汪國(guó)武,姚 遠(yuǎn),張 雨,徐 娜,劉 芳

（1.石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，新疆 石河子 832000；2.四川省遂寧市中心醫(yī)院婦科，四川 遂寧 629000；3.新疆維吾爾自治區(qū)石河子市人民醫(yī)院婦科，新疆 石河子 832000；4.南方醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院婦科，廣東 廣州 510900）

子宮內(nèi)膜癌（endometrial carcinoma，EC）是女性生殖系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，由于其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，在國(guó)內(nèi)外均具有較高的死亡率，EC已成為醫(yī)學(xué)和社會(huì)亟待解決的棘手問(wèn)題之一［1-2］。研究［3-5］顯示：非編碼RNA在EC發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用，尤其是微小RNA（microRNAs，miRNAs）對(duì)調(diào)控EC細(xì)胞增殖、侵襲和遷移起重要作用。miRNAs是一類小的非編碼RNA，能抑制mRNA的 翻 譯 或 促 進(jìn) 其 降 解［6］。研 究［7-9］顯 示：微 小RNA-152（microRNA-152，miR-152）在多種惡性腫瘤的增殖、侵襲和遷移過(guò)程中發(fā)揮作用。近些年來(lái)miR-152在EC中的作用也受到越來(lái)越多學(xué)者的關(guān)注。通過(guò)EC的miRNA表達(dá)譜發(fā)現(xiàn)了miR-152在EC組 織 中 低 表達(dá)［10］，動(dòng) 物實(shí) 驗(yàn)［11］結(jié) 果顯 示miR-152參與了子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的增殖，但miR-152如何調(diào)控代謝在EC發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮的作用尚不清楚。低密度脂蛋白受體（low-density lipoprotein receptor，LDLR）是低密度脂蛋白（low-density lipoprotein，LDL）的受體，其可調(diào)控LDL的胞吞作用，對(duì)維持人體中膽固醇穩(wěn)態(tài)和血漿中LDL處于相對(duì)恒定的水平具有重要作用［12］。研究［13］顯示：異常的LDLR與多種癌癥的發(fā)生密切相關(guān)。本研究探討miR-152對(duì)EC細(xì)胞增殖和侵襲的影響及其與靶基因LDLR的關(guān)系，為研究EC的發(fā)病機(jī)制和靶向治療方案提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 組織來(lái)源選取2017年9月—2019年12月石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院婦科收治且病理檢查診斷為EC的患者21例作為腫瘤組，同期收治的39例非EC但行子宮切除術(shù)者作為對(duì)照組。腫瘤組和對(duì)照組患者內(nèi)膜組織標(biāo)本與年齡、身高、體質(zhì)量（body mass，BM）、體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）、收縮壓（systolic blood pressure，SBP）、舒張 壓（diastolic blood pressure，DBP）、腰 圍（waistline circumference，WC）和腹圍（abdomina circumference，AC）等臨床資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。檢測(cè)2組患者甘油三酯（triglyceride，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、LDL、高密度脂蛋白（highdensity lipoprotein，HDL）和Ki-67水平。所有患者在術(shù)前均未行放化療治療。

1.2 細(xì)胞、主要試劑和儀器EC RL 95-2細(xì)胞和293T細(xì)胞購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞庫(kù)。實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（real-time fluorescence quantitative PCR，RT-qPCR）實(shí)驗(yàn)所需試劑均購(gòu)自北京天根生化有限公司，蛋白Marker購(gòu)自美國(guó)Thermo公司，LDLR抗體（1∶500）和β-actin抗體（1∶10 000）均購(gòu)自美國(guó)Abcam公司，二抗（羊抗鼠/兔）和ECL發(fā)光液購(gòu)自廣州碧云天公司，1640培養(yǎng)基、青/鏈霉素、澳洲胎牛血清和0.25%胰酶均購(gòu)自美國(guó)Gibco公司，CCK-8試劑盒購(gòu)自日本Dojindo公司，Lipofectamine 2000試劑盒和TRIzol購(gòu)自美國(guó)Invitrogen公司，Matrigel基質(zhì)膠和Transwell小室購(gòu)自美國(guó)Corning公司，miR-152 mimics、pcDNA 3.1-LDLR和對(duì)照序列均購(gòu)自上海吉瑪公司，雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒購(gòu)自美國(guó)Promega公司。電泳儀購(gòu)自美國(guó)Bio-Rad公司，酶標(biāo)儀購(gòu)自美國(guó)Thermo Fisher公司，CO?細(xì)胞培養(yǎng)箱購(gòu)自上海力康醫(yī)療設(shè)備有限公司，倒置顯微鏡購(gòu)自德國(guó)蔡司公司。

1.3 生物信息學(xué)軟件預(yù)測(cè)miR-152下游靶基因采用生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)TargetScan 7.2（www.targetscan.org）和miRDB（www.mirdb.org）數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)miR-152的下游靶基因及其評(píng)分。

1.4 RT-qPCR法檢測(cè)子宮內(nèi)膜組織和細(xì)胞中miR-152及LDLR m RNA表達(dá)水平采用液氮將組織和細(xì)胞研磨至粉末狀，向其加入TRIzol試劑提取總RNA，檢測(cè)其濃度和完整性，對(duì)檢測(cè)合格的樣本分別按照PrimeScript RT Reagent Kit with gDNA Eraser試劑盒和RT-qPCR試劑盒說(shuō)明書(shū)逆轉(zhuǎn)錄和加樣，引物序列：miR-152 Forward 5′-GATAATTGGCCTTGCCAGTA-3′， miR-152 Reverse 5′-GTGTGTAGAGGTCAGGAAGT-3′；U6-Forward 5′-GGTAGCCGCGGTTGAAATGG-3′，U6-Reverse 5′-CAGTAAGCAGTAAAGTCGA-3′；LDLR-Forward 5′-CTGTAGGGGTCTTTACGTGTTC-3′，LDLR-Reverse 5′-GTTTTCCTCGTCAGATTTGTCC-3′；以β-actin作為內(nèi)參。采用2－△△Ct法計(jì)算內(nèi)膜組織和細(xì)胞中miR-152和LDLR mRNA的表達(dá)水平。

1.5 Western blotting法檢測(cè)子宮內(nèi)膜組織和細(xì)胞中LDLR蛋白表達(dá)水平組織和細(xì)胞總蛋白的提取按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，對(duì)其進(jìn)行濃度測(cè)定，計(jì)算總蛋白濃度后依次進(jìn)行點(diǎn)樣電泳。將電泳后的產(chǎn)物切膠，采用電轉(zhuǎn)系統(tǒng)（300 mA）將10%SDSPAGE凝膠電泳轉(zhuǎn)移至PVDF膜上。采用5%脫脂牛奶搖床密封1 h，PBST清洗PVDF膜，采用LDLR抗體（1∶500）于4℃搖床上孵育過(guò)夜，PBST清洗PVDF膜，將其置入稀釋好的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗體（1∶500）中室溫下孵育1 h，采用極敏感ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒（P0018FT）進(jìn)行曝光成像，以β-actin（1∶10 000）作為內(nèi)參蛋白，采用Image J軟件分析目的蛋白和內(nèi)參蛋白條帶灰度值，計(jì)算目的蛋白表達(dá)水平。目的蛋白表達(dá)水平=目的蛋白條帶灰度值/內(nèi)參β-actin條帶灰度值。

1.6 免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)子宮內(nèi)膜組織中LDLR表達(dá)情況免疫組織化學(xué)檢測(cè)的操作按照EnVision兩步法操作說(shuō)明進(jìn)行。LDLR免疫組織化學(xué)檢測(cè)抗體進(jìn)行檢測(cè)（1∶250），Ki-67抗體（克隆號(hào)MIB.I）由北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司提供，結(jié)果判讀由石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院病理科2名副主任醫(yī)師獨(dú)立盲審，根據(jù)腫瘤細(xì)胞陽(yáng)性比例和細(xì)胞膜著色深度進(jìn)行綜合評(píng)分?？偡帧?分判讀為陽(yáng)性表達(dá)，總分＜3分判讀為陰性表達(dá)。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：①按腫瘤細(xì)胞陽(yáng)性比例進(jìn)行評(píng)分，同一顯微鏡下計(jì)算腫瘤細(xì)胞陽(yáng)性數(shù)，染色陽(yáng)性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞的比例＜10%計(jì)0分，10%≤比例＜30%計(jì)1分，30%≤比例＜70%計(jì)2分，比例≥70%計(jì)3分；②按細(xì)胞著色深度評(píng)分，無(wú)著色計(jì)0分，呈淡棕黃色計(jì)1分，棕黃色計(jì)2分，棕褐色計(jì)3分。

1.7 細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染和分組RL 95-2細(xì)胞采用1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%FBS+1%雙抗青霉素鏈霉素培養(yǎng)液，培養(yǎng)條件為37℃、5%CO2飽和濕度，采用0.25%胰酶消化對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期的RL 95-2細(xì)胞，選取傳代3代的RL95-2細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染。根據(jù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染物質(zhì)的不同，分為空質(zhì)粒組（轉(zhuǎn)染miR-NC空質(zhì)粒）、miR-152組（轉(zhuǎn)染miR-152-mimics）、miR-152-mimics+pcDNA 3.1-vector組（同時(shí)轉(zhuǎn)染miR-152 mimics和pcDNA 3.1-vector） 和miR-152-mimics+pcDNA 3.1-LDLR組（同時(shí)轉(zhuǎn)染miR-152-mimics和pcDNA 3.1-LDLR）。轉(zhuǎn)染步驟嚴(yán)格參照Lipofectamine 2000試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)48 h，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.8 CCK-8法檢測(cè)各組RL 95-2細(xì)胞增殖率將各組成對(duì)數(shù)生長(zhǎng)的RL 95-2細(xì)胞消化后重懸，在96孔板中每孔加入3×103個(gè)細(xì)胞，置入培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。24 h后，將舊培養(yǎng)基丟棄，每孔加入100μL含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基和10μL CCK-8溶液，置入培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)1 h，于450 nm處檢測(cè)3組細(xì)胞的吸光度（A）值，以A值代表各組RL 95-2細(xì)胞增殖率，每組細(xì)胞設(shè)置3個(gè)復(fù)孔。在48、72和96 h時(shí)，再次進(jìn)行上述操作，并采用GraphPad Prism 8軟件進(jìn)行繪圖。

1.9 Transewell法檢測(cè)各組侵襲細(xì)胞數(shù)冰上將Matrigel按照1∶10的比例與預(yù)冷的無(wú)血清DMEM培養(yǎng)基混勻，在Transewell小室中加入上述混合液100μL，在培養(yǎng)箱中孵育1 h使其凝結(jié)成膠。之后在每個(gè)Transewell小室上部加入200μL無(wú)血清DMEM與含4×104個(gè)RL 95-2細(xì)胞的混懸液，小室下部加入600μL含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，置入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，每組細(xì)胞均設(shè)置3個(gè)復(fù)孔。24 h后，采用棉棒擦拭Transewell小室上層細(xì)胞，4%多聚甲醛固定30 min后采用結(jié)晶紫染色20 min后拍照。

1.10 雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)檢測(cè)各組293T細(xì)胞中熒光素酶活性將構(gòu)建好的LDLR野生型或突變型序列插入至pmiR質(zhì)粒載體中，隨后重組的Mut-LDLR和WT-LDLR載體與miR-152-mimic共同轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞中，培養(yǎng)24 h后去除培養(yǎng)液，PBS洗滌3次，加入細(xì)胞裂解液，收集細(xì)胞用于雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)分析熒光素酶活性。熒光素酶活性=螢火蟲(chóng)熒光素酶活性/海腎熒光素酶活性。

1.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件和Graphpad Prism 8.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。腫瘤組和對(duì)照組患者子宮內(nèi)膜組織中miR-152和LDLR mRNA表達(dá)水平、RL 95-2細(xì)胞增殖率、侵襲細(xì)胞數(shù)和細(xì)胞熒光素酶活性均符合正態(tài)分布，以±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間樣本均數(shù)兩兩比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，miR-152與LDLR mRNA在EC內(nèi)膜組織中表達(dá)的相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析法。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 2組患者一般資料和生化指標(biāo)腫瘤組和對(duì)照組患者年齡、SBP、DBP及HDL比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；此外，腫瘤組患者BMI、BM、WC、TC、TG和LDL均明顯高于對(duì)照組（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 2組患者一般資料和生化指標(biāo)T ab.1 General data and biochemical indexes of patients in two groups

2.2 miR-152與LDLR的靶向關(guān)系采用生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)TargetScan預(yù)測(cè)LDLR與miR-152存在一定的互補(bǔ)堿基對(duì)，構(gòu)建了LDLR的野生型（WT）或突變型（Mut）3′UTR的質(zhì)粒，見(jiàn)表2。并采用miRDB數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)靶基因LDLR的分值，LDLR的評(píng)分為99分。見(jiàn)表3。

表2 TargetScan預(yù)測(cè)miR-152與LDLR的靶向關(guān)系Tab.2 Targeting relationship between miR-152 and LDLR predicted by TargetScan

表3 miRDB數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)靶基因LDLR的分值Tab.3 Score of target gene LDLR predicted by miRDB database

2.3 2 組患者子宮內(nèi)膜組織中miR-152和LDLR mRNA及蛋白表達(dá)水平腫瘤組患者子宮內(nèi)膜組織中miR-152表達(dá)水平明顯低于對(duì)照組（P＜0.05），LDLR mRNA和蛋白表達(dá)水平均明顯高于對(duì)照組（P＜0.05或P＜0.01）。免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示：腫瘤組患者子宮內(nèi)膜組織中LDLR陽(yáng)性表達(dá)率為66.67%（14/21），對(duì)照組患者子宮內(nèi)膜組織中LDLR陽(yáng)性表達(dá)率為30.77%（12/39），組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。對(duì)LDLR mRNA的表達(dá)與miR-152表達(dá)水平相關(guān)性分析結(jié)果顯示：LDLR mRNA表達(dá)水平與miR-152表達(dá)水平呈 負(fù) 相 關(guān) 關(guān) 系（r=－0.4387，P＜0.05）。對(duì)LDLR mRNA表達(dá)與患者一般資料及生化指標(biāo)的相關(guān)性分析結(jié)果顯示：LDLR mRNA表達(dá)水平與患者Ki-67、BMI、TC、TG、BM和WC均呈正相關(guān) 關(guān) 系（r=0.4490，r=0.4377，r=0.4472，r=0.4706，r=0.5882，r=0.5130，P＜0.05）。見(jiàn)圖1～4。

圖1 2組患者子宮內(nèi)膜組織中miR-152和LDLR mRNA及蛋白表達(dá)水平Fig.1 Expression levels of miR-152 and LDLR mRNA and proteins in endometrial tissue of patients in two groups

圖2 2組患者子宮內(nèi)膜組織中LDLR蛋白表達(dá)電泳圖Fig.2 Electrophoregram of expressions of LDLR protein in endometrial tissue of patients in two groups

圖3 免疫組織化學(xué)檢測(cè)2組患者子宮內(nèi)膜組織中LDLR蛋白表達(dá)情況（×100）Fig.3 Expressions of LDLR protein in endometrial tissue of patients in two groups detected by immunohistochemistry(×100)

圖4 miR-152表達(dá)水平與LDLR mRNA表達(dá)水平的相關(guān)性Fig.4 Correlation between miR-152 expression level and LDLR mRNA expression level

2.4 miR-152過(guò)表達(dá)后各組RL 95-2細(xì)胞增殖率和侵襲細(xì)胞數(shù)CCK-8法檢測(cè)結(jié)果顯示：轉(zhuǎn)染miR-152 mimics后，miRNA-152 mimics組細(xì)胞增殖率較對(duì)照組和miRNA-NC組明顯降低（P=0.048，P=0.032）。Transwell實(shí)驗(yàn)在400倍顯微鏡下隨機(jī)選取5個(gè)視野進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)：miR-152 mimics組和miRNA-NC組侵襲細(xì)胞數(shù)分別為（145.21±8.32）個(gè)和（49.21±6.46）個(gè)，miR-152 mimics組侵襲細(xì)胞數(shù)明顯多于miR-NC組。見(jiàn)圖5和6。

圖5 CCK-8法檢測(cè)miR-152過(guò)表達(dá)后各組RL 95-2細(xì)胞增殖率Fig.5 Proliferation rates of RL 95-2 cells in various groups after over-expression of miR-152 detected by CCK-8 method

2.5 LDLR作用后各組RL 95-2細(xì)胞增殖率和侵襲細(xì)胞數(shù)將miR-152 mimics和pcDNA 3.1-LDLR或pcDNA 3.1-vector空載體轉(zhuǎn)染至RL 95-2細(xì)胞，于轉(zhuǎn)染48 h后收集細(xì)胞。通過(guò)CCK-8法和Transwell試劑盒檢測(cè)轉(zhuǎn)染后EC細(xì)胞增殖和侵襲能力結(jié)果顯示：轉(zhuǎn)染72和96 h時(shí)，miR-152 mimics+pcDNA 3.1-LDLR組細(xì)胞增殖率明顯高于miR-152 mimics組和miR-152 mimics+pcDNA 3.1-vector組（P＜0.01），見(jiàn)圖7。Transwell法檢測(cè)中在400倍顯微鏡下隨機(jī)選取3個(gè)視野進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，miR-152 mimics+pcDNA 3.1-LDLR組、miR-152 mimics組和miR-152 mimics+pcDNA 3.1-vector侵襲細(xì)胞數(shù)分 別 為 （92.23±5.46）、（41.34±3.78） 和（37.92±4.13）個(gè)，即miR-152 mimics+pcDNA 3.1-LDLR組侵襲細(xì)胞數(shù)明顯高于miR-152 mimics組和miR-152 mimics+pcDNA 3.1-vector 組 （P＜0.01）。見(jiàn)圖7和8。

圖7 CCK-8法檢測(cè)各組RL 95-2細(xì)胞增殖率Fig.7 Proliferaton rates of RL 95-2 cells in various groups detected by CCK-8 method

表4 LDLR mRNA表達(dá)水平與EC患者一般資料和生化指標(biāo)相關(guān)性Tab.4 Correlations between expression level of LDLR and general data,biochemical indexes of patients with EC

2.6 各組293T細(xì)胞中熒光素酶活性與對(duì)照組比較，miR-152 mimics組轉(zhuǎn)染野生型（WT）LDLR 3′UTR載體的293T細(xì)胞熒光素酶活性明顯降低（P＜0.01）。見(jiàn)圖9。

圖6 Transwell法檢測(cè)miR-152過(guò)表達(dá)后2組RL 95-2細(xì)胞侵襲能力（結(jié)晶紫，×100）Fig.6 Invasion abilities of RL 95-2 cells in two groups after over-expression of miR-152 detected by Transwell assay(Crystal violet,×100)

圖9 雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)檢測(cè)2組293T細(xì)胞中熒光素酶活性Fig.9 Luciferase activities of 293T cells in two groups detected by dual luciferase reporter gene assay.

3 討 論

miRNAs是只有20個(gè)核苷酸片段的內(nèi)源性非編碼RNA，雖然不直接參與蛋白質(zhì)表達(dá)，卻通過(guò)與靶基因結(jié)合，參與調(diào)控約1/3的蛋白質(zhì)表達(dá)［14-15］。近年來(lái)研究［16-17］顯示：多種miRNAs與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切，在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮抑癌或促癌作用，與下游靶基因相互作用在細(xì)胞增殖、分化、凋亡和侵襲遷移中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。

圖8 Transwell法檢測(cè)各組RL 95-2細(xì)胞侵襲能力（結(jié)晶紫，×100）Fig.8 Invasion abilitiesof RL 95-2cellsin variousgroupsdetected by Transwell assay(Crystal violet,×100)

miR-152是miR-152/148a/148b家族成員之一，首先發(fā)現(xiàn)于小鼠的結(jié)腸組織中，位于11號(hào)染色體上，之后在人類組織中被發(fā)現(xiàn)，位于人17號(hào)染色體上，在多種惡性腫瘤組織中異常表達(dá)［18］，與多種惡性腫瘤的預(yù)后關(guān)系密切，如miR-152通過(guò)抑制靶基因DNMT 1的表達(dá)，抑制卵巢癌細(xì)胞增殖，促進(jìn)細(xì)胞凋亡［19］。此外miR-152可以靶向KLF5抑制宮頸癌細(xì)胞的增殖和細(xì)胞周期［20］。上述研究均提示miR-152在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮抑癌作用，但在鼻咽癌中，miR-152抑制癌細(xì)胞的凋亡，通過(guò)靶向PTEN的表達(dá)促進(jìn)細(xì)胞的增殖［21］，證實(shí)了miR-152在不同的腫瘤中表達(dá)不同，并且生物功能也不同。本研究檢測(cè)腫瘤組和對(duì)照組患者子宮內(nèi)膜組織中miR-152表達(dá)結(jié)果顯示：腫瘤組患者子宮內(nèi)膜組織中miR-152表達(dá)水平較對(duì)照組明顯降低，過(guò)表達(dá)RL 95-2細(xì)胞中miR-152表達(dá)可抑制EC細(xì)胞的增殖和侵襲能力，miR-152與EC的惡性進(jìn)展有關(guān)。

LDLR是其家族的第一個(gè)成員，該家族由多個(gè)跨膜糖蛋白組成［22］。這些跨膜糖蛋白主要負(fù)責(zé)內(nèi)化脂蛋白、外毒素和其他細(xì)胞外配體，最后被溶酶體降解［23］。研究［24-25］顯示：LDLR與許多癌癥相關(guān)，例如LDLR的表達(dá)與前列腺癌和宮頸癌的臨床預(yù)后密切相關(guān)。最近文獻(xiàn)［26］報(bào)道：在肝細(xì)胞癌中，LDLR是肝癌患者預(yù)后因素，并且下調(diào)LDLR可提高細(xì)胞內(nèi)膽固醇合成，加速肝癌細(xì)胞的增殖，其機(jī)制部分歸因于激活MEK/ERK信號(hào)通路。本研究結(jié)果顯示：腫瘤組患者子宮內(nèi)膜組織中LDLR高表達(dá)，提示LDLR與EC的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，并且腫瘤組患者子宮內(nèi)膜組織中LDLR的表達(dá)與Ki-67、BMI、TC、TG、BM和WC呈正相關(guān)關(guān)系，與miR-152表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，即高血脂及肥胖的EC患者LDLR表達(dá)越高，EC細(xì)胞的增殖活力越強(qiáng)。因此，過(guò)表達(dá)miR-152可抑制EC細(xì)胞增殖和侵襲，再次加入LDLR后，EC細(xì)胞的增殖和侵襲得到恢復(fù)，提示miR-152通過(guò)抑制LDLR表達(dá)影響EC細(xì)胞增殖和侵襲。

綜上所述，miR-152過(guò)表達(dá)對(duì)EC細(xì)胞的增殖和侵襲具有抑制作用，其機(jī)制可能與降低LDLR表達(dá)有關(guān)，本研究結(jié)果為EC的治療提供了新靶點(diǎn)，但miR-152是否調(diào)控腫瘤其他惡性行為尚不清楚，有待進(jìn)一步研究。