α-葡萄糖苷酶抑制活性

沙棘葉茶的α-葡萄糖苷酶抑制活性測(cè)定結(jié)果見表4，α-葡萄糖苷酶抑制活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示IC50值在1.086 0～3.859 9 mg/mL 之間，其中SY-G 對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制活性顯著強(qiáng)于SY-B，XZ-B 對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制活性顯著強(qiáng)于XZ-G，XJ-YG 對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制活性顯著強(qiáng)于XJ-G，YA-SB 和YA-AB 對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制活性最差，且兩者之間無顯著性差異。活性成分和α-葡萄糖苷酶抑制活性相關(guān)性分析結(jié)果（表5）顯示，α-葡萄糖苷酶抑制活性的IC50值與水溶性碳水化合物含量呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.893，P＜0.01），與異鼠李素含量呈強(qiáng)的負(fù)相關(guān)（r=-0.731，P＜0.05）。α-葡萄糖苷酶抑制活性的IC50值與可溶性總多酚和總黃酮含量呈弱的負(fù)相關(guān)，此結(jié)果表明，可溶性總多酚和總黃酮對(duì)于α-葡萄糖苷酶抑制有一定的作用，柳梅等[33]研究發(fā)現(xiàn)沙棘葉多酚提取物對(duì)α-淀粉酶具有一定的抑制作用。

表4 沙棘葉茶α-葡萄糖苷酶抑制活性和胰脂肪酶抑制活性Table 4 α-glucosidase inhibitory activity,and pancreatic lipase inhibitory activity of sea buckthorn leaf tea

表5 沙棘葉茶中活性成分和活性的相關(guān)性分析Table 5 Correlation coefficients for the relationship of between active ingredient and activity of sea buckthorn leaf tea

2.3.2 不同沙棘葉茶的胰脂肪酶抑制活性

沙棘葉茶的胰脂肪酶抑制活性測(cè)定結(jié)果見表4，當(dāng)樣品中總黃酮含量相等時(shí)，胰脂肪酶抑制率在40.33%～64.40%之間，其中SY-G 對(duì)胰脂肪酶抑制活性顯著強(qiáng)于SY-B，XZ-B 對(duì)胰脂肪酶抑制活性顯著強(qiáng)于XZ-G，XJ-YG 對(duì)胰脂肪酶抑制活性顯著強(qiáng)于XJ-G，YA-AB 對(duì)胰脂肪酶抑制活性強(qiáng)于YA-SB。當(dāng)樣品中可溶性總多酚含量相等時(shí)，胰脂肪酶抑制率在59.80%～96.92%之間，而整體趨勢(shì)與樣品中總黃酮含量相等時(shí)恰恰相反，這一結(jié)果可能是由于在這兩種情況下樣品中的活性成分含量存在差異所致。范金波等[34]研究發(fā)現(xiàn)沙棘葉黃酮提取物對(duì)胰脂肪酶活性有一定的抑制作用。

2.4 不同沙棘葉茶樣品聚類分析

根據(jù)以上沙棘葉茶的活性成分含量及活性，利用SPSS 20 軟件對(duì)8 種沙棘葉茶樣品進(jìn)行聚類分析，得到樹形圖見圖1（見下頁）。由圖可知，忻州綠茶（XZ-G）、忻州紅茶（XZ-B）、新疆沙棘嫩葉綠茶（XJ-YG）、新疆沙棘葉綠茶（XJ-G）和沈陽綠茶（SY-G）可以聚為一類，延安沙棘葉紅茶（秋）（YA-AB）、延安沙棘葉紅茶（夏）（YA-SB）和沈陽紅茶（SY-B）可以聚為一類。從聚類分析結(jié)果來看，綠茶和紅茶之間存在顯著性差異，而同一種茶的特性較相似。

圖1 沙棘葉茶聚類分析結(jié)果Fig.1 Cluster analysis of sea buckthorn leaf tea

3 結(jié)論

通過對(duì)8 種沙棘葉茶中主要成分的分析，發(fā)現(xiàn)在同一產(chǎn)地綠茶中可溶性總多酚和總黃酮含量高于紅茶；而異鼠李素含量和水溶性碳水化合物含量在紅茶中較高。YA-SB 中可溶性總多酚、總黃酮和異鼠李素含量高于YA-AB。XJ-G 中可溶性總多酚、總黃酮和異鼠李素含量高于XJ-YG。采用APC 指數(shù)法對(duì)8 種沙棘葉茶的抗氧化活性進(jìn)行評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)同一產(chǎn)地綠茶的抗氧化活性強(qiáng)于紅茶；YA-SB 的抗氧化活性強(qiáng)于YA-AB。α-葡萄糖苷酶抑制活性和黃酮含量相等時(shí)的胰脂肪酶抑制活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示SY-G 強(qiáng)于SY-B，XZ-B 強(qiáng)于XZ-G，XJ-YG 強(qiáng)于XJ-G；而多酚含量相等時(shí)的胰脂肪酶抑制活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果與此趨勢(shì)相反。通過聚類分析，可以把8 種沙棘葉茶分為兩大類：一類包括XZ-G、XZ-B、XJ-YG、XJ-G 和SY-G；另一類包括YA-AB、YA-SB 和SY-B。結(jié)果表明，第一類沙棘葉茶的總多酚含量（76.95～106.57mgGAE/g），總黃酮含量（43.7～54.54 mg RT/g），異鼠李素含量（1.25～1.86 mg/g）較高，抗氧化活性APC 綜合指數(shù)（71.80%～88.65%）較高；α-葡萄糖苷酶的IC50值（1.086 0～2.233 0 mg/mL）較低；黃酮含量相等時(shí)的胰脂肪酶抑制率較高；而第二類均為紅茶，相對(duì)第一類來說其活性成分含量較低，活性較差。本研究結(jié)果為沙棘葉茶加工方式的選擇及采摘時(shí)間提供了數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。