鮑 菊,蔡甫格,張秀偉,牛力立,朱 江,曹家洪
(安順市農(nóng)業(yè)科學(xué)院,貴州 安順 561000)
榆黃菇(Pleurotus citrinopileatus)又名金頂側(cè)耳、玉皇蘑、元蘑等,因其常見腐生于榆樹枯枝上而得名榆黃菇[1]。榆黃菇隸屬于擔(dān)子菌亞門(Basidiomycotina)、傘菌目(Agaricales)、口蘑科(Tricholomataceae)、側(cè)耳屬(Pleurotus),分布于我國黑龍江、吉林、遼林、湖南、河北、四川和云南等地,日本、歐洲、北美洲也有分布[2]。榆黃菇的味道鮮美,營養(yǎng)豐富,含蛋白質(zhì)、維生素和礦物質(zhì)等多種營養(yǎng)成分,其中氨基酸含量尤為豐富,含有17 種氨基酸,且必需氨基酸含量高,富含人體必須的8 種氨基酸,是不可多得的珍稀食用菌[3]。榆黃菇還有滋補(bǔ)強(qiáng)壯功能,也是著名的珍稀藥用真菌,有潤肺生津、補(bǔ)益肝腎、降血壓、降低膽固醇含量、治療肌萎和痢疾等功效。榆黃菇還含有豐富的鉀、鈉、鈣、鐵、鋅,以及維生素C、煙酸、泛酸等[4]。雖然榆黃蘑的子實(shí)體色彩鮮黃艷麗、營養(yǎng)豐富、味道鮮美、市場價(jià)格可觀,但其種植至今尚未形成規(guī)?;a(chǎn)。溫度、pH 值、光照等環(huán)境因子會影響菌絲的正常生長,從而影響食用菌的產(chǎn)量和品質(zhì)[5],不同的培養(yǎng)基配方、碳源、氮源也會影響食用菌菌絲生長。為此,筆者對榆黃菇菌絲生長條件進(jìn)行了研究,以期探索出適宜榆黃菇菌絲生長的最佳條件,為榆黃菇的種植推廣提供參考。
1.1.1 供試菌種安順市農(nóng)業(yè)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)室自行分離的榆黃菇母種。
1.1.2 供試培養(yǎng)基PDA 培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g/L、卡拉膠粉20 g/L、葡萄糖20 g/L、加蒸餾水至1 000 mL;胡蘿卜培養(yǎng)基:胡蘿卜100 g/L、卡拉膠粉15 g/L、加蒸餾水至100 0 mL;燕麥培養(yǎng)基:燕麥20 g/L、卡拉膠粉18 g/L、加蒸餾水至1 000 mL;察氏培養(yǎng)基:硝酸鈉3 g/L、磷酸氫二鉀1 g/L、硫酸鎂0.5 g/L、氯化鈉0.5 g/L、硫酸亞鐵0.01 g/L、蔗糖30 g/L、卡拉膠粉20 g/L、加蒸餾水至1 000 mL;真菌生理培養(yǎng)基:氮源1 g/L、磷酸二氫鉀0.5 g/L、碳源5 g/L、瓊脂20 g/L、加蒸餾水至1 000 mL。
1.2.1 不同溫度對榆黃菇菌絲生長的影響無菌條件下用打孔器在培養(yǎng)了15 d 的榆黃菇菌種上取直徑為5 mm 生長一致的菌塊,接種到配制好的PDA 培養(yǎng)基平板中央,將培養(yǎng)皿邊緣用封口膜封好后分別置于5、10、15、20、25、30、35 和40℃恒溫條件下培養(yǎng),15 d后用十字交叉法測量菌落直徑,每個(gè)處理重復(fù)3 次。
1.2.2 不同pH 值對榆黃菇菌絲生長的影響用NaOH 和HCl 將PDA 培養(yǎng)基的pH 值分別調(diào)到4、5、6、7、8、9、10,高壓滅菌后備用。在無菌條件下用打孔器取培養(yǎng)了15 d 的直徑為5 mm 的菌種接種到不同pH 值的PDA 培養(yǎng)基中央,用封口膜封好培養(yǎng)皿邊緣后置于25℃恒溫條件下培養(yǎng),15 d 后測量菌落直徑,每個(gè)處理重復(fù)3 次。
1.2.3 不同培養(yǎng)基對榆黃菇菌絲生長的影響在無菌條件下用打孔器取培養(yǎng)了15 d 的直徑為5 mm 的菌種分別接種到PDA 培養(yǎng)基、胡蘿卜培養(yǎng)基、燕麥培養(yǎng)基、察式培養(yǎng)基中央,培養(yǎng)皿邊緣用封口膜封好后置于25℃恒溫條件下培養(yǎng),15 d 后測量菌落直徑,每個(gè)處理重復(fù)3 次。
1.2.4 不同碳源對榆黃菇菌絲生長的影響以真菌生理培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,首先分別配制以果糖、蔗糖、無碳源(CK)、麥芽糖、木糖和葡萄糖為不同碳源的培養(yǎng)基,然后接種直徑為5 mm 的菌種于培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基中央,置于25℃恒溫條件下培養(yǎng)15 d 后測量菌落直徑,每個(gè)處理重復(fù)3 次。
1.2.5 不同氮源對榆黃菇菌絲生長的影響以真菌生理培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,首先分別配制以蛋白胨、牛肉膏、硫酸銨、硝酸鉀、無氮源(CK)和甘氨酸為不同氮源的培養(yǎng)基,然后接種直徑為5 mm 的菌種于培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基中央,置于25℃恒溫條件下培養(yǎng)15 d 后測量菌落直徑,每個(gè)處理重復(fù)3 次。
1.2.6 不同光照對榆黃菇菌絲生長的影響光照設(shè)連續(xù)光照(24 h 光照)、間斷光照(12 h 光照和12 h 黑暗)、黑暗(24 h 黑暗)3 個(gè)處理,將直徑5 mm 的菌種接種到PDA 培養(yǎng)基平板中央,置于不同光照的25℃恒溫條件下培養(yǎng)15 d 后測量菌落直徑,每個(gè)處理重復(fù)3 次。
從表1 可知,榆黃菇菌絲在10~35℃條件下均可生長。以25℃培養(yǎng)的菌絲萌發(fā)時(shí)間最短,為24 h,菌絲活力最強(qiáng),菌落特濃密,生長均勻,其菌落直徑為5.75 cm;30℃培養(yǎng)的菌絲萌發(fā)時(shí)間為48 h,菌絲活力強(qiáng),菌落濃密,生長不均勻,但其菌落直徑最大,為6.33 cm,顯著大于25℃培養(yǎng)的,且25℃和30℃培養(yǎng)的菌落直徑都顯著大于其他處理。綜合考慮菌絲生長狀況和菌落直徑,榆黃菇菌絲生長的最適溫度為25℃。
表1 不同溫度對榆黃菇菌絲生長的影響
從表2 可知,榆黃菇菌絲僅在pH 值為5~8 的條件下能正常萌發(fā)生長。當(dāng)pH 值為7 時(shí),菌絲萌發(fā)時(shí)間為24 h,菌絲生長最快、活力最強(qiáng),菌落生長最濃密,菌落直徑達(dá)到6.97 cm;pH 值為6 時(shí),菌絲萌發(fā)時(shí)間為24 h,且菌落生長濃密,活力也很強(qiáng),菌落直徑為6.27 cm;且pH值為6和7時(shí)的菌落直徑顯著大于其他處理。因此,榆黃菇菌絲生長的最適pH 值為6~7。
表2 不同pH 值對榆黃菇菌絲生長的影響
榆黃菇菌絲在4 種培養(yǎng)基中均能生長,但在PDA 培養(yǎng)基上的菌絲萌發(fā)時(shí)間較短,為24 h,菌落最濃密,菌絲活力最強(qiáng),其菌落直徑為6.90 cm,顯著大于其他處理(見表3)。因此,榆黃菇菌絲生長的最適培養(yǎng)基為PDA 培養(yǎng)基。
表3 不同培養(yǎng)基對榆黃菇菌絲生長的影響
榆黃菇菌絲在6 種不同碳源的培養(yǎng)基上均能生長,但以葡萄糖為碳源時(shí),菌絲的萌發(fā)時(shí)間較短,為24 h,菌落最濃密,菌絲活力最強(qiáng),其菌落直徑為7.06 cm;其次是以蔗糖作碳源的,其菌絲萌發(fā)時(shí)間也為24 h,菌落濃密,菌絲活力也強(qiáng),菌落直徑為6.57 cm;以葡萄糖和蔗糖為碳源的菌落直徑均顯著大于其他處理(見表4)。因此,榆黃菇菌絲生長的最適碳源為葡萄糖和蔗糖。
表4 不同碳源對榆黃菇菌絲生長的影響
榆黃菇菌絲在6 種不同氮源的培養(yǎng)基上均能生長,但以硝酸鉀為氮源的菌絲萌發(fā)時(shí)間最短,為24 h,菌落生長最好,菌落最濃密,其菌落直徑為7.10 cm,顯著大于其他處理(見表5),硝酸鉀為榆黃菇菌絲生長的最適氮源。
表5 不同氮源對榆黃菇菌絲生長的影響
從表6 可知,榆黃菇菌絲生長的最佳光照條件為黑暗,其菌絲萌發(fā)的時(shí)間最短,為24 h,菌絲生長速度最快,菌落最濃密,菌絲活力最強(qiáng),菌落直徑達(dá)7.15 cm,且顯著高于連續(xù)光照的處理。
表6 不同光照對菌落生長的影響
關(guān)于榆黃菇的研究主要是對榆黃菇菌絲體多糖提取及抗腫瘤活性研究[6]以及對榆黃菇發(fā)酵菌絲體及胞外多糖的影響因子研究[7]等,對其菌絲體生物學(xué)特性的研究不多。該研究通過比較不同溫度、光照條件、pH 值、培養(yǎng)基、碳源和氮源等環(huán)境因子與營養(yǎng)因子對榆黃菇菌絲生長的影響,篩選出了榆黃菇菌絲生長的最適條件:溫度25℃,pH 值6~7,培養(yǎng)基為PDA培養(yǎng)基,碳源為葡萄糖和蔗糖,氮源為硝酸鉀,光照條件為黑暗 等,有利于進(jìn)行榆黃菇生產(chǎn)時(shí)培養(yǎng)條件的確定,有利于提高產(chǎn)量和經(jīng)濟(jì)效益,對榆黃菇規(guī)?;N植具有一定的指導(dǎo)作用。但該研究只是對榆黃菇菌絲的生長條件進(jìn)行了簡單的單因子試驗(yàn),還有待進(jìn)一步設(shè)計(jì)較完善的復(fù)合因子試驗(yàn)對榆黃菇菌絲的生長條件進(jìn)行研究。