據(jù)世界衛(wèi)生組織報道，原發(fā)性肝癌是世界六大惡性腫瘤之一，其死亡率在癌癥中排列第二。原發(fā)性肝癌是我國常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和死亡率非常高

。原發(fā)性肝癌早期癥狀不明顯，大部分患者就診時已處于中晚期，即使早期治療的患者，由于在治療過程中，癌癥易復發(fā)和轉(zhuǎn)移，仍然導致患者預后不良率較高

。據(jù)研究統(tǒng)計，我國原發(fā)性肝癌患者術(shù)后5年生存率僅10%左右

。Mac-2結(jié)合蛋白是一類糖蛋白，該蛋白由含7個N糖基的單體組成，可以聚集成大的環(huán)狀或線狀結(jié)構(gòu)，在多種癌癥、炎癥性疾病中明顯升高

。Mac-2結(jié)合蛋白聚糖異構(gòu)體(Mac-2 binding protein glycan isomer，M2BPGi)是Mac-2結(jié)合蛋白另一種存在形式，具有肝臟特異性，能更好反映肝臟纖維化進展。高敏等

研究發(fā)現(xiàn)在乙型肝炎肝纖維化中，M2BPGi水平隨肝纖維程度加重而升高。本研究擬探討M2BPGi在原發(fā)性肝癌患者血清中的變化及其與預后的關(guān)系，旨在為預測原發(fā)性肝癌的預后提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院在2018年1月至2019年12月期間收治的原發(fā)性肝癌患者100例(原發(fā)性肝癌組)、慢性乙型肝炎患者72例(慢性乙型肝炎組)為研究對象。原發(fā)性肝癌組中男59例，女41例，年齡35～76歲，平均(56.86±10.81)歲；腫瘤直徑≤5 cm 41例，腫瘤直徑>5 cm 59例；根據(jù)腫瘤個數(shù)，單發(fā)22例，多發(fā)或彌漫性78例。慢性乙型肝炎組中男40例，女32例；年齡35～76歲，平均(57.02±11.06)歲。納入標準：①符合原發(fā)性肝癌病理診斷指南(2015年版)

；②慢性乙型肝炎診斷標準參照2015年《慢性乙型肝炎防治指南》

；③患者年齡35～76歲；④患者之前未接受任何抗癌治療；⑤同意隨訪并配合此次試驗者。排除標準：①合并其他惡性腫瘤患者；②合并嚴重腎功能障礙患者；③ 合并有嚴重感染性疾病患者；④合并有自身免疫性疾病患者；⑤其他肝炎病毒感染者；⑥精神異?；颊?；⑦酒精性脂肪肝患者。選取同時期本院體檢結(jié)果健康者100例為對照組，男54例，女46例，年齡35歲～76歲，平均(56.97±10.98)歲。原發(fā)性肝癌組、慢性乙型肝炎組及對照組性別、年齡比較差異無統(tǒng)計學意義(

>0.05)，具有可比性。本研究通過本院倫理委員會批準，患者及家屬知情并簽署知情同意書和臨床研究協(xié)議書，研究符合《世界醫(yī)學協(xié)會赫爾辛基宣言》。

1.2 標本采集 對所有研究對象清晨空腹時采取靜脈血4～5 ml裝于采血管中，靜置20 min后，4℃，3 500 r/min，離心15 min，留上清，凍存于-80℃冰箱中，待測。

氣候突變表示氣候從一種穩(wěn)定態(tài)跳躍式地轉(zhuǎn)變到另一種穩(wěn)定態(tài)的現(xiàn)象，它是普遍存在于氣候變化中的一個重要現(xiàn)象。圖3為天峻地區(qū)1961-2017年春季干旱指數(shù)M-K突變檢驗，從分析的結(jié)果來看，相對濕潤度指數(shù)(M指數(shù))和標準化降水指數(shù)(SPI指數(shù))的M-K突變檢驗是一致的，在上下兩條±1.96(α=0.05)的置信線內(nèi)，兩個指數(shù)的UF與UB兩條曲線均在1966年和2016出現(xiàn)交叉點，UF曲線在1966年的交叉點后向負方向變化，并低于-1.96，說明交叉點后減小趨勢顯著，因此認為1966年為突變年，而2016年的交叉點是不是突變點，有待需要更長序列的數(shù)據(jù)驗證。

1.3 檢測血清M2BPGi水平 采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測血清M2BPGi水平，操作步驟嚴格依據(jù)M2BPGi ELISA試劑盒(貨號：JCSW1945，上海機純實業(yè)有限公司)進行，使用Multiskan MK3酶標儀進行。

(4)對老舊管線的清管作業(yè)，應事先根據(jù)管道實際情況，有選擇地在適當位置斷管，摸清管道內(nèi)黑粉情況，然后選擇適當?shù)那骞芷?，并采取多段清管的方式清除管道?nèi)黑粉。

2.3 M2BPGi與肝纖四項的相關(guān)性分析 Pearson分析顯示，原發(fā)性肝癌患者血清M2BPGi與HA、PCⅢ、Ⅳ-C、LN均呈正相關(guān)(

<0.05)，見表3。

1.5 隨訪 對原發(fā)性肝癌患者進行隨訪1年，根據(jù)患者病情分為預后良好組75例和預后不良組25例，預后不良指患者病情復發(fā)、癌細胞轉(zhuǎn)移或死亡。隨訪方式為入戶、電話隨訪，或邀請患者入院檢查，每兩個月隨訪1次。

2 結(jié)果

2.1.2 混播禾草種類對混播植物POD活性的影響 A2處理禾草POD活性最高，其次是A3處理。其中，A2處理禾草POD活性分別比A1，A3和A4處理高250.04%，20.22%和350.42%倍，差異均達極顯著水平(P<0.01)；A3處理禾草POD活性分別比A1和A4處理高191.18%和274.68%(P<0.01)。A1和A4處理之間差異不顯著(表1)。A1處理下苜蓿POD活性比A4處理高19.47%(P<0.01)；A3處理POD活性比A4處理高16.40%(P<0.05)；其余處理之間無顯著差異。

2.2 預后良好與預后不良原發(fā)性肝癌血清M2BPGi和肝纖四項水平比較 原發(fā)性肝癌的不良預后與患者的腫瘤大小、腫瘤的個數(shù)均相關(guān)(χ

=6.480、62.720，

=0.011、0.000)。見表2。

1.4 檢測血清中肝纖四項水平 采用日立7170型全自動生化分析儀檢測透明質(zhì)酸(HA)、Ⅲ型前膠原(PCⅢ)、Ⅳ型膠原(Ⅳ-C)、層黏連蛋白(LN)水平。

2.1 血清M2BPGi和肝纖四項水平比較 見表1。

2.4 ROC分析M2BPGi對原發(fā)性肝癌不良預后的預測價值 M2BPGi對原發(fā)性肝癌不良預后診斷的曲線下面積AUC為0.883，靈敏度為84.00%，特異度為81.30%，截斷值為2.65 mg/ml。

現(xiàn)代漢語詞匯的重疊一般不兒化，但在歷史上卻并非如此。動詞的重疊形式后面加‘兒’的形式，常常見于明、清時期的白話文學作品里，從明代中葉的小說《西游記》、《金瓶梅》來看，動詞重疊兒化達到高潮。如：

3 討論

2016年全球肝癌患者已達到了100萬例，且每年的發(fā)病率依然在持續(xù)升高，嚴重威脅人民的身體健康

。原發(fā)性肝癌患者早期無明顯臨床表現(xiàn)，晚期時表現(xiàn)為肝部刺痛或持續(xù)性鈍痛，并伴隨腹脹等，多數(shù)患者就診時原發(fā)性肝癌已發(fā)展至中晚期，導致患者錯失最佳治療時期，因而大多患者術(shù)后預后差。因此臨床上急需探尋一種分子標志物用于原發(fā)性肝癌患者預后判斷，以期為臨床治療決策和改善患者不良預后提供理論依據(jù)。

在我國，長期被肝炎病毒感染(以乙型肝炎或丙型肝炎病毒為主)的患者，后期易發(fā)展為肝纖維化、肝硬化及肝癌

。肝纖維化是肝細胞外基質(zhì)過度堆積為主的慢性炎癥過程，是肝硬化的前期階段

，肝纖四項(HA、PC-Ⅲ、LN、Ⅳ-C)是肝細胞外基質(zhì)的主要組成成分。研究發(fā)現(xiàn)肝纖維化及肝硬化時，Ⅳ-C被大量沉積在細胞外基質(zhì)，血清HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C水平在肝癌患者中明顯升高，且與肝癌的嚴重程度呈正相關(guān)

。本研究發(fā)現(xiàn)在對照組、慢性乙型肝炎組、原發(fā)性肝癌組中，血清HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C、LN水平依次顯著升高，提示慢性乙型肝炎、原發(fā)性肝癌患者均存在肝纖維化。

M2BPGi是一種新的血清肝纖維化生物標志物。M2BPGi是由Mac-2結(jié)合蛋白與紫藤多花凝集素組成，二者結(jié)合后，Mac-2結(jié)合蛋白結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。紫藤多花凝集素陽性Mac-2結(jié)合蛋白檢測纖維化的原理是利用紫藤多花凝集素檢測蛋白質(zhì)表面糖鏈變化，對檢測肝纖維化是一種無創(chuàng)、可靠的生物標志物。Mac-2結(jié)合蛋白最早被發(fā)現(xiàn)能與半乳糖凝集素3結(jié)合形成糖化蛋白，導致Mac-2結(jié)合蛋白的質(zhì)和量都發(fā)生變化，猜測可能原因是糖鏈修飾蛋白結(jié)構(gòu)造成的

。后來研究顯示，N-乙酰半乳糖基化修飾的紫藤多花凝集素也可與Mac-2結(jié)合蛋白形成紫藤多花凝集素陽性Mac-2結(jié)合蛋白，且對肝纖維化的不同分期具有較高的診斷價值

。高敏等

研究發(fā)現(xiàn)紫藤多花凝集素對識別肝纖維化過程中，紫藤多花凝集素陽性Mac-2結(jié)合蛋白的水平不受其他器官組織分泌的M2B結(jié)合蛋白的影響，具有肝臟特異性，因此可反映肝纖維化的程度。研究顯示M2BPGi對晚期肝纖維化、肝硬化、肝細胞癌術(shù)后的發(fā)展和復發(fā)具有預測價值

。王偉等

研究發(fā)現(xiàn)慢性丙型肝炎肝纖維化患者血清M2BPGi水平明顯高于丙型肝炎無肝纖維化患者，且M2BPGi對丙型肝炎患者肝纖維化具有較好的診斷價值。肝纖維化是“肝炎-肝纖維化-肝硬化-肝癌”這一發(fā)展過程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)

。本研究發(fā)現(xiàn)原發(fā)性肝癌組患者血清M2BPGi水平顯著高于慢性乙型肝炎組和正常健康人，慢性乙肝病組患者血清M2BPGi水平顯著高于正常健康人，提示M2BPGi可能參與原發(fā)性肝癌的發(fā)生。肝炎后肝硬化是原發(fā)性肝癌發(fā)生的危險因素。另外Ueno等

研究報道，M2BPGi可作為評估膽道閉鎖肝硬化患者的預后指標，因為患者發(fā)生肝硬化后，其肝纖維化程度仍可能發(fā)生變化。預后不良組原發(fā)性肝癌患者血清M2BPGi顯著高于預后良好組原發(fā)性肝癌患者，提示M2BPGi可能與原發(fā)性肝癌患者預后不良密切相關(guān)，猜測M2BPGi在不同預后的原發(fā)性肝癌患者血清有變化可能是因為原發(fā)性肝癌患者肝纖維化程度可能仍在變化

。進一步研究發(fā)現(xiàn)M2BPGi與HA、PCⅢ、Ⅳ-C、LN均呈正相關(guān)，提示M2BPGi參與肝癌患者肝纖維化進程。M2BPGi對原發(fā)性肝癌不良預后診斷的曲線下面積AUC為0.883，靈敏度為84.00%，特異度為81.30%，提示M2BPGi對原發(fā)性肝癌預后不良可能具有較好的評估價值，應加強對M2BPGi水平變化進行監(jiān)測。

綜上所述，血清M2BPGi水平原發(fā)性肝癌中呈上調(diào)，對原發(fā)性肝癌預后不良具有較好的評估價值。但本研究是單中心回顧性分析，缺乏前瞻性臨床研究。M2BPGi與原發(fā)性肝癌的疾病發(fā)生的相關(guān)機制仍有待進一步研究。

[1]Akinyemiju T,Abera S,Ahmed M,

.The Burden of Primary Liver Cancer and Underlying Etiologies From 1990 to 2015 at the Global,Regional,and National Level: Results From the Global Burden of Disease Study 2015[J].JAMA Oncol,2017,3(12):1683-1691.

[2]Valery P C,Laversanne M,Clark P J,

.Projections of primary liver cancer to 2030 in 30 countries worldwide[J].Hepatology,2018,67(2):600-611.

[3]Xu Y,Wang B,Zhang F,

.Long non-coding RNA CCAT2 is associated with poor prognosis in hepatocellular carcinoma and promotes tumor metastasis by regulating Snail2-mediated epithelial-mesenchymal transition[J].Onco Targets Ther,2017,10(1):1191-1198.

[4]鄭毅,白霞,許鑫,等.原發(fā)性肝癌肝切除術(shù)后嚴重并發(fā)癥的危險因素分析[J].廣西醫(yī)科大學學報,2017,34(9)：1313-1316.

[5]楊以良,崔園園,胡月,等.Mac-2結(jié)合蛋白糖基化異構(gòu)體在慢性肝病診斷中的作用[J].臨床肝膽病雜志,2016,32(12):2395-2398.

[6]高敏,劉蓉,張慶.血清miRNA-122和紫藤多花凝集素陽性Mac-2結(jié)合蛋白對慢性病毒性肝炎患者肝纖維化程度的預測價值[J].臨床肝膽病雜志,2018,34(4):764-769.

[7]中國抗癌協(xié)會肝癌專業(yè)委員會,中華醫(yī)學會肝病學分會肝癌學組,中國抗癌協(xié)會病理專業(yè)委員會,等.原發(fā)性肝癌規(guī)范化病理診斷指南(2015年版)[J].中華肝膽外科雜志,2015,21(3):865.

[8]中華醫(yī)學會肝病學分會,中華醫(yī)學會感染病學分會.慢性乙型肝炎防治指南(2015更新版)[J].中華肝臟病雜志,2015,23(12):888-905.

[9]盛慶壽,古訓東,許峰銘.中醫(yī)藥防治原發(fā)性肝癌的表觀遺傳學研究進展[J].中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志,2017,27(6):382-384.

[10]Jin L,Zhang T,Chen X.The trends in incidence of primary liver cancer caused by specific etiologies: Results from the Global Burden of Disease Study 2016 and implications for liver cancer prevention[J].J Hepatol,2019,70(4):674-683.

[11]錢宏波,錢媛,趙漢東.HA、PC-Ⅲ、LN、Ⅳ-C在原發(fā)性肝癌診斷及判斷手術(shù)預后中的價值[J].胃腸病學和肝病學雜志,2016,25(11):1286-1288.

[12]方未英,徐蘭,顧婷玉,等.肝纖維化治療策略的研究進展[J].醫(yī)學研究雜志,2019,48(4):6-9.

[13]張明哲,常文龍,周雪,等.血清HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-c檢測在肝癌診斷及術(shù)后的價值分析[J].現(xiàn)代消化及介入診療,2018,23(6):35-38.

[14]王澤瑞,許文萍,謝渭芬.紫藤凝集素陽性Mac-2結(jié)合蛋白在慢性肝病診治中的應用現(xiàn)狀[J].中華消化雜志,2017,37(8):571-573.

[15]Toshima T,Shirabe K,Ikegami T,

.A novel serum marker,glycosylated Wisteria floribunda agglutinin-positive Mac-2 binding protein (WFA(+)-M2BP),for assessing liver fibrosis[J].J Gastroenterol,2015,50(1):76-84.

[16]Nagata H,Nakagawa M,Nishimura-Sakurai Y,

.Serial measurement of Wisteria floribunda agglutinin positive Mac-2-binding protein is useful for predicting liver fibrosis and the development of hepatocellular carcinoma in chronic hepatitis C patients treated with IFN-based and IFN-free therapy[J].Hepatol Int,2016,10(6):956-964.

[17]Ura K,Furusyo N,Ogawa E,

.Serum WFA(+) -M2BP is a non-invasive liver fibrosis marker that can predict the efficacy of direct-acting anti-viral-based triple therapy for chronic hepatitis C[J].Aliment Pharmacol Ther,2016,43(1):114-124.

[18]王偉,馬玉萍,馬海婷,等.血清M2BPGi聯(lián)合MRI-DWI預測丙型肝炎患者肝纖維化的臨床價值[J].實用醫(yī)學雜志,2018,34(2):293-296,300.

[19]呂春燕,裴豪,戴亞萍,等.血清AFP、AFP-L3及PIVKA-Ⅱ聯(lián)合檢測在原發(fā)性肝癌診斷中的價值[J].標記免疫分析與臨床,2019,26(7):1159-1162.

[20]Ueno T,Kodama T,Noguchi Y,

.Serum Mac-2-binding protein (M2BPGi) as a marker of chronological liver fibrosis in biliary atresia patients with cirrhosis[J].Pediatr Surg Int,2019,35(10):1065-1070.

[21]劉春紅,張丹圖,盧寵茂,等.ALPPS在合并輕中度肝纖維化肝細胞癌患者中的應用分析[J].中華肝膽外科雜志,2019,25(11):806-808.