黃太華，吳 璇，呂繼蓉，史海濤，郭春華*，張正帆

(1.西南民族大學(xué) 畜牧獸醫(yī)學(xué)院，四川 成都 610041；2.四川省動物采食調(diào)控工程技術(shù)研究中心，四川 成都 611130)

0 引言

【研究意義】在我國反芻動物養(yǎng)殖中，由于蛋白質(zhì)資源緊缺、加上利用率偏低，飼料蛋白質(zhì)的添加已成為制約我國反芻動物健康發(fā)展的主要因素之一，而氨基酸營養(yǎng)可為該問題提供解決思路。蛋氨酸(DL-Methionine，Met)是反芻動物主要限制性氨基酸，其能在蛋氨酸轉(zhuǎn)導(dǎo)酶的作用下，參與一系列生物化學(xué)反應(yīng)，調(diào)節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收[1]。由于瘤胃的特殊性，日糧中直接添加蛋氨酸會導(dǎo)致瘤胃中的微生物對其進行降解，導(dǎo)致蛋氨酸的利用率僅為40%～80%，不能有效地對其進行吸收和利用[2-4]。因此，采用過瘤胃保護技術(shù)生產(chǎn)過瘤胃蛋氨酸(Rumen-protected methione，RP-Met)，保護蛋氨酸可安全地經(jīng)瘤胃直接進入小腸，從而使蛋氨酸利用率大大提升[5]，對緩解蛋白質(zhì)飼料緊張、促進反芻動物的健康生長具有重要意義。【前人研究進展】蛋氨酸作為添加劑在畜禽上已得到廣泛應(yīng)用，然而過瘤胃蛋氨酸在反芻動物的研究起步較晚，且多集中在奶牛以及綿羊方面，在山羊上的應(yīng)用研究較少[6-8]。CHEN等[9]研究表明，在肉羊全混合日糧(TMR)中補充過瘤胃賴氨酸和過瘤胃蛋氨酸可顯著提高肉羊的平均日采食量并提高日增重。斯欽[10]研究表明，內(nèi)蒙古細(xì)毛羯羊飼糧中加入過瘤胃蛋氨酸，有利于提升羯羊的生長性能、增加平均日增重。王萌等[11]研究表明，添加4 g/d的過瘤胃蛋氨酸，與對照組相比，能明顯改善灘羊體重，并使其日增重增加43.25%?，F(xiàn)有研究表明，日糧添加過瘤胃蛋氨酸可提高肉羊日增重、降低料重比[12-14]。然而，張艷梅等[15]研究表明，在試驗山羊日糧中加入過瘤胃蛋氨酸后，其日增重、干物質(zhì)采食量和料重比均不受影響。OBEIDAT[16]研究表明，羔羊氨基酸平衡模式的蛋氨酸需要量為0.38%。燕磊[17]在小尾寒羊日糧中添加質(zhì)量比為0.485%過瘤胃蛋氨酸可極顯著提高氮的沉積。李向龍[18]研究表明，過瘤胃蛋氨酸可提升肉羊血清總蛋白、白蛋白、球蛋白和葡萄糖的含量，降低尿素氮的含量。而王菲等[19]在低蛋白水平飼糧添加過瘤胃蛋氨酸，結(jié)果顯示，過瘤胃蛋氨酸對黔北麻羊血漿總蛋白、白蛋白、總氨基酸、尿素氮、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶沒有影響?！狙芯壳腥朦c】綜上可知，過瘤胃蛋氨酸在反芻動物生產(chǎn)中發(fā)揮重要作用。然而，過瘤胃蛋氨酸在反芻動物中的應(yīng)用也存在一些問題，如在反芻動物日糧中適宜添加量尚不清楚，添加量與不同日糧粗蛋白水平之間還需要找到一個平衡點。由于研究動物的種類、日齡以及日糧構(gòu)成的差異，過瘤胃蛋氨酸的適宜添加量也有所差異。目前，過瘤胃蛋氨酸在川中黑山羊的研究尚屬空白?！緮M解決的關(guān)鍵問題】以剛斷奶的川中黑山羊為研究對象，在全混合日糧(TMR)中添加不同水平過瘤胃蛋氨酸，研究其對生長性能、血清指標(biāo)及經(jīng)濟效益的影響，以期獲得川中黑山羊過瘤胃蛋氨酸的適宜添加量，為川中黑山羊日糧配方的設(shè)計、飼養(yǎng)方案的優(yōu)化提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試羔羊 供試羔羊為四川省成都市金堂縣金羊羊生態(tài)養(yǎng)殖基地提供的川中黑山羊健康斷奶羔羊，共48只(公母各半)，日齡為(55±5)d，體重為(15.58±2.69)kg。

1.1.2 基礎(chǔ)日糧和添加劑 羔羊基礎(chǔ)日糧為顆粒全混合日糧(TMR)，配方見表1。添加劑為包被蛋氨酸(過瘤胃蛋氨酸)，由杭州康德權(quán)生物科技有限公司提供，其蛋氨酸含量為75%。

表1 不同比例包被蛋氨酸添加試驗羔羊日糧組成及營養(yǎng)水平(絕干基礎(chǔ))

1.2 試驗設(shè)計

根據(jù)羔羊體重采用單因素隨機區(qū)組設(shè)計，分成4個組，每個組3個重復(fù)，每個重復(fù)4只羊。對照組(CK)飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗組在基礎(chǔ)日糧中分別添加質(zhì)量比為0.25%(處理1)、0.51%(處理2)、0.76%(處理3)過瘤胃蛋氨酸，折合蛋氨酸純添加水平(質(zhì)量比)0.19%、0.38%和0.57%。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗于2019年6—8月在四川省成都市金堂縣金羊羊生態(tài)養(yǎng)殖基地進行，試驗前圈舍進行徹底清潔消毒。試驗羔羊在預(yù)飼前打上耳標(biāo)、公羔去勢、注射三聯(lián)四防疫苗，注射伊維菌素進行驅(qū)蟲，其他免疫按羊場相關(guān)程序進行。每日于7:30、12:30和17：30時飼喂3次飼料，自由采食及飲水。每天清掃圈舍，預(yù)飼期15 d，試驗期60 d。試驗羔羊日糧參照NRC(2007)山羊營養(yǎng)需要配制。

1.4 樣品采集與指標(biāo)測定

1.4.1 生長性能 試驗正式期，記錄第1天和第60天的體重(空腹12 h的體重)，每天記錄試驗期全混合日糧(TMR)的飼喂量和剩余量，計算平均日增重、平均日采食量及料重比。

1.4.2 血清指標(biāo) 試驗結(jié)束后，每個處理組隨機挑選4只(共16只)試驗羔羊，早晨空腹頸靜脈采血液10 mL,置于離心管中，3 000 r/min離心8 min，吸取上層血清，置于-20℃冰箱保存，委托成都里來生物科技公司檢測相關(guān)血清指標(biāo)。

1.4.3 經(jīng)濟效益 考慮每只羔羊的其他投入均一致，經(jīng)濟效益分析時，計算投入飼料總成本和銷售總收入，總收入扣除總成本后，即為毛利潤。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

用Excel 2016整理數(shù)據(jù)，用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件GLM進行單因素方差分析，并采用回歸方法進行線性和二次回歸分析，以P<0.05作為差異顯著的標(biāo)準(zhǔn)判斷，對差異顯著的結(jié)果使用LSD進行多重比較，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧添加過瘤胃蛋氨酸斷奶羔羊的生長性能

由表2可知，各處理間羔羊的初重、末重和料重比差異不顯著；處理1、處理2羔羊的平均日增重(ADG)分別比CK提高 17.32%和25.21%，平均日采食量(ADFI)分別比CK顯著提高15.81%和18.86%。羔羊平均日增重和平均日采食量隨過瘤胃蛋氨酸添加比例的增加呈二次曲線變化，即高水平組(處理3)羔羊平均日增重和平均日采食量有所下降，但與CK間差異不顯著。表明，在基礎(chǔ)日糧中添加適量過瘤胃蛋氨酸可以增加羔羊采食和促進羔羊生長。

表2 日糧添加不同水平過瘤胃蛋氨酸斷奶羔羊的生長性能指標(biāo)

2.2 日糧添加過瘤胃蛋氨酸斷奶羔羊的血清生化指標(biāo)

由表3看出，不同處理組間羔羊血清中葡萄糖(Glu)、總蛋白(TP)、血清尿素氮(UN)、總甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、白蛋白(Alb)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的含量差異不顯著。表明，日糧添加不同水平過瘤胃蛋氨酸對羔羊各項血清生化指標(biāo)沒有影響。

表3 日糧添加不同水平過瘤胃蛋氨酸斷奶羔羊的血清生化指標(biāo)含量

2.3 日糧添加過瘤胃蛋氨酸斷奶羔羊的經(jīng)濟效益

由表4可知，與CK相比，日糧中添加過瘤胃蛋氨酸(RP-Met)均增加飼料成本。在飼養(yǎng)60 d時，處理1、處理2均提高了總收入和毛利潤，其中，處理1和處理2的毛利潤較CK分別增加50.92元/頭和71.97元/頭，增幅分別為14.73%和20.82%。處理3則因日糧成本增加以及山羊增重降低，致使經(jīng)濟效益低于CK。綜合看，以日糧中添加過瘤胃蛋氨酸比例為0.51%(折合蛋氨酸純添加比例為0.38%)的經(jīng)濟效益最佳。

表4 日糧添加不同比例過瘤胃蛋氨酸川中黑山羊的養(yǎng)殖經(jīng)濟效益

3 討論

大量研究顯示，在飼料中添加過瘤胃蛋氨酸能夠提升反芻動物生長性能。ZANG等[20]研究結(jié)果顯示，在飼料中添加過瘤胃蛋氨酸、賴氨酸及組氨酸，同時飼喂低代謝蛋白日糧能夠增加奶牛對氮和能量利用，提升其生長性能。周玉香等[14]在舍飼灘羊日糧中添加4.5～6.0 g/只過瘤胃蛋氨酸能提高其平均日增重，降低料重比。趙永玉[13]在斷奶羔羊飼糧中添加過瘤胃蛋氨酸，結(jié)果表明，斷奶羔羊體重和平均日增重均有顯著改善，其中4 g/(d·只)的添加量顯著降低料重比。密士恒等[21]在肉羊日糧中添加29 g/(d·只)、49 g/(d·只)、69 g/(d·只)RPM可以顯著提高試驗羊體重，添加29 g/(d·只)組體重和日增重達最高，其料重比最低，添加量超過29 g/(d·只)后試驗羊體重呈下降趨勢，料重比也隨之增加。李海霞等[22]研究表明，與對照組(不添加過瘤胃蛋氨酸)相比，飼料中分別添加5 g/(d·只)、10 g/(d·只)過瘤胃蛋氨酸對黔北麻羊的生長性能差異不顯著。而本研究通過設(shè)置對照組與過瘤胃蛋氨酸日添加糧質(zhì)量比為0.25%、0.51%、0.76%，即折合蛋氨酸純添加水平為0.19%、0.38%、0.57%的試驗組，探究日糧中過瘤胃蛋氨酸不同添加水平對斷奶羔羊生長性能的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，日糧中添加質(zhì)量比例為0.19%過瘤胃蛋氨酸的試驗組能夠顯著增加斷奶羔羊平均日增重，與前人的研究結(jié)果一致，但本研究各試驗組與對照組相比，料重比均差異不顯著。過瘤胃蛋氨酸添加質(zhì)量比為0.25%組和0.51%組能夠顯著增加斷奶羔羊平均日采食量，且斷奶羔羊ADG、ADFI隨RP-Met添加水平提高呈二次曲線變化，表明過瘤胃蛋氨酸添加量過高，可能造成羔羊體內(nèi)氨基酸的不平衡，從而產(chǎn)生負(fù)面影響。本研究顯示，日糧中過瘤胃蛋氨酸添加水平(質(zhì)量比)為0.25%和0.51%可提升斷奶羔羊平均日增重、平均日采食量。相較于前人研究，部分試驗結(jié)果是一致的，而導(dǎo)致部分研究結(jié)果不一致的原因可能與動物的種類、年齡、試驗外部條件以及所使用日糧組成等因素有關(guān)，因此在實際養(yǎng)殖過程中，要根據(jù)實際養(yǎng)殖條件綜合權(quán)衡動物的實際狀態(tài)與具體養(yǎng)殖環(huán)境，確定過瘤胃蛋氨酸適宜添加量。

血清生化指標(biāo)能間接反映機體對于營養(yǎng)物質(zhì)的吸收狀況及器官功能狀態(tài)。反映機體對糖的吸收、轉(zhuǎn)運和代謝動態(tài)平衡狀態(tài)的重要指標(biāo)是血清中葡萄糖含量，而總蛋白、白蛋白、尿素氮含量則是反映動物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和飼糧氨基酸平衡狀況的重要指標(biāo)。試驗結(jié)果表明，日糧添加過瘤胃蛋氨酸對羔羊血清中Glu、TP、UN、Alb均無顯著影響，與李海霞等[22]對黔北麻羊的研究結(jié)果類似，說明日糧添加過瘤胃蛋氨酸不影響羔羊糖代謝及蛋白質(zhì)合成代謝。TG、TC為脂肪代謝的直接反映，以往研究中過瘤胃蛋氨酸對TG是否有影響，目前尚未有統(tǒng)一結(jié)論。趙永玉[13]研究表明，飼糧蛋氨酸添加水平對斷奶羔羊血清TG、TC無顯著影響；VRBCHEVA[23]對羔羊進行試驗研究，探究過瘤胃蛋氨酸對一般狀態(tài)下游離氨基酸數(shù)量和一些表現(xiàn)氮代謝和其他代謝生化指標(biāo)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，0.10 g/kg、0.13 g/kg體重劑量對Hb、血糖、氨基酸指數(shù)、TG和UN有增加作用。ALT和AST為機體重要轉(zhuǎn)氨酶，主要存在肝臟和心肌中，其中肝臟酶活性最高，其反映肝臟的功能狀態(tài)[24]。本研究顯示，添加RP-Met對ALT和AST含量并無顯著影響，說明在本試驗條件下斷奶羔羊的肝臟功能并未有受到影響。郝薪云等[25]研究表明，飼糧中蛋氨酸水平對羊駝各項血清生化指標(biāo)均無顯著影響，本試驗結(jié)果與其相似。

經(jīng)濟效益是反映過瘤胃蛋氨酸對斷奶羔羊養(yǎng)殖影響的最直觀和實際體現(xiàn)。目前探究過瘤胃蛋氨酸對反芻動物經(jīng)濟效益的研究主要集中在奶牛、羊駝等動物，而對于羔羊經(jīng)濟效益的影響目前研究較少涉及。蘆娜等[26]報道，在泌乳高峰期的荷斯坦奶牛日糧添加過瘤胃蛋氨酸 20 g/頭，與對照組相比，試驗組奶牛經(jīng)濟效益增加2.30元/(頭·d)。孫華等[27]研究顯示，奶牛泌乳關(guān)鍵期在飼料中添加過瘤胃蛋氨酸，可增加乳汁分泌量從而提高經(jīng)濟收益(8.54元/頭.d)。CHO J等[28]研究表明，將過瘤胃蛋氨酸控制在最佳補充水平，可最大限度地提高奶牛場的乳蛋白產(chǎn)量，從而提高飼養(yǎng)純利潤。試驗結(jié)果顯示，飼料中過瘤胃蛋氨酸添加水平(質(zhì)量比)為0.25%、0.51%，即蛋氨酸純添加水平為0.19%、0.38%時，均能夠增加斷奶羔羊經(jīng)濟效益，其中過瘤胃蛋氨酸純添加水平為0.51%的經(jīng)濟效益最佳，毛利潤達417.70元/頭，較CK提高20.82%。

4 結(jié)論

日糧中添加質(zhì)量比為0.25%、0.51%過瘤胃蛋氨酸(即蛋氨酸純添加水平為0.19%、0.38%)均能提高斷奶羔羊的平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)，ADG分別比CK提高17.32%和25.21%，ADFI分別比CK顯著提高15.81%和18.86%；羔羊ADG、ADFI隨過瘤胃蛋氨酸添加水平的增加呈二次曲線變化，即添加量過高(添加0.760%過瘤胃蛋氨酸，即0.57%純蛋氨酸)時，羔羊ADG、ADFI降低。日糧中添加過瘤胃蛋氨酸對斷奶羔羊的料重比及羔羊血清中Glu、TP、UN、TG、TC、Alb、ALT、AST沒有影響。日糧中添加0.25%、0.51%過瘤胃蛋氨酸可增加經(jīng)濟效益，添加0.51%過瘤胃蛋氨酸(即蛋氨酸純添加水平為0.38%)經(jīng)濟效益最佳，毛利潤達417.70元/頭，較CK(未添加過瘤胃蛋氨酸)提高20.82%。綜上，本試驗條件下，日糧中添加適量過瘤胃蛋氨酸可增加斷奶羔羊的平均日增重與提高川中黑山羊的飼養(yǎng)經(jīng)濟效益，過瘤胃蛋氨酸適添加水平為0.51%(即蛋氨酸純添加水平為0.38%)。