江文力，胡海春，鄧英釗

（廣州市花都區(qū)人民醫(yī)院，廣東 廣州 510800）

0 引言

慢性乙型病毒性肝炎（chronic hepatitis B）主要指的是因為嗜肝病毒（HBV）導(dǎo)致的以肝臟病變?yōu)橹鞯囊环N傳染性疾病，也是全球面臨的比較重要的一個健康問題[1]。根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）估計，全世界長期感染乙型肝炎病毒者超過2.4億人。我國作為HBV感染的一個高流行區(qū)，當(dāng)前HBV慢性感染者有930萬，所以加強乙型肝炎的預(yù)防和控制工作尤為重要。當(dāng)前在對乙型病毒肝炎進行診斷時，乙肝兩對半定量檢測是首選的一種方法，不僅可以明確患者病情，還可以對觀察療效和評估預(yù)后提供有效依據(jù)[2]。在乙肝兩對半檢測中，常用的方法有兩種，分別是全自動酶免儀和免疫發(fā)光儀，并且不同檢測方法的效果也存在著一定的區(qū)別。因此，本文對免疫發(fā)光儀和全自動酶免儀運用在乙肝兩對半定量檢測中的臨床價值進行了探討，如下報道。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇廣州市花都區(qū)人民醫(yī)院2017年2月-2019年7月收治的160例慢性乙型肝炎患者為研究對象，其中男88例，女72例，年齡15～80歲，平均（47.1±14.2）歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料完善；②依從性好，可正常交流和溝通；③對本次研究知情，且自愿參與。排除標(biāo)準(zhǔn)：①嚴(yán)重意識障礙或精神異常者；②合并肝臟其他疾病者；③不愿意參與研究者；④臨床資料缺失者。

1.2 方法

選擇愛康uranusAE酶免儀和maglumi2000plus免疫發(fā)光儀，于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下，采集5mL肘靜脈血，以3000r/min轉(zhuǎn)速進行10min離心處理后，對上層血清進行分離，保存于-20℃條件下待測，然后采用配套試劑，操作的過程中，嚴(yán)格按照說明書要求進行。

1.3 結(jié)果判讀

1.3.1 免疫發(fā)光儀

若核心抗體（抗-HBc）≥4.58U/mL；e抗體（抗-HBe）≥0.77U/mL；e抗原（HBeAg）≥0.39U/mL；表面抗體（抗-HBs）≥10mIU/mL；表面抗原（HBsAg）≥0.48μg/L時，則可以判斷血清中存在這一標(biāo)志物，為陽性。

1.3.2 全自動酶免疫

若抗-HBc≥0.1DRU/mL；抗-HBe≥1.50DRU/mL；HBeAg≥0.50DRU/mL；抗-HBs≥10mIU/mL；HBsAg≥0.50ng/mL，則提示血清中存在這一標(biāo)志物，可判斷為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

本次數(shù)據(jù)由SPSS 20.0軟件分析，其中計數(shù)資料采用百分率（%）表示，組間比較行χ2檢驗，以P＜0.05表示有差異。

2 結(jié)果

2.1 兩種方法檢測結(jié)果對比

所有患者均順利完成檢測，但是兩種檢測方法的檢出率比較無統(tǒng)計意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩種方法檢出率比較[n（%）]

2.2 兩種方法檢測模式比較

免疫發(fā)光儀和全自動酶免儀對乙肝兩對半一項以上標(biāo)志物檢測的陽性模式，見表2。

表2 兩種方法檢測模式對比[n（%）]

3 討論

中國是乙肝大國。有文獻表明：中國大約有10%的人患有乙型肝炎。對于該疾病，臨床上通常使用乙肝兩對半法對受試者實施相關(guān)檢查。由于這種病毒的傳播途徑是接觸性傳播和母嬰傳播，因此，在患者各類體液中均可以檢測出乙肝病毒。達到能夠更好地預(yù)防以及診斷乙炎的目的以及為今后疾病治療計劃制定夯實基礎(chǔ)，需要使用有效方式，全方位提升乙肝病毒檢測的精準(zhǔn)性。關(guān)于乙肝兩對半檢查五項指標(biāo)主要包含：HBeAg，HBsAg，抗-HBe，抗-HBs以及抗-HBc。差異化抗原體的檢查臨床意義并不相同。檢測-HBc表示受試者機體內(nèi)是否存在乙肝病毒；檢測HBsAg表示患者機體內(nèi)是否存在保護性，代表抵抗乙肝病毒入侵程度；抗HBeAg檢查結(jié)果代表病患機體內(nèi)是否存在乙肝病毒復(fù)制現(xiàn)象，有無傳染可能；檢查HBeAb結(jié)果代表病患機體內(nèi)乙肝病毒復(fù)制情況是否得以抑制；HBcAb表示受試者會否存在乙肝病毒感染史。

通常而言，HBV的非慢性感染窗口期也許為既往感染。有文獻表明：大約有25.00%的健康人體內(nèi)會檢測出HBcAb。值得說明的是，乙肝病毒本身并不無致病性。乙肝病毒針對人體肝細(xì)胞損傷主因機體免疫系統(tǒng)清除反應(yīng)而引發(fā)。當(dāng)一個人受到乙肝病毒感染后，HBV會于短期內(nèi)入侵到患者肝臟細(xì)胞中，就此導(dǎo)致肝臟細(xì)胞部分功能受損，引發(fā)機體對肝細(xì)胞產(chǎn)生免疫反應(yīng)。如果情況嚴(yán)重，免疫系統(tǒng)還會殺滅已經(jīng)被乙肝病毒侵害的細(xì)胞與部分未感染肝臟細(xì)胞。從上述內(nèi)容中我們可以看出：乙型肝炎病患機體免疫力對于疾病的發(fā)生機制中起到的意義相當(dāng)重大。

在乙肝患者的臨床診斷中，檢測血清學(xué)標(biāo)志物是比較重要的一個組成部分，可以動態(tài)監(jiān)測乙肝患者的病程和進展，為醫(yī)生合理解釋病情提供有效依據(jù)[3]。通常情況下，乙肝兩對半定量檢測具有以下作用：①對抗-HBc進行定量檢測，抗-HBc是曾感染或處于感染期的一個重要標(biāo)志；②抗-HBe作為病毒停止復(fù)制的一個標(biāo)志，對抗-HBe含量進行檢測，可以判斷傳染性的強弱；③HBeAg作為病毒復(fù)制的一個標(biāo)志，通過對HBeAg含量進行定量檢測，可以判斷患者病情進展；④對抗-HBs含量進行定量檢測，可以對機體康復(fù)或是否存在抵抗力進行判斷；⑤對HBsAg含量進行定量檢測，有助于評價治療效果[4]。本次研究結(jié)果顯示，兩種方法對乙肝血清標(biāo)志物的檢測陽性率比較無差異（P＞0.05），提示免疫發(fā)光儀和全自動酶免儀能夠?qū)σ腋蝺蓪Π脒M行準(zhǔn)確檢測。但是在臨床操作中，免疫發(fā)光儀存在著諸多缺點，具體如下：①檢測的過程中往往需要人工操作，可能出現(xiàn)交叉污染；②完成1次檢測后，需要人工清洗，無法連續(xù)工作，降低工作效率；③容易受到諸多因素影響，比如血中血紅蛋白、溶血標(biāo)本等[5-6]。而全自動酶免儀運用時間分辨免疫熒光分析法，采用一次性針，減少交叉污染，可以確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和安全性，并且每一個微板位都能獨立控制孵育和震蕩，可以使規(guī)范化程度提高[7-9]。同時，本次研究還發(fā)現(xiàn)，在乙肝血清標(biāo)志物一項以上陽性率中，與免疫發(fā)光儀相比，全自動酶免儀的陽性率略高，提示全自動酶免儀能夠?qū)舛群枯^低的標(biāo)本進行檢測，并且具有較高的敏感性。此外，與免疫發(fā)光儀檢測相比，全自動酶免儀還具有操作簡單、檢測速度快、不容易受到環(huán)境干擾等諸多優(yōu)點，備受醫(yī)務(wù)工作者青睞。

侯智圓[10]研究認(rèn)為：在中國，乙肝疾病的發(fā)生概率比較高，每年新增乙肝病毒攜帶者的人數(shù)表現(xiàn)出了逐年上漲的勢態(tài)。乙型肝炎患者在發(fā)病之后往往會表現(xiàn)出嘔吐、惡心、腹脹、食欲下降等不良情況。在對患者開展疾病治療過程中，需要為其實施抗病毒治療。與此同時，患者還要接受免疫調(diào)節(jié)治療、抗纖維化治療以及保肝治療。由此能夠看出，盡早診斷、治療、發(fā)現(xiàn)乙肝疾病，有助于全面改善患者的生活品質(zhì)。精準(zhǔn)的檢測結(jié)果針對于乙型肝炎病患后續(xù)治療有非常重要的促進意義。當(dāng)醫(yī)療機構(gòu)對受試者開展乙肝兩對半定量檢測工作過程中，如果沿用人工檢測法所取得的結(jié)果并不穩(wěn)定，且人工法會受到諸多因素的影響，靈敏度較低。全自動酶免儀應(yīng)用了專業(yè)的一次性針，檢測過程安全性強。這種檢測方法可以在真正意義上做到零污染，同時也能夠保證檢測結(jié)果的精準(zhǔn)性。該組實驗研究指出：觀察組以及對照組受試者分別接受乙肝兩對半定量檢測之后，觀察組陽性率為7.69%、對照組陽性率為5.77%。和對照組相比，觀察組患者的陽性率略高，但組間數(shù)據(jù)無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。觀察組內(nèi)有一項標(biāo)志物陽性者共計1例、兩項標(biāo)志物2例、三項標(biāo)志物1例。對照組之內(nèi)有意向標(biāo)志物陽性1例、兩項標(biāo)志物1例、三項標(biāo)志物1例。兩組受試者乙肝陽性模式對比（P＞0.05）。從上述內(nèi)容中可以看出使用全自動酶免儀測定乙肝兩對半定量檢測精準(zhǔn)率比較高。該法能夠有效評價受試者血液內(nèi)是否存在乙肝抗體和抗原，且這種方法的實施不需要人工干預(yù)，操作簡單易行，結(jié)果可靠性強、無污染。

高建軍[11]等分析了全自動酶免儀和免疫發(fā)光儀檢測乙肝兩對半定量的研究情況。其選擇共計180例住院患者為研究樣本，對所有病患開展全自動酶免儀檢測和免疫發(fā)功能檢測，對比兩組受試者乙肝血清標(biāo)記物陽性率以及陰性率，測定乙肝兩對半標(biāo)志物陽性模式的具體結(jié)果。結(jié)果表明：兩種方法測定乙肝血清標(biāo)記物的陰性率以及陽性率不存在顯著差異（P＞0.05）；于檢測同一例血清之內(nèi)，實驗組HBaAg、抗-HBs均為陽性共計2例，對照組測定出1例，其余指標(biāo)差別不高。該學(xué)者研究指出：全自動免疫發(fā)光儀以及全自動酶免儀乙肝兩對半定量準(zhǔn)確率均比較高，兩者差別不大。但全自動酶免疫使用了自動化模式，這種方法操作起來相對簡單靈敏度強，可進一步推廣。車建武[12]分析了全自動免疫和免疫發(fā)光儀在乙肝兩對半定量檢測中的應(yīng)用價值。其選擇共計196例乙肝兩對半檢測患者為研究樣本，所有受試者均接受了自動免疫檢測以及免疫發(fā)光儀檢測，分析兩種方法測定乙肝血清標(biāo)記物陽性率，與此同時評價兩類檢測方法的靈敏性以及精準(zhǔn)性。結(jié)果表明：通過檢測分析可以發(fā)現(xiàn)兩種方法在檢測乙肝血清標(biāo)記物陽性率以及陰性率方面差別不顯著，組間數(shù)據(jù)無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。而在同一血清檢測之中，全自動酶免儀地測定出實HBsAG、抗-HBs陽性共計2例，免疫發(fā)光儀檢測共計1例。剩余指標(biāo)差別不顯著。

綜上所述，全自動酶免儀和免疫發(fā)光儀在乙肝兩對半定量檢測中均具有較高的準(zhǔn)確性，但是相比較免疫發(fā)光儀而言，全自動酶免儀具有高靈敏度、穩(wěn)定性好以及零污染等優(yōu)點，具有一定的推廣應(yīng)用價值。