曾維軍,秦 維,安常蓉,崇慧影,羅文敏,劉 燕

(貴州省生物研究所，貴州 貴陽 550009)

0 引言

威寧短柱油茶(Camelliaweiningensis)又名怒江紅山茶[1]，是山茶科、山茶屬的一個野生木本油料樹種。這個種垂直分布高，具有抗寒、抗旱、耐瘠薄土壤、早熟、果皮與種殼薄、出仁率與出油率高等特性[2]，是高寒山區(qū)加快林業(yè)發(fā)展，增加農(nóng)民收入的新路徑，發(fā)展威寧短柱油茶產(chǎn)業(yè)，對保護(hù)生物多樣性，促進(jìn)區(qū)域生態(tài)經(jīng)濟(jì)協(xié)調(diào)發(fā)展發(fā)揮重要作用[3-4]。目前，威寧短柱油茶種苗繁育方式主要以種子繁殖為主，種子繁育變異大，育苗周期長，結(jié)果時間晚，性狀分離嚴(yán)重，不適宜大規(guī)模育苗和推廣應(yīng)用。而扦插育苗因簡單易行、不受時間限制、繁殖系數(shù)較高、成本低等優(yōu)點，已成為油茶快繁育苗的主要方式之一[5]。如果用其技術(shù)來繁育威寧短柱油茶，必將在短時間內(nèi)獲得大量繁殖系數(shù)高、成本低、性狀好的種苗，可滿足威寧縣急需發(fā)展威寧短柱油茶5萬畝產(chǎn)業(yè)的種苗需求。油茶扦插繁殖研究雖已有報道[5-9]，但在不同地區(qū)，不同油茶樹種間，其試驗結(jié)果各不相同[10]。威寧短柱油茶扦插繁殖相關(guān)研究還鮮見報道。作者以多年生威寧短柱油茶枝條為試驗材料，對影響其扦插生根的各個因子進(jìn)行研究，從而篩選出威寧短柱油茶最佳扦插繁殖技術(shù)，為威寧地區(qū)快速繁育油茶種苗提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗地點

試驗地位于貴州省畢節(jié)市威寧縣爐山鎮(zhèn)新豐村苗圃地。新豐村地處亞熱帶季風(fēng)濕潤區(qū)，具有低緯度高海拔氣候特點，年平均降雨893 mm，年平均氣溫14 ℃。全年日照時數(shù)為1 495 h，無霜期214 d，適宜多種生物資源生長[11]。

1.2 試驗材料

威寧短柱油茶穗條采自威寧縣草海鎮(zhèn)大山村楊梅山(地理坐標(biāo)：26°75′N，104°34′E)野生油茶林。選擇健康無蟲的油茶樹上當(dāng)年生半木質(zhì)化枝條，將其剪成上剪口平整、下剪口馬蹄狀的插穗，每插穗保留1片完整葉片和1個腋芽(如果葉片過大，可修剪掉1/3葉片)。插穗剪好后立即速蘸生根劑插入土壤，如果不能立即使用，需要給插穗保濕，防止插穗失水。

1.3 試驗方法

1.3.1 扦插基質(zhì)對插穗生根的影響

將扦插基質(zhì)按100%黃心土、80%黃心土+20%珍珠巖、60%黃心土+40%珍珠巖、40%黃心土+60%珍珠巖分成4組，每組基質(zhì)混合均勻后鋪于苗床上，厚約15 cm。5 cm插穗采用1 000 mg/LABT1速蘸5 s后，扦插于4組基質(zhì)上。

1.3.2 插穗長度對插穗生根的影響

將插穗剪成2 cm、5 cm、8 cm長的穗條，將3種長度插穗用1 000 mg/L ABT1速蘸5 s后，扦插于混合基質(zhì)上(60%黃心土+40%珍珠巖，下同)。

1.3.3 扦插時間對插穗生根的影響

選擇2020年3月、4月、5月、6月、7月、8月、9月作為扦插時間，將5 cm插穗用1 000 mg/L ABT1速蘸5 s后，扦插于混合基質(zhì)上。

1.3.4 激素種類對插穗生根的影響

將NAA、IBA、生根粉ABT、雙吉爾-GGR配置成1 000 mg/L溶液的生根劑，將5 cm插穗速蘸各種生根劑5 s，以自來水做對照(CK)，將處理好的插穗扦插于混合基質(zhì)上。

1.3.5 激素濃度對插穗生根的影響

將生根粉ABT配置成濃度500 mg/L、800 mg/L、1 000 mg/L、1 200 mg/L的生根劑，將5 cm插穗速蘸各種生根劑5 s后扦插于混合基質(zhì)上。

1.3.6 扦插方式對扦插苗造林的影響

苗床扦插：在大棚中起畦，將混合基質(zhì)制作成床高15 cm，寬1.2 m，長6 m苗床。將5 cm插穗用1 000 mg/LABT速蘸5s后，扦插于苗床中。容器扦插：選取長10 cm寬9 cm高7.5 cm無紡布育苗袋，裝滿混合基質(zhì)后放入挖好的廂面中，用細(xì)土回填壓實。將5 cm插穗用1 000 mg/L ABT速蘸5 s后，扦插于育苗袋中2種育苗方式繁育的苗術(shù)在培養(yǎng)一年后移栽上山。

以上處理扦插前基質(zhì)需用3%～5%高錳酸鉀溶液噴淋消毒，用竹簽在苗床或育苗袋中扎好孔，插穗插入基質(zhì)后澆足水，用塑料薄膜覆蓋保溫保濕1個月。使用遮光度為75%遮陽網(wǎng)遮陰，棚內(nèi)溫度28 ℃，濕度85%。每個處理扦插200株插穗，3次重復(fù)，共育600株苗。從扦插開始，每隔5 d隨機(jī)抽檢10株插穗，記錄插穗愈傷組織產(chǎn)生時間(出愈時間)和生根時間；培養(yǎng)3個月后隨機(jī)抽取10株插穗，3次重復(fù)，統(tǒng)計愈傷組織誘導(dǎo)率、生根率、生根數(shù)量和主根長度。

1.4 數(shù)據(jù)分析

試驗數(shù)據(jù)采用Excel 2007進(jìn)行整理，使用SPSS 18.0進(jìn)行數(shù)據(jù)單因素方差分析，采用Tukey法進(jìn)行多重比較。

2 試驗結(jié)果

2.1 扦插基質(zhì)對威寧短柱油茶扦插生根的影響

表1結(jié)果顯示，扦插基質(zhì)對威寧短柱油茶插穗生根有顯著影響。在黃心土中加入珍珠巖明顯提前了插穗的出愈時間和生根時間，提高了插穗愈傷組織誘導(dǎo)率、生根率、生根數(shù)量和主根長度，表明扦插基質(zhì)越透氣，威寧短柱油茶生根率越高、生根數(shù)量越多、根越長。60%黃心土+40%珍珠巖和40%黃心土+60%珍珠巖兩種基質(zhì)在扦插生根各個指標(biāo)無顯著性差異(P<0.05)，生根率達(dá)93.33%，但60%黃心土+40%珍珠巖成本較40%黃心土+60%珍珠巖低，故選60%黃心土+40%珍珠巖為適宜的扦插基質(zhì)。

表1 不同扦插基質(zhì)對插穗生根的影響

2.2 插穗長度對威寧短柱油茶扦插生根的影響

插穗長短會影響威寧短柱油茶的扦插效果，主要表現(xiàn)在影響了插穗出愈時間、生根時間、愈傷組織誘導(dǎo)率、生根率、生根數(shù)量(表2)。威寧短柱油茶插穗長度在5 cm適宜，出愈時間、生根時間均較其他兩個長度時間提前，而愈傷組織誘導(dǎo)率、生根率、生根數(shù)量均與其他兩個長度有顯著性差異(P<0.05)，可見插穗過短或過長都會導(dǎo)致生根效果不理想，適宜的扦插長度才能獲得較好的扦插效果。

表2 插穗長度對威寧短柱油茶插穗生根的影響

2.3 扦插時間對威寧短柱油茶扦插生根的影響

扦插時間對威寧短柱油茶生根有顯著性影響(表3)。結(jié)果表明扦插月份不同，威寧短柱油茶出愈時間、生根時間、愈傷組織誘導(dǎo)率、生根率、生根數(shù)量和主根長度上存在較大差異。在連續(xù)扦插的7個月中，3月和8月扦插效果最好，這兩個月插穗出愈時間、生根時間較其他月份早，愈傷組織誘導(dǎo)率、生根率、生根數(shù)量上與其他月份生根指標(biāo)有顯著性差異(P<0.05)，可見，在威寧地區(qū)扦插威寧短柱油茶宜選3月或8月扦插。

表3 不同扦插時間對插穗生根的影響

2.4 外源激素種類對威寧短柱油茶扦插生根的影響

與清水(對照)相比，外源激素處理顯著提高了威寧短柱油茶插穗生根的各個生根指標(biāo)(表4)。4種激素在出愈時間和生根時間上明顯比清水處理時間提前，在愈傷組織誘導(dǎo)率、生根率、生根數(shù)量和主根長度上與對照相比有顯著性差異(P<0.05)。在4種激素中ABT效果最好，其出愈時間和出根時間較其他激素處理早5～10 d，生根率也比其他3種激素高，達(dá)93.33%，生根數(shù)量12條左右，主根長約8 cm。

表4 不同外源激素對插穗生根的影響

2.5 外源激素濃度對威寧短柱油茶扦插生根的影響

表5結(jié)果表明，外源激素濃度顯著影響了威寧短柱油茶扦插效果。隨著濃度增加，愈傷組織誘導(dǎo)率、生根率、生根數(shù)量和主根長都得到了一定程度的提高。尤其是當(dāng)ABT濃度在800 mg/L和1 000 mg/L時威寧短柱油茶扦插生根的各個指標(biāo)較其他處理有顯著性差異(P<0.05)，但兩個濃度間插穗生根指標(biāo)無顯著性差異(P<0.05)。當(dāng)濃度升高到1 200 mg/L時插穗的生根指標(biāo)較800 mg/L和1 000 mg/L兩個濃度生根指標(biāo)又有所降低，可見，生根劑濃度過低或過高對插穗生根都不利，只有適合的濃度才能促進(jìn)插穗的生根。

表5 不同激素濃度對插穗生根的影響

2.6 不同扦插方式對扦插苗移栽造林的影響

對苗床扦插的裸根苗和育苗袋扦插的容器苗進(jìn)行了單位面積出苗量統(tǒng)計和移栽，一年后測量了兩種苗木的成活率、苗高、地徑、冠幅和新梢高度。表6結(jié)果表明，苗床扦插苗雖然在單位面積上的出苗量高于容器扦插苗，但容器扦插苗在移栽后成活率、苗高、地徑、冠幅和新梢高度上均與裸根苗的生長指標(biāo)有顯著性差異(P<0.05)，表明用容器扦插威寧短柱油茶易于在威寧地區(qū)的移栽造林。

表6 不同扦插方式對扦插苗造林的影響

3 討論

3.1 扦插基質(zhì)對威寧短柱油茶插穗生根的影響

扦插基質(zhì)是影響插穗生根及生長重要因子之一，只有適宜的基質(zhì)才能保證插穗基部的氣體交換和水分的供給，獲得理想的生根效果。謝一青等[12]研究顯示，扦插基質(zhì)對油茶嫩枝扦插生根力有顯著影響，不同基質(zhì)中油茶的生根率、生根數(shù)量、根系發(fā)達(dá)程度各不相同。隨著珍珠巖比例的增加，威寧短柱油茶插穗各個生根指標(biāo)也得到提高，尤其是在當(dāng)珍珠巖提高到40%以上時，插穗的生根率均達(dá)了93.33%，表明透氣性好又保溫的基質(zhì)適合威寧短柱油茶扦插繁殖生根。油茶扦插通常采用純河沙[13]、80%紅壤土+ 20%細(xì)沙[5]、60%黃心土+40%細(xì)沙[11]為扦插基質(zhì)。本研究所用基質(zhì)稍和前人研究不同，但一樣取得了較好的扦插效果，可見，只要基質(zhì)透氣性好、保溫保濕都適合植物的扦插育苗。

3.2 扦插時間對威寧短柱油茶插穗生根的影響

適宜的扦插時間對插穗產(chǎn)生不定根有著重要意義。本試驗中，威寧短柱油茶插穗扦插時間設(shè)置了7個處理，結(jié)果表明，3月和8月是威寧短柱油茶最適宜的扦插時間。這兩個月的插穗愈傷組織產(chǎn)生時間、出根時間均較其他月份提前，而愈傷組織誘導(dǎo)率、生根率、生根數(shù)量等指標(biāo)都優(yōu)于他月份扦插苗。這與莊朱輝[14]、莊少芳等[15]研究結(jié)論不一致，他們認(rèn)為油茶以夏插效果較好。這可能與不同油茶樹種、不同扦插條件產(chǎn)生的差異有關(guān)。威寧短柱油茶扦插時間以3月和8月為宜，表明威寧短柱油茶以春插和秋插效果較佳。這與大多數(shù)植物最佳扦插季節(jié)在春季或秋季結(jié)果一致。

3.3 插穗長度對威寧短柱油茶插穗生根的影響

插穗長度對穗條的生根率和生根性狀有顯著影響[16]。本研究結(jié)果顯示，威寧短柱油茶插穗長5 cm適宜，其各個生根指標(biāo)均與于2 cm和8 cm插穗的生根指標(biāo)有顯著性差異(P<0.05)。表明過長或過短的插穗都會影響威寧短柱油茶的扦插效果。插穗過短，穗條插入基質(zhì)較淺，影響了穗條對水分吸收；穗條過長，暴露在基質(zhì)外的部位較多，穗條表面的水分蒸發(fā)量較大，容易導(dǎo)致穗條脫水，這些都容易造成穗條愈傷組織誘導(dǎo)和生根率低。曾金華[17]研究發(fā)現(xiàn)，香樟插穗在10 cm時生根率最高。本研究中威寧短柱油茶的插穗在5 cm時生根率最高，可見，植物不同其最適宜的插穗長度也存在差異，應(yīng)根據(jù)植物的特性來選取最適宜的長度才能獲得理想的扦插效果。

3.4 外源激素對威寧短柱油茶插穗生根的影響

外源激素顯著影響了植物的扦插繁殖，它主要是重新分配了插穗體內(nèi)的養(yǎng)分和激素，促使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)和激素聚集于插穗基部，繼而促進(jìn)愈傷組織及根原基的發(fā)生，加快生根進(jìn)程[18]。本研究中，與清水(對照)相比，外源激素處理顯著提高了威寧短柱油茶插穗生根的各個指標(biāo)。主要表現(xiàn)為縮短了插穗出愈時間和生根時間，提高了插穗愈傷組織誘導(dǎo)率、生根率、生根數(shù)量和主根長度?？梢姡庠醇に貙ν幎讨筒璨逅肷酗@著性影響。在4種外源激素中，ABT生根粉效果最好，其插穗生長指標(biāo)較NAA、IBA和GGR有顯著性差異。這與田如英[11]、謝一青等[12]的研究結(jié)果相似。ABT生根粉是由IAA和NAA按一定比例混合研制，它不僅生根率高，還兼具NAA產(chǎn)生的根粗和IAA產(chǎn)生根多的優(yōu)點，能極大縮短插穗產(chǎn)生愈傷組織和生根時間。可見，這種混合型生根劑較單一激素更適合威寧短柱油茶扦插繁殖。

3.5 激素濃度對威寧短柱油茶插穗生根的影響

在植物扦插繁殖中，除外源激素種類會影響扦插效果外，外源激素濃度也會對扦插生根造成顯著影響[19]。外源激素濃度適宜時有助于愈傷組織誘導(dǎo)和插穗生根及根系生長，濃度過高時易對插穗組織造成傷害，抑制插穗生根和根系生長[20]。本研究中，ABT生根劑濃度過低(500 mg/L)或過高(1 200 mg/L)對威寧短柱油茶插穗生根都不利，只有當(dāng)ABT生根劑濃度在800～1 000 mg/L時速蘸5 s后扦插出來的插穗生根率才達(dá)到了90%以上，表明800～1 000 mg/L為ABT生根劑速蘸生根的適宜濃度，這個濃度有助于威寧短柱油茶插穗的愈傷組織誘導(dǎo)和根系發(fā)育。

4 結(jié)論

結(jié)果表明，威寧短柱油茶以5 cm長的插穗在濃度800～1 000 mg/L ABT1生根劑中速蘸5 s后在3月或8月扦插在60%黃心土+40%珍珠巖基質(zhì)中效果較好，生根率可達(dá)93.33%，生根數(shù)量為12條，根長約為8 cm。在威寧地區(qū)適宜容器扦插，在后續(xù)造林時容器苗的成活率、苗高、地徑等生長指標(biāo)均優(yōu)于苗床扦插苗。