于蕾，胡濱，吳潔，李倩倩，陳寶榮（.北京金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司實(shí)驗(yàn)診斷部，北京 000；.北京化工大學(xué)化學(xué)學(xué)院，北京 0009；.沃特世科技（北京）有限公司，北京 0076）

繼發(fā)性高血壓的精準(zhǔn)診斷是高血壓診療的難點(diǎn)。2020年王夢(mèng)琳等［1］報(bào)道我國(guó)高血壓專(zhuān)科患者中繼發(fā)性高血壓占39.26%。原發(fā)性醛固酮增多癥（primary aldosteronism，PA）是最常見(jiàn)的繼發(fā)性高血壓疾病之一［2-3］?！对l(fā)性醛固酮增多癥診斷治療的專(zhuān)家共識(shí)（2020版）》推薦ARR為PA篩查的首選指標(biāo)［2］。ARR包括醛固酮（aldosterone，Aldo）與血漿腎素活性的比值和醛固酮與血漿腎素濃度的比值兩種形式。放射免疫分析法（RIA）測(cè)定的是腎素活性，即單位時(shí)間內(nèi)血管緊張素原轉(zhuǎn)化為血管緊張素Ⅰ的水平，間接反映血漿中腎素活性水平?；瘜W(xué)發(fā)光法測(cè)定的是腎素濃度。根據(jù)RAAS血壓調(diào)控機(jī)制和既往研究，血管緊張素Ⅰ（angiotensinⅠ，AngⅠ）、血管緊張素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ）和Aldo是PA等繼發(fā)性高血壓篩查和鑒別診斷的主要實(shí)驗(yàn)室依據(jù)［4］。

既往AngⅠ和Aldo的檢測(cè)方法包括RIA、化學(xué)發(fā)光法（CLIA）、高效液相色譜法等［4-6］，而AngⅡ的檢測(cè)方法主要是RIA［6］。由于免疫學(xué)方法測(cè)定上述激素存在非特異性干擾，van der Gugten等［7］建立了液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（liquid chromatography tandem mass spectrometry，LC-MS/MS）測(cè)定AngⅠ的方法，Meunier等［8］建立了LC-MS/MS測(cè)定血漿Aldo的方法。受技術(shù)發(fā)展的限制，直至2021年，Chen等［9］采用LC-MS/MS建立了同時(shí)檢測(cè)腎素活性、AngⅡ和Aldo的方法。鑒于AngⅠ、AngⅡ和Aldo對(duì)PA鑒別診斷的重要價(jià)值，本實(shí)驗(yàn)室在充分研究AngⅠ、AngⅡ和Aldo分子結(jié)構(gòu)與測(cè)量特性的基礎(chǔ)上，建立了一種新的可同時(shí)檢測(cè)上述3種重要血漿成分的LC-MS/MS方法，現(xiàn)介紹如下。

1 材料與方法

1.1 主要儀器與試劑 超高效液相色譜串聯(lián)Xevo TQ-S質(zhì)譜儀（美國(guó)Waters公司）；AcquityTMpremier HSS T3色譜柱（100×2.1 mm，1.8μm，美國(guó)Waters公司）；96孔固相萃取SPE板（Oasis MAXμElution SPE，美國(guó)Waters公司）；Eppendorf手動(dòng)移液器（德國(guó)Eppendorf公司）。

標(biāo)準(zhǔn)品為AngⅠ（純度＞99%，批號(hào)20202120-4，上海譜芬公司）、AngⅡ（純度＞99%，批號(hào)2020421-4，上海譜芬公司）、Aldo（純度＞99.1%，批號(hào)FN05141904，美國(guó)Cerilliant公司）；內(nèi)標(biāo)品為AngⅠ-［13C6，15N］（純度≥95%，批號(hào)1756675，美國(guó)Anaspec公司）、AngⅡ-［13C6，15N］（純度≥95%，批號(hào)1955630，美國(guó)Anaspec公司）、Aldo-［2H7］（純度≥98%，批號(hào)PG1-2019-216A1，美國(guó)Isosciences公司）。甲醇、乙腈、甲酸、異丙醇均為HPLC級(jí)，購(gòu)自德國(guó)Merck公司；氨水（優(yōu)級(jí)純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑公司）、水為一次蒸餾水；牛血清清蛋白（BSA）、磷酸鹽緩沖液（PBS）、大豆胰蛋白酶抑制劑（SBTI）、苯甲基磺酰氟（PMSF）、乙二胺四乙酸（EDTA）、三羥甲基氨基甲烷（Tris-base）均購(gòu)自美國(guó)Sigma-Aldrich公司。

1.2 BSA緩沖液和溫育液配制

1.2.1 BSA緩沖液配制 精密稱(chēng)量0.1 g BSA加入10 mL 0.01 mol/L的PBS緩沖液中，配制成濃度為10 mg/mL的BSA緩沖液。

1.2.2 溫育液配制 稱(chēng)取7.40 g EDTA、12.11 g Tris-base、0.063 g PMSF和0.01 mg SBTI，加入90 mL蒸餾水溶解，用乙酸調(diào)節(jié)pH為5.4～5.5。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和內(nèi)標(biāo)液配制

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)配制

1.3.1.1 單一標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液配制 用十萬(wàn)分之一精密電子天平分別稱(chēng)取AngⅠ、AngⅡ和Aldo標(biāo)準(zhǔn)品各0.02 mg，移液器準(zhǔn)確加入1 mL 20%乙腈溶解，配制濃度均為20μg/mL的單一標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液。

1.3.1.2 混合標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液配制 移取不同體積的單一標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液，20%乙腈稀釋得到AngⅠ、AngⅡ、Aldo濃度為10、0.1、1μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液。

1.3.1.3 S1～S10標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)配制 用BSA緩沖液將混合標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液倍比稀釋至10個(gè)濃度，AngⅠ濃度為0、0.1、0.2、0.5、1、2、5、10、50、100 ng/mL；AngⅡ?yàn)?、0.001、0.002、0.005、0.010、0.020、0.050、0.100、0.500、1.000 ng/mL；Aldo為0、0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、5.0、10.0 ng/mL。

1.3.2 內(nèi)標(biāo)液配制

1.3.2.1 單一內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液配制 稱(chēng)取AngⅠ-［13C6，15N］、AngⅡ-［13C6，15N］和AngⅡ-［13C6，15N］各0.01 mg，移液器取1 mL 20%乙腈溶解，配制濃度均為10μg/mL的單內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液。

1.3.2.2 混合內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液配制 移取不同體積的單內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液，20%乙腈稀釋得到3種化合物對(duì)應(yīng)內(nèi)標(biāo)濃度為50、20、500 ng/mL的混合內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液。1.3.2.3 內(nèi)標(biāo)工作液配制 用20%乙腈稀釋混合內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液至AngⅠ-［13C6，15N］、AngⅡ-［13C6，15N］、Aldo-［13C6，15N］濃度為0.5、0.2、5 ng/mL的內(nèi)標(biāo)工作液。

1.4 樣本前處理

1.4.1 預(yù)處理樣本 分別取200μL待測(cè)樣本，加入200μL溫育液，在37℃溫育3 h后加300μL內(nèi)標(biāo)工作液，得到預(yù)處理樣本。

1.4.2 固相萃取 在96孔正壓裝置上，用200μL含1%甲酸的50%乙腈水溶液活化SPE板。取550 μL預(yù)處理樣本至SPE板上，然后加200μL含1%氨水的10%甲醇洗滌雜質(zhì)。接著將SPE板下方的廢液板更換為96孔樣品板，用40μL含1%甲酸的50%乙腈水溶液洗脫待測(cè)物并收集至樣品板待測(cè)。

1.5 LC-MS/MS分析

1.5.1 色譜條件 色譜柱：AcquityTMpremier HSS T3；柱溫：40℃；進(jìn)樣量：15μL；運(yùn)行時(shí)間：5 min；流動(dòng)相：A為0.1%甲酸水溶液，B為乙腈；流速0.4 mL/min的液相梯度見(jiàn)表1。

表1 流動(dòng)相梯度

1.5.2 質(zhì)譜條件 質(zhì)譜分析采用電噴霧離子源（ESI）；監(jiān)測(cè)模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；毛細(xì)管電壓：1.00 kV；離子源溫度：50℃；去溶劑氣溫度：550℃；去溶劑氣流速：1 100 L/h。AngⅠ、AngⅡ和Aldo的定量監(jiān)測(cè)離子對(duì)質(zhì)荷比（m/z）分別為：433.1＞619.4、349.8＞136.1、359.2＞331.1，對(duì)應(yīng)內(nèi)標(biāo)品定量離子對(duì)（m/z）分別為：435.4＞625.5、352.1＞136.2、367.3＞339.2；碰撞電壓：30 V。

1.6 方法學(xué)性能評(píng)價(jià) 根據(jù)《液相色譜-質(zhì)譜臨床應(yīng)用建議》［10］對(duì)建立的方法進(jìn)行性能評(píng)價(jià)。

1.6.1 線(xiàn)性 取10個(gè)濃度點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)S1～S10，按1.4樣本前處理后，重復(fù)檢測(cè)3次。使用多元回歸方程評(píng)價(jià)線(xiàn)性，記錄線(xiàn)性方程和相關(guān)系數(shù)（r）。各濃度點(diǎn)實(shí)測(cè)值與理論值偏差＜15%，CV＜15%且r＞0.998，可用于樣本定量。

1.6.2 檢出限（LOD）和定量限（LOQ） LOD是指方法在規(guī)定的實(shí)驗(yàn)條件下所能檢出分析物的最低濃度，而LOQ是方法能準(zhǔn)確檢測(cè)的最低濃度。選擇AngⅠ、AngⅡ和Aldo濃度分別為0.1、0.001、0.01 ng/mL，0.2、0.002、0.02 ng/mL，0.5、0.005、0.05 ng/mL的3個(gè)低濃度水平樣本進(jìn)行測(cè)定，每個(gè)濃度水平的樣本重復(fù)檢測(cè)10次。信噪比＞3的最低濃度為本法的LOD。若同時(shí)滿(mǎn)足信噪比＞10且連續(xù)進(jìn)樣CV＜15%的最低濃度為本法的LOQ。

1.6.3 回收率 在正常人低值血漿中分別添加不同濃度的AngⅠ、AngⅡ和Aldo標(biāo)準(zhǔn)品，制備3個(gè)不同濃度水平的待測(cè)樣本。其中，AngⅠ的濃度分別為5.0、20.0、50.0 ng/mL；AngⅡ的濃度分別為0.020、0.080、0.200 ng/mL；Aldo的濃度分別為0.10、0.40、1.00 ng/mL。在同一天內(nèi)完成3個(gè)濃度樣本、每個(gè)濃度樣本重復(fù)6次的檢測(cè)，并同時(shí)測(cè)定空白血漿濃度。每個(gè)樣本按實(shí)測(cè)濃度/理論濃度×100%計(jì)算回收率。

1.6.4 實(shí)驗(yàn)室間比對(duì) 采用本法檢測(cè)2021年國(guó)家衛(wèi)生健康委臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)評(píng)樣本202112、202114、202115的AngⅠ、AngⅡ和Aldo濃度。根據(jù)給定的質(zhì)譜法靶值（多家實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果的穩(wěn)健均值）判斷本室測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1.6.5 精密度 根據(jù)《液相色譜-質(zhì)譜臨床應(yīng)用建議》［10］，測(cè)定低、中、高3個(gè)濃度水平樣本進(jìn)行精密度評(píng)估。每個(gè)濃度水平樣本每天測(cè)量5次，連續(xù)測(cè)3天，計(jì)算同一批次內(nèi)5個(gè)樣本（批內(nèi)）和3個(gè)批次（批間）的變異系數(shù)CV。建議CV應(yīng)＜15%。

1.6.6 基質(zhì)效應(yīng) 選取5人血漿和溶劑基質(zhì)，前處理后分別添加低、高濃度標(biāo)準(zhǔn)品。其中，溶劑基質(zhì)為20%乙腈，添加的AngⅠ、AngⅡ、Aldo低濃度標(biāo)準(zhǔn)品為5.0、0.050、0.50 ng/mL，高濃度為50.0、0.500、5.00 ng/mL。此外，向上述樣本中均加入相同體積的內(nèi)標(biāo)工作液。經(jīng)內(nèi)標(biāo)校正后，若血漿基質(zhì)與溶劑基質(zhì)的信號(hào)比值在85%～115%范圍，可認(rèn)為無(wú)明顯基質(zhì)效應(yīng)。

1.6.7 攜帶污染 即評(píng)估高值樣本對(duì)低值樣本的影響。其中，高值樣本AngⅠ、AngⅡ和Aldo濃度分別為：50.0、0.500、5.00 ng/mL，低值樣本為：0.2、0.002、0.020 ng/mL。首先低值樣本連續(xù)進(jìn)樣5次，然后高、低樣本交替進(jìn)樣5次。計(jì)算連續(xù)進(jìn)樣和交替進(jìn)樣的低值樣本的差值，應(yīng)小于連續(xù)進(jìn)樣的3倍標(biāo)準(zhǔn)差（SD）。

1.6.8 凍融次數(shù) 樣本多次凍融可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，因此進(jìn)行樣本的反復(fù)凍融實(shí)驗(yàn)。選取4例臨床樣本，分別進(jìn)行凍融1、2、3次實(shí)驗(yàn)，查看樣本反復(fù)凍融對(duì)結(jié)果的影響。

1.6.9 參考區(qū)間驗(yàn)證 隨機(jī)選擇25名無(wú)血壓增高的健康志愿者，男性11名，女性14名，年齡23～43歲。采集清晨空腹靜脈血到EDTA-K2抗凝管中，并立即離心（25℃，10 min，離心力1 000×g），采用LC-MS/MS法檢測(cè)各血漿樣本中AngⅠ、AngⅡ和Aldo濃度。

2 結(jié)果

2.1 AngⅠ、AngⅡ和Aldo的代表色譜圖 血漿中AngⅠ、AngⅡ和Aldo的色譜圖見(jiàn)圖1，該方法分析時(shí)間為5 min。AngⅠ、AngⅡ和Aldo能有效分離，峰型對(duì)稱(chēng)，保留時(shí)間分別為1.93、1.83和3.33 min。

圖1 AngⅠ、AngⅡ和Aldo色譜圖

2.2 線(xiàn)性 將AngⅠ、AngⅡ及Aldo的10個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)點(diǎn)S1～S10采用本法檢測(cè)，AngⅠ、AngⅡ和Aldo濃度范圍分別為0.2～50.0 ng/mL、0.002～0.500 ng/mL、0.02～5.00 ng/mL時(shí)，各濃度點(diǎn)實(shí)測(cè)值與理論值偏差均＜10%且CV＜15%。AngⅠ、AngⅡ和Aldo的擬合線(xiàn)性方程為：y＝0.803x+0.021、y＝0.003x-0.001和y＝0.003x（r＝0.999，P＜0.001），線(xiàn)性評(píng)價(jià)通過(guò)。

2.3 LOD和LOQ 樣本中AngⅠ、AngⅡ和Aldo濃度為0.1、0.001、0.01 ng/mL時(shí)，信噪比均＞3，該濃度為本法的LOD。而樣本中AngⅠ、AngⅡ和Aldo濃度為0.2、0.002、0.02 ng/mL時(shí)，連續(xù)進(jìn)樣10次，信噪比均＞20且同時(shí)滿(mǎn)足連續(xù)進(jìn)樣CV為1.8%～9.8%，該濃度為本法的LOQ。

2.4 回收率 采用本法測(cè)定血基質(zhì)空白、低、中、高濃度樣本，去除空白樣本濃度后，AngⅠ、AngⅡ、Aldo的加標(biāo)回收率分別為91%～95%、98%～103%、91%～93%。加標(biāo)回收率均在85%～115%之間，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 AngⅠ、AngⅡ和Aldo的加標(biāo)回收率

2.5 實(shí)驗(yàn)室間比對(duì) 采用本方法測(cè)定國(guó)家衛(wèi)生健康委臨床檢驗(yàn)中心2021年室間質(zhì)評(píng)3個(gè)樣本202112、202114、202115，本方法AngⅠ、AngⅡ和Aldo檢測(cè)值與靶值偏差為-9.7%～7.2%，檢測(cè)結(jié)果全部在國(guó)家衛(wèi)生健康委臨床檢驗(yàn)中心給定的等效范圍內(nèi)（見(jiàn)表3）。

表3 實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)結(jié)果

2.6 精密度 對(duì)低、中、高3個(gè)不同濃度的樣本連續(xù)檢測(cè)3 d、每天檢測(cè)5個(gè)平行樣本，結(jié)果見(jiàn)表4。AngⅠ、AngⅡ和Aldo的批內(nèi)CV分別為1.4%～3.6%、2.2%～5.1%、2.4%～3.3%；批間CV分別為1.5%～4.6%、2.1%～4.4%、3.0%～5.2%，本法精密度良好。

表4 AngⅠ、AngⅡ和Aldo的精密度

2.7 基質(zhì)效應(yīng) 通過(guò)內(nèi)標(biāo)校正后，5名研究對(duì)象血漿基質(zhì)與溶劑基質(zhì)的信號(hào)比值分別為85%～100%（AngⅠ）、90%～109%（AngⅡ）、106%～114%（Aldo），均在85%～115%范圍。表明加入內(nèi)標(biāo)品后，可有效補(bǔ)償基質(zhì)增強(qiáng)或抑制，該方法無(wú)明顯基質(zhì)效應(yīng)。

2.8 攜帶污染 AngⅠ低值樣本連續(xù)進(jìn)樣和高、低值樣本交替進(jìn)樣峰面積差值為173.2，小于連續(xù)進(jìn)樣的3SD（227.6）。因此，當(dāng)AngⅠ樣本濃度低于50 ng/mL時(shí)，攜帶污染可忽略。而AngⅡ和Aldo無(wú)攜帶污染。

2.9 樣本凍融次數(shù) 進(jìn)行樣本反復(fù)凍融實(shí)驗(yàn)，以4例臨床樣本AngⅠ、AngⅡ和Aldo的濃度平均值隨凍融次數(shù)的變化，評(píng)估反復(fù)凍融對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。對(duì)于AngⅠ和Aldo，樣本凍融2次和3次，濃度變化均在1.5%以?xún)?nèi)，無(wú)明顯差異。而AngⅡ，樣本凍融2次變化較小；樣本凍融3次，結(jié)果明顯降低29.5%。因此，建議樣本凍融次數(shù)不超過(guò)2次。

2.10 參考區(qū)間驗(yàn)證 對(duì)臨床表觀正常、無(wú)RAAS相關(guān)基礎(chǔ)疾病的25名健康志愿者樣本采用該方法進(jìn)行檢測(cè)，所有人均為坐位采血。檢測(cè)結(jié)果如下：成人血漿中AngⅠ、AngⅡ、Aldo的濃度范圍分別為1.4～11.8 ng/mL、0.003～0.016 ng/mL、0.02～0.20 ng/mL。腎素活性0.47～3.95 ng·mL-1·h-1，與徐雯等［11］建立的參考區(qū)間（0.25～5.12 ng·mL-1·h-1）一致。AngⅡ濃度與美國(guó)實(shí)驗(yàn)室Mayo Clinic參考區(qū)間0.005～0.040 ng/mL對(duì)應(yīng)［12］。Aldo濃度也與Meunier等［8］測(cè)定范圍（0.02～0.23 ng/mL）相符。

3 討論

采用不同的測(cè)量原理、不同方法學(xué)測(cè)量RAAS的3個(gè)激素時(shí)，由于使用非同源測(cè)量方法常導(dǎo)致臨床測(cè)量結(jié)果合理分析、正確使用難度大。因此，血漿AngⅠ、AngⅡ和Aldo同時(shí)檢測(cè)一直是臨床實(shí)驗(yàn)室的期望。受測(cè)量技術(shù)、儀器性能等的影響，既往一個(gè)方法一般僅能檢測(cè)其中一項(xiàng)。首先，AngⅠ、AngⅡ和Aldo化學(xué)性質(zhì)差異較大，AngⅠ和AngⅡ?yàn)樯锎蠓肿忧译婋x后為多電荷正離子，而Aldo為小分子且電離后為負(fù)離子，要將3種物質(zhì)完全分離并達(dá)到檢測(cè)質(zhì)量要求，對(duì)檢測(cè)儀器性能要求很高；其次，AngⅡ在血漿中含量極低，約5～40 pg/mL，檢測(cè)困難；此外，AngⅠ和AngⅡ均為分子量1 000以上的多肽類(lèi)物質(zhì)，極易與常規(guī)使用的C8色譜柱等發(fā)生吸附作用，因此在檢測(cè)前需耗費(fèi)大量的時(shí)間平衡色譜柱。本研究通過(guò)優(yōu)選色譜柱、色譜條件和離子對(duì)篩選目標(biāo)化合物，并采用正負(fù)離子切換模式進(jìn)行檢測(cè)，在有效分離3種化合物的同時(shí)實(shí)現(xiàn)樣本中AngⅡ檢測(cè)濃度低至2 pg/mL的準(zhǔn)確測(cè)量。

與中山醫(yī)院2021年建立的同時(shí)測(cè)定腎素活性、AngⅡ和Aldo的方法［9］比較，本研究采用TQ-S質(zhì)譜儀，通過(guò)優(yōu)化測(cè)量條件以及選用專(zhuān)為AngⅠ、AngⅡ等多肽大分子設(shè)計(jì)的AcquityTMpremier新型色譜柱，靈敏度顯著提高。在血漿使用量?jī)H200μL條件下，AngⅠ的LOQ 0.2 ng/mL（比較方法0.33 ng/mL）、AngⅡ的LOQ 0.002 ng/mL（比較方法0.015 ng/mL），能更好地滿(mǎn)足臨床檢測(cè)需求。

RIA曾經(jīng)作為腎素活性檢測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)”，可檢測(cè)腎素的范圍是0.2～6.0 ng·mL-1·h-1［13］。而本研究AngⅠ的線(xiàn)性范圍為0.2～50.0 ng/mL，本方法可檢測(cè)的腎素活性范圍為0.07～16.7 ng·mL-1·h-1。對(duì)于AngⅡ和Aldo，CLIA可檢測(cè)的線(xiàn)性范圍均為0.01～1.00 ng/mL，而LC-MS/MS分別為0.002～0.500 ng/mL和0.02～5.00 ng/mL。對(duì)比可知，本研究建立的LC-MS/MS新方法不僅實(shí)現(xiàn)了AngⅠ、AngⅡ和Aldo的同時(shí)準(zhǔn)確測(cè)量，也較傳統(tǒng)方法的檢測(cè)范圍更寬、靈敏度更高。

本方法通過(guò)超高效液相分離技術(shù)有效分離待測(cè)物，通過(guò)同位素內(nèi)標(biāo)品和標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行校正，保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，方法加標(biāo)回收率在89%～102%之間。檢測(cè)國(guó)家衛(wèi)生健康委臨床檢驗(yàn)中心實(shí)驗(yàn)室間質(zhì)量評(píng)價(jià)樣本，其結(jié)果表明本法與其他同類(lèi)實(shí)驗(yàn)室測(cè)量結(jié)果一致性好。另外，采用本法測(cè)量了25名健康成人血漿中AngⅠ、AngⅡ、Aldo濃度，結(jié)果與文獻(xiàn)［8，11-12］報(bào)道一致。鑒于本法測(cè)量原理可靠，其在測(cè)量性能方面已展現(xiàn)出的良好性能，未來(lái)是否能助力PA的實(shí)驗(yàn)室診斷的標(biāo)準(zhǔn)化，還有待進(jìn)一步研究證實(shí)。